Les acides gras polyinsaturés en n-3 ont-ils un rôle protecteur sur l’induction

d’ischémies cérébrales chez le rat âgé ?

Jérémy Skrzypski*, Christian Tessier*, Nathalie Bertrand¥, Claude Mossiat¥, Jean-Michel Chardigny†, Michel Narce*

UMR 866-INSERM/Université de Bourgogne*

UMR 887-INSERM/Université de Bourgogne¥

UMR 1019 INRA de Clermont-Theix, Université d’Auvergne†

INTRODUCTIONINTRODUCTION

-Ischémie cérébrale: 37 769 de + de 65 ans, 2001

-Troisième cause de décès après le cancer et l’infarctus du myocarde.

-Ischémie cérébrale Diminution transitoire/permanente du flux sanguinLimitée à un territoire donné

Occlusion embolie/thrombose

-En fonction

_taille

_localisation

_type

problèmes moteur, sensoriel, cognitif, comportement

L’épisode ischémique

pro-ischémie anti-ischémie Récupération

Post-ischémique

pro-ischémie anti-ischémie

neurogenèse

-Récupération: stimulation des voies de neurogenèse

Entraînement et/ou activité physique

neurotrophine: BDNF/TrkB

-Plasticité cérébrale, mémoire.. (Mc Allister et coll., 1999)

-Survie, différenciation, maintien des neurones. (Thoenen, 1995;

Lewin et Barde, 1996)

- Rôle de BDNF

BDNF

BDNF, ischémie et vieillissement

Très variable

Au cours du temps

Sous-structure cérébrale

(Cai et coll., 2006)

Augmentation de BDNF et TrkB, dans le cœur de l’animal âgé, facteur aggravant lors d’atteinte ischémique

Activité modérée volontaire chez le rat âgé Diminution de BDNF

Âge serait neuroprotecteur vis-à-vis de l’ischémie ?

Diminution de BDNF

Régulation nutritionnelle

régime carencé en acide gras en n-3 diminution

BDNF régime enrichi en acides gras en n-3

augmentation de BDNF

(Rao et coll.,

2007) AGPI en n-3 protecteur

Ischémie

Rétine

Cardiovasculaire

chez l’animal âgé ?

Effet d’un enrichissement en acides gras en n-3, chez des animaux vieillissants, sur la propagation d’une ischémie focale induite,

au niveau cortical

But de l’étude

F1

F2

21 mois

Régime huile de tournesol

(Def)OA (29,88%), LA

(57,14%)

Régime colza (ALA)

OA (56,95%), LA (12,36%), ALA (2,28%)

Régime colza + 0,6% de DHA (ALA+DHA)

OA (58,88%), LA (11,05%), ALA (1,20%), DHA (0,60%)

Pendant 3 mois

Protocole experimentalProtocole experimental

rats wistars mâles huile de Tournesolcarencés en acides gras en n-3 (Def)

Protocole experimental

Expression de BDNF et de Trk-B au niveau cortical (ARNm)

Pré-ischémie

Post-ischémie

Coupe 20 µm cryostat

Composition LT plasma et cortex frontal

Volume d’infarctus cérébraux

Crésyl violet

Prélèvement 200µm

Volume [Scion Image (NIH)]

Dénombrement des corps apoptotiques et des noyaux fragmentés

Prélèvement coupes au maximum de la lésion

Bleu de Toluidine

Résultats en pré-ischémie

Composition en lipides totaux (% molaire) dans le plasma [A] et le cortex frontal [B] des animaux des lots Def, ALA et ALA+DHA

Def

18,38

0,16

115

ALA

17,09

2,08

8

ALA+DHA

10,81

2,13

5

Σn-6

Σn-3n-6/n-3

A

Def

28,00

8,08

3,5

ALA

20,8

13,77

1,5

ALA+DHA

19,45

16,58

1,2

Σn-6

Σn-3

B

diminution 22:5n-6 augmentation 22:6n-3 (DHA)

Conservation 20:4n-6 (AA)

n-6/n-3

Plasma Cortex frontal

Expression des ARNm codants BDNF (A) et TrkB (B) dans le cortex frontal des lots Def, ALA et ALA+DHA

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Def ALA ALA+DHA

BD

NF/

L1

9 (

un

ités a

rbit

rair

es)

Def ALA ALA+DHA

BDNF

L19

Résultats : partie I

A***

***

0

10

20

30

40

50

60

70

Def ALA ALA+DHA

BD

NF/

L1

9 (

un

ités a

rbit

rair

es)

Def ALA ALA+DHA

TrkB

L19

B *****

Conclusion intermédiaire

ALA et ALA+DHA donnés pendant 3 mois, chez des animaux âgés

TrkB

BDNFISCHEMIE

?

Augmentation des teneurs en acides gras en n-3

Résultats en post-ischémie

0

5

10

15

20

25

30

Def ALA ALA+DHA

Volumes de lésions cérébrales (mm3) des lots Def, ALA et ALA+DHA.

Résultats : partie II

Dénombrement des corps apoptotiques et des noyaux fragmentés dans des lots Def, ALA et ALA+DHA (en % de l’ensembles des

cellules). Résultats : partie II

0

5

10

15

20

25

Def ALA ALA+DHA

% d

e l'e

nse

mb

le d

es c

ellu

les

*ns

10,4212,44

18,22

0

2

4

6

8

10

12

Def ALA ALA+DHA

% d

e l'e

nse

mb

le d

es c

ellu

les

Conclusion

Régime enrichi en ALA ou ALA+DHA

•Augmentation teneur en DHA niveau cortex, avec une diminution

de la teneur en AA dans le lot ALA

•Aucune modification significative de la propagation de l’épisode ischémique,bien que les expressions de BDNF et de son récepteur soient augmentées.

•Augmentation nombre corps apoptotiques lot ALA+DHA

Merci de votre attention !!!!