20
ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 Produits novateurs pour la chromatographie Colonnes pour chromatographie en mode HILIC Merck p.6 Transfert de méthodes en CCM Camag p.11 Surveillez vos niveaux Scat Europe p.13 Logiciel de pilotage pour HPLC Hitachi p.14 Filtration sans seringues... Whatman p.17 Filtration et dégazage en une seule étape Pall Life Science p.19 vwr.com

ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

  • Upload
    others

  • View
    0

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

ChromJournalNuméro 6 Mars 2009

Produits novateurs pour la chromatographie

Colonnes pour chromatographieen mode HILICMerck p.6

Transfert de méthodes en CCMCamag p.11

Surveillez vos niveauxScat Europe p.13

Logiciel de pilotage pour HPLCHitachi p.14

Filtration sans seringues...Whatman p.17

Filtration et dégazageen une seule étapePall Life Science p.19

vwr.com

Page 2: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 20092

RédactionVWR International Europe bvbaHaasrode Research Park Zone 3Geldenaaksebaan 4643001 LeuvenBelgique

Rédaction publicitaireVWR International Europe bvba

Mise en page et compositionMarketing Services VWR

ImpressionStork, Bruchsal, Allemagne

Aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ou copiée sans l’autorisation écrite préalable de VWR International Europe.

Tirage68 000 exemplairesDate de publication : mars 2009

En raison des volumes de vente importants des articles en promotion, il est possible que nous soyons momentanément en rupture de stock. Les conditions de vente de VWR sont d’application.

Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote et Pline à nos jours . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3

Colonnes ZIC®-HILIC pour la chromatographie simple de composés polaires et hydrophiles . . . . . . . . . . . . . . . . 6

Colonnes HPLC Chromolith® “Exceptionnelles dans toutes les circonstances – notre gamme au

service de votre réussite” . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8

Une nouvelle gamme de capillaires en silice monolithique pour la micro et la nano-LC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9

Transfert de méthode CCM/HPTLC vers l’HPLC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

CAMAG système Vario-HPTLC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

Dégazeur Teflon AF VWR modèles 2003 - 2005 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Contrôle des niveaux enfin disponible pour tous les laboratoires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13

Systèmes HPLC VWR Hitachi pilotés par différents logiciels pour chromatographie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

Préparation trois fois plus rapide d’échantillons HPLC / UHPLC grâce aux dispositifs

de filtration sans seringue Whatman Mini-UniPrep . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17

Appareil SolVac Pall Life Sciences . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

Chers chromatographistes,

Par notre nouveau visuel « Chrom for You », nous attirons votre

attention sur le fait que :

Ne nous limitant pas à être un fournisseur généraliste pour le

laboratoire, nous vous proposons une large gamme de consommables

dédiés à la chromatographie, et des solutions techniques en adéquation

avec vos attentes.

Sous ce nouveau logo nous associons toute notre expertise en terme de

produits, instruments, applications, logiciels, et services.

Nous sommes particulièrement fier d’ajouter à notre activité de

chromatographie liquide, les systèmes GC/GC-MS de la société

Perkin-Elmer

Cette nouvelle édition du ChromJournal présentant de nouveaux

produits et applications est l’exemple même de notre polyvalence pour

une offre globale en chromatographie.

Wolf-Dieter Beinert

Sommaire

Editorial

All you need for Chromatography

Une offre globale par un fournisseur unique.

Intégrer nos solutions chromatographiques !

• Colonnes et sorbants pour HPLC et GC

• Chromatographie gazeuse instrumentale et consommables

• Applications, support et formations

• Logiciel d’acquisition et de pilotage

• Chromatographie sur couche mince

• Solvants et bouchons de sécurité

• Chromatographie liquide analytique,

préparative et flash chromatographie

• Flacons pour passeurs d’échantillons

• Analyseurs d’acides aminés

• Préparation d’échantillons

• Logiciels additionnels

• Service après-vente

• Couplage LC-MS

Pour plus d’informations,

prenez contact avec

votre interlocuteur local

ou connectez-vous sur

www.vwr.com

VWR international vous fournit des solutions et une aide

pour toutes vos activités chromatographiques dans

vos travaux quotidiens.

Page 3: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 3

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.comGénéral

Histoire de la chromatographie- De Moïse, Aristote et Pline à nos jours

Exposé d'Anton Janßen, de l'Université des sciences appliquées de Munster, en Allemagne,

invité à la commémoration du 25e Symposium de chromatographie – ChromForum – à Steinfurt, Allemagne, le 9 septembre 2008.

La référence la plus ancienne à l'effet des matériaux poreux de grande surface se trouve dans la Bible : Exode (env. 1225

avant J-C), chapitre 15, versets 22 – 25 : "Les Israélites, conduits par Moïse, quittèrent la mer des Roseaux et se dirigèrent vers le désert de Chour. Ils marchèrent trois jours dans le désert sans trouver d'eau. Lorsqu'ils arrivèrent à Mara, ils ne purent pas y boire l'eau qui s'y trouvait, car elle était amère. De là vient le nom de Mara, qui signifie "Amertume". La foule se mit à protester contre Moïse et à dire "Qu'allons-nous boire ?". Moïse implora le Seigneur, qui lui montra un morceau de bois. Moïse le jeta dans l'eau et l'eau devint buvable."

Mara, où cet événement s'est apparemment passé, se traduit par "source amère" ou "puits amer" (de l'hébreu mara = amer). Nous savons aujourd'hui que l'amertume de l'eau était due à la présence de substances amères telles que l'epsomite (sulfate de magnésium, MgSO4· 7H2O).

Vers 330 avant J-C, Aristote (384 – 322 avant J-C) recommandait de filtrer l'eau de mer à l'aide de certains types de terre afin de la rendre potable (oeuvres 7, 933 b). Ces événements extraordinaires furent toutefois identifiés au milieu du XIXe sièclecomme des processus d'échange ionique. Ils firent alors l'objet d'études scientifiques.

La découverte des échangeurs d'ions peut être attribuée aux Anglais H.S. Thompson (agriculteur), J. Spence (pharmacien) et J.T. Way (agrochimiste) vers 1850 : H.S. Thompson constata que l'engrais pouvait être dépourvu de son ammoniac. Il demanda alors à J. Spence d'étudier le comportement des sels d'ammonium hydrosolubles dans la terre. Spence remplit une colonne de verre d'argile sableuse mélangée à du sulfate d'ammonium ((NH4)2SO4), qu'il tenta d'éliminer en versant de l'eau dans la colonne, de haut en bas. L'éluat ne contenait toutefois aucune trace détectable de sulfate d'ammonium. A sa grande surprise, il y trouva toutefois du gypse (CaSO4· 2H2O). Cette expérience fut très clairement la première description d'un processus d'échange ionique, bien que ni Thompson ni Spence n'aient pu expliquer le mécanisme de réaction. Peu après, J. T. Way fut à même de démontrer que la réaction impliquait bel et bien un échange ionique.

Terre2- Ca2+ + 2 NH4+ --> Terre2- 2 NH4

++ Ca2+

Il ne savait néanmoins toujours pas quelle partie de l'échantillon de terre en était responsable [H. S. Thompson et J. Roy ; Agr. Soc. Eng. 11, 68 (1850) et J. T. Way et J. Roy ; Agr. Soc. Eng. 11, 313 (1850) et 13, 123 (1852)].

En 1858, les scientifiques allemands H. Eichhorn, W. Henneberg et F. Stohmann découvrirent que certains minéraux argileux, la zéolite et l'humus étaient à l'origine du processus d'échange ionique. Ils purent démontrer l'échange d'ions Ca2+ avec des ions 2 Na+. Cela était particulièrement clair dans le cas de la chabazite (zéolite) étudiée par J. Lemberg et définie comme une réaction d'échange ionique totale selon : 2 Na[AlSi206)

+ + + Ca2+ -->Ca[AlSi206) + + 2 Na+

[Z. dtsch. Geol. Ges. 22, 355 (1870) u. 28, 519 (1876)].Cette expérience explique également l'effet du bois jeté dans l'eau amère par Moïse : la cellulose contenue dans le bois fut oxydée, formant, parmi d'autres substances, de l'acide polygalacturonique : les groupes COOH formés réagirent comme des échangeurs cationiques faiblement acides.

Sur base de ces connaissances, l'on a tenté d'utiliser les échangeurs ioniques naturels à bon escient. En 1896, des zéolites naturels étaient utilisés pour la première fois dans l'industrie sucrière pour remplacer les ions Na+ et K+ par des ions Ca2+ et Mg2+, respectivement, dans le sirop.A ce jour, une grande variété d'échangeurs ioniques ont été développés, en particulier sur base de résines synthétiques. Les domaines d'application correspondants sont également vastes, par ex. :

Production d'eau déminéralisée, généralement • désignée comme désioniséePurification de sirops• Protection des lave-vaisselle contre les ions Ca• 2+

et Mg2+ à l'origine de la calcificationRéduction de la teneur en carbonate de calcium • de l'eau dans les détergents afin de prévenir la formation de savon de chauxSéparation de métaux terreux rares ; cela a • permis d'identifier et d'isoler le prométhéum et plusieurs éléments transuraniensPhases stationnaires de la chromatographie • d'échange ionique qui ont révolutionné l'analyse des anions en particulier

La condition préalable à la chromatographie, en général, est la présence de solides poreux à la surface très grande et de nombreux "centres" possédant un degré élevé d'affinité avec des molécules et ions (fig. 1). Lorsque l'on considère les quatre principaux types de chromatographie (analyse d'échange total, analyse frontale, analyse de déplacement et analyse d'élution), ils ont tous un point commun : la porosité du matériau et son effet capillaire (analyse capillaire).

Fig. 1 : l’existence de solides poreux présentant une très grande surface spécifique constitue une condition préalable essentielle à la chromatographie.

Page 4: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 20094

Général

Vers 50 après J-C, G. P. Plinius Secundus (Pline le Jeune) utilisait la porosité et l'effet capillaire d'une substance (analyse capillaire) et fut le premier à décrire cette réaction. Il détecta le sulfate de fer (II) à l'aide d'un papyrus imprégné d'extrait de noix de galle (Naturalis historiae). Cette réaction vieille de plus de 2000 ans forme toujours la base des encres ferro-galliques en raison de la résistance de la couleur. Elles étaient fabriquées à base de sulfate de fer (II) (vitriol) et d'extraits aqueux de noix de galle. Le pigment proprement dit est constitué de fer et d'acide gallique.

Acide galliqueLe pigment de l'encre n'apparaissant que lorsque le Fe2+ est oxydé en Fe3+ par l'oxygène de l'atmosphère

pendant le séchage de l'encre, un autre pigment doit être ajouté. Cet additif rend l'encre visible au moment de l'écriture. A l'origine, l'on utilisait de la suie, qui avait toutefois tendance à obstruer la plume. En 1856, A. Leonhardt remplaça la suie par de l'acide sulfonique indigo. Il inventa ainsi la première encre ferro-gallique stable, utilisable dans des plumes à réservoir.

Friedlieb Ferdinand Runge (1794-1867) créa ainsi une méthode unique de dessin, sans peinture ni pinceau. Pour ce faire, il utilisait un papier spécial, au centre duquel il ajoutait des gouttes de différentes solutions chimiques. Il laissait alors le dessin se former. Il publia ses oeuvres dans deux livres : 1. Zur Farben-Chemie. Musterbilder für Freunde des Schönen. Berlin 1850 ("La chimie des couleurs" – Des images pour les amoureux de l'art)2. Der Bildungstrieb der Stoffe. Veranschaulicht in selbstständig gewachsenen Bildern. Oranienburg 1855 ("Structure interne des matériaux" – illustré par des dessins spontanés) (Fig.2). Une nouvelle édition contenant les résultats de leurs propres expériences fut publiée par G. Harsch et H. H. Bussemas, Cologne 1985, sous le titre "Bilder, die sich selber malen" ("Les dessins qui se peignent d'eux-mêmes").

Hugo Schiff (1834 – 1915) fut le premier à utiliser une réaction sur papier filtre pour l'identification chimique d'une substance. Il ajouta ainsi quelques gouttes d'un échantillon d'urine sur un papier filtre imprégné de carbonate d'argent. Une tache brune (argent élémentaire) indiqua la présence d'acide urique.

Christian Friedrich Schönbein (1799 – 1868) décrivit en détail ce type de réaction par tache en 1861 en utilisant du papier filtre comme milieu réactif. Il démontra comment l'eau formait un front, qui avançait juste devant les substances dissoutes (fig. 3). Il prouva également que différentes substances migrent à différentes hauteurs si elles sont appliquées sur papier filtre sous forme de solutions aqueuses (analyse frontale).

Par la suite, son élève, Friedrich Goppelsröder(1837 – 1919) mena des études approfondies sur l'effet capillaire de solutions chimiques sur papier filtre. [Mitteilungen der naturforschenden Gesellschaft (Communications de la Société de recherche naturelle) de Bâle, III. partie, II., 268 – 275 (1861)]. Il découvrit ainsi que le papier filtre imprégné d'une solution alcoolique de morine constituait un réactif de détection très sensible à l'aluminium.

Des réactions sur papier filtre pour divers anions et cations furent alors développées par Fritz Feigl (1891 – 1971) dès 1918. Ces tests consistaient à placer une goutte d'échantillon sur un papier imprégné de réactif ou à déposer des gouttes d'échantillon et de réactif ensemble. La détection avait alors lieu lors de la fusion des gouttes.

Pour en revenir à la chromatographie, comment la chromatographie par élution a-t-elle vu le jour ?

Dans ce domaine, le nom de Michail Semjonowitsch Tswett (1872 – 1919) est pratiquement toujours mentionné. Il fut le premier à publier un article sur la séparation des pigments végétaux en 1903. Il décrivit également les phénomènes d'adsorption, utilisables pour les séparations chromatographiques, avant de les présenter le 21 mars 1903 à la section Biologie de la Société de recherche naturelle de Varsovie. Il nomma cette méthode de séparation des pigments dans une solution la "chromatographie", du grec chroma = couleur et graphein = écrire. Etrangement, le mot russe "Tswett" signifie également "couleur" [Berichte der Deutschen Botanischen Gesellschaft (Rapports de la Société botanique allemande) 1906, 24, 316-323, et 384].

Toutefois, tant le terme "chromatographie" que la description de la méthode d'élution sont plus anciens : le mot "chromatographie" a ainsi été utilisé en Grande-Bretagne dès le XVIIIe siècle pour "The Science of Color". En 1836, Georg Field rédigea un article sur les colorants et pigments intitulé "Chromatographie", dans lequel il utilisait le terme dans son sens le plus strict [Verlag des Landes-Industrie-Comptoirs, Weimar 1836]. En 1893, L. Reedfut le premier à utiliser des colonnes pour séparer des substances [Proc. Chem. Soc. 9, 123 (1893)].

En 1897, D. T. Day sépara du pétrole en fractions de différents points d'ébullition en le filtrant à travers de la terre à foulon (silicate d'aluminium et de magnésium). Jusqu'alors cette substance n'avait été utilisée que pour clarifier des produits pétroliers [Amer. Phil. Soc. 36, 112 (1897), Industrial and Technical Petroleum Revue 3 (annexe à l'édition du 25. 08. 1900, p. 9), C. Engler u. E. Albrecht, Z. angew. Chemie 14, 889 – 891 (1901)].

Fig. 2 : en 1855, Friedlieb Ferdinand Runge publia “Der Bildungstrieb der Stoffe” (“Structure interne des matériaux”)

Fig. 3 : représente la progression de l’eau lorsque le papier test de pH est immergé dans une solution aqueuse acide.

Fig. 4 : en 1903, Michail Semjonowitsch Tswett publie la première séparation de pigments végétaux

Page 5: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 5

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.comGénéral

En 1904, la société MERCK, Darmstadt, à la suggestion de Hans Wislicenus, introduisit un oxyde d'aluminium pour des analyses d'adsorption lors de la 7e Conférence internationale des chimistes du cuir de Turin, le 18 - 23. septembre. Il s'agissait de la première phase stationnaire pour chromatographie sur colonne produite industriellement. En 1954, Merck avait introduit 23 sorbants supplémentaires. En 1931, R. Kuhn, A. Winterstein et E. Ledererdéveloppèrent une chromatographie sur colonne pour applications préparatives basée sur les expériences de Tswett [un bref article original dans "Naturwissenschaften" ("Sciences naturelles"), 17 février 1931 ; Hoppe Seylers Zeitschrift für die physiologische Chemie ("Revue Hoppe Seylers de chimie physiologique"), 197, 147 (1931)].En 1934, "l'oxyde d'aluminium normalisé selon Brockmann" fut le résultat d'une coopération entre Merck et Hans Brockmann. En 1938, N. A. Izmailov et M. S. Shraiberprogetèrent de l'oxyde d'aluminium sur des plaques de verre et séparèrent différentes substances sur ces couches : les premières tentatives de chromatographie d'adsorption sur couche mince [Farmatsiya 3, 1 (1938)].En 1941, A. J. P. Martin et R. L. M. Syngeséparèrent les acides aminés de mélanges de protéines par chromatographie de distribution sur du gel de silice contenant une certaine quantité d'eau [Biochemical Journal 35, 1358 (1941)].En 1944, R. Consden, A. H. Gordon et A. J. P. Martin remplacèrent le "support" en gel de silice par des bandelettes de papier, créant ainsi la chromatographie de distribution sur papier [Biochemical Journal 38, 224 – 232 (1944)].En 1952, A. T. James et A. J. P. Martin réalisèrent une expérience de chromatographie gaz-liquide [Biochemical Journal 50, 679 (1952)].En 1958, E. Stahl, en normalisant la chromatographie sur couche mince, contribua à son adoption comme méthode analytique [Chemiker-Ztg. 82, 323 (1958)]. MERCK, Darmstadt, présenta ensuite pour la première fois la chromatographie sur couche mince lors de l'exposition ACHEMA de Francfort.En 1963, J. C. Giddings utilisa du gel de silice d'une petite taille de particule calibrée en association avec la chromatographie sur colonne. Il put ainsi obtenir une résolution élevée et donc la vitesse analytique désirée. Ce fut la naissance de la chromatographie HPLC [Anal. Chem. 35, 2215 (1963)].En 1966, MERCK, Darmstadt, fut la première entreprise à produire des plaques CCM prêtes à l'emploi. Vers 1970, F. Geiss publia des données de base sur l'activité des adsorbants dans la CCM [F. Geiss, Die Parameter der Dünnschichtchromatographie ("Paramètres de la chromatographie sur couche mince") ; Friedr. Vieweg & Sohn, Braunschweig 1972]. Dans le même temps, la société CAMAG,

Muttenz, Suisse, lança la chambre Vario KS, qui permettait d'effectuer la CCM dans une atmosphère définie, par exemple en terme d'humidité relative. Elle permettait également d'effectuer des analyses à différentes humidités relatives au cours de la séparation (analyses de gradients). A partir de 1971, l'importance de la HPLC commença à croître : en 1970, le chromatographe liquide analytique ALC 100 de Waters fut le premier appareil à associer LC et GPC en association avec le réfractomètre différentiel R 401 de Waters.En 1972, les phases stationnaires chimiquement modifiées (phase inverse : RP), par ex. RP 18, RP 8, furent introduites.En 1973, les particules sphériques - LiChrospher Merck – améliorèrent les performances de la HPLC.En mars 1984, Merck et Hitachi conclurent un partenariat officiel. Par la suite, MERCK commercialisa le premier appareil HPLC modulaire Merck-Hitachi, la série 655A. Il associait une pompe très solide, un détecteur d'UV et un appareil de traitement de données. En septembre de la même année, en coopération avec le département de génie chimique de l'Université des sciences appliquées de Munster, en Allemagne, le premier atelier HPLC fut organisé en coopération avec Merck. En 1993, les particules sphériques de gel de silice hautement purifié (Purospher de Merck) permirent d'améliorer les performances de séparation et la reproductibilité. Dès 2000, les gels de silice monolithique (colonnes Chromolith de Merck) réduisirent considérablement le temps d'analyse.En 1999, Merck KGaA fonda VWR Internationalen tant que filiale. En 2004, VWR, grand fournisseur international de produits de laboratoire, redevint indépendant. VWR est l'organisation de vente de tous les produits de laboratoire de Merck en Europe occidentale. En 2004, VWR entama une coopération avec Bruker Daltonik dans le domaine de la LC-MS.En 2008, Perkin Elmer et VWR commencèrent à coopérer en vue de la commercialisation d'appareils de GC. Egalement en 2008, le lancement du système LaChrom Ultra pour la chromatographie liquide ultra-rapide fut la dernière innovation de VWR-Hitachi dans le domaine de la chromatographie.

Fig. 5 : après avoir réussi la séparation de la chlorophylle, Tswett appela sa méthode de séparation la “chromatographie”

Fig. 6 : en 1966, MERCK, Darmstadt, fut la première entreprise à produire des plaques CCM prêtes à l’emploi

Fig.7 : en 1984, Merck a présenté la gamme d’instruments HPLC modulaires Merck-Hitachi, série 655A

Fig. 8 : en 1993, les particules sphériques de gel de silice hautement purifié (Purospher de Merck) ont amélioré les performances de séparation et la reproductibilité

Page 6: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 20096

HPLC analytique

Colonnes ZIC®-HILIC pour une chromatographie simple des composés polaires et hydrophiles

Tobias Jonsson, Patrik Appelblad, Wen Jiang, Camilla Viklund, Merck SeQuant AB, Box 7956, 90719 Umeå, Suède

Chromatographie simple

Qui se ressemble se dissout. Il s’agit du principe fondamental de la rétention en chromatographie de partage HPLC. C’est également la raison pour laquelle la chromatographie liquide en phase inverse éprouve tant de difficultés à conserver et séparer les composés polaires et hydrophiles. Il existe tout simplement une incompatibilité fondamentale. Par le passé, toutes les tentatives d’adaptation des séparations en phase inverse utilisant la dérivatisation, des réactifs de paires d’ions ou des phases polaires intégrées ont rencontré des obstacles tels que des rendements variables, une faible compatibilité avec la spectrométrie de masse, une faible stabilité de la colonne, voire une désactivation de la phase stationnaire.

Fig. 1 : illustration schématique des processus de chromatographie de partage hydrophile et d’interactions électrostatiques faibles responsables de la rétention sur les colonnes zwittérioniques SeQuant™ ZIC®-HILIC et ZIC®-pHILIC.

Par contre, la HILIC (chromatographie liquide d’interaction hydrophile) résout le problème de la séparation des molécules polaires et hydrophiles de manière directe. Les colonnes HILIC comportent une phase stationnaire hydrophile, tandis que la phase mobile est plus hydrophobe, bien que miscible avec l’eau. Les colonnes SeQuant™ ZIC®-HILIC hautes performances de Merck comportent une fonctionnalité zwittérionique greffée et sont conçues pour une séparation HILIC efficace de tous les types de composés polaires et hydrophiles dans de nombreuses conditions de phase mobile (voir Figure 1). L’ordre d’élution des composés avec la colonne ZIC®-HILIC est donc généralement opposé à celui de la phase inverse et l’éluant courant contient de l’acétonitrile et un tampon aqueux (le solvant le plus éluant dans la HILIC).

Toutes les classes de composés polaires et hydrophiles

Il existe de nombreux exemples d’analyses de routine réussies intégrant les séparations ZIC®-HILIC et, la grande reproductibilité, la robustesse de la colonne ZIC®-HILIC en font l’outil parfait pour de nombreux champs d’application, notamment la recherche pharmaceutique, la chimie clinique, les analyses protéomiques, environnementales et agro-alimentaires. Avec la colonne ZIC®-HILIC, la séparation de composés polaires et hydrophiles est simple et sa sélectivité zwittérionique est idéale pour une vaste gamme de molécules contenant des groupes fonctionnels hydrophiles ou ionisables. Cela inclut les composés tels que les hydrates de carbone, les métabolites, les acides et les bases, les ions organiques et inorganiques, les complexes métalliques, les acides aminés, les peptides, les protéines dégradées, les extraits de plantes et de cellules, etc. Ces composés sont généralement caractérisés par une valeur LogP faible ou négative (coefficient de partage octanol-eau) et ont une faible rétention sur les colonnes en phase inverse.

Par exemple, les bases ADN et ARN (purines et pyrimidines) peuvent-elles être séparées sans difficultés avec ZIC®.-HILIC ? Voir Figure 2. Les bases plus hydrophiles ont un niveau de rétention plus élevé que les bases moins hydrophiles. La rétention est plus élevée pour les bases comportant des groupes d’acides aminés primaires, alors qu’elle est moins élevée pour les bases comprenant un groupe de méthyle.

La “drogue du viol”, le GHB (gamma-hydroxybutyrate)) est une autre substance efficacement retenue sur colonne ZIC®-HILIC, voir Figure 3. Cet exemple montre également l’influence sur la rétention d’une augmentation du taux d’acétonitrile dans l’éluant. Plus une phase mobile est organique, plus la rétention sera importante.

Avec la colonne ZIC®-HILIC, il est possible de réaliser des séparations rapides avec des colonnes courtes à des pressions nettement plus faibles qu’avec la phase inverse, grâce à la faible viscosité des éluants riches en acétonitrile, voir Figure 4. La volatilité de ces éluants favorise également la sensibilité lorsqu’ils sont associés à un détecteur à diffusion de lumière (cf. Figure 4) ou

Page 7: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 7

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

la spectrométrie de masse (cf. Figure 3), alors qu’avec un détecteur UV (cf. Figure 2), la sensibilité est plutot comparable à celle de la phase inverse.

Les séparations en mode gradient sont également simples avec les colonnes ZIC®-HILIC, bien que les formes de gradient soient généralement plus modérées et ne doivent pas passer d’un solvant totalement organique à un solvant totalement aqueux, (cf. figure 5). La colonne ZIC®-pHILIC basée sur des polymères comporte la même phase stationnaire que la colonne ZIC®-HILIC basée sur de la silice, mais étend la plage d’utilisation au pH basique. Cela permet de mieux définir la sélectivité pour les séparations difficiles (bien que cela implique une concession à la perte de charge), (cf. figure 5).

ConclusionsPosséder une colonne ZIC®-HILIC est clairement un avantage pour tous les chromatographistes pour différentes sélectivités de séparation. En outre, l’association de phase inverse et de HILIC (en ligne avec deux colonnes ou hors ligne en extraction liquide-solide) permet de réaliser les séparations bi-dimensionnelles. Avec une colonne ZIC®-HILIC, il est donc plus facile pour les analystes de respecter les exigences de réduction du temps d’analyse des échantillons, c’est-à-dire de gagner plus en dépensant moins.

Pour plus d’informations sur les colonnes ZIC HILIC, consultez le site www.mercksequant.com et découvrez la gamme complète des colonnes HPLC de Merck sur www.chromatography.merck.de

Fig. 2 : séparation isocratique de thymine, uracile, adénine, guanine et cytosine à l’aide d’une colonne ZIC®-HILIC (150x2,1 mm, 5 µm, 200 Å). Débit : 0,1 ml/min. Eluant : 80% d’acétonitrile et 20% de formiate d’ammonium 2,5 mM avec acide formique 25 mM. Détection : UV à 254 nm. Injection : 2 µl dans l’éluant.

Fig. 3 : rétention de gamma-hydroxybutyrate sur ZIC®-HILIC (50x2,1 mm, 3,5 µm, 200 Å). Eluant : % différents (70:30, 75:25 et 80:20, respectivement) d’acétonitrile/formiate d’ammonium 100 mM, pH 6,3. Débit : 0,2 ml/min. Détection : LC-ESI MS mode négatif, ion SIM : 103,2. Injection : 2 µl en phase mobile.

Fig. 4 : séparation isocratique de choline et d’inositol dans une boisson vitaminée à l’aide d’une colonne ZIC®-HILIC (20x2,1 mm, 3,5 µm, 100 Å). Débit : 0,5 ml/min. Eluant : 80% d’acétonitrile et 20% d’acétate d’ammonium 100 mM, pH 4,5. Détection : Sedex 85LT ELSD à 60 ºC, air comprimé 4,0 bars et Gain 11. Injection : 2 µl dans l’éluant. Perte de charge : 5,5 MPa (792 psi).

Fig. 5 : séparation en mode gradient de pantothénate (2), acétyl-CoA (3), AMP (4), CoA (7), ADP (6), ATP (7) sur une colonne ZIC®-pHILIC (150x2,1 mm, 5 µm). Débit : 100 µl/min. Eluants : ACN (A), 10 mM CO3(NH4)2 + 0,2% NH4OH (B). Gradient : 20-60 % B en 15 min, 5 min à 60% B, équilibrage en 15 min à 20 % B. Détection FTMS, mode ESI négatif, balayage 100-1 000 m/z. Injection : 1 µl (20 pmol) dans ACN/MeOH (80:20 v/v). Avec l’aimable autorisation de : T.Pluskal, K.Nagao et M.Yanagida, G0 Cell Unit, projet de recherche initial, Institut de science et de technologie d’Okinawa, Okinawa 904-2234, JAPON.

HPLC analytique

Page 8: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 20098

HPLC analytique

Colonnes HPLC Chromolith®

“Exceptionnelles dans toutes les circonstances – notre gamme au service de votre réussite”

Nouvelle brochure technique avec des informations à jour sur la gamme de colonnes HPLC monolithiques pour des applications capillaires, analytiques et préparatives.

Les produits récents décrits dans cette brochure comprennent notamment la colonne HPLC Chromolith®

FastGradient 50-2 mm, idéale pour les applications avec les instruments UHPLC modernes, tels que le LaChrom Ultra, ou avec les systèmes HPLC standard à faible volume mort, tels que le LaChrom Elite avec cellule UV semi-micro. Grâce à la faible perte de charge des colonnes Chromolith®, la séparation ultra rapide sur celles-ci ne crée pas de pressions très élevées !

Les nouvelles colonnes capillaires monolithiques d’un diamètre interne de 50 µm, 100 µm et 200 µm,

principalement utilisées pour les applications LC/MS, ainsi qu’en protéomique et en biosciences, sont décrites en détails dans la brochure:

Les nouvelles colonnes de garde pour colonnes Chromolith® de 3 mm de diamètre interne, qui seront disponibles début 2009, ne figurent pas dans cette brochure. Pour plus d’informations sur ces nouveaux produits, contactez votre bureau VWR local.

Pour plus d’informations, demandez un exemplaire de la nouvelle brochure Chromolith® (ZPRO-MERC0714-EN).

Page 9: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 9

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

Une nouvelle gamme de capillaires en silice monolithique pour micro et nano-LC :

Des outils parfaits pour la spectrométrie de masse.

Les colonnes capillaires monolithiques sont devenues de plus en plus importantes pour les séparations de biomolécules, notamment en association avec la spectrométrie de masse en ligne ou hors ligne. Comparées aux colonnes capillaires à particules, les colonnes capillaires monolithiques ne nécessitent pas de fritté et sont moins fréquemment obstruées. En outre, les colonnes monolithiques permettent des débits optimaux qui améliorent la vitesse et la qualité de la caractérisation des biomolécules par spectrométrie de masse.

Deux types de colonnes capillaires monolithiques sont désormais disponibles, les monolithes en silice et les monolithes en polymère. Alors que les derniers manquent souvent de capacité et de stabilité mécanique, les monolithes en silice sont parfaits à cet égard. Ils ne gonflent pas et ne se rétractent pas avec les solvants organiques, offrent des capacités étendues en raison de leur grande surface spécifique et sont bien plus faciles à utiliser grâce à leur faible perte de charge et à l'augmentation possible du débit de séparation.

Le besoin croissant d'outils efficaces pour la séparation de protéines et de peptides est comblé grâce à la gamme de nouveaux capillaires monolithiques en silice avec une grande diversité de diamètres internes (50 µm – 200 µm), de phases greffées (C8, C18), de structures de pores (produits "HR") et de longueurs (Trap).

Augmentation de la

sensibilité

Colonne : Chromolith® CapRod® RP18e 150 mm x 100 µm Débit = 3 µl/min Volume d’injection =5 µl Source micro-ESIGradient : 98 % à 60 % A en 35 minutesPhase mobile : A : 0,1 % d’acide formique dans 2 % d’acétonitrileB : 0,08 % d’acide formique dans 80 % d’acétonitrile

Colonne : Chromolith® CapRod® RP18e 150 mm x 50 µmDébit = 500 nl/min Volume d’injection = 1 µl Source nano-ESI

Les deux chromatogrammes de pic de base montrent une augmentation importante de la sensibilité lors de l’utilisation d’un capillaire de diamètre inférieur. Ce résultat est atteint aux dépens du volume d’échantillon qui peut être chargé dans une colonne.

Comparaison d’applications de deux capillaires différents montrant les données en LC-ESI-MS d’un mélange de peptides

Domaines d’utilisation préconisés de Chromolith® CapRod®

Capillaire silice monolithe, Chromolith® CapRod®

La coupe transversale montre une structure de pores bimodale du CapRod avec des macropores à env. 2 µm (1 µm pour les produits “HR”) et des mésopores à 13 nm. Le diamètre extérieur du capillaire est de 350 nm, les raccords et les ferrules sont livrés avec.

HPLC analytique

Colonne Longueur D.I. Code art. Chromolith® CapRod® RP-18 e 150 mm 0,05 mm 1.50403.0001 Chromolith® CapRod® RP-18 e 150 mm 0,1 mm 1.50402.0001 Chromolith® CapRod® RP-8 e 150 mm 0,1 mm 1.50400.0001 Chromolith® CapRod® RP-18e HR 150 mm 0,1 mm 1.50404.0001 Chromolith® CapRod® RP-18e 150 mm 0,2 mm 1.50405.0001 Chromolith® CapRod® RP-18e HR 150 mm 0,2 mm 1.50407.0001 Chromolith® CapRod® RP-18e Trap 50 mm 0,2 mm 1.50409.0001

Capillaire de 100 µm DI etsource micro-ESI

Capillaire de 50 µm DI etsource nano-ESI

Page 10: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 200910

C.C.M.

Fig. 2 : séparation d’un échantillon réel (pesticides dans la laitue) dans des conditions chromatographiques CCM et HPLC identiques

Transfert de méthode CCM/HPTLC vers l’ HPLC

Merck s’est spécialisé, en quelques décennies, dans la fabrication de matériaux normalisés pour chromatographie tel que le gel de

silice pour CCM pour chromatographie analytique et préparative et propose une vaste gamme de sorbants personnalisés.

Pour cette raison, des matières premières identiques sont disponibles pour les phases stationnaires pour CCM et HPLC, ce qui engendre une sélectivité équivalente pour les deux techniques (voir fig. 1)

La chromatographie sur couche mince (CCM), l’une des techniques de séparation les plus polyvalentes dans l’industrie pharmaceutique, agro-alimentaire et cosmétique, est également utilisée pour le développement rapide de méthodes en HPLC.

Les plaques HPTLC de Merck offrent une vitesse et une sensibilité élevées comparées aux plaques CCM classiques et offrent d’excellentes séparations. Avec des instruments, les plaques HPTLC permettent une chromatographie sur couche mince moderne et quantitative, aux performances comparables à celles de la HPLC (voir fig. 1 et 2).

Les séparations HPTLC et HPLC présentent les mêmes résultats de séparation, si les deux techniques sont utilisées dans des conditions chromatographiques similaires. p.ex.

des sorbants identiques • des phases mobiles identiques •

Préparation d’échantillons : extraction à l’acétone d’un broyat de laitue Conditions chromatographiques :a) plaque HPTLC : gel de silice HPTLC 60 RP-18 F254 (réf. 1.13724.0001)b) colonne : LiChroCART® LiChrospher® 100 RP-18 (réf. 1.50154.0001)Pour les deux méthodes, la phase mobile est : acétonitrile /eau 70/30

Principaux avantages de la CCM et de la HPTLC

l’analyse d’huile, de graisses, ou de bien • d’autres matrices complexes d’échantillons, devient possible sans préparation de l’échantillonpossibilité de traiter simultanément plusieurs • échantillons (40 max.) dans des conditions identiquesdes méthodes de séparation plus rapides et • moins coûteuses sont possibles sans avoir besoin d’instruments sophistiquésune séparation bidimensionnelle facile grâce • à deux phases mobiles distinctes dans des directions différentes pour une qualité de séparation unique

Fig. 1 : séparation CCM (gauche) et séparation HPLC correspondante (droite)

Séparation HPTLC et HPLC de pesticides dans la laitue (échantillon réel) sous conditions chromatographiques [Dinocap (1), parathion (2), iprodon (3), mathylparathion (4), métobromuron (5) et diméthoate (6)]

Page 11: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

11

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

CAMAG système Vario HPTLC - un outil rapide et pratique pour la mise au point de la phase mobile en vue de chromatographie sur colonne préparative

Lors du développement d’une séparation sur colonne préparative, la sélection de la phase mobile est un défi important, car la résistance aux solvants et la sélectivité doivent être déterminées. Alors que la première détermine le temps de séparation, la seconde affecte le degré de séparation. L’utilisation de solvants

purs est préférable mais des mélanges de solvants doivent fréquemment être utilisés pour obtenir une bonne séparation. La chromatographie sur couche mince (CCM) est une technique peu coûteuse, pratique et rapide, qui peut être utile lors du processus de sélection.

Pour obtenir de bon résultats de séparation lors de la chromatographie préparative, les différences de distance de migration sur CCM doivent être supérieures à 0,05 unités Rf. La chromatographie Flash est généralement utilisée lorsque les différences de distance de migration sur CCM sont supérieures à 0,15 unités Rf.

L’optimisation de la phase mobile est facilitée par le système CAMAG Vario HPTLC. Ce système permet de tester un échantillon en parallèle avec six phases mobiles différentes sur une plaque. En très peu de temps, la meilleure résistance aux solvants peut être sélectionnée sur la base des valeurs Rf des composés cibles. La sélectivité est jugée sur la base de la performance de séparation du composé cible par rapport aux autres composés de l’échantillon.

La chambre Vario offre deux modèles de configuration : le mode “sandwich” et le mode “cuve”. Le premier peut simuler la séparation dans une colonne sèche et le second, la séparation dans une colonne humide.

Les effets de l’activité de la phase stationnaire sur la séparation peuvent également être étudiés. Pour ces expériences, les bandes individuelles de la plaque peuvent être conditionnées avec des niveaux d’humidité différents.

Consommables pour

chromatographie

Page 12: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 200912

Consommables pour chromatographie

Dégazeur Teflon AF VWR Modèle 2003 - 2005

Le dégazage en ligne s’est révélé être plus efficace que la sonication ou le barbotage à l’hélium pour l’élimination des gaz dissous des phases mobiles.

Un appareil permet ainsi de dégazer cinq lignes de solvant simultanément. Le volume très faible de chaque canal Teflon®

AF (480 µl) assure un équilibrage très rapide et un temps de démarrage très court.

Le Teflon® AF est 50 fois plus perméable que l’ancien Teflon®

PTFELa nouvelle membrane en Teflon® AF présente des performances supérieures à celles des membranes plus anciennes en Teflon® PTFE utilisées actuellement dans de nombreux autres systèmes de dégazage. Il est ainsi possible d’utiliser des tubes plus courts pour l’élimination des gaz dissous.

AvantagesTemps d’équilibrage / de re-équilibrage nettement • plus courtTrès facile à amorcer• Temps de mise sous vide rapide, généralement • 3 minutesLe Teflon AF peut éliminer les bulles formées avant • la pompe par la cavitation et les bulles formées par les réservoirs d’éluant en hauteur posent moins de problèmes de fiabilité

Technologie de pompe à vide

La pompe à vide avec moteur pas à pas ZHCR® (Zero Hysteresis Constant Run), spécialement conçue et développée pour le dégazage par membrane de la phase mobile HPLC, constitue une nouveauté. L’utilisation d’une stratégie de contrôle du vide en boucle fermée haute précision permet à la pompe de maintenir un niveau de consigne du vide constant (50 mmHg) en faisant varier la vitesse du moteur pas à pas. La pompe fonctionne initialement à grande vitesse, ce qui assure une mise sous vide rapide et, à mesure qu’elle approche du point de contrôle du vide, elle ralentit progressivement jusqu’à l’obtention du niveau de vide désiré. Cette stratégie de contrôle brevetée permet au dégazeur en ligne de maintenir un vide pratiquement constant, quelle que soit la variation des charges de dégazage. En conséquence, les fluctuations de la valeur de base dues à l’hystérésis de vide sont éliminées car la pompe ne doit pas s’arrêter et redémarrer de manière répétée, comme c’est le cas pour les systèmes plus anciens.

Avantages Fonctionnement extrêmement silencieux• Longue durée de vie : 5 ans de fonctionnement • continuLa purge de la tête de pompe évite de devoir • purger la valveElimine les fluctuations de la valeur de base • dues à la pompe à videTemps de mise sous vide réduit, généralement • 3 minutesLe contrôle de vide en boucle fermée assure un • vide constant (vitesse variable)Fonctions avancées de vérification des fuites et • des erreurs

SpécificationNombre de canaux : 3, 4 ou 5Volume interne des canaux : 480 µlDébit max. : 10 ml/minCapacité de dégazage : ~ 2 ppm à 1 ml/minPièces internes : Peek, PTFE et Teflon AFDimensions : 127 mm (H) x 273 mm (l) x

249 mm (P)Alimentation : 15 à 24 V c.c., 0,85 A max.

(0,5 A typique)Poids : 2,7 kg

Page 13: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 13

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

Un contrôle des niveaux enfin fiable pour tous les laboratoires

Surveillance simple et sûre des niveaux de liquide dans le laboratoire.Les systèmes électroniques de contrôle des niveaux de SCAT Europe sont pratiques et faciles à installer, sans aucun outil ou autre équipement.

Les systèmes SCAT Europe sont spécialement conçus pour les applications de laboratoire et permettent un travail fiable sans interruption.

Contrôle des niveaux sans contact

Le contrôle des niveaux peut être effectué sans rentrer en contact avec les liquides, à l’aide d’un capteur positionné et fixé à l’extérieur du conteneur, au niveau de liquide approprié. Le niveau de liquide critique est indiqué par un signal sonore et un voyant lumineux sur le boîtier de contrôle. Les systèmes de surveillance conviennent à tous les conteneurs en verre et en plastique (matériau non-conducteur uniquement).

Contrôlez jusqu’à 15 niveaux de liquides en même temps grâce aux boîtiers de surveillance SCAT Europe. Si le niveau de liquide critique est atteint, vous pouvez agir sur le contrôle d’équipements auxiliaires (pompes, vannes, systèmes HPLC, etc.) grâce au relais contact intégré exempt de potentiel

Contrôle des niveaux pour flacons en matière électro-conductriceCe système possède un flotteur et un capteur électronique intégrés dans le bouchon de sécurité pour flacons de collecte SCAT Europe. Les niveaux critiques sont indiqués par le flotteur de niveau placé sur le

bouchon, ainsi que par un signal sonore et un voyant lumineux sur le boîtier de surveillance. Les bouchons de sécurité pour flacons de collecte SCAT Europe sont disponibles dans toutes les tailles courantes de filetage. Les filtres à charbon actif intégrés empêchent les émanations de vapeurs et de gaz dangereux. Un conteneur à déchet est également disponible en option.

Egalement disponible en version pour le contrôle d’épuisement des phases mobiles pour HPLC dans les flacons de prélèvement limitant le risque d’interrompre l’analyse en cours.

Consommables pour

chromatographie

Contrôle des niveaux sans contactCapteur avec boîtier de signaux, alimentation (110/230 V), câble de raccordement et éléments de montage

590-0682

Boîtier de signaux (1 canal), avec alimentation 590-0726Boîtier de signaux (5 canaux), avec alimentation 590-0731Boîtier de signaux (15 canaux), avec alimentation

590-0738

Rallonge pour la transmission des signaux, 3 m 590-0739Rallonge pour la transmission des signaux, 5 m 590-0727Rallonge pour la transmission des signaux, 10 m 590-0728Câble pour relais-contact, 5 m 590-0729Câble pour relais-contact, 10 m 590-0730Capteur de niveau, à l’unité 590-0737

Contrôle des niveaux pour flacons en matière électro-conductriceBouchon S 55, 3 voies capillaires1/8”OD 590-0766Bouchon S 55, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0767Bouchon S 60/61, 3 voies capillaires 1/8”OD 590-0777Bouchon S 60/61, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0779Boluchon S 65, 3 voies capillaires 1/8”OD 590-0768Bouchon S 65, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0769Bouchon S 70/71, 3 voies capillaires 1/8”OD 590-0781Bouchon S 70/71, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0783Bouchon B 83, 3 voies capillaires 1/8”OD 590-0770Bouchon B 83, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0771Bouchon S 90, 3 voies capillaires 1/8”OD 590-0773Bouchon S 90, 2 voies capillaires 1/8”OD et 1 connexion tube 6-8mm 590-0774

Page 14: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 200914

Logiciel de pilotage

Systèmes HPLC Hitachi pilotés par divers logiciels chromatographiques

Au cours des dernières années, les laboratoires ont investi beaucoup d’argent pour piloter l’ensemble de leur parc d’instrumentation HPLC

et GC, pour lancer des analyses, retraiter les données et générer des rapports automatiquement avec la même application en mode Stand Alone et en mode client serveur.

On se dirige vers une standardisation du logiciel dans les laboratoires.

Cela permet:

Une uniformisation des formats de données et donc • des formats de dossiers.Une Une réduction des coûts de formation• Une réduction des coûts de maintenance• Une amélioration des processus de travail au sein • du laboratoireUn partage des ressources..•

Des laboratoires du monde entier utilisent les systèmes LaChrom Ultra et LaChrom Elite de VWR Hitachi. De nombreux utilisateurs préfèrent les instruments LC LaChrom Ultra et LaChrom Elite de VWR Hitachi pour leur fonctionnement robuste et polyvalent.

Cette gamme d'instruments HPLC offre une précision et une sensibilité de pointe, ainsi qu'un transfert d'échantillon minimum.

Le logiciel EZChromElite permet de piloter plus de 300 types d’instruments différents..

VWR Hitachi LaChrom Ultra™ et LaChrom Elite®

sont désormais pilotables par toutes les principales plateformes logicielles chromatographiques, telles que

Agilent, EZChromElite• Waters Empower 2• Dionex Chromeleon•

Les drivers de pilotage des chaînes HPLC Hitachi LC et Lachrom ultra sont développées par les ingénieurs d’Hitachi en collaboration avec les différents fabricants respectant les normes qualités.

L'utilisateur est ainsi certain que toutes les fonctions des instruments sont incluses et que les ingénieurs de VWR Hitachi apporteront l'assistance nécessaire.

Aucun driver n’est développé en “reverse ingenering” ce qui garantit la fiabilité et la robustesse des instruments Hitachi.

Fig. 1 : paramétrage de la méthode sur l’appareillage LC VWR Hitachi dans le logiciel EZChrom Elite®

Page 15: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 15

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

Fig. 2 : paramétrage de la méthode sur l’appareillage LC VWR Hitachi dans le logiciel Empower 2

Fig. 3 : paramétrage de la méthode sur l’appareillage LC VWR Hitachi dans le logiciel Chromeleon

Fig. 4 : Panneau de contrôle de la chaine VWR Hitachi sous logiciel EZChrom Elite®

Stratégie de systèmes ouverts

Dans la section suivante, la combinaison d'un instrument LC VWR Hitachi avec le logiciel Agilent EZChrom Elite®, Waters Empower 2 et Dionex Chromeleon est utilisée pour montrer comment le logiciel est intégré au travail quotidien et comment les tâches habituelles telles que le paramétrage d'une méthode ou la surveillance du statut d'un instrument sont réalisées.

Maintenance

Très souvent, les fonctions de maintenance et de diagnostic ne sont pas intégrées au pilotage de l'instrument . VWR Hitachi utilise une application spéciale de maintenance pour réaliser ces tâches. Le logiciel Maintenance est un outil puissant qui réalise des diagnostics réguliers et fonctionne indépendamment du système de données chromatographiques.

Logiciel de pilotage

Page 16: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 200916

Logiciel de pilotage

Commande simple :

Le logiciel Instrument Control pour LaChrom Elite de VWR Hitachi permet de commander totalement les pompes, les injecteurs automatiques, les fours et les détecteurs.- Commande de pompes :Toutes les informations de gradient, le débit, les événements secondaires , la composition du gradient et le débit en fonction du temps.- Commande de fours :Réglage de la température et de la tolérance.- Commande de détecteurs :Les détecteurs peuvent être configurés dans le logiciel pour spécifier la longueur d'onde, les commandes d'autozéro et l'état de la lampe, avec un tableau pour

spécifier les longueurs d'ondes et d'autres paramètres désirés en fonction du temps

Respect des réglementations :

Tous les modules LaChrom Ultra et LaChrom Elite comprennent un journal de maintenance, qui consigne l'utilisation de pièces de rechange. Ils présentent également une fonction de diagnostic intégrée, qui permet de contrôler les conditions de fonctionnement du système.

EZChrom Elite est une marque d'Agilent Technologies Inc.Empower 2 est une marque de Waters CorporationChromeleon est une marque déposée de Dionex Corporation.

Fig. 6 : Panneau de contrôle de la chaine VWR Hitachi sous logiciel Chroméléon

Fig. 5 : Panneau de contrôle de la chaine VWR Hitachi sous logiciel Empower 2

Page 17: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 17

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

Préparation d’échantillon

Les dispositifs de filtration sans seringue Whatman Mini-UniPrep™ permettent d’éliminer rapidement et facilement

les particules des échantillons et offrent une confirmation visuelle de la filtration de tous les échantillons analysés.

Au lieu d’utiliser une seringue, un filtre pour seringue, un vial et un septum, utilisez simplement un Mini-UniPrep et réalisez la même manipulation en quelques secondes seulement.

En raison des exigences spécifiques liées à la préparation d’échantillons dans les applications chromatographiques, celle-ci peut prendre beaucoup de temps lors des activités quotidiennes en laboratoire. La protection des colonnes pour les applications HPLC est toujours conseillée et devient de plus en plus importante avec les nouveaux instruments Ultra HPLC.

L’avènement de colonnes à fines particules pour des résolutions maximales mais des pertes de charge élévées engendre une propreté de l’échantillon irréprochable.

Motivé par une volonté d’amélioration permanente et d’innovation, Whatman a tenu compte de ces nouvelles exigences et créé toute une gamme de filtres Mini-UniPrep.

Additionnez les économies de temps et d’argent pour votre laboratoire en évitant d’utiliser plusieurs consommables lors de la préparation des échantillons.

Avantages du Mini-UniPrep :

réduit le temps de préparation des • échantillons et améliore l’efficacitéréduit les coûts• réduit les déchets de laboratoire• protège les colonnes, dans la mesure où la • filtration se fait dans le vialpermet d’obtenir une confirmation visuelle • de la filtration de l’échantillonFlexible : conçu pour être adapté aux • passeurs d’échantillons compatibles avec les vials de 2 mlFlexible : disponible avec un large choix de • membranes

Préparez vos échantillons HPLC / UHPLC trois fois plus vite grâce aux dispositifs de filtration sans seringue Whatman Mini-UniPrep

Pour les clients utilisant des septa pré-percés, Whatman propose des Mini-UniPrep avec ce type de fermeture.Pour les clients qui souhaitent protéger les échantillons de la lumière, il existe des Mini-Uniprep ambrés.

Pour maximiser le rendement de la préparation d’échantillons, Whatman a développé le compresseur 6 positions. Il permet de traiter 6 Mini-UniPrep en même temps et de réduire le risque de fatigue manuelle.

SimplicitéPlacez l’échantillon non filtré dans le godet.

InnovationCompressez l’unité filtrante dans le godet à échantillons. Le filtrat propre remplit le vial.

CommoditéLa forme du Mini-UniPrep s’adapte parfaitement aux passeurs d’échantillons standards.

Une préparation 3 fois plus rapide

Page 18: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 200918

Préparation d’échantillon

La membrane filtre est placée au bas du vial, avec un bouchon/septum à l’autre bout. En appuyant sur l’unité filtrante lorsque l’échantillon est placé dans le godet, une pression positive force le filtrat à entrer dans le vial. L’air s’échappe par les orifices de ventilation jusqu’à ce que le cran de blocage soit atteint, ce qui assure une fermeture étanche à l’air. En quelques secondes, le Mini-UniPrep peut être placé dans votre passeur d’échantillons pour une injection ultérieure.

Le compresseur 6 positions vous rend la tâche encore plus facile

Contactez-nous [email protected] pour vérifier la disponibilité des vials ambrés ou des septa pré-percés.

Spécifications techniquesDimensions Equivalent en taille aux vials de

12 mm x 32 mmMatériaux de fabrication Boîtier et bouchon :

polypropylèneMilieu de filtration : tel que spécifiéSeptum : Silicone/PTFE

Capacité de filtration 0,4 mlForce nominale nécessaire pour la compression

Approximativement 8 psi (0,6 bar)

Température de fonctionnement maximale

120° F (50 °C)

Choisissez la bonne membrane de filtration Mini-UniPrepEchantillons Mini-UniPrep adaptésLiquides riches en particules Microfibres de verre

(GMF) Echantillons aqueux/organiques, de pH 3 à 10

Nylon (NYL)

Milieux de filtration généraux/échantillons à base de solvants

Polypropylène (PP)

Solutions chimiques corrosives Polytétrafluoroéthylène (PTFE)

Echantillons biologiques nécessitant des milieux à faible affinité pour les protéines

Polyéthersulfone (PES)

Solvants aqueux/organiques – milieux non spécifiques à faible affinité pour les protéines

Polyfluorure de vinylidène (PVDF)

Solvants aqueux/organiques – débit et capacité de chargement élevés

Polypropylène (dp PP)

Solvants aqueux/organiques – milieux non spécifiques à faible affinité pour les protéines

Cellulose régénérée (RC)

Page 19: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

Pour plus d’informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR, envoyez un e-mail à [email protected] ou visitez notre site web sur fr.vwr.com

VWR ChromJournal Numéro 6 Mars 2009 19

Préparation d’échantillon

Dispositif SolVac de Pall Life Sciences Simplifiez-vous la filtration et le dégazage de solvants des phases mobiles ou des autres mélanges

Le SolVac porte-filtre magnétique breveté de Pall Life Sciences est idéal pour la filtration et le dégazage de solvants et

des mélanges. Le SolVac offre une conception polyvalente qui s’adapte à la plupart des flacons, récipients pour HPLC et élimine les étapes de nettoyage des récipients et de transferts.

Le dispositif fermé fonctionne sous vide et aspire directement le contenu à filtrer, ce qui évite les renversements des solvants lors du remplissage des entonnoirs en verre des systèmes de filtration.

Fabriqué en polypropylène résistant aux produits chimiques, le SolVac est compatible avec tous les solvants HPLC courants tels que le méthanol, l’acétonitrile et le tétrahydrofurane.

Convivialité

L’étanchéité du SolVac est assurée grâce à une conception magnétique brevetée fiable, facile à utiliser. Ce mécanisme d’étanchéité unique élimine le glissement ou la déchirure des membranes pouvant survenir avec des clamps en aluminium ou des supports à visser.

Membranes disques Pall

Pall propose une gamme complète de membranes disques de 47 mm qui s’adaptent parfaitement au porte-filtre SolVac. Ces membranes sont certifiées HPLC pour offrir l’assurance que le matériau du filtre n’ajoutera pas d’artéfacts ou de substances extractibles à vos analyses.

Pall propose une gamme complète de membranes certifiées HPLC qui comprend les matériaux PTFE, PVDF et nylon.

Dans cette gamme complète de membranes disques, Pall propose aussi la membrane filtre GH Polypro (GHP) certifiée HPLC. La membrane GHP est une membrane en polypropylène hydrophile, polyvalente et universelle avec une résistance chimique optimale aux solutions corrosives, idéale pour la filtration des solvants aqueux et agressifs. La membrane GHP est le choix optimal pour la filtration des phases mobiles HPLC.

Pour plus d’informations sur la gamme complète des produits de préparation d’échantillons analytiques qu’offre Pall Life Sciences, consultez le site www.pall.com/lab.

Informations de commandeSolVac et membranes GHPCode art. Description Cdt de514-4001 Porte-filtre SolVac, avec un tuyau d’alimentation de 61 cm, un plongeur, un adaptateur de

raccord de vide, 2 joints pour membrane et 2 joints d’étanchéité1

514-4053 Membrane GHP, 47 mm, 0,2 µm 100514-4052 Membrane GHP, 47 mm, 0,45 µm 100

Page 20: ChromJournalfr.vwr-cmd.com/ex/downloads/magazine/chromjournal_6/VWR_Chro… · Général ou visitez notre site web sur fr.vwr.com Histoire de la chromatographie - De Moïse, Aristote

EM11/2008

Allemagne VWR International GmbHHilpertstrasse 20aD - 64295 DarmstadtTel.: 0180 570 20 00Fax: 0180 570 22 22E-mail: [email protected]*14 Cent/Minute aus d. dt. Festnetzggf. abweichende Mobilfunktarife

AutricheVWR International GmbHGraumanngasse 71150 WienTel.: 01 97 002 0Fax: 01 97 002 600E-mail: [email protected]

BelgiqueVWR International bvba/sprlHaasrode Researchpark Zone 3Geldenaaksebaan 4643001 LeuvenTel.: 016 385 011Fax: 016 385 385E-mail:[email protected]

DanemarkVWR - Bie & BerntsenTransformervej 82730 HerlevTel.: 43 86 87 88Fax: 43 86 87 90E-mail: [email protected]

EspagneVWR International Eurolab S.L.Ronda Can Fatjó, nº 11 Edifici Tecnopark, 3 Parc Tecnològic del Vallés 08290 Cerdanyola del Vallés (Barcelona)Tel.: 902 222 897Fax: 902 430 657E-mail: [email protected]

FinlandeVWR International OyPihatörmä 1 C 1, 02240 EspooTel.: 09 80 45 51Fax: 09 80 45 52 00E-mail: [email protected]

FranceVWR International S.A.S.Le Périgares – Bâtiment B201, rue Carnot94126 Fontenay-sous-Bois cedexTel.: 0 825 02 30 30 (0,15 EUR TTC/min)Fax: 0 825 02 30 35 (0,15 EUR TTC/min)E-mail: [email protected]

HongrieSpektrum-3D Ltd.A VWR International CompanySimon László u. 4.4034 DebrecenTel.: (52) 521-131Fax: (52) 470-069E-mail: [email protected]

IrlandeVWR International LtdOrion Business CampusNorthwest Business ParkBallycoolin, Dublin 15Tel.: 01 88 22 222Fax: 01 88 22 333E-mail [email protected]

Irlande du NordVWR International LtdA10 Harbour Court, 7 Heron RdSydenham Business ParkBelfast BT3 9HBTel.: 028 9058 5800Fax: 028 9080 7812Email: [email protected]

ItalieVWR International s.r.l.Via Stephenson 9420157 Milano (MI)Tel.: 02 332 03 11Fax: 800 152 999E-mail: [email protected]

Pays-BasVWR International B.V.Postbus 81981005 AD AmsterdamTel.: 020 4808 400Fax: 020 4808 480E-mail: [email protected]

PortugalVWR International - Material de Laboratório, LdaEdifício NeoparkAv. Tomás Ribeiro, 43- 3 D2790-221 CarnaxideTel.: 21 3600 770Fax: 21 3600 798/9E-mail: [email protected]

NorvègeVWR International ASKakkelovnskroken 1P.B. 45, Kalbakken, 0901 OsloTel.: 0 2290Fax: 815 00 940E-mail: [email protected]

Royaume-UniVWR International LtdCustomer Service CentreHunter Boulevard, Magna ParkLutterworth, LeicestershireLE17 4XNTel.: 0800 22 33 44Fax: 01455 55 85 86E-mail: [email protected]

SuèdeVWR International ABFagerstagatan 18a163 94 StockholmTel.: 08 621 34 00Fax: 08 621 34 66E-mail: [email protected]

SuisseVWR International AGLerzenstrasse 16/18, 8953 DietikonTel.: 044 745 13 13Fax: 044 745 13 10E-mail: [email protected]

Votre Partenaire de Distribution Européen

Rendez vous sur www.vwr.com: vous y trouverez les dernières nouveautés et offres spéciales et les coordonnées de votre partenaire VWR.

Plus de 100 ans d’excellence –

Produits chimiques BDH Prolabo2009 est une année “trés particulière” pour notre marque BDH Prolabo – la marque BDH fêtera ses 100 ans ce mois-ci et Prolabo a désormais plus de 106 ans ! Nous sommes fiers d’affirmer que les valeurs clés initiales de ces marques de qualité sont toujours d’actualité dans cette gamme – qualité, fiabilité, reproductibilité et performances excellentes.

VWR met tout en œuvre pour améliorer la qualité, les performances et la compétitivité des prix de tous les produits et nos produits chimiques ne font pas exception à la règle. Nous avons été très fiers de fusionner ces deux marques exceptionnelles en 2007, afin d’associer la qualité optimale et la compétitivité des produits BDH et Prolabo existants tout en conservant nos grades renommés tels que HiPerSolv CHROMANORM pour les chromatographistes, avec leur fiabilité et leurs performances élevées garanties.

Tout au long de l’année, profitez des promotions spéciales que nous proposerons pour célébrer cet événement exceptionnel.

N’oubliez pas... grâce à ses droits de distribution exclusifs sur les produits chimiques de laboratoire BDH Prolabo et Merck, VWR aura toujours le réactif adapté à tous vos besoins.