26
Hospital de la Santa Creu i Sant Pau Gastroenteritis víriques. Diagnòstic 1 Gastroenteritis víriques: Diagnòstic microbiològic. Quan i com? Núria Rabella 27 maig 2010

Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

  • Upload
    others

  • View
    2

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

1

Gastroenteritis víriques:

Diagnòstic microbiològic.Quan i com?

Núria Rabella27 maig 2010

Page 2: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

21972

19791977

1973

1984

Virus causants de gastroenteritis

1972

19751989

Page 3: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

3

* Els virus han de ser empassats

* Resistir l’àcid clorhídric de l'estómac

* Resistir els àcids biliars del duodè

* Trobar les cèl.lules susceptibles de l'intestí

Virus causants de gastroenteritis

Persistència a pesar de les mesures de desinfecció que usualment eradiquen la contaminació bacteriana

Page 4: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

4

Gastroenteritis víricaEtiologia

Rotavirus NorovirusSapovirusAstrovirusAdenovirus 40, 41

CoronavirusTorovirusParechovirusAichi virusBirnavirusBocavirus

Page 5: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

5

Etiologia de la gastroenteritisnosocomial

Lopman BA et al. Clinical manifestation of norovirus gasroenteritis in health care settings. CID 2004.

Anys: 2002-2003Seguiment prospectiu de brots de gastroenteritisAvon County, Regne Unit

Hospitals: 4 grans, 11 de petits / 238B / 122E / 61N (50%)Residències: 135 / 33B / 19E / 14N (74%)

Page 6: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

6

Etiologia de la gastroenteritis

Lopman BA et al. Clinical manifestation of norovirus gasroenteritis in health care settings. CID 2004.

Page 7: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

7

Etiologia de la gastroenteritisde la comunitat

Bacteris enteropatògens 17 (2,4%)Virus 232 (21%)

Norovirus 114Rotavirus 52Sapovirus 43Adenovirus 27Astrovirus 14

Paràsits 48 (6,8%)Toxines bacterianes 24 (7,8%)

Total de diagnòstics 46%

De Wit MAS et al. Sensor, a population-based cohort study on gastroenteritis in the Netherlands: Incidence and etiology. Am J Epidemiol 2001

Page 8: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

8

Reoviridae

Rotavirus

Sis grups antigènics. A-F

A, B, C detectats en humans

7 P serotipus segons la VP4 de càpside

Capacitat de recombinació del material genètic(11 fragments)

Codifiquen una enterotoxina

Page 9: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

9

Adenoviridae

MastadenovirusAdenovirus 40, 41

Sis subgrups: A-F

Subgrup F associat a gastroenteritis

Altres serotipus en pacients immunodeprimits

No es detecta en cultius cel·lulars

Circula tot l’any

Page 10: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

10

Astroviridae

Genogrup A: serotipus 1-5 i 8

Genogrup B: serotipus 6 i 7 12 genotipus

No hi ha una completa correlació entre genotipus iserotipus. El més prevalent HAstV-1

No immunitat creuada

Múltiples tipus circulant al mateix temps en una zonageogràfica

Astrovirus

Page 11: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

11

Astroviridae

Astrovirus

Diferències en virulència segons el genotipus.

HAstV-3, particularment el genotipus IV implicat en casosde diarrea persistent de durada fins a 3 mesos

Correlació entre la càrrega vírica i la durada de la diarrea

Descobriment de que la càpside vírica te propietatssimilars a les enterotoxines que són dosi-depenents

Page 12: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

12

Caliciviridae

NorovirusSapovirus

Page 13: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

13

Genogrups I-II-IV,com a mínim 40 genotipusnombrosos subgrups

Acumulació de mutacions puntuals i recombinació

Expressió dels gens de la càpside en baculovirus perproduir VLP

Receptors: antígens de grup sanguini ABO, relacionatsamb susceptibilitat

Emergència de noves variants que substitueixen lasanteriors: nova soca pandèmica cada 2-4 anys

Norovirus

Page 14: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

14

Únic hoste l’home

Dosi infectiva baixa (10 -100)

Transmissió: gotes, fomites, contacte persona-persona,contaminació ambiental. Casos secundaris:30%

Excreció vírica abans símptomes i després (109)

Virus manté la seva infectivitat en un ampli rang detemperatures des de la congelació fins 60ºC

Degut a la gran diversitat de soques i a la falta d’immunitatcreuada les infeccions es repeteixen al llarg de la vida

Norovirus

Page 15: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

15

És la causa més comuna de

gastroenteritis en els adults i la

segona en nens:

5%-31% de pacients hospitalitzats pergastroenteritis

5%-36% de pacients que consulten al metge

Norovirus

Patel MM et al. Systematic literature review of role of noroviruses in sporadic gastroenteritis. Emerg Infect dis 2008

Page 16: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

16

Infecció nosocomial:

30%-50% brots epidèmics en hospitals i residències

altament transmissible

múltiples maneres de transmissió (seqüencial 7)

resistent als desinfectants

Complicacions

Eliminació prolongada

Infecció crònica: noves variants?

Norovirus

Said MA et al. Gastrointestinal flu: norovirus in health care and long-term facilities. CID2008.

Page 17: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

17

Diagnòstic:

RT-PCR detecten la majoria de soques però nototes

RT-PCR a temps real més sensible

EIA molt específic per alguns genotipus, lasensibilitat és genotipus depenent. Útil en brots.Confirmació negatius amb RT-PCR

Norovirus

Patel MM et al. Noroviruses : A comprehensive review. J Clin Virol 2009

Page 18: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

18

Altres virus

Parechovirus (picornavirus)

Virus Aichi (picornavirus)

Birnavirus

CoronaviridaeCoronavirus

Torovirus

Bocavirus (parvovirus)

Page 19: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

19

• Una mostra tenia 7 virus diferents • Les mesures que serveixen per eliminar els

“coliformes” no serveixen pels virus

Page 20: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

20

Gastroenteritis víricaTransmissió a través de l’aigua o dels alimentsTransmissió persona a personaTransmissió nosocomial

Alguns amb distribució estacional característicaAfectació de nens i adults

Incubació: 1 a 4 diesDurada: 2 a 7 diesEliminació vírica més enllà del quadre clínic

Page 21: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

21

Gastroenteritis víricaDiagnòstic etiològic

QUAN?

Gastroenteritis que requereixen hospitalitzacióBrots epidèmicsGEA de nova aparició en hospitals o residències

Page 22: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

22

Gastroenteritis víricaDiagnòstic etiològic

COM?

Microscopia electrònica: poc sensible i laboriosa per moltes mostres

Immunomicroscopia

Page 23: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

23

Gastroenteritis víricaDiagnòstic etiològic

COM?

Detecció d’antigen: EIA, làtex, ICGpoc sensible

comercialitzats: rotavirus, adenovirus, astrovirus, norovirus

Page 24: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

24

Gastroenteritis víricaDiagnòstic etiològic

COM?

Detecció d’àcids nucleics: molt sensiblePCR multiplex atenció a les diverses variantscorrelació amb infectivitat

Page 25: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

25

Gastroenteritis víricaConclusions

1) Alta freqüència, gran impacte social i sanitari

2) Recomanable fer un diagnòstic etiològic

3) Diversitat de reactius disponibles i només per alguns dels virus, amb sensibilitats i especificitats variables

4) No existeix cap tècnica per avaluar infectivitat

Page 26: Diagnòstic microbiològic. Quan i com?Reoviridae. Rotavirus. Sis grups antigènics. A-F. A, B, C detectats en humans. 7 P serotipus segons la VP4 de càpside. Capacitat de recombinació

Hos

pita

l de

la S

anta

Cre

u i S

ant P

auG

astr

oent

eriti

s ví

rique

s. D

iagn

òstic

26