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Recherche en pneumologie 675
b Service de pneumologie, institut du thorax, CHU de Nantes,Nantes, France∗ Auteur correspondant.
Adresse e-mail : [email protected] (M. Pain)
Mots clés : Infection ; InflammationContexte.— La principale complication à long terme de la trans-plantation pulmonaire est l’apparition d’un rejet chronique, appelébronchiolite oblitérante (BO). Cette dernière est caractérisée parla destruction de l’épithélium suivi d’un phénomène de fibrose.Le processus par lequel ces cellules épithéliales bronchiques (CEB)sont remplacées par des fibroblastes est mal décrit. Cependant derécentes études suggèrent que ces cellules épithéliales acquièrentun phénotype fibroblastique par le processus de transition épithélio-mésenchymateuse (TEM). L’hypothèse est que ce phénomène estimpliqué dans le développement de la BO et joue un rôle très impor-tant dans le remodelage de l’épithélium bronchique. Le but de notreétude est de déterminer le rôle des lymphocytes T (LT) activés dansle processus de la TEM.Méthodes.— Nous avons mis en place un modèle d’épithélium bron-chique en interface air liquide à partir de CEB primaires issuesde transplantations pulmonaires. Cet épithélium est cultivé avecdes monocytes et/ou les LT activés en présence de TGF� pendant5 jours. Les protéines épithéliales (E-cadhérine, Zonula-Occludens1) et mésenchymateuses (Fibronectine, métalloprotéinases 9) sontétudiées par western blot, immunofluorescence et Q-PCR ; lesmédiateurs sont dosés dans le surnageant par Luminex.Résultats.— Les résultats préliminaires montrent que la co-culturede cellules épithéliales avec des LT activés en présence de TGF�
diminue l’expression de l’E-cadhérine (n = 4, p < 0,05) et de la ZO-1(n = 4, p < 0,05) et induit une augmentation d’expression de MMP9(n = 4, p < 0,05) et de fibronectine (n = 4, p < 0,01). De plus, nousavons mis en évidence dans les surnageants de ces co-cultures, laprésence de chimiokines telles que l’IP-10, MCP-1 et l’IL-8.Conclusion.— Cette étude démontre l’implication de LT activésdans l’induction de la TEM, en potentialisant l’effet du TGF�. Deplus les chimiokines identifiés dans les surnageants sont retrou-vées de facon augmentée dans LBA de patients porteurs de BO.Les perspectives sont de déterminer les voies de transduction parlesquelles les lymphocytes T activés potentialisent l’induction de laTEM. À terme ce modèle permettra d’étudier la BO, l’identificationde biomarqueurs, le test de traitements et l’identification demarqueurs d’autres maladies avec fibrose bronchique (asthme etBPCO).
http://dx.doi.org/10.1016/j.rmr.2014.04.071
72Le FGF9 est exprimé dans le poumonau cours de la fibrose pulmonaireidiopathique et module l’activationdes fibroblastes pulmonairesA. Joannes a,∗, J. Marchal-Somme a, B. Crestani a,b,A.-A. Mailleux a
a Inserm U700, UFR de médecine Xavier-Bichat, Paris, Franceb Service de pneumologie, hôpital Bichat, Paris, France∗ Auteur correspondant.
Adresse e-mail : [email protected] (A. Joannes)
Mots clés : Infection ; InflammationIntroduction.— La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est unemaladie rare avec une survie médiane de 3 ans après le diagnostic etpeu d’opportunités thérapeutiques. Au cours de la FPI, il existe uneréactivation des voies impliquées au cours de l’ontogenèse pulmo-naire. Parmi ces voies, la voie des Fibroblast Growth Factor (FGF)joue un rôle important dans les interactions entre les cellules épi-théliales et les cellules mésenchymateuses. Ainsi, le FGF9 produitpar l’épithélium distal alvéolaire et le mésothélium est nécessaire
au développement du poumon. L’objectif de ce travail est de mettreen évidence le rôle du FGF9 lors dans la FPI et plus particulière-ment dans les interactions entre l’épithélium/mésothélium et lesfibroblastes.Matériel et méthodes.— Par PCRq et par immunohistochimie nousavons évalué le niveau d’expression et la localisation du FGF9, deses récepteurs (FGFR2,-3,-4) et de leurs inhibiteurs (Sprouty1,-2,-4 ;Spred 1-2) dans des échantillons pulmonaires provenant de patientsatteint de FPI (n = 11) et de patients témoins (n = 8) et dans desfibroblastes pulmonaires issus de biopsies de patients témoins etFPI avant et après stimulation par le TGF-� (1 ng/mL). Nous avonsétudié l’effet du FGF9 sur la prolifération, la migration et de ladifférenciation myofibroblastique des fibroblastes pulmonaires detémoins et de FPI.Résultats.— Nous détectons le FGF9 dans l’épithélium, les foyersfibroblastiques et dans les cellules mésothéliales pleurales depatients FPI. En PCRq, nous avons observé une diminution ducontenu de l’ARNm de FGF9 dans les biopsies de patients FPI par rap-port aux patients témoins. L’expression des récepteurs FGFR1IIIc,2IIIb, 3IIIb et -4 ainsi que des inhibiteurs des FGF (SPRY2 et SPRED 1)est aussi diminuée.In vitro, l’expression du FGF9 n’est pas modifiée par le TGF-�. LeFGF9 n’influence pas la prolifération des fibroblastes. En revanche,le FGF9 stimule la migration des fibroblastes témoins et FPI dansun modèle de chambre de Boyden modifiée ainsi que dans unmodèle de migration sur matrices produites par des fibroblastes.L’augmentation des capacités migratoires des fibroblastes en pré-sence de FGF9 est associée à l’activation de la voie ERK1/2. Dans desexpériences préliminaires réalisées, le FGF9 diminue l’expressionde COL1A1 et de ACTA2 par les fibroblastes témoins.Conclusion.— Ces résultats suggèrent que le FGF9 contrôle lephénotype des fibroblastes en inhibant la différenciation myofibro-blastique et en favorisant leur migration.
http://dx.doi.org/10.1016/j.rmr.2014.04.072
73Un neutraligand de la chimiokineCXCL12 inhibe la fibroproliférationdans un modèle de bronchioliteoblitérante après transplantationhétérotopique de trachée chez lasourisS. Nemska a,∗, C. Ammouche a, F. Daubeuf a, D. Bonnet a,M. Hibert a, J.-L. Galzi b, N. Frossard a
a Laboratoire d’innovation thérapeutique UMR7200, université deStrasbourg, Illkirch, Franceb Biotechnologie et signalisation cellulaire UMR7242, ESBS,Illkirch, France∗ Auteur correspondant.
Adresse e-mail : [email protected] (S. Nemska)
Mot clé : TransplantationIntroduction.— La bronchiolite oblitérante (BO) est la manifestationdu rejet chronique de greffe après transplantation pulmonaire. LaBO se caractérise par un infiltrat inflammatoire bronchiolaire suivid’une fibroprolifération résultant en une obstruction des petitesvoies aériennes. La chimiokine CXCL12 et son récepteur CXCR4, sur-exprimés après transplantation pulmonaire, sont impliqués dans lachimiotaxie des cellules hématopoïétiques, cellules dendritiques etfibrocytes. Notre laboratoire a identifié une molécule neutraligandde CXCL12—la chalcone 4 [1,2], qui en se fixant à CXCL12 empêchesa liaison à CXCR4.Le but de cette étude est d’évaluer l’effet de la chalcone4 comparativement à celui de l’antagoniste de CXCR4, AMD3100,dans un modèle de BO après transplantation hétérotopique de tra-chée.
