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Effet dn benzoate d'oestradiol sur la fonction hbpatique et sur le rnbtabolisme du cholesterol et des acides biliaires chez la caille
CHRISTIAN LAWGIER Lcrborntoire dc Plzy ~iologie-Phurmacodj~n~zr~zie, 406, Instif~ct National dcs Sciences
AppiiquL:es, 20 A venue Albert Einstein, 69624 Villeurbunne Crdex i f iunce)
JEAN-FRANCBIS PAGEAWW, BERNARD DUPERRAY, AND WEPJRI PACHECO Lalporutoire de Clzinzie Biologique, 406, Institzli Nuiionczl dcs Scie~zc.es .4pp%iqarPrs,
20 Avenue Albert Einsteirr, 69621 Vilicrlrban~ie Cedcx (France)
EMILE BRARD &ah(zratcpire dc Pilysinlogie-Phcirw~acodynun~ie~ 406, l~tsrirut lLrarionttl dcs Scienc.es
Appliqur'es, 0 A~gen~re Albert Einstein, 69621 Villeurba~ane Cedex (Fmnce)
K e ~ u le 19 mai 8978
LAUGIEH, C . , PAGEAUX, J.-F., DUPER RAY,,^^.. PACHECO, H., et WRARD, E. 1979. EfFet dan benzoate ci'oestradiol sur la fonction hkpatique et sur le n16tabolisme dn cholesterol et des acides biliaire5 chez la caille. Can. J. Physiol. Pkarmacol. 57, 396-403.
I)es cailles fernelies immatures ont r e p , pendant 6 jours, clu benzoate d90estradiol aux doses de 0.01, 0.02, 0.1 et 1 rng/joanr. A ia fin du traiternent les paramktres suivants ont 6te etudiis: dkbit de bile, taux hkpatiques, biliaires et skriques et debits biliaires du cholesterol (CST) et des acidcs biliaires (AB). Sur certains animaux, nous avons determink la valeur du rapport (M) des vitesses d'incorporatioia, dans les acides choliques (I") et ch6nodesoxycholiqw (CDC) de la bile, de la radioactivitk de [2-I4C]acetate inject6 intraveineusement. Ees traitements oestrogkni- ques aux doses stipdrieures A 0.01 mg/our perturbent la fonction hkpatique et le d t a b o l i s n ~ e du CST et des AR: le poids relatif du foie? les rkserves hkpatiques de CST, les taux skric~ues de CST, C, CDC, 19activite SGOT et la cholkrkse augmentent (de 56,57,650,6000,700,42 et 235(,;,1, respectivement, il la dose de 0.1 rngljour) tandis que dirninuelmt les concentrations biliaires des AB totaux et de CDC, les rapports de concentrations CDC/C skriques et biliaires et le rapport R (de 71, 82. 84, 69 et 58(, I, respectivement, h la mCme dose). L'augnientation de la fraction de bile indtpendante des sels biliaires est responsable de l'hyperchol6r&se, sei~le ou avec d'autres facteurs, selon Ba dose. Ces resultats sont compares B ceux obtenus c h e ~ Be marnmiftre. notarnment chez le rat.
LAUOIER, C., PAGEAUX, J.-F., DUPERRAY, B., PACHECO, W., and BRARD, E. 1979. Effet du benzoate d'oestradiol sur la fonction hepatique et sur le metabolisn~e du cholesterol et des acides biliaires chez la caille. Can. J. Physiol. Pharmacol. 57, 396-403.
Immature fernale quails were treated for 6 days with estradiol benzoate at daily 0.08-, 0.02-, 0.1 -, and 1-n~g dosages. At the end of treatment, bile outflow, biliary cholesterol (CST), and bile acid (BA) secretory rates and liver, bile, and serum CST and HA levels were determined. Some quails were used to measure the ratio (K) of the rates of intravenously injected [2-I 4C]ace- tate radioactivity incorporation in cholic (C) and cllenodeoxycholic (CDC) acids excreted in bile. The oestrogenic treatments at doses greater than 0.01 mg/day caused a marked disturb- ance in hepatic function and in CST and BA metabolism: they induced an increase in relative liver weight, liver CST stores, serum CST, C , CDC, and SGOT levels and in choleresis (respec- tively up to 56, 57,658,6000, 700,42, and 2357; increase at the daily 0.1-mg dosage) and they decreased bile total BA and CI>C levels, bile and serum CDC to C level ratios, and R ratio (by 71, 82, 69, 84, and 58(,;,, respectively). An increase in the bile salts independent fraction of bile was responsible for hypercholeresis, whether alone at low dosage or in conjunction with other factors at higher dosage. These results are compared with those obtained in nlamnlaIs, garticu- larly in the rat.
Introduction pas les contraceptifs oraux. Le modkle experimental
De non~breux travaux ont i t6 entrepris pour itu- le plus couramment utilisk est le rat; chez cet animal,
dier le rble des oestrogtnes dans l'apparition des aprks adnministration d'oestrogGnes, on n'a pas pu
cholestases de la grossesse et des cholestases induites mettre cn evidence les signes morplaologiques d'une cholestase (Plaa et Priestly 1 977 ) mais on a cepen-
A H K ~ Y M I I O N S ~ AB, aCideS biliaires; C . acide cholique; dant observe de fortes perturbations de la fonction CDC, racide chCnodesoxychoiliquc. hkpatique touchant, en particulies, le m6tabolisane
0008-421 2/79/810396-88$OI 100/0 z) 1979 National Research Council of Canada/ConseiB national de recherches du Canada
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du ckoIest6roI et des AB. On a notannment mis en 6vidence des modifications des vitesses d'excrition biliaise, du rapport des conceaatratioins biliaires et des vitesses de syntlniise des acides C et CDC (Davis et Kern 1976; Kern et al. 1 9 7 9 Uchida et a]. 1970, 1973; Wata~aabe 1975 ) . Ces observations ne per- mettent pas encore de comprcl~dre clalrcment gar clue1 m@canisrne Ics oestrogk~nes influencent le m@ta- bolisme des AB ni quel rble pourraient avoir ics modifications de ce m71i.taboiisme dans Ba ginkse d'une cholestase. 11 nous a scmblk que B'interprkta- tlon des rksultats obtenus chez Ie rat pourrait &re Eacilitie par I'itude expkritnentale d'un rnodhBe animal, tel qare Ia c~aille, prksentant apparerrament une rkgulation de la syaathkse des AB difl'krente de celle du rat avec, poaar AB dominant, Ie CBC et non le C. Nous avons domc, chez cet animal, 6tudii I'influence d'un traiternent au beanzoate d'oestradiol sur la fonction hkpatiqaie et, plaas partic~alikreinent, sur Ia syntlmCsa: hipatiquc., L7e?icri.tion biliaire et les baux sCriques des AB.
Materiels et mkthodes
Prod~ti f s cir irnicllres B,e benzoate d'oestradiol a kt6 fourni par Roussel (Ben-
zogynoestrylL'!~). Le cholesterol et les acides biliaires pro- viennent dc Steraloids. Lc [2-'"]acetate de sodium provient du C.E.A. (France): sa pilrete raaliochirnique est suptirieurc h 98%.
A ninzaux Nous altilison\ de\ cailles fernelles (Coturnix coturnix
japonica) AgCes de 21 jours (premikre expOrience) ou de 24 jours Qdeuxierne expCrience) pesant respectivement environ 100 oar 150 g, 6levCcs en Iqatterie dam des cages indivi- duelles, recevant 'ad libitl~m' la boisson et une nourriture standard sous forme dc farine.
Tr-ciifc~rnrrat ocstroglraiyr~e el collection des kc hantillons Le benzoate d'oestradiol, en sol~ation lauileilse (huile
d'olive neartralisie et st@rilisee), est inject6 quotidienmemcnt par voie intramusculaire pendant 6 jours. aux doses de 0.01 ii 1 mg, sous un volume constant ds 0.1 n~li,. Hxs tCmoin\ repivent l'hnile seule dans les rnPmcs conditions. La bile est recueillie sur les aninsaux placCs en ambiance de neutralit6 tkern~ique, entre la 30erne et la 98kme min suivant Ba mise en place, salr 19animal vigile, d'un cathiter dCrivant le canal entCrohCpatique. Le moment reterraa polar collccter la bile est celali oh, selon une Otude prilirninaire, lc d6bit de bile est Be plus stable (pendant Ies 3 0 prerni6res min, le ddbit e\t trks irrtgulier; il reste ensuite constant pendant 4 h ) . Le sang est recrmellii aprks ddcapitation, sur d'autres animaux trait& de la mime rraanikre: le sirurn est utilisd pour le dosage des A H et du cholsstCr-ol driques. Sur les minles aninraux, le fsie est pl-Clevi et pesC: on diterrnine le taux de cholcstCrol hkpatique et ta tenetir ern eau du tissn.
L16tude 'in viuo9 du rapport des vitesses tnoyennes de synthkse de CDC et de C a kt6 rkaliske chez des animaux vigiles porteurs d'un cathdter hipntoenterique auxquels on injecte, darts la veine de l'aile. 0.1 ml- d'une solution de
Ringer contenant le [2-"C]acetate de sodium ( 2 5 mM, 200 pCi (1 Ci -- 37 GBq)). La bile est reeueillie ensuite pendant 2 h.
M<tl~oclcss d'arlalyse Le cholestCrol sdrique est dost par la mCthode de Watson
(1 960) avec extraction prialable 116thansl-Cther (3 : 1). H,a ditermination du cholestCro1 hkpatique est obtenue
par chromatographie en phase gazeuse, en priscnee d'un titalon interne (5a-cholestane) aprks hydrolyse alcaline d'une aliyuote de l'homoginat du foie, double extraction du cho- lesttrol B l'hexane, double lavage B B'eau et evaporation ii scc de la solution hcxanique. L'hydrolyse dure 90 min P 10O0C, sur 0.5 mL ai9homsginat, avee 3 mL d5Cthanol et 1.4 rnL de soude 5 N. HJe chromatographe Girdel 3000 a un ddtecteur >I ionisation dc flarnme, une colonne en Pyrex ( 1 n~ x 3 nnm intirie~ar) chargke d'OV-17 h 3% sur chromo- sorb WHP 80-1 80 mesh et maintenue r'p 240°C; Ic dCbit de gaz porteur (azote) est de 35 mI,/min. Le taux de recouvre- rncnt cholesti.ro1 est de 84.0 + 1.7% (n =- 5).
Les AH et le cholest6rol de la bile sont dosds par chroma- tographic en pha5e gazeuse, sous forme de trifluorac6tates, \elon la mCthodr: de Crrandgeorge et al. (1973). L'acide cle\oxycholique Gtant, dans tous les cas, pratiquement absent de la bile de caille, nous 19avons utilisk comme Ctalon in- terne; par prkcaution, cependant, tous les tchantillons ont 4i1bi une double analjse, avec et sans Otalon interne. L'ab- sence d'interfirence d'AB inattendus a CtC contrBlCe par analyse de6 dchantillons, aprhs mkthylation et avant tri- fluoracdt~~lation, en chrolnatographie en phase gazeuse sur colonne d'O\'-210 3 %. et par chrumatographic en eouche mince auec difrdrents systemes de solvants.
H a dkternaination dc l'activiti SGOT est effectuke sclon la mithode UV standard de Boerhinger GmbH (Mann- heirnj.
Pour la ddtermination du rapport R des vitesses Prloyennes cle synth6se cle CDC et de C, la bile recueillie en 2 h subit klnc hydrolyse alcaline (ssude 2.5 N , 8 h, 120°C): puis est dmenie B pH 1 par 6 N HC1. Les AB en sont extraits par 3 x 20 nlL d'ither Cthylique; la solution ithCrCe d'AB est lavke par 3 x 10 mlt- d'eau puis CvagorCe sous courant d'azote; le rCsidu est repris par 5 mI, de mkthanol. Une partie de cctte solution est analysee par chromatographie en phase gazeuse pour fcwrnir la masbe de chaque AB debitCe en 2 h et la valeur Inloyenme du rapport @DC/C. Le reste de la solution permet la dCtcrmination des activitCs spicifiq~aes moyennes de CDC et de C : les acides C et CDC de la solution sont siparks et purifigs par double chroma- tographic sur couche mince de Silica gel, la seconde fois :iprks mithylation par le diazomithane. Les solvants de dkveloppement sont: acCtate d16thyle - aeide acktique glacial (96:4, v/v) clans le premier cas, isooctane - acdtate d'dthyle - acide acttique - n-butanol (10: 5: 1 .$: 1.5, u/v) dans le se- cond cas. Les rdvilations sont faites aux vapeurs d9iode. Les solvants d9elution sont le mgthanol h chaud dans le premier cas. le milange chloroforme-mdthanol (1:1, v/v) dans le \econd cas.
Le\ AB ssnt ac6tylCs selon Roovers et al. (1968) et, a p r h addition d'un ttalon interne (ester rnethylique du diceto 3,12-cholanoi'que), leiar activiti spkcifique est d6terminCe par chrornatcpgrnphie en phase gazeuse et cornptage de radio- activitt5 en scintillation liquide. La puretC radiochin~ique des AW m6thyl6s et acLtylCs est supkrieure ii 97%, d'aprks les courbes de rkpartition de %a radioactivitC a p r h chroma- tographic sur colsnne de Lipidex 5000 (40 x 2 cm) ou siir couche mince de Silica gel avec entrainement par isooctane-
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acetate d'kthyle - acide adtique (669: 39: 4 , v /v ) . Le rapport e\t caHcul6 par la formule 1 :
o<i tP est 19astivit6 sp6cifique moyenne de CDC, a, cclle de C' eh k, le rapport des masses excritCes en 2 h. Unme Cerade prkliminaire a montrC que ce rapport k est constant sur rane p61 iode de 5 h,
ke dosage des AH skriques est cRectnC par ehron-aato- graphic en phase gazerise selsn la mCthode de Pagcar~x et ai. (1 978).
li'ous les rCsultaes sont exprirnCs sous forrne de moyennes affecties de l'crreur \ tandad 2 Ia mogrenne. Lcs ajustements l inkires ant it2 efI'ectu6s pas la rnithode des moindres rec- tangles. Les moyennes sont corraparies par lc test de Saradent.
Tcnc~rrr tPr la bile de caille itn~~zafsrre en AB Les taux moyens (de 10 rinimaux) des AB de la
bile de caille fenmellle immature: sont les suivants, e11 pourcentage du taux des AB totaux: CDC, 72.6 -(- 1.7; C , 20.0 2 1.5; acide lithockolique, 6.0 2 0.6; acide d~soxycholique~ 0.3 %I ; acldes epidesoxycko- lique, kyc~clesc~xyclaoIiq%~@. cktoli thockoliquee 1 % .
La bile ne contient pas d'acides a or1 /3 muricho- liyues en quarrtitk ddceIable. Le dosage des AB sul- fates n'a laas kt6 cgFectu6.
A cttorr dr! h~sazcmte d'o~stradiob srar brs crzolesee- rob6naie et sllr le taclx hkpnfiyrde de clzolestdrvl (7'iaDleasl I )
Un traitement de 6 jours au benzoate d'oestradiol induit lane hypcrcholestdrolkmie d'autant plus inn- portante clue Ia dose im~jectie est 6levEe. Le taux de choIest6rsl laipatique ne varie pas, sauf pour la dose de 0.02 lmmg/'jour qui conduit sl Bane augmentation significative dc 8.596 .
Actiorz dl4 be tbzo~ fe R90e~tradk'ol srrr la c/zolkrk..~e ct La conzpositiosr cle la hibe {Tuhlearl 2 , Fig. I )
Le be~lzoatc d7crestradiol provoque rnne augmen- tation, d6penmdante de la dose administrke, du dk'tsii de bile, sans modifier la skcr6tion clIes AB totrauxj en cons6yucncc, la comlcentration des AB dkcroit de faqon significative. Le traitelnent n'affecte pas le dkbit du cholestkrol: on devrait done constater unae dimintation de la conceiltration du claolestkrc~l mais, du iait de la dispersiorm des valcurs individuellcs, les forts icarts elatre lles moyennes que rnontre le Ta- bleau 2 n'atteigncnt pas la signification statistiqtae.
Pour les aninzaux tkmoins et pour les animaux traitis h la cfosc quoticlienne de 0.02 mg, on pcut rnettre eta @videnee ume corr6lation liniaire s9expri- ~naaat par les iquatiorss 2 ( t ho in s ) et 3 (animaux trait&) graphique~n~ent reprkscnties par la Fig. I :
ou Y dksig~se le cEbit de bile (microlitres par keure par 108 g de poids vif), X, le dkbit biliaire dcs AB (microgranarnes par heure par 100 g de poids vlf), r., le coeficient de corriIation ct P, %e risquc d'erreur de premi?re esp6ce. Les pentes des deux droites ne sont pas significativement diflirentes.
~ i ; cornme cela a C t i fnit cllez le tnammifl-re (GBa~nucio et Valdivicso 1971 ; Heikel et Lathe 4 97Qb), on disti~mgaae une fraction de bile indCpen- dank des sels biiiaires, le dkbit de celle-ci est donnie par la valeur de Y pour A' nul, calculable B partir des kquatisns pr@cddentes. On constate alors clue le traitemerlt avec 0.02 ~ngj jour de benzoate d'oestr a- diol provsque une augmentation de 246% de cette fraction ( B < 0.05).
FAELEAU 1. Elyet du ben~oate d'oestradiol sur le poids du foie et les tauu de cholesterol
Poi& du foie, Poids sec clu fsie, CholsstersI hk.patiquc, Chole\terol hkpat~que, Chc~iesterol skricl~ie, rralternent g/ 100 t: ( ; d~a poids f r a~s mg/g foie rng/'180 g p s ~ d s corpor el , ~ g /mL,
Ntrrn.: Le traitcment nu bcrizoate d'oestt-ndioi, aux doses journali6res indiqu&s. a i t( . poursuia~i pendant 6 jours. 1.c poids nloycn des nr?irn:iux (rigis de 2 I jours lors tlu s:~crlfici.) cst de 100 g sans variation signiiicn!ive d 'un lot B 1'autl.e. Ch;iquc vaicur tigurant darls le tablc;~u repr6sente la moycnne dc citiq i~ lluit :ininzaus. nffectic- de I'crreur standard h la moyeniic. B.cs Larintions signifisativcs soiit affcctCes du signe ' ou '* selon q u c Ic r isqi~c d'erreur clc pretnikrc espkce est ~'0.05 clu <-0.01.
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T~u~,tnu 3. Btafluence d'un traitenaent au benzoate d'oestratliol snr cguelques indisaleurs de La foc~ction hkpatique
Taux des acicles biliaires s@riqitrs Rapport des vitesses SGOT, -- cfe syntMse
mEU/rnk, AR totaux, CDC, c9 CDC'/C9 hCpatiqueCDC'/C', rraiternent ci ~ g / l n L ~g/mHd pg/raxE h c
Oestradiol, 0.01 rng!jour 89 k 9 1 1 . E k0.7 9.6k0.3 1.50+0.10 7 . 3 t 1 . 4 -
Oeatradiol, 0.02 mg/jour 8 0 2 12 15.0i-J .G* 12.1 k 1 . 2 2 .90 i0 .40** 4 . 3 1 0.4"* -
Oestradiol, 1 mg/jour 1147 -t IG* 57&2*** 35?3*** 21.41-1.3*** 1 .71 0.2"** -
Norr.: Les ctonii6t.s d e ce tableau provienr~cnt ties mi.nies arii~nc~lax que celles du .Lab!c:iu I, h [ ' ~ X C I I I S ~ O I ~ des dorinPcs rlc In dcrniitrc colonnc provenant d'un lot distinct. Chacluc vulcur reprksente la moyennc dc ~ i x anim;lux atl'ectee clc I'errcur s t t~ndnrd II In moyenne; c c l l c ~ qu i prlsentent uri Pcort signifisatif avec la ~ s l e u r observee pour les tCmoins sclnt affeitces des siglies *, **, * * * sclorl clue Ic r-iscluc cl'crreur cle preanikre especc est -.:O.OS, i O . 0 1 o u <#).001. a. iictivit6 tr;uis~lrnin;~cc glutalnicjuc ox;~lacCticlrle s6rique; h, rapport des contentrations tles ncitles C D C et C ; c., rapport cles vitessrs rnoyenlles d ' i ~ i c c > r [ ~ o r a l i o ~ ~ d e 1;1 rndionct i~i t6 cle [?-'dC]:~cCtnte inject6 intraveinei~semen~. clans les acides CEIC et C d e ia bile; AS, ucidcs bili,lircs; CDC', acide cl~inodesoxycl~oiic~~~e; C', ncidc cliolic~uc..
Pour lcs arliiraa~ax trait& B la dose de 0.1 rng/]jotar igalernerat un accroissement d'activitk de %a SGOT, pendant 6 jours, la cousbe de rkgression corrklant Y aux doses &gales ou supCriealres il 0.1 mg/jour, et et X n'est pas linkaire: il n"est plus possible de d6- uaae klkvation dar taux des AB siriques, aglx doses finir une fraction de bile indkpealdante des sels kgales ota sup6rieures ri 0.02 la-ag/jorar. biliaires. Ee spectre dcs LAB skriques est modifik par Ie
Action drl benzoate dJos~seratdio& srsr %61 fondion hPpatiyrte (Tableaux P,2 er 3)
I,e benzoate c%'oestradiol provoque urae augrnenta- tion du poids reIatif du foie sans modifier sa teneur en eat1 (sauf 5 la dose de 1 mg/jour) et, conme on 17a vu, une atagmentation de la chol6ri.se et un ckangement cle composition de Ba bile. 11 indalit
0 rn
1000 3000
debi t d e ~ A B p p h-' idX) get
FIG. 1. Relation entre le debit de bile et celui des acides bilial-cs totaux. Effet du benzoate d'oestradiol. ( ) Cailles immatures ternloins ( y = - 0 . 0 6 7 ~ + 12.71 ; r = 0.94; p < 0.001; n - 14). (a) Cailles traitees au benzoate d'oestradiol 2 la dose de 0.02 rngjjoilr pendant 6 jours ( y = 0 . 0 6 1 ~ +- 43.99; r = 0.84: p < 0.001; 12 - 1 3 ) .
traitement: le mpport des concentrations d e CDC et de 6 est fortemelat dirninuk. En outre, ~ U X doses de 0.1 et L rng/jour, Iaous observo~ns, au cours des analyses de skruna par chromatographie en phase gazeuse, I'apparition d'une substance nor1 identifike qui, d'apr6s la position du pic, est probablement alra
AB monocktoniyue 1)srtan-t un ou cleux lnydroxyles. Nous ne 19avons pas pris en compte dans nos caI- - culs: il n'apparait m quanriti d ~ c d a b l e quc chcz les caiiles traitees aux doses de 0.1 mg/jour (avec un taux moyen de 4 i 5 pg/mL) et de I mg/jour (taux moyen 3 pg/mE); mbne si cet AB est un rnktabolite de CDC, Bes quanbitis trouvies ne rnodifient pas seansiblement Ies conclusions qu'on peut tirer des rksultats.
Le benzoate d'oestradiol, B la dose de 0.1 mg/ jour provoque une diminution de 57% du rapport cles vitesses moyennes de syntkPse de CDC et de C .
La fonction h6patique de la caille insmature est for- tement perturbke par un traitement au benzoate d'oes- tradigsl. Cet te perturbation, con firrnke par une r6ten- tion accrue de la BSP (Eaugier. rksultats laon palbliks), se traduit par une augmentation du poids relatif du foie, par une Glkvation du taux des transarninases sericljues et, surtout, par une tr?s forte augmer-rtalion, d6pendante de Ia dose d'oestradiol adrninistrie, des
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taux seriques des AB: de nc~~nbreux auteurs ont montrk, aussi biena chez l'homrne (Barnes et al. 3 975; Bloomer et al. 1976; Makino et al. 1969, 1975; Sandberg et al. 1965; Schws.arz et al. 1975; Van Bergc Henegouwers et al. 1976) clue chsz l'anirnal de laboratoire (Answer et al. 19761, qu'uan tel cffek sur les AB skriclues 6tait %e signs soit de domrnages caus6s ri I'hkpatocyte soit d9ura itat cholestatique. %l semblc dstlc qus 1e traitement au benmate d'oestra- diol, en endornnnageaimt l'hkpatocytc, induit une defi- cience de la 'captation' hepatique entrainant une 616- vation, dans le sang, du tauxdes substances activermaent transporties par l'hipatocyte: les effets du traitemelat SUP la cholkrkse, doilt news parlons paus Boin et qui son$, eux aussi, un signe de perturbatiori hkpatique, rendent peu a~raisernblable l'iiaduction d'un @tat chs- Iestaticlue.
Chez les anammifkres sournis 2 dcs traitenments oestroginiques, des perturbations similaires oist Gtk obsel-vkes. Chez le rat, on constatc ulmc rt~agnaentation du poids du foie (Davis et Kern 1976) associke B une rktentiora accrue de la BSP et unc diminution de la capaciti an:ixirnale de tranqport dcs AT3 (Jenscn et al. 1977) et de la BSP (Kreek et a1. 3967). Chez B'homlrme trait6 par des oectrogPnes ou chez la femme enceinte, la vitesse d'excr6tiom de la BSP est dimi- nuke (Kreek 1969).
Chez la caillc immature, les traiternents oestro- gkniques (aux doses sup6ricures i 0.02 mg/jour) induisent urle augmeimtation, dkpendante de la dose, du taux de cholestkrc~l skrique et des rkserveq de cholestirol hzpatique (en milligramrnes par 100 g de poids vif), sans changer nc~tablernent le taux de cholestkrol hkgatique. Des rGsultats semblablen ont kt6 trouvbs par Uchida et al. (1973) chez le rat: agrks un traitenlent de 3 jours Ci l'oestradiol, on con- state une hypocholestirol6n1ie accc~rmpagrn6e d'une augmentation du kaux hitpatique de cholestkrol; mais, apr&s ur-r traitement de 3 semaines, on observe une hypercholest@rolkmie acconmpagnke d'une baisse du taux h6patique; en fait, si l'on tielst comgte de la forte augmentation du psids du foie (4705% selon Davis et Kern 1976): les rksultats d'Uckida rnontrent, dans les deux cas. une augnlentation des rkserves hdgatiques de cholestkrol. Kelner et al. (1 977) corastatent kgalement un accraissernent de la cholest6rolkmie chez le rat ovariectomisk trait6 2 l'oestradiol pendant 42 jours. L'augrnentation de la masse de cholestkrol hkpatique et de la cholestit- roI6mie ne sigr~ifient pas nkcessairement que le cImolest6rol total du corps augmente et elmcore moins que la synthkse du cholestkrol soit accrue: les lois de la cholest6rolbnaie, chez la caille, sont inconnucs mais il n9est pas impossible qu'elles s'apparentent B
celles observkes clmez le rat oil %a synthkse du choles- tdrol dira~inue lorsque la cholestirol6mie auglnlenmte (Cheva%%ier et al. 1976 ; l'esp?ce humaine semble connaitre lle meme phknoltn6rae (donnkes dc Nestel el al. 1969, dtudidcs par Chevallier et al. 1976). %,es cffefs du traitement oestroginiqus sur la claolcs- tkrolimic et sur le cholesterol hepate'que chez la caille cornnme chez le rat sont plus vraisemblable- merat 1e sign~e d'unme namodificatio~m de rkpartition du cholestkrc~l e~mtre seq diifkrents pools, ce qui met earn cause la validit6 des inesures de vitessc de synthkse du cholest6rol par dtitcrminatiora de Ba vitesse de disparitic~ii de chrslestirol radioactif inject6 intra- vei~aeusenaent 2 dcs aninlaux trait& par des oestro- gsnes.
Chez la caiile immature, le benaoate d9ocstradio1 provoque un net accroissernent de la cholkr?se: B la dose de 0.02 mg/jour, cet effet, rnoddre (-4- 30% 1, concerns uniquenlent la fraction de bile in- dipersdarste des se%s bi%iaires; I\a la dose de 8.1 mg/ jour, le ddbit de bile est rnultiplik par 3. mals comme il n'est plus une fonction linkire du d6bit des A13 totaux, il n'est pas possible de dkterrnincr l'effet de l'oestradiol sur la fraction de bile indkpendante des sels biliairss. Chez les marnrtaif?res, les oestrob' renes provsquent une kypoehoIkr&se gar diminution de cette fraction de bile (Lynn et al. 1973; Gumucio et Valdivieso 1971; Heikel et Lathe 1970a; Kern et al. 1977 ) . Cet efkt est gknGraIernent interpret6 ccjmrne aln mod@lc apprschh de la cholestase de Ba grossesse ou des cho1estasc.s provocjuies, chez la femme, par les contraceptifs oraux. Si l'ora adrnet, d'apr?s Er- linger (1972) que la fraction de bile iamdkpendante des sels biliaires est like ii I'activitC d'ATPases (K+, Na+B rnernsbranaires de l'lakpatocyte et si l'on tie~mt comgte des resultats de Simon et al. (1976) rnontrant I'inhibition de ces ATPases par trla traite- nnent oestrog@a~ique, an cst amen&. cornme l'on faif plusietars dcs auteurs citis, Grnettre 19hypothPse clue les oestrog?nes provoquent l'hypochoHkr2se par inhibition des transports d'ions entre l9h6patocyte et la lumikrc canaliculaire. Si cette hypoth@se est va- lide et si %a mkme rslation existe, claez Ba caille, cntre cl~olkrhse et ATPases membm-arsaires, on devrai t, chez cet animal trait6 i~ l'oestradiol, observer une forte activation de ces ATPases correspondant A l'hyperchol@rhse que nous aLJons constattie. T I ap- parait ainsi que la conanaissarlce du rn6canisnae des effets hkgatiques des c>estrog?ncs pourrait progresser gar l'ktude, que nous 11ous proposons d'entre- prendre, de 19infuence dcs oestrogknes S U ~ les ATPases membranaires de la caille.
Chez la caille, comme chez tous les naanamif2rcs itudiks, dont I'hommc. les oestrogknes grovoyuent
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une modification de la conripositisn de la bile. Chez Javitt et aB. (1975), Bennisn et al. (1976) ct Eaati- la caillc traitCe au benzoate d'oestradiol, la baisse moyenne de conce~~tration du cholest6rol biliaire est logicpement probable, bier1 qaae statistiquement non significative, taaldis quc la ccmcentration des AB totaux dkcroit fortemlent, esse~ltiellement par rkduc- tion du taux de l'acide CBC; le rapport des csncen- trations CDC/C diminue tr?s nettement dans la bile et plus encore dans le &rum. Ces ri.snltats pouvaient signifier que, chez la caille, He benzoate d'oestradiol deplace 176quilibre de syntlmkse des acides C et CDC; nous avons tent6 de v6rifier cette hypoth5se en itu- diant I'influence du traiternent au benzoate d'oestra- diol (0.1 mg/jour) sur le rapport des vitesses d'in- corporation, dans les acides CDC et C, de la radioac- tivit6 de [I4Cjacftate administre par vsie intra- veineuse: ilo~xs avons observk clue ce rapport (CDC/C) htait diminui de pr?s de 68% aprks 6 jours de traiternent. Bans la nnesure ou l'on peut ad- rnettre que ces deux acides dkrivent du meme pool dc cholestCrol, ce rksultat tend 2 inontrer que le ben- zoate d'oestradiol provoque une aug~nsntation rela- tive de synth2se de C par rapport 2 la synth2se de CDC, sans toutefois indiquer 2 cluelle &tape de syn- thkse intervient cette aa~odification. Si l'on met en doute I'unicit6 du pool du prkcurseur. cholesthrol ou metabolite du chslest6rol, I'action de l'oestradiol slar les vitesses relatives d'incorporation de %a sadioac- tivit6 de laac6tate signifierait clue cet oestroghe rnodifie la rhpartition de ce pr6curseur entre les pools dc synthkse de C et de CDC. Cette interprktatior~ n'exclut pas la possibilit6 d'une influeracc de I'oestra- diol sur I'absorption intestinale des AB.
Chez le rat trait6 aux oestrog2nes %e &bit biliaire et le taux relatif de li'acide C diminuent tandis que le dkbit et Ie taux relatif de I'acide CDC (OU dtl muricholique) augmentent: le rapport biliaire CDC,'C augrnente fortemcnt (Kern et al. 1977; Uchida et al. 1970; Watanabe 1975). Divers auteurs ont tenti de nsesurer 19e8et des oestro- g h e s sur la vitesse absolue cBe synthkse dcs AB chcz le rat (Davis et Kern 1976; Saini et Patrick 1970) et trouv6 des rksultats apparcmment opposis; les mbthodes qu'ils ont utiliskes fournissent des r6- sultats do i~ t l'interpritation est trits hasardeuse dans le cas d9nn traitenlenat modjfiant les 6quilibres de transfert du cholcstkrol entre ses pools. On peut sculement retenir des recherches de ces auteurs qu'elles ont mis en kvider~ce chcz le rat des pertur- bations toucl~ant soit le mktabolisme du cholcstCro1, soit la biosy~nth?se des AB.
Chez la guenorl macaque, H,%;nn et 141. (1973) observent, aprks administration d'oestradiol, unc forte diminution du dibit biliaire des AR totaux.
kairlen ct Hessl~ (1975), slgnalent une augmentation de Ha proportion d'acide C et une diminution de celle de CDC dans la bile ou le serum du babc~irl trait6 B l'ithinylsestradiol (Javitt), de la femme absorbant des contraceptifs oraux (Bennion) et de la femme enceinte (Laatikainen). En opposition apparente avec les rhsultats de Bennic~n, Pertsemlidis et al. (1 974) trouvent, chez la fenme secevant des contra- ceptifs oraux, une riductisn du pool et un ralentisse- ment dc la vitesse de syntkakse de l'acicte C (par rnesure de d6croissance de radioactiviti spdcilique de l'acide C radioactif adrninistrk].
De l'ensernble de ces donnkes apparernrrsent con- tradictoires, iI ressort clue les oestrogknes perturbcnt le rn6tiabolisme des AR. Cette perturbation con- cerne vraisenlblablen~ent, dans tous les cas, la cap- tation des AB par Be foic et leur transport dans I'hkpatocy te comme %e nlontrent les faits rapport& plus haut (rktentisn de la BSP, diminution de la capacit6 de transport de la BSP et des AB, chez la caille, le rat et l'homme). Ees r@sultats obtenus chez la caille montrent que la perturbation peut kgaIe- ment eoracerner la rkgulation de l'kquilibre dcs syn- thhses des acides C et CDC. On peut admettre clue cette action des oestrog?nes entraine dcs eoras6- qucnces difF6rentes lorsqu'elle s'appliclue A des sys- tkmes 6cluilibr@s, diE6remment r6gul6s, tels que ceux de la caille, du rat et de l'kmomme. E'ktude des diflf- reilces existant entre les deux mod@les cxp6rimen- taux, caille et rat, devrait perrnettre de mieux distinguer les rnkcanismes fondamentaux, &en- tuellement extrapolables h l'esp@ce humaine, des phCnom&rmes secondaires li6s aux particularitks des modkles.
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