Compte rendu Mycologie 162 (EN.CRMYC.17-06-16.01

Date d’édition : 17/06/2016 Statut du document : Définitif

Compte rendu Mycologie 162 Campagne 2016

EN.CRMYC.17-06-16.01 Page 1 sur 4

Centre Toulousain

pour le Contrôle de qualité en Biologie clinique

COMPTE RENDU : n°162 EEQ : Mycologie

Association déclarée à la Préfecture de la Haute-Garonne le 30 Octobre 1973

et enregistrée sous le n° W313002633 CTCB - 33 route de Bayonne - 31300 TOULOUSE

℡ : 05 34 51 49 80 – Fax : 01 57 67 25 90

Email : [email protected] – site Internet : www.ctcb.com

Siret : 428 789 853 000 28 – APE : 8559A ACCRÉDITATION N° 1-2178 PORTÉE DISPONIBLE SUR WWW.COFRAC.FR

Expert biologiste Coordonnateur des programmes

Vérification du contenu scientifique et autorisation du rapport d’essai d’aptitude

Parasitologie/Mycologie Dr S. CASSAING

[email protected]

Dr S. ALBAREDE Pharmacien Biologiste [email protected]

Documentation

Le compte rendu comporte les éléments suivants : - Une partie commune pour tous les laboratoires :

� Pages explicatives : présentation du programme, présentation du système de notation des laboratoires et informations générales,

� Exploitation statistique, � Commentaire éventuel sur les réponses des participants.

- Une partie propre à chaque laboratoire « Résultats individuels » en annexe 1 :

� Résultats du laboratoire � Evaluation de la performance du laboratoire

Sommaire

1. Présentation du programme d’inter-comparaison page 2 2. Détermination de la notation du laboratoire page 2 3. Scenario et commentaire page 2 4. Fiche technique Trichophyton mentagrophytes page 4



1 - PRESENTATION DU PROGRAMME D’INTERCOMPARAISON Expert du programme : Mme CASSAING, Service de Parasitologie / Mycologie, CHU Toulouse - Institut Fédératif de Biologie Purpan, [email protected] > Fréquence de passage : Deux échantillons sont envoyés dans l’année, accompagnés d’un scénario clinique. > Présentation du programme et des produits de cont rôle utilisés : Les levures (mélange possible) ou les champignons filamenteux sont concernés. Le type de prélèvement à partir duquel a été isolé le champignon est spécifié. L’envoi peut être soit une culture, soit une suspension du champignon en eau stérile ou en milieu de transport, soit un lyophilisat (produit par la société ELITECH). Chaque laboratoire doit identifier le champignon : genre ou genre et espèce selon le thésaurus. INFORMATION : La préparation et l’emballage des échantillons lyophilisés sont confiés à la société ELITECH ayant une certification ISO 9001 et ISO 13485. Les souches lyophilisées sont testées par notre sous-traitant le Service de Parasitologie / Mycologie du CHU de Toulouse (IFB Purpan) selon les modalités internes (procédures et modes opératoires). Suite à la validation des échantillons, les échantillons sont ensuite acheminés par ELITECH au CTCB pour l’expédition. Tous les essais réalisés par le laboratoire sous-traitant permettent de :

• vérifier l’homogénéité des échantillons au sein d’un même lot, • vérifier la stabilité des échantillons afin de garantir qu’ils ne subiront pas de modifications

significatives tout au long de l’essai, • déterminer les valeurs assignées.

2 - DETERMINATION DE LA NOTATION DU LABORATOIRE Le système de notation qualitatif pour l’échantillon 162 repose sur l’échelle d'évaluation suivante : Score A : Identification Trichophyton mentagrophytes ou Trichophyton interdigitale Score B : Identification de T. mentagrophytes associé à une 2ème espèce. Score C : Identification du genre Trichophyton Score D : Identification d’un dermatophyte du genre Microsporum ou Epidermophyton Score E : Identification d’un champignon non dermatophytique Le résultat attendu est la valeur transmise par l’expert selon le protocole qu’il a défini. Cette valeur est confirmée après l’exploitation des résultats des adhérents : elle devient alors la valeur assignée.

3 - SCENARIO ET COMMENTAIRE Scenario : Souche fongique isolée d’une lésion de 3 cm sur le poignet de Mme L. Matériel envoyé : souche lyophilisée Réponse attendue : Trichophyton mentagrophytes Résultats des participants : 348 participants dont 346 ont répondu. 272 participants (78.6%) ont identifié l’espèce Trichophyton mentagrophytes. 41 participants (11.9%) ont fait une identification au genre 5 participants ont identifié une 2ème espèce associée à T. mentagrophytes 30 participants (8.7%) ont identifié un dermatophyte d’un autre genre que Trichophyton 6 participants (1.7%) ont identifié un champignon non dermatophytique. Commentaires : T. mentagrophytes (zoophile) et T. interdigitale (anthropophile) sont 2 espèces morphologiquement très proches. Elles appartiennent au « complexe mentagrophytes » qui comprend des espèces dont le point commun est la présence de microconidies rondes et piriformes. La nomenclature des espèces à l’intérieur du complexe est remise en question d ans la bibliographie récente.



Sur milieu Sabouraud, la culture obtenue pour cette souche est couleur crème, d’aspect poudreux/plâtreux, avec un revers brun. Etude microscopique : pour observer les fructifications caractéristiques de cette souche, un prélèvement de la culture avec du ruban adhésif était indispensable (méthode du drapeau). Après repiquage sur milieu Sabouraud pouvaient être observées :

- des microconidies rondes (très nombreuses) associées à des microconidies piriformes (moins nombreuses

- des macroconidies en massue - des vrilles

Diagnostic différentiel avec les autres dermatophyt es :

- Trichophyton rubrum : colonies duveteuses avec un « dôme » central. La croissance est plus lente que celle de T. mentagrophytes. Pas de microconidies rondes. Microconidies piriformes disposées en acladium. Macroconidies rarement présentes pour les souches autochtones. Présence d’excroissance en triangle.

- Trichophyton tonsurans : Colonies duveteuses, blanches à crème, parfois plissées.

L’envers de la culture varie du beige au rouille/acajou. Microconidies en « ampoule » à base large, hétérogènes en taille. Absence de vrilles. Présence de chlamydospores. Macroconidies rares.

- Trichophyton erinacei : Espèce rarement impliquée en pathologie humaine. L’envers de la

culture est jaune en général (diffusion dans la gélose). Les microconidies piriformes sont nombreuses. Les macroconidies sont plus courtes et plus fusiformes que chez T. mentagrophytes. Des vrilles peuvent être présentes. Test uréase négatif.

- Microsoprum persicolor : Colonies couleur crème à beige-rosé, poudreuses à duveteuses. Macroconidies à paroi finement échinulée (genre Microsporum). Microconidies « en ampoule » avec une base large. Présence de vrilles assez fréquente. Test uréase positif donc non contributif pour le diagnostic différentiel avec T. mentagrophytes.

Bibliographie : CholletA., Cattin V., Fratti M., Mignon B., Monod M. Which fungus originally was Trichophyton mentagrophytes ? Historical review and illustration by a clinical case. Mycopathologia, 2015; 180:1-5 Ziółkowska G., Nowakiewicz A., Gnat S., Trościańczyk A., Zięba P., Dziedzic BM. Molecular identification and classification of Trichophyton mentagrophytes complex strains isolated from humans and selected animal species. Mycoses 2015;58(3):119-26. Monod M., Fratti M., Mignon B., Baudraz-Rosselet F. Dermatophytes transmis par les animaux domestiques. Rev Med Suisse, 2014;749-753

Rédaction : Dr. Sophie CASSAING

Expert biologiste Parasitologie / Mycologie

Relecture : Dr. Xavier IRIART

Expert biologiste Parasitologie / Mycologie ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

PS : Ces documents doivent être archivés selon la réglementation en vigueur. Pour tout renseignement : COORDONNATEUR / BIOLOGISTE : Stéphanie ALBAREDE - [email protected] ADMINISTRATIF : Marie-Christine ONDERBEKE, Tél. : 05.34.51.49.80 - Fax : 01.57.67.25.90 - [email protected] TECHNIQUE : Delphine GARIMBAY, Tél. : 05.34.51.49.81 - [email protected] QUALITE : Erick SANCHEZ, Tél. : 05.34.51.49.82 - [email protected] INFORMATIQUE : Philippe GONZALVO - [email protected] Information : Les essais d’homogénéité et de stabilité se sont avérés conformes aux modalités décrites dans la procédure de contrôle. Les documents utilisés pour réaliser ce programme d’intercomparaison (préparation des objets d’essai, détermination des valeurs indicatives et assignées, traitement statistique, …) sont disponibles sur demande auprès du CTCB. L’interprétation de ces résultats ne doit pas se faire isolément et doit être rapprochée de ceux obtenus lors des autres opérations de contrôle effectuées dans le cadre de l’évaluation interne et de l’évaluation externe du laboratoire



4 – Fiche technique : Trichophyton mentagrophytes Trichophyton mentagrophytes

Répartition Cosmopolite

Transmission Espèce zoophile et tellurique (principalement petits rongeurs et chevaux, mais aussi lapins, chiens, chats, …)

(T. interdigitale est anthropophile) Pathogénicité Epidermophyties circinées inflammatoires, teignes inflammatoires, sycosis, kérions.

(T. interdigitale est généralement responsable d’intertrigo inter-orteil, du pli inguinal, d’onyxis).

Culture (macroscopie)

Pousse facile en 4 à 6j sur milieu Sabouraud avec ou sans cycloheximide entre 25° et 30°C. Culture poudreuse, plâtreuse, blanc–crème. Re vers beige à brun.

Culture sur Sabouraud, J6, incubation à 25°C.

Culture (microscopie)

Filaments disposés en angle droit, en « croix de Lorraine ». Association de microconidies rondes (dominantes) et piriformes. Macroconidies « en massue », à paroi lisse. Présence possible de vrilles. Test complémentaire : uréase positif

Obj. x20, microconidies « en buisson » Obj. x40, microconidies rondes

Obj. x20, macroconidies Obj. x20, vrilles

verso

Documents

Compte rendu Mycologie 162 (EN.CRMYC.17-06-16.01