Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic Diagnostic d’une d’une

hémoglobine hémoglobine instableinstable

Congrès Tuniso-françaisTunis, 6-7 sept 2007

Patricia Aguilar MartinezCHU de Montpellier, France

Congrès Tunis Sept 2007

Hb instables: historiqueHb instables: historique

• 19521952 (Cathie): enfant, cyanose + splénomégalie

• 19601960 (Dacie) : « anémie hémolytique congénitale non non sphérocytairesphérocytaire »

• 19621962 (Grimes) : « anémie congénitale à corps de corps de HeinzHeinz »

• 19661966 (Carrel) : Hb KölnKöln (1ère Hb instable identifiée)

• 1967 1967 (Dacie) (Sansone): Hb Hammersmith, Hb Genova

• 20072007 : + d’une centaine de variants connus (« http/www.globin gene serverhttp/www.globin gene server »)

Congrès Tunis Sept 2007

Hb instable: définition?Hb instable: définition?

• Groupe d’hémoglobines anormales• responsables d’anémie d’anémie

hémolytiquehémolytique• et caractérisées par la présence

de corps de Heinzcorps de Heinz

rare

sra

res

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Tableaux cliniquesTableaux cliniques

• Anémie hémolytique chronique (provoquée par stress oxydatif)

• Formes cliniques spéciales:– avec cyanose (affinité pour l’oxygène)– mimant une bêta-thalassémie

hétérozygote (Hb très instable)– asymptomatiques… (instabilité in vitro)

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Cas Cas n°1n°1

• Jeune fille, 14 ans• Urgences pédiatriques• Pâleur, splénomégalie

• Num:– Hb: 5,8 g/dl– GR: 1,9 106/mm3– VGM: 79.1 fl– TCMH: 29,9 pg– Pt: 129 000/mm3– GB: 2500/mm3

• Réticulocytes: 19,2%

(365 000mm3)

• Étude de l’Hb• Recherche de sphérocytose

héréditaire• (Enzymes érythrocytaires)

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HPLC:

• Hb A : 81.3%• Hb F : 4.5%• Hb X :8%• Hb A2 : 6,2% (VN

<3,5)

Examens biologiquesCas n°1Cas n°1

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N T P N

Examens biologiques

Isofocalisationélectrique

Cas n°1Cas n°1

Fraction anormale

AFS

A2C

XSuspicion d’Hb instable

Suspicion d’Hb instable

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Examens biologiques

(Avant transfusion)

Corps de Heinz

positifs (80%)

Cas n°1Cas n°1

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Enquête familiale

• Père : (splénectomisé?)– Num:Num: Hb: 13,1g/dl, VGM:97fl, – Rétic:Rétic: 232 000/mm3 hémolyse compensée

– HPLC:HPLC: Hb A2: 2.9%, HbF <1%, Hb X (petit pic)– IsofocalisationIsofocalisation: pas d’anomalie visible– Corps de Heinz: +Corps de Heinz: +

• Mère : – bilan normal

Cas n°1Cas n°1

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Diagnostic moléculaire

• Technique de screening: DGGE

• Technique de confirmation: séquençage

Cas n°1Cas n°1

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Diagnostic moléculaire

• Mutation hétérozygote du gène ß-ß-globineglobine:

c.127 T>C (bêta42 Phe>Val)Hb Sendagi (Hb instable connue)

Père et fillePère et fille

Cas n°1Cas n°1

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PhysiopathologiePhysiopathologie

Déstabilisation du tétramère d’hémoglobine :

– Infiltration d’eaueau dans la molécule d’Hb

– Anomalie de l’hèmehème: formation d’hémichromes

– Anomalies de la zone de contactcontact des chaînes de globine

– Insertions/délétions d’aa

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Diagnostic biologiqueDiagnostic biologique

• Numération + réticulocytes

• Etude de l’Hb (HPLC, isofocalisation)

• Recherche de corps de Heinzcorps de Heinz

• Test de stabilité à la chaleur (1h à 50°C)

à l’isopropanol

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Recherche de corps de Recherche de corps de HeinzHeinz

• Coloration supravitale (bleu de Crésyl brillant)

• Incubation prolongée (½h, 1h, 2h, 4h, 2424h)

• Examen de toutes les lames

• Aspect: inclusions accolées à la membrane, balles de golf…

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Corps de HeinzCorps de Heinz

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Diagnostic moléculaireDiagnostic moléculaire

Hb A

Hb F

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GénétiqueGénétique

• Transmission dominantedominante 1 seul allèle muté ≠

thalassémies

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GénétiqueGénétique

• Transmission dominantedominante 1 seul allèle muté ≠

thalassémies

• Cas particuliers : en associations avec une

ß° thalassémieß° thalassémie thal intermédiaire

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Diagnostic différentielDiagnostic différentiel

• Anémie hémolytique avec splénomégalie :– Sphérocytose héréditaire

• Hémolyse provoquée/médicaments + corps de Heinz– Déficit en G6PD

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TraitementTraitement

• Anémie hémolytique modérée:– Folates– Surveillance lithiase biliaire– Médicaments

• Anémie sévère:– Transfusions

• Anémie chronique avec splénomégalie:– Splénectomie

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Quelques hémoglobines Quelques hémoglobines instablesinstables

• Hb Köln la plus fréquente

• Hb Hammersmith, Poitier, Brest, Clermont Ferrand…

• Hb Tunis-Bizerte : – Alpha1 129(H12) Leu>Pro– Anémie, microcytose (alpha thal)– Famille tunisienne (mère homoz, 2 enfants

hétéro)

HbVar : A database of Human Hemoglobin Variants and Thalassemias

Congrès Tunis Sept 2007

Laboratoire Laboratoire d’hématologied’hématologie

Hôpital Saint EloiHôpital Saint Eloi

Pr JF SchvedPr JF Schved

Dr M GiansilyDr M Giansily

S CunatS Cunat

H IgualH Igual

F BeckerF Becker