Le genre Vibrio

JM Scheftel

Les vibrions sont des bacilles à Gram négatif, droits ou incurvés, assez courts (1,5 à 3µm de L), très mobiles par un flagelle polaire .anaérobies facultatifs,

GC% : 38 -51 moles %

Plus de 80 espèces, surtout environnementales dans les écosystèmes marins

Quelques espèces sont responsables d’infections chez l’homme:Choléra, Gastro-entérites, infections cutanées, bactériémies

Principales espèces responsables d’infections chez l’homme

Vibrio cholerae biovars cholerae et El Tor Vibrio cholerae O1 et O 139

Vibrio cholerae non O1 ou NAG (non agglutinable)

V.parahaemolyticusV.alginolyticusV.vulnificus

Vibrio cholerae : espèce type

Vibrio cholerae: microscope électronique à balayage

Historique

En 1832 : le choléra sévissait en France Casimir Périer,1er ministre, contracta le choléra lors d’une visite d’un service d’un hôpital où avaient été admis des patients atteints du choléra. Il décéda de cette maladie dans les jours suivants .En 1846: à nouveau le choléra sévissait en France . Après cette épidémie, naîtra l’Assistance Publique des Hôpitaux de Paris

De nos jours, l’épidémie mondiale ou pandémie est la 7ème ( elle a débuté dans les années 60 à partir des îles Célèbes ou Sulawesi.)

V.cholerae O1biovar Eltor : la 7 ème pandémie à partir de 1960

Habitat et épidémiologie:

La bactérie est éliminée : en grande quantité dans les selles (106 à 108 vibrions par ml de selles ) et dans les produits de vomissement

Dans le milieu extérieur (eau, aliments…), la survie du germe est courte. Sa durée de vie est plus longue dans les eaux salées (lagune)

L’homme est le principal réservoir de vibrions cholériques (malades +++, porteurs sains), la contamination est principalement manu-portée.

En zone sèche, la contamination est inter-humaine

En zone humide: contamination mixte, inter-humaine et hydrique

Caractères bactériologiques:

Morphologie: bâtonnet incurvé en virgule de 2µm L x 0,5mµ lmobile par un flagelle polaire qui lui confère une mobilité ditevibrionantenon capsulé , non sporuléCaractères culturaux: aérobie-anaérobie facultatif, peu exigeant, Culture à 30 à 40°C, pH 7,6 à 9,6 halotolérant (0,5 à 7% NaCl)Résiste à la bile et aux sels biliaires

Milieu liquide: culture rapide voile en surfaceMilieu solide: en 24h colonies plates et translucides

Caractères biochimiques

Oxydase (+), catalase (+), NO3 (+)

Indole (+), hémolyse de globules rouges variable selon espèces animales et biotypes.

O/129 S (2,4 diamino 6,7 diisopropylptéridine)

Caractères antigéniques

Ag O somatique, polysaccharidique, thermostable ( 100 sérotypes)

Les souches pathogènes de V.cholerae (biovar classique et El Tor) appartiennent au sérogroupe O1

Ce sérogroupe O1 comporte 3 spécificités antigéniques a,b,c

combinaison ab sérotype Ogawa

combinaison abc sérotype Hikojima

combinaison ac sérotype Inaba

Les sérotypes Ogawa et Inaba sont les plus souvent isolés

Nouveau sérotype émergent toxinogène le O 139 (sérotypeBengal)

Substances élaborées

Enzymes extra-cellulaires: lécithinases, protéases, neuraminidasemucinase Mucinase favorise la traversée de la couche de mucus et l’entrée en contact du vibrio avec la bordure en brosse des entérocytesProtéases qui clivent la SU A de la toxine cholérique en SU A1 et SU A2

Adhésines: pili de type IV constitué de la protéine TCP (gène tcpA)Les pili sont codés par une quinzaine de gènes formant un îlot de pathogénicité porté par le phage VP1Ø

Substances élaborées (2)

toxine cholériqueProtéine oligomérique (multimérique) de structure A-B de 84 KDa

1 SU A de 28 KDa activité catalytique

5 SU B de 11,5 KDa activité de fixation

Vibrio cholerae : adhésion à la bordure en brosse

ctxA et ctxB localisés sur le phage CTX Ø

Pouvoir pathogène naturel : le choléra

début brutal: diarrhée hydrique sévèreselles afécales, flocons blanchâtres, aspect en « eau de riz »10 à 50 selles par j (3 à 15 litres d’eau et d’électrolytes/j)

crampes, absence de fièvre, vomissementsdéshydratation, anurie collapsus décès

Formes atténuées: diarrhées (1 à 20 selles /j), selles fécales, douleursabdominales, absence de vomissement

Cas de choléra sec: le décès survient avant l’apparition des diarrhées.

Sans traitement efficace, la mortalité atteint 50%

Pouvoir pathogène expérimentalAnimal:On ne peut reproduire le choléra après administration deV.cholerae per os excepté chez animaux nouveau-nés (lapin, chien)Anse ligaturée de lapin:Augmentation de liquide dans la lumière intestinale après injection dans l’anse de 1ml de filtrat de culture et effet observé après 18 hCultures cellulaires:La toxine cholérique présente un effet cytotonique sur lignées cellulaires

Cellules Y1 (cellules surrénalliènes): arrondissement des cellules

Cellules CHO (cellules ovariennes de hamster chinois): allongement des cellules (aspect fibroblastique)

Pathogénie

Le syndrome infectieux est dû à l’intense perte hydrique et d’électrolytes

Pas de lésions de l’épithélium intestinal

Diagnostic bactériologique

Diagnostic direct

Prélèvements

Selles, écouvillonnages rectaux, produits de vomissement

(hémoculture: non)

Aspect des selles: très liquides

Examen direct

État frais: entre lame et lamelle mobilité en banc de poisson

Coloration de Gram: bacille incurvé à Gram (-)

Culture: milieu d’enrichissement : eau peptonée alcaline à 1 à 3%

de NaCl

Agglutination avec les sérums anti O1 et anti O139

Milieux d’isolementMilieux sélectif et non sélectifMilieu sélectif: milieu TCBS (thiosulfate,citrate, bile,saccharose)Culture: V.cholerae colonies jaunes Caractères : mobile , Gram (-)Identification biochimiqueOxydase(+), O129 SGalerie API®

Diagnostic indirect : aucun intérêt étant donné le caractère d’urgence du diagnostic

Vibrio cholerae : coloration de Gram

Vibrio cholerae : Culture sur gélose ordinaire ou alcaline

Procédure d’isolement de V.cholerae

Prévention et TraitementMesures d’hygièneVaccination

Vaccins anticholériquesà base de vibrions tués :

injection IMprotection de l’ordre de 55 à 60%durant 3 à 6 mois

per os: pas de protection notableà base de constituants purifiéstoxine détoxifiéeSU B purifiée (per os)

Ce type de vaccin provoque l’apparitiond’IgA intestinales mais protection insuffisante

Nouveau vaccin: Dukoral ® (SBL vaccins ,Suède)Vaccin oral à germes entiers (V.cholerae O1) tués + SU Bper os, deux doses chez l’adulte, à 8 j d’intervalleprotection de 85% sur 6 mois

ChimioprophylaxieSéjour de courte durée: prévenir la maladie en supprimant le portageSulfamide retard (Fanasil) ou Tétracyclines

Traitement curatifCorrectement traité le choléra : 1% de décèsMais si structures débordées: mortalité atteignant 50%

RéhydratationPar voie parentérale par sérum physiologique et bicarbonatéPar voie orale; soluté de réhydratation orale (SRO de l’OMS)

AntibiothérapieIntérêt mis en doutePeut réduire l’importance et la durée de la diarrhéeRaccourcit la durée de portage

sulfamides, Bactrim, tétracyclines

Autres Vibrio d’intérêt clinique

V.alginolyticusV.parahaemolyticusV.vulnificus

Pathologies:V.parahaemolyticus

Infections intestinales2 à 6 h après le repas contaminantDiarrhées de 4 à 7 j

V.alginolyticusInfections cutanées après un contact avec eau de mer Cellulites, ulcères

V vulnificusInfections cutanées consécutives à une exposition au milieu marin dans les pays tropicaux ou septicémie grave suite à la consommation de fruits de mer chez patients immunodéprimés;

Lésions cutanées à Vibrio spp