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comité de l'antibiogramme, standardisation de l'antibiogramme, société française de microbiologie.
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V.1.0 MAI 2014
SOMMAIRE
1. DETERMINATION DE LA SENSIBILITE AUX ANTIBIOTIQUES 3 1. 1. Prparation des milieux utiles aux mthodes CA-SFM / EUCAST pour la diffusion en milieu glos et la dtermination des CMI par microdilution en milieu liquide 3 1.1.1. Diffusion en glose : milieux 3 1.1.2. Dtermination des CMI en milieu liquide (microdilution) : milieux 4 1. 2. Conditions techniques gnrales pour les mthodes de diffusion 6 1. 3. Contrle de qualit interne 12 1.3.1. Staphylococcus aureus ATCC 29213 (NCTC 12973 ; CIP 103429) 14 1.3.2. Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 (NCTC 12977 ; CIP 104340). (Souche de sensibilit intermdiaire la pnicilline) 15 1.3.3. Enterococcus faecalis ATCC 29212 (NCTC 12697 ; CIP 103214) 16 1.3.4. Haemophilus influenzae NCTC 8468 (CIP 54.94) 17 1.3.5. Campylobacter jejuni ATCC 33560 (NCTC 11351 ; CIP702) 17 1.3.6. Escherichia coli ATCC 25922 (NCTC 12241 ; CIP 76.24) 18 1.3.7. Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (NCTC 12903 ; CIP 76110) 19 2. RESISTANCES NATURELLES AUX ANTIBIOTIQUES DES PRINCIPALES ESPECES BACTERIENNES DINTERET MEDICAL 20 2. 1. Bacilles Gram ngatif non exigeants 20 2.1.1. Entrobactries 20 2.1.2. Aeromonas 20 2.1.3. Bacilles Gram ngatif non fermentaires 20 2. 2. Bacilles Gram ngatif exigeants 21 2. 3. Coques Gram positif 21 2. 4. Bacilles Gram positif 21 2. 5. Coques Gram ngatif 21 2. 6. Bactries anarobies strictes 21
3. CONCENTRATIONS CRITIQUES PK/PD NON RELIEES A UNE ESPECE 23
4. TABLEAUX DES CONCENTRATIONS CRITIQUES POUR LINTERPRETATION DES CMI ET DES DIAMTRES DES ZONES DINHIBITION 28 4.1. Enterobacteriaceae 29 4.2. Pseudomonas spp. 37 4.3. Acinetobacter spp. 40 4.4 Stenotrophomonas maltophilia 43 4.5. Staphylococcus spp. 45 4.6. Enterococcus spp. 54 4.7. Streptococcus pneumoniae 60 4.8. Streptocoques des groupes A, B, C ou G 68 4.9. Autres streptocoques 75 4.10. Listeria Monocytogenes 82 4.11. Corynbactries 84 4.12. Haemophilus influenzae 85 4.13. Moraxella catarrhalis 92 4.14. Pasteurella multocida 96 4.15. Helicobacter pylori 98 4.16. Campylobacter spp. 100
5. ANTIBIOGRAMME VETERINAIRE DU COMITE DE LANTIBIOGRAMME DE LA SOCIETE FRANCAISE DE MICROBIOLOGIE 102
Copyright 2014 - SocitFranaisedeMicrobiologieTous droits de traduction, dadaptation et de reproduction par tous procds rservs pour tous pays. Toute reproduction ou reprsentation intgrale ou partielle par quelque procd que ce soit de ce document, faite sans autorisation expresse et crite du Comit de lantibiogramme de la Socit Franaise de Microbiologie (28, rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15) est illicite et constitue une contrefaon. Seules sont autorises, dune part, les reproductions strictement rserves lusage du copiste et non-destines une utilisation collective, et dautre part, les courtes citations justifies par le caractre scientifique ou dinformation de luvre dans laquelle elles sont incorpores (art. L. 122-4, L. 122-5 et L. 335-2 du Code de la proprit intellectuelle).
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AVANT-PROPOS
Le CA-SFM / EUCAST (EUropean Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) est heureux de vous proposer les recommandations 2014 (V1.0, janvier 2014) relatives : aux conditions de dtermination de la sensibilit des bactries aux antibiotiques par diffusion en glose, aux valeurs des diamtres et concentrations critiques des antibiotiques.Les nouvelles recommandations 2014 du CA-SFM / EUCAST sont le rsultat dun remaniement complet des mthodes dtude de la sensibilit aux antibiotiques par diffusion (inoculum bactrien plus lourd, charge de certains disques modifies, parfois milieu glos), de la prise en compte de donnes rcentes de PK/PD et enfin de lanalyse critique des donnes cliniques. Cette dmarche sest droule dans le cadre de lharmonisation europenne mene par lEUCAST dont le CA-SFM est un membre actif depuis de nombreuses annes. De nombreuses propositions faites par le CA-SFM / EUCAST ont t prises en compte par lEUCAST tout au long de la dmarche. Chaque genre ou espce bactrien a fait lobjet dun examen approfondi par des groupes de travail spcifiques du CA-SFM / EUCAST. Les recommandations ont ensuite t revues en dtail par lensemble du comit pour approbation finale. Le CA-SFM informe que les recommandations 2013 du CA-SFM et 2014 du CA-SFM / EUCAST sont opposables vis--vis de laccrditation jusquau 30 juin 2015. Aprs cette date, seul le CA-SFM / EUCAST le sera.Cette 1re version est sujette volution. Les modifications seront ajoutes en ligne dans les chapitres concerns et seront signales dans le tableau Modifications situ en dbut douvrage. Cependant, le document papier ne sera dit quune seule fois par an.Pour certains genres ou espces bactriens, lEUCAST ne propose pas encore de diamtres et/ou de concentrations critiques. Dans ces cas, le CA-SFM / EUCAST a conserv la mthodologie et les valeurs du communiqu 2013. Il sagit de Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis et des bactries anarobies. Certaines recommandations restent encore provisoires en attente de donnes complmentaires. Dans un avenir proche, les rgles dinterprtation ( experts rules ) de lEUCAST, ainsi que les recommandations pour la dtection des rsistances, seront disponibles en franais.Lapplication des recommandations 2014 va entraner de profondes modifications des pratiques dans nos laboratoires, en particulier pour les utilisateurs de la mthode par diffusion et va imposer de nouveaux paramtrages de nos systmes de gestion et dinterprtation des donnes.Dans ce cadre, les Evaluations Externes de la Qualit (EEQ) nationales ou volontaires en matire de tests de sensibilit aux antibiotiques, ainsi que dautres types dEEQ, ont un rle essentiel pour sassurer que les laboratoires de bactriologie soient en mesure de gnrer des rsultats adquats pour les situations les plus frquentes. Les EEQ peuvent tre utilement compltes par des tests ducatifs visant mettre les laboratoires dans des situations rares mais pdagogiques.
La lettre dinformation du CA-SFM / EUCAST concernant la dtection de carbapnmase chez les entrobactries est accessible tous sur le site de la SFM (lien direct ici). Les recommandations dfinitives sur cette dtection sont en cours dlaboration et paratront ds que possible sur le site.
Mai 2014.Le CA-SFM / EUCAST
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1. DETERMINATION DE LA SENSIBILITE AUX ANTIBIOTIQUES
1. 1. Prparation des milieux utiles aux mthodes CA-SFM / EUCAST pour la diffusion en milieu glos et la dtermination des CMI par microdilution en milieu liquide
1.1.1. Diffusion en glose : milieux
Glose Mueller-Hinton (MH) et glose MH au sang de cheval dfibrin et additionne de -NAD (MH-F).
La glose MH est employe lors de la mthode de diffusion en glose pour les bactries autres que celles croissance lente.
La glose MH-F additionne de 5% de sang de cheval dfibrin mcaniquement et de 20 mg/L de -NAD, est employe pour Streptococcus spp. dont Streptococcus pneumoniae, Haemophilus spp., Moraxella catarrhalis, Listeria monocytogenes, Campylobacter spp., Pasteurella multocida et autres bactries croissance lente.
Les gloses peuvent tre achetes prtes lemploi dans le commerce ou tre prpares localement comme suit: (ce nest pas recommander vis--vis de laccrditation)
Ractifs1. Poudre pour glose MH du commerce.
2. Sang de cheval dfibrin mcaniquement.3. -nicotinamide adnine dinuclotide (-NAD), puret 98%.
Prparation de la solution mre de -NAD1. Dissoudre le -NAD dans de leau dsionise strile afin dobtenir une concentration de 20 mg/mL.
2. La filtration strilisante de la solution mre est ralise laide dune membrane de 0,2 m.3. La solution mre filtre se conserve en aliquotes -20C, dcongeles au fur et mesure des besoins.
Ne pas recongeler les solutions inutilises.
Prparation des gloses1. Prparer et autoclaver la glose MH en fonction des recommandations du fabricant.
2. Ramener la temprature 42-45C.3. Pour prparer la glose MH-F, ajouter strilement 50 mL de sang de cheval dfibrin et 1 mL de la
solution mre de -NAD par litre de milieu.Bien agiter et rpartir immdiatement.
4. Rpartir le milieu en botes de Petri striles de faon obtenir une paisseur de 4 mm 0.5 mm (soit environ 25 mL par bote de Petri de 90 mm de diamtre, 31 mL par bote de Petri de 100 mm de diamtre, 71 mL par bote de Petri de 150 mm de diamtre, 40 mL par bote de Petri carre de 100 mm)
5. Laisser la glose prendre avant de dplacer les botes.6. La surface de la bote doit tre sche avant utilisation. Le schage des botes dpend des conditions
de stockage et des moyens de schage. Ne pas desscher la glose.
Conservation des gloses1. Conserver les botes de Petri dans des sachets en plastique ventils 8-10C. Si les botes de Petri
doivent tre conserves plus de 7 jours, il existe une alternative qui consiste les conserver 4-8C, en sachet plastique scell.
2. En cas de fabrication au laboratoire, les conditions de schage, de conservation des botes et de dure de vie la paillasse devront tre dtermines dans le cadre du programme dassurance qualit.
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Conservation des gloses3. Les botes achetes dans le commerce seront conserves selon les indications du fabricant et
employes avant la limite de premption.
Contrle de qualit1. Employer une lectrode de contact pour vrifier que le pH se situe entre 7,2 et 7,4.
2. Contrler lpaisseur de la glose 4 mm 0,5 mm.3. Vrifier que le milieu permet une bonne croissance de(s) souche(s) du contrle de qualit proposes.4. Vrifier que les diamtres des zones dinhibition sont bien dans les limites requises pour chacune des
associations antibiotique/bactrie.
1.1.2. Dtermination des CMI en milieu liquide (microdilution) : milieux
Bouillon Mueller-Hinton (MH) ajust en cations divalents et bouillon MH au sang de cheval et additionn de -NAD (bouillon MH-F).
Le bouillon MH, ajust en cations divalents, est employ lors de la mthode de dilution en milieu liquide (microdilution) pour les bactries autres que celles croissance lente selon la norme ISO 20776-1, 2006.
Le bouillon MH-F, bouillon MH additionn de 5% de sang de cheval lys et de 20 mg/L -NAD, est employ pour Streptococcus spp., dont Streptococcus pneumoniae, Haemophilus spp., Moraxella catarrhalis, Listeria monocytogenes, Campylobacter spp., Pasteurella multocida et autres bactries croissance lente.
Le bouillon MH-F est prpar comme suit:
Ractifs1. Bouillon MH du commerce ajust en cations divalents.
2. Sang de cheval lys 50%.3. -Nicotinamide adnine dinuclotide (-NAD), puret 98%.
Prparation du sang de cheval lys 50%.1. Diluer strilement le sang de cheval avec de leau dsionise strile parties gales.
2. Congeler le sang une nuit -20C et dcongeler. Rpter le cycle jusqu ce que les cellules soient compltement lyses (trois cycles sont souvent suffisants mais la norme ISO 20776-1 stipule que 7 cycles sont parfois ncessaires).
3. Clarifier le sang de cheval lys 50% par centrifugation 12000 x g pendant 20 min. pour enlever les membranes cellulaires.
4. La solution mre filtre se conserve en aliquotes -20C qui seront dcongeles au fur et mesure des besoins. Ne pas recongeler les fractions inutilises.
Prparation de la solution mre de -NAD 1. Dissoudre le -NAD dans de leau dsionise strile afin dobtenir une concentration de 20 mg/mL.
2. La filtration strilisante de la solution mre est ralise laide dune membrane de 0,2 m.3. La solution mre filtre se conserve en aliquotes - 20C qui seront dcongeles au fur et mesure
des besoins. Ne pas recongeler les fractions inutilises.
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Prparation du bouillon MH-F 1. Prparer et autoclaver le bouillon MH ajust en cations selon les recommandations du fabricant mais
avec 100 mL en moins deau dsionise pour tenir compte de laddition ultrieure de sang de cheval.2. Ramener la temprature du milieu jusqu 42-45C.3. Ajouter strilement 100 mL de sang de cheval lys 50% et 1 mL de la solution mre de -NAD pour
un litre de bouillon ; bien mlanger.
4. Rpartir 11 mL de bouillon MH-F en tubes striles avec bouchon vis.
Conservation du bouillon MH-F 1. Le bouillon MH-F est conserv la temprature de 4-8C.
2. Les conditions de conservation et la dure dutilisation devront tre dtermines dans le cadre du programme dassurance qualit. En gnral, la date de premption des milieux est de lordre de 6 mois.
Contrle de qualit1 Vrifier que le pH est compris entre 7,2 et 7,4.
2 Vrifier que le milieu permet une bonne croissance de(s) souche(s) du contrle de qualit des bactries proposes.
3 Vrifier que les valeurs des CMI sont bien dans les limites requises pour chacune des associations antibiotique/bactrie.
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1. 2. Conditions techniques gnrales pour les mthodes de diffusion
Abrviations et terminologie
ATCC American Type Culture Collectionhttp://www.atcc.org
BLNAR Rsistance lampicilline sans production de -Lactamase
CCUG Culture Collection Universtity of Gteborghttp://www.ccug.se
CECT Coleccin Espaola de Cultivos Tipohttp://www.cect.org
CIP Collection de souches de lInstitut Pasteurhttp://www.cabri.org/CABRI/srs-doc/cip_bact.info.html
DSM Bacterial cultures from Deutsche Stammsammlung fr Mikroorganismen und Zellkulturen (DSMZ) have DSM numbershttp://www.dsmz.de/index.htm
BLSE -lactamase spectre tendu
EP En prparation
EPI Elments de preuve insuffisants
EUCAST European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing http://www.eucast.org
MH Glose de Mueller-Hinton
MH-F Glose de Mueller-Hinton pour bactries croissance lente (MH additionn de 5% de sang de cheval dfibrin et de 20 mg/L de -NAD)
NA Non applicable
SARM Staphylococcus aureus rsistant la mticilline (possdant le gne mecA ou mecC)
NCTC National Collection of Type Cultureshttp://www.hpacultures.org.uk
-NAD -nicotinamide adnine dinuclotide
Solution sale Solution aqueuse 0,85% de NaCl
U.F.C. Units formant colonies
1. IntroductionLa mthode de diffusion est lune des plus anciennes approches de dtermination de la sensibilit des bactries aux antibiotiques et demeure lune des mthodes les plus utilises en routine. Elle convient pour la majorit des bactries pathognes incluant les bactries croissance lente ; elle permet une varit dans le choix des antibiotiques et ne requiert aucun matriel particulier. Comme la plupart des techniques de diffusion en glose, la mthode de lEUCAST est standardise, se fonde sur les principes dfinis dans le rapport de lInternational Collaborative Study of Antimicrobial Susceptibility Testing (1972) mais aussi sur lexprience des experts du monde entier.
Les diamtres critiques de la mthode EUCAST sont tablis en fonction des concentrations critiques europennes publies par EUCAST et accessibles gratuitement sur le site de lEUCAST (http://www.eucast.org).
Comme dans toute mthode, les techniques dcrites doivent tre suivies sans aucune modification de faon obtenir des rsultats corrects.
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2. Prparation des milieux2.1 Prparer la glose de MH selon les indications du fabricant en ajoutant, pour les bactries
croissance lente, les supplments pour la glose au sang MH-F comme indiqu dans le Tableau 1. La prparation et laddition des supplments sont dcrits en dtail : http://www.eucast.org.
2.2 Lpaisseur de la glose doit tre de 4 mm 0,5 mm (approximativement 25 mL pour une bote de 90 mm de diamtre, 31 mL pour une bote de 100 mm de diamtre, 71 mL pour une bote de 150 mm de diamtre et 40 mL pour une bote carre de 100 mm de ct.
2.3 La surface de la glose doit tre sche avant emploi. Les conditions de schage et de conservation des milieux fabriqus au laboratoire sont fonction de lquipement du laboratoire et doivent tre dtermines localement.Les botes ne doivent pas tre dessches.
2.4 Conserver les botes prpares au laboratoire 8-10C. Si elles sont conserves au-del de 7 jours, les conserver 4-8C en sachet plastique scell.
2.5 Les conditions de schage et de conservation des milieux fabriqus au laboratoire doivent tre dtermines localement dans le cadre du programme dassurance qualit.
2.6 Il convient de suivre les recommandations du fabricant pour le mode de conservation des gloses prtes lemploi. Les utiliser avant premption.
Tableau 1Milieux de dtermination la sensibilit des bactries aux antibiotiques
Organisme MilieuEntrobactries Glose de Mueller-HintonPseudomonas spp. Glose de Mueller-HintonStenotrophomonas maltophilia Glose de Mueller-HintonAcinetobacter spp. Glose de Mueller-HintonStaphylococcus spp. Glose de Mueller-HintonEnterococcus spp. Glose de Mueller-HintonStreptococcus pneumoniae Glose MH-F1
Streptocoques des groupes A, B, C, G Glose MH-F1
Streptocoques du groupe viridans Glose MH-F1
Haemophilus spp. Glose MH-F1
Moraxella catarrhalis Glose MH-F1
Listeria monocytogenes Glose MH-F1
Pasteurella multocida Glose MH-F1
Campylobacter jejuni et C. coli Glose MH-F1
Autres bactries croissance lente Selon
1 MH + 5% sang de cheval dfibrin mcaniquement + 20 mg/L -NAD
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3. Prparation de linoculum3.1 Raliser une suspension bactrienne directement partir des colonies en solution sale pour
atteindre une turbidit quivalente celle de ltalon 0,5 de la gamme de McFarland (Tableau 2), ce qui correspond un inoculum denviron 1 2 x108 UFC/mL pour Escherichia coli.Cette mthode convient pour toutes les bactries y compris croissance lente dont : Haemophilus spp. Moraxella catarrhalis, Streptococcus pneumoniae, les streptocoques -hmolytiques.Raliser une culture sur milieu non slectif. Le lendemain, prlever plusieurs colonies de mme morphologie (si possible) afin dviter de slectionner un variant atypique. Mettre ces colonies en suspension en milieu sal avec une se strile ou un couvillon en coton.
3.2 La suspension bactrienne est standardise laide du tmoin 0,5 McFarland. Un inoculum lourd engendre des diamtres plus petits et inversement.
3.2.1 Il est recommand demployer un spectrophotomtre pour ajuster linoculum. Cet appareil doit tre calibr contre un talon de la gamme de McFarland selon les recommandations du fabricant.
3.2.2 On peut galement comparer lil nu la turbidit de la suspension bactrienne celle de ltalon 0,5 de la gamme de McFarland.Dans ce cas agiter vigoureusement ltalon de turbidit sur un VortexR avant usage (certains talons commerciaux sont glifis et ne doivent pas tre agits; suivre les recommandations du fabricant). Pour faciliter la comparaison des deux chantillons, se placer face un fond blanc avec des lignes noires.
3.2.3 Pour S. pneumoniae on prfre partir dune glose au sang et atteindre McFarland 0,5. Quand S. pneumoniae provient dune glose chocolat on prpare linoculum comparativement au tube 1 de McFarland.
3.2.4 Pour ajuster la densit bactrienne au tube 0,5 McFarland, ajouter soit la solution sale soit les bactries.
3.3 La suspension bactrienne doit tre employe de faon optimale dans les 15 min. sans jamais dpasser 60 min.
Tableau 2Prparation de ltalon de turbidit McFarland 0,5
1 Ajouter 0,5 mL dune solution 0,048 mol/L de BaCl2 (1,175% p/v BaCl22H20) 99,5 mL dune solution 0,18 mol/L (0,36 N) de H2S04 (1% v/v) et agiter vigoureusement.
2 Vrifier la densit de la suspension laide dun spectrophotomtre avec un faisceau de 1 cm et des cuvettes assorties. Labsorbance 625 nm doit tre comprise entre 0,08 et 0,13.
3 Distribuer la suspension dans des tubes de mme taille que ceux utiliss pour ajuster linoculum. Sceller les tubes.
4 Une fois scells, conserver ces tubes temprature ambiante et labri de la lumire. 5 Avant usage, mlanger vigoureusement le tube laide dun Vortex. 6 Renouveler ltalon ou vrifier son absorbance aprs 6 mois de conservation.7 Il convient de vrifier les talons achets dans le commerce en sassurant que labsorbance se
situe dans les limites fixes.
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4. Inoculation des gloses4.1 Linoculum bactrien doit idalement tre employ dans les 15 min. qui suivent sa prparation.
Son emploi doit tre fait au plus tard dans les 60 min. qui suivent sa prparation. 4.2 Plonger un couvillon en coton strile dans la suspension bactrienne et liminer lexcs de
liquide en tournant lcouvillon sur les parois du tube. Il est important de rejeter lexcs de liquide sur lcouvillon pour viter une sur-inoculation des botes, en particulier pour les bactries Gram ngatif.
4.3 Ecouvillonner sur la totalit de la surface de la glose dans trois directions ou en utilisant un ensemenceur rotatif.
4.4 Dposer les disques dans un dlai de 15 min.Si les botes sont abandonnes la temprature du laboratoire trop longtemps avant le dpt des disques la bactrie peut commencer crotre conduisant une fausse diminution de la taille des zones dinhibition.
5. Dpt des disques imprgns dantibiotique5.1 Les charges des disques sont indiques dans les Tableaux o figurent les concentrations critiques
et le contrle de qualit.5.2 Dposer les disques fermement la surface de la glose inocule et sche. Le contact avec la
surface doit tre troit. Les disques une fois dposs ne peuvent tre dplacs car la diffusion des antibiotiques est trs rapide.
5.3 Le nombre de disques dposs par bote est limit du fait du chevauchement des zones dinhibition et pour limiter les interfrences entre les antibiotiques. Il est important que les diamtres des zones dinhibition soient mesurables. Le nombre maximum de disques est fonction de la bactrie et des antibiotiques car certains entranent pour des souches sensibles, des zones trs larges. Un maximum de six disques convient pour les botes de 90 mm de diamtre et douze (ou seize) pour celles de 150 mm de diamtre.Les disques drythromycine et de clindamycine doivent tre placs une distance de 12-20 mm bord bord afin de dtecter la rsistance inductible aux lincosamides, chez les staphylocoques et les streptocoques.
5.4 La dcharge des disques conduit des zones dinhibition rduites et constitue une source derreur habituelle. Do :
5.4.1 Conserver les disques, y compris ceux en cartouches dans des conteneurs ferms avec un dessiccateur et labri de la lumire (certains agents comme le mtronidazole, le chloramphnicol et les fluoroquinolones sont inactivs en cas dexposition prolonge la lumire)
5.4.2 Conserver les disques -20C sauf indication contraire du fabricant. Si cela nest pas possible conserver les disques une temprature infrieure 8C.
5.4.3 Placer le matriel pour les tests une temprature infrieure 8C.
5.4.4 Pour viter la condensation, laisser les disques revenir la temprature ambiante avant douvrir les cartouches.
5.4.5 Ne pas utiliser de disques prims.
6. Incubation des botes de Petri6.1 Retourner les botes et dans les 15 min. qui suivent le dpt des disques, les incuber. Si elles sont
abandonnes temprature ambiante aprs dpt des disques, la pr-diffusion des antibiotiques engendrera des zones dinhibition faussement agrandies.
6.2 Lempilement des botes dans ltuve peut affecter les rsultats en raison des diffrences de temprature lies au systme de chauffage et de ventilation. Lefficacit des tuves est variable, aussi le contrle des paramtres de lincubation y compris le nombre de botes par pile doivent tre tracs et font partie du programme de lassurance qualit du laboratoire.
6.3 Incuber les botes comme indiqu dans le Tableau 3. 6.4 Pour les glycopeptides et certaines souches dentrocoques les colonies rsistantes napparaissent
quaprs une priode de 24 h pleine dincubation. Il est possible deffectuer la lecture aprs16 20 h et de rpondre quand la souche est rsistante ; en cas de sensibilit, il y a lieu dincuber nouveau puis de lire 24 h.
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Tableau 3Conditions dincubation
Organisme Conditions dincubationEntrobactries 351C en arobiose 16 20 hPseudomonas spp. 351C en arobiose 16 20 hStenotrophomonas maltophilia 351C en arobiose 16 20 h
Acinetobacter spp. 351C en arobiose 16 20 hStaphylococcus spp. 351C en arobiose 16 20 hEnterococcus spp. 351C en arobiose 16 20 h
(351C en arobiose 24 h pour les glycopeptides)Streptococcus pneumoniae 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hStreptocoques des groupes A, B, C, G 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hStreptocoques du groupe viridans 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hHaemophilus spp. 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hMoraxella catarrhalis 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hListeria monocytogenes 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 hPasteurella multocida 351C en prsence de 4 6% CO2 en arobiose
16 20 h
7. Lecture des botes aprs incubation7.1 Un inoculum et un ensemencement corrects doivent conduire une culture confluente. 7.2 La culture doit tre rpartie sur toute la surface de la glose de faon obtenir des zones
dinhibition circulaires. 7.3 La prsence de colonies isoles indique que linoculum est trop faible. Refaire le test.7.4 Vrifier que les diamtres des zones dinhibition sont dans les limites du contrle de qualit.
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8. Mesure des zones dinhibition et catgorisation clinique8.1 La bordure de la zone dinhibition doit tre lue lil nu et au niveau de la complte inhibition de
la culture ; la bote tant place 30 cm de lil.8.2 Lire les zones dinhibition au dos des gloses MH sur fond noir clair par une lumire rflchie. 8.3 Lire les zones dinhibition sur gloses MH-F directement face la bote, couvercle retir, claire
par une lumire rflchie. 8.4 Ne pas tenir les botes face une lampe (lumire transmise) ni employer une loupe grossissante
(sauf cas particulier, voir infra).8.5 Mesurer les diamtres des zones dinhibition au millimtre le plus proche avec une rgle, un pied
coulisse ou un systme de lecture automatis. 8.6 Interprter les diamtres des zones dinhibition par rfrence aux Tableaux o figurent les
concentrations critiques.
8.7 Si des modles sont employs pour interprter les diamtres des zones dinhibition, les botes de Petri doivent tre places sur le modle et les zones dinterprtation sur le modle doivent correspondre aux concentrations critiques EUCAST. Vrifier que les concentrations critiques employes correspondent bien la dernire version EUCAST. Un programme de prparation des modles sobtient gratuitement sur la toile : http://bsac.org.uk/susceptibility/template-program
8.8 Recommandations particulires de lecture:8.8.1 Sil y a quelques colonies dans la zone dinhibition, elles devront tre repiques, identifies et le
test sera recommenc. 8.8.2 Pour les sulfamides et le trimthoprime, un antagonisme, d au milieu, peut conduire des
colonies minuscules autour du disque. Ce type de culture doit tre ignor et le diamtre de la zone dinhibition mesur l o la bordure est nette.Pour Stenotrophomonas maltophilia et le cotrimoxazole, une culture substantielle peut apparatre dans la zone dinhibition. Ignorer cette culture et considrer quil y a une zone dinhibition que si celle-ci est bien visible. Considrer quil ny a pas de zone dinhibition, si la culture se fait au contact du disque.
8.8.3 Pour les entrobactries et lampicilline avec certains lots de M-H, un fin film peut se produire lintrieur de la zone dinhibition. Ignorer ce film.
8.8.4 Pour E. coli et mcillinam, ne pas tenir compte des colonies isoles au sein de la zone dinhibition. 8.8.5 Pour Proteus spp., ignorer ltalement (swarming) et lire linhibition de la croissance.
8.8.6 Pour les staphylocoques et la pnicilline G, examiner la bordure de la zone proche dune lumire transmise (bote tourne vers la lumire). Des souches pour lesquelles le diamtre de la zone dinhibition est suprieur au diamtre critique mais dont la bordure nest pas nette doivent tre rpondues rsistantes.
8.8.7 Quand la dtection de la rsistance la mticilline chez Staphylococcus aureus est effectue laide dun disque de cfoxitine, mesurer la zone dinhibition et rechercher attentivement, sous un clairage adquat, la prsence de colonies dans la zone dinhibition. Il sagit alors soit dune contamination soit de lexpression dune rsistance htrogne la mticilline.
8.8.8 Pour les staphylocoques et le linzolide, lire au dos de la bote place face la lumire (lumire transmise).
8.8.9 Pour les entrocoques et la vancomycine, inspecter la bordure de la zone dinhibition, bote face la lumire (lumire transmise). Des bordures au contour peu net ou des colonies dans la zone dinhibition doivent tre examines avec attention car ils sont parfois le seul signal vocateur dune rsistance la vancomycine. Poursuivre linvestigation.
8.8.10 Pour les streptocoques -hmolytiques sur glose MH-F, ne pas lire la zone dhmolyse mais la zone dinhibition. La zone dhmolyse est gnralement distincte de la zone de croissance tandis que pour les streptocoques -hmolytiques les deux concident frquemment.
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9. Contrle de qualit9.1 Utiliser les souches du contrle pour apprcier la performance globale du test (Tableau 4). Les
souches recommandes sont des souches sensibles, mais des souches rsistantes peuvent tre galement employes pour confirmer que la mthode dtecte un mcanisme de rsistance connu (Tableau 5). Ces souches sachtent soit dans les collections soit dans le commerce.
9.2 Conserver les souches dans des conditions qui maintiennent la fois leur vitalit et leurs caractristiques. Une mthode pratique consiste les conserver sur billes de verre -70C en bouillon glycrol (ou quivalent commercial). Pour les bactries autres que celles croissance lente, on peut les conserver -20C. Deux tubes de chaque souche de contrle doivent tre conservs, lun est le tube en cours (en service) lautre est le tube archiv pour fournir ultrieurement un nouveau tube en cours si besoin.
9.3 Chaque semaine, repiquer une bille du tube en cours sur un milieu non slectif et vrifier la puret. A partir de cette culture, prparer autant de tubes de repiquage que de jours de la semaine travaills. Pour les bactries croissance lente qui ne survivront pas sur botes au-del de 5 6 jours, pratiquer un repiquage quotidien mais sans dpasser une semaine.
9.4 Les limites acceptables sont indiques dans :EUCAST Quality Control Tables.
9.5 Utiliser les souches recommandes en routine pour vrifier la performance de lessai. Les tests seront effectus quotidiennement au moins pour les antibiotiques utiliss en routine.Chaque jour, raliser le test et comparer les 20 derniers rsultats conscutifs.Observer les tendances et en particulier les rsultats constamment suprieurs ou infrieurs la moyenne. Si au moins 2 tests sont hors limites, enquter
9.6 Le contrle a lieu quotidiennement jusqu ce que la performance soit satisfaisante (pas plus dun test sur 20 en dehors des limites) ; la frquence du contrle peut ensuite devenir hebdomadaire, Si la performance est mauvaise, les causes doivent tre recherches.
9.7 En plus du contrle de routine, il convient de tester tout nouveau lot de MH et de sassurer que les zones dinhibition sont dans les limites requises. Des divergences inacceptables sobservent avec les aminosides (variation du taux de cations divalents dans le milieu), tigcycline (variation de la concentration en magnsium), trimthoprime-sulfamthoxazole (avec la concentration en thymine), macrolides (pH inadquat).
1. 3. Contrle de qualit interne
Tableau 4Souches du contrle de qualit en routine
Organisme Souche Caractristiques de la soucheEscherichia coli ATCC 25922
NCTC 12241CIP 7624DSM 1103CCUG 17620CECT 434
Sensible
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853NCTC 12934 CIP 76110DSM 1117CCUG 17619CECT 108
Sensible
Staphylococcus aureus ATCC 29213NCTC 12973CIP 103429 DSM 2569CCUG 15915CECT 794
Faible production de -lactamase
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Tableau 4 (suite)Souches du contrle de qualit en routine
Organisme Souche Caractristiques de la soucheEnterococcus faecalis ATCC 29212
NCTC 12697CIP 103214 DSM 2570CCUG 9997CECT 795
Sensible
Streptococcus pneumoniae ATCC 49619NCTC 12977CIP 104340DSM 11967CCUG 33638
Intermdiaire la Pnicilline G
Haemophilus influenzae NCTC 8468CIP 5494CCUG 23946
Sensible
Campylobacter jejuni ATCC 33560NCTC 11351CIP 702DSM 4688 CCUG 11284
Sensible, souche sauvagePour les conditions mthodologiques, se reporter lannexe A
Tableau 5Souches complmentaires du contrle de qualit pour la dtection de mcanismes de rsistance
spcifiquesOrganisme Souche Caractristiques de la soucheEscherichia coli ATCC 35218
NCTC 11954CIP 102181DSM 5564CCUG 30600CECT 943
-lactamase TEM-1, rsistant lampicilline
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603NCTC 13368CCUG 45421CECT 7787
BLSE (SHV-18)
Staphylococcus aureus NCTC 1249 Htrorsistante loxacilline, mecA Enterococcus faecalis ATCC 51299
NCTC 13379CIP 104676DSM 12956CCUG 34289
Rsistante haut niveau aux aminosides et la vancomycine (vanB)
Haemophilus influenzae ATCC 49247NCTC 12699CIP 104604DSM 9999CCUG 26214
Rsistance lampicilline sans production de -lactamase (BLNAR)
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1.3.1. Staphylococcusaureus ATCC 29213 (NCTC 12973 ; CIP 103429)(Souche faiblement productrice de bta-lactamase)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesAcide fusidique 0,12 0,06-0,25 10 29 26-32Amikacine 2 1-4 30 21 18-24Ampicilline - - 2 18 15-21Azithromycine 1 0,5-2 - -Cfoxitine 2 1-4 30 27 24-30
Ceftaroline 0,25 0,12-0,5 5 27 24-30Chloramphnicol 4-8 2-16 30 24 20-28Ciprofloxacine 0,25 0,12-0,5 5 24 21-27Clarithromycine 0,25 0,12-0,5 - -Clindamycine 0,12 0,06-0,25 2 26 23-29Daptomycine 0,25-0,5 0,12-1 - -Doxycycline 0,25 0,12-0,5 - -Erythromycine 0,5 0,25-1 15 26 23-29Fosfomycine 1-2 0,5-4 - -Gentamicine 0,25-0,5 0,12-1 10 22 19-25Lvofloxacine 0,12-0,25 0,06-0,5 5 26 23-29Linzolide 2 1-4 10 24 21-27Minocycline 0,12-0,25 0,06-0.5 30 26 23-29Moxifloxacine 0,03-0,06 0,015-0,12 5 28 25-31Mupirocine 0,12 0,06-0,25 200 34 31-37Ntilmicine
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1.3.2. Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 (NCTC 12977 ; CIP 104340). (Souche de sensibilit intermdiaire la pnicilline)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesAmoxicilline 0,06 0,03-0,12 - - -Ampicilline 0,12 0,06-0,25 2 28 25-31Azithromycine 0,12 0,06-0,25 - - -Pnicilline G 0,5 0,25-1 1 unit 19 16-22Cfaclor 2 1-4 30 28 25-31
Cfpime 0,06-0,12 0,03-0,25 30 34 31-37Cfotaxime 0,06 0,03-0,12 5 31 28-34Cefpodoxime 0,06 0,03-012 10 32 29-35Ceftaroline 0,015 0,008-0,03 5 EC ECCeftriaxone 0,06 0,03-0,12 30 35 32-38Cfuroxime 0,5 0,25-1 30 31 28-34Chloramphnicol 4 2-8 30 27 24-30Ciprofloxacine - - 5 25 22-28Clarithromycine 0,06 0,03-0,12 - - -Clindamycine 0,06 0,03-0,12 2 25 22-28Daptomycine 0,12-0,25 0,06-0,5 - - -Doripnme 0,06 0,03-0,12 10 34 31-37Doxycycline 0,03-0,06 0,015-0,12 - - -Ertapnme 0,06-0,12 0,03-0,25 10 31 28-34Erythromycine 0,06 0,03-0,12 15 29 26-32Imipnme 0,06 0,03-0,12 10 38 34-42Lvofloxacine 1 0,5-2 5 24 21-27Linzolide 0,5-1 0,25-2 10 26 23-29Mropnme 0,12 0,06-0,25 10 34 30-38Minocycline - - 30 28 25-31Moxifloxacine 0,12 0,06-0,25 5 27 24-30Nitrofurantoine 8 4-16 100 28 25-31Norfloxacine 4 2-8 10 21 18-24Ofloxacine 2 1-4 5 21 18-24Oxacilline - - 1 11 8-14Rifampicine 0,03 0,015-0,06 5 29 26-32Teicoplanine - - 30 21 18-24Tlithromycine 0,008-0,015 0,004-0,03 15 30 27-33Ttracycline 0,12-025 0,06-0,5 30 31 28-34Tigcycline 0,03-0,06 0,015-0,12 15 27 24-30
Trimthoprimesulfamthoxazole
0,25/4,75-0,5/9,5
0,12/2,4-1/19 1,25/23,75 23 20-26
Vancomycine 0,25 0,12-0,5 5 20 17-23
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1.3.3. Enterococcusfaecalis ATCC 29212 (NCTC 12697 ; CIP 103214)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesAmpicilline 1 0,5-2 2 18 15-21Gentamicine 8 4-16 301 15 12-18Imipnme 1 0,5-2 10 27 24-30Linzolide 2 1-4 10 22 19-25Nitrofuranes 8 4-16 100 21 18-24
Quinupristinedalfopristine
4 2-8 15 14 11-17
Teicoplanine 0,5 0,25-1 30 18 15-21Tigcycline 0,06 0,03-0,12 15 23 20-26Trimthoprime 0,25 0,12-0,5 5 28 24-32Timthoprime-sulfamthoxazole
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1.3.4. Haemophilusinfluenzae NCTC 8468 (CIP 54.94)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesAmoxicilline-acide clavulanique
- - 2-1 22 17-23
Ampicilline - - 2 22 19-25Pnicilline G - - 1 unit 16 13-19Cfaclor - - 30 27 24-30Cfpime - - 30 32 29-35
Cfixime - - 5 30 27-33Cfotaxime - - 5 32 29-35Cefpodoxime - - 10 31 28-34Ceftaroline - - 5 - -Ceftibutne - - 30 33 30-36Ceftriaxone - - 30 37 33-41Cfuroxime - - 30 28 25-31Chloramphnicol - - 30 34 30-38Ciprofloxaxine - - 5 35 31-39Doripnme - - 10 29 26-32Ertapnme - - 10 30 27-33Erythromycine - - 15 15 12-18Imipnme - - 10 28 25-31Lvofloxacine - - 5 35 32-38Mropnme - - 10 31 28-34Minocycline - - 30 30 27-33Moxifloxacine - - 5 32 29-35Acide nalidixique - - 30 30 27-33Ofloxacine - - 5 33 30-36Rifampicine - - 5 23 20-26Tlithomycine - - 15 18 15-21Ttracycline - - 30 31 28-34Trimthoprime-sulfamthoxazole
- - 1,25/23,75 30 26-34
1.3.5. Campylobacterjejuni ATCC 33560 (NCTC 11351 ; CIP702)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesCiprofloxacine - - 5 38 34-42Erythromycine - - 15 31 27-35Ttracycline - - 30 34 30-38
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1.3.6.Escherichiacoli ATCC 25922 (NCTC 12241 ; CIP 76.24)
Antibiotiques CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesAmikacine 1-2 0,5-4 30 23 19-26Amoxicilline 4 2-8 - - -Amoxicilline-acide clavulanique
4/2 2/1-8/41 20/10 21 18-24
Ampicilline 4 2-8 10 19 16-22Ampicilline-sulbactam 4/2 2/1-8/41 10/10 22 19-24
Aztronam 0,12 0,06-0,25 30 32 28-36CfadroxIl 30 17 14-20Cfalexine 8 4-16 30 18 15-21Cfpime 0,03-0,06 0,015-0,12 30 34 31-37Cfixime 0,5 0,25-1 5 25 23-27Cfotaxime 0,06 0,03-0,12 5 28 25-31Cfoxitine 4 2-8 30 26 23-29Cefpodoxime 0,5 0,25-1 10 26 23-28Ceftaroline 0,06 0,03-0,12 5 27 24-30Ceftazidime 0,12-0,25 0,06-0,5 10 26 23-29Ceftibutene 0,25 0,12-0,5 30 31 27-35Ceftriaxone 0,06 0,03-0,12 30 32 29-35Cfuroxime 4 2-8 30 23 20-26Chloramphnicol 4 2-8 30 24 21-27Ciprofloxacine 0,008 0,004-0,015 5 35 30-40Colistine 0,5-1 0,25-2 - - -Doripnme 0,03 0,015-0,06 10 31 27-35Ertapnme 0,008 0,004-0,015 10 33 29-36Fosfomycine 1 0,5-2 - - -Gentamicine 0,5 0,25-1 10 29 26-32Imipnme 0,12 0,06-0,25 10 29 26-32-Lvofloxacine 0,015-0,03 0,008-0,06 5 33 29-37Mcillinam 0,06-0,12 0,03-0,25 10 27 24-30Mropnme 0,015-0,03 0,008-0,06 10 31 28-34Acide nalidixique 2 1-4 30 25 22-28Ntilmicine
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Antibiotiques(suite)
CMI (mg/L) Charge du disque
Diamtres dinhibition (mm)Cible Limites
acceptablesCible Limites
acceptablesTicarcilline-acide clavulanique
8/2 4/2-16/2 75/10 27 24-30
Tigcycline 0,12 0,03-0,25 15 24 20-27Tobramycine 0,5 0,25-1 10 22 18-26Trimthoprime 1 0,5-2 5 25 21-28Trimthoprime - sulfamthoxazolele
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2. RESISTANCES NATURELLES AUX ANTIBIOTIQUES DES PRINCIPALES ESPECES BACTERIENNES DINTERET MEDICAL
La rsistance naturelle est caractristique dune espce bactrienne. Elle dlimite le spectre naturel de lantibiotique et constitue une aide lidentification. La rsistance naturelle se traduit habituellement par des CMI suprieures la valeur critique basse de concentration (c) de lantibiotique concern. Les quelques souches apparemment sensibles aux antibiotiques auxquels lespce est naturellement rsistante devraient donc tre interprtes I .
2. 1. Bacilles Gram ngatif non exigeantsPnicilline G, oxacilline, macrolides, ktolides, lincosamides, streptogramines, acide fusidique, glycopeptides, oxazolidinones, lipopeptides.
2.1.1. Entrobactries
Tableau IV Rsistance naturelle chez les entrobactries.
Espces AM AMC TIC/PIP
C1G FOX MA CXM GM TET COL FT
Klebsiella spp.E. hermaniiC. koseriC. freundiiE. cloacaeE. aerogenesH. alveiS. marcescensP. mirabilisP. vulgaris, P. penneriM. morganiiP. stuartiiP. rettgeriY. enterocolitica
RRRRRRRR
RRRRR
RRRRR
RRRR
RRR
R
RRRRR
RRRRR
RRR
R
R
R
R
R
RR
R
R
RR
RR
RRRRRR
RRRRR
R : rsistance naturelleAM : aminopnicillines ; AMC : amoxicilline + acide clavulanique ; TIC : ticarcilline ; PIP : pipracillineC1G : cphalosporines de 1re gnration ; FOX : cfoxitine ; MA : cfamandole ; CXM : cfuroxime ;GM : gentamicine ; TET : ttracyclines y compris la tigcycline ; COL : colistine, polymyxine B ; FT : nitrofuranes.
2.1.2. Aeromonas
Aminopnicillines (sauf Aeromonas trota), cphalosporines de 1ere et de 2eme gnration (sauf Aeromonas veronii), ertapnme.
2.1.3. Bacilles Gram ngatif non fermentaires
Tableau V Rsistance naturelle chez les bacilles Gram ngatif non fermentaires.
Espces TIC TCC PIP CTX CAZ IPM QUI C TMP FOS COLS. maltophiliaB. cepaciaA. denitrificansC. meningosepticumO. anthropi
RR
RR
R
RR
R
RR
R
RRR
RR
RR
R
R
R
RRR
RR R
R
R : rsistance naturelleTIC : ticarcilline ; TCC : ticarcilline + ac. clavulanique ; PIP: pipracilline ; CTX: cfotaxime ; CAZ : ceftazidime ;IPM : imipnme ; QUI : quinolones; C : chloramphnicol ; TMP: trimthoprime ; FOS : fosfomycine ;COL : colistine, polymyxine B.
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Pseudomonas aeruginosa : aminopnicillines, cphalosporines 1re et 2me gnration, cfixime, cfuroxime, cfotaxime, ceftriaxone, ertapnme, kanamycine, ttracyclines, chloramphnicol, trimthoprime, quinolones.Acinetobacter baumannii, Acinetobacter calcoaceticus : aminopnicillines, aztronam, cphalosporines 1ere et 2eme gnration, ertapnme, fosfomycine, trimthoprime, furanes.
S. maltophiliaLa rsistance intrinsque aux aminosides est observe uniquement aprs incubation 30C. Interprter I, un rsultat S obtenu aprs incubation 37 C.
Autres bacilles Gram ngatif non fermentaires : aminopnicillines, cphalosporines 1re et 2me gnration, ertapnme. Voir aussi le tableau V.
2. 2. Bacilles Gram ngatif exigeants
Haemophilus : macrolides (cycle 16 atomes : spiramycine, josamycine, midcamycine), lincosamides.Campylobacter : aztronam, novobiocine, streptogramines, trimthoprime, glycopeptides.Campylobacter jejuni , Campylobacter coli et Campylobacter lari : cphalosporines de 1re gnration.Campylobacter fetus et Campylobacter lari : quinolones.
2. 3. Coques Gram positif
Mcillinam, aztronam, quinolones, colistine.
Staphylococcus saprophyticus : fosfomycine, novobiocine.Staphylococcus cohnii et Staphylococcus xylosus : novobiocine, lincomycine.Micrococcus : furanes.Streptococcus (dont Streptococcus pneumoniae) : aminoglycosides (bas niveau), pfloxacine.Enterococcus : oxacilline, cphalosporines, ertapnme, aminosides (bas niveau), pfloxacine, fosfomycine (bas niveau), sulfamides.Enterococcus faecalis : lincosamides, streptogramines A.Enterococcus gallinarum - Enterococcus casseliflavus / flavescens : vancomycine.Pediococcus Leuconostoc : glycopeptides.
2. 4. Bacilles Gram positif
Mcillinam, aztronam, colistine, polymyxine B, quinolones.
Listeria monocytogenes : oxacilline, cphalosporines, lincosamides, fosfomycine, fluoroquinolones (bas niveau).Erysipelothrix rhusiopathiae : glycopeptides.Corynebacterium urealyticum - Corynebacterium jeikeium : bta-lactamines, aminosides, macrolides, lincosamides, sulfamides.Rhodococcus equi : streptogramines, lincosamides.Bacillus cereus : pnicilline G, amino- et carboxy- pnicillines, cphalosporines.Nocardia asteroides Nocardia farcinica : trimthoprime, vancomycine, rifampicine, fluoroquinolones.Lactobacillus : sulfamides.Lactobacillus htrofermentaires : glycopeptides.
2. 5. Coques Gram ngatif
Neisseria : trimthoprime, glycopeptides.Neisseria meningitidis - Neisseria gonorrhoeae : lincosamides, colistine, polymyxine B.Branhamella catarrhalis : lincosamides, trimthoprime.Moraxella : trimthoprime.
2. 6. Bactries anarobies strictesAminosides, aztronam (sauf Fusobacterium), trimthoprime, quinolones.
Bacteroides du groupe fragilis : aminopnicillines, cphalosporines 1re gnration, cfamandole, cfuroxime, colistine, polymyxine B, glycopeptides, fosfomycine.Prevotella : glycopeptides, fosfomycine.Porphyromonas : fosfomycine, colistine, polymyxine B.Fusobacterium : macrolides (bas niveau) .
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Fusobacterium varium - Fusobacterium mortiferum : rifampicine.Clostridium - Eubacterium Peptostreptococcus : colistine, polymyxine B, fosfomycine.Clostridium difficile : cphalosporines.Clostridium innocuum : vancomycine (bas niveau).Actinomyces Propionibacterium : cphalosporines 1re gnration, nitroimidazoles,ornidazole.Mobiluncus : nitroimidazoles.Veillonella : macrolides (bas niveau), glycopeptides.
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V.1.0 MAI 2014 Concentrations critiques PK/PD
3. CONCENTRATIONS CRITIQUES PK/PD, NON RELIES UNE ESPECE Ces concentrations critiques ne doivent pas tre utilises quand il existe des concentrations critiques despces, telles que des valeurs chiffres dans les tableaux, ou lorsquapparait -.
PnicillinesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes
S R >Benzylpnicilline (pnicilline G) 0,25 2 Les concentrations critiques non spcifiques S/I et I/R sont fondes sur des posolgies de 600 mg x 4 (2,4 g/j)
et 2,4 g x 4 (14,4 g/j), respectivement.Ampicilline 2 8 Les concentrations critiques non spcifiques sont fondes sur des posologies d'au moins 0,5 g x 3-4 (1,5-2
g/j)Ampicilline-sulbactam 2 8 En prparationAmoxicilline 2 8 Les concentrations critiques non spcifiques sont fondes sur des posologies d'au moins 0,5 g x 3-4 (1,5-2
g/j)Amoxicilline-acide clavulanique 2 8 En prparationPipracilline 4 16Pipracilline-tazobactam 4 16 Les concentrations critiques s'appliquent pour des posologies de pipracilline-tazobactam de 4 g x 3Ticarcilline 8 16Ticarcilline-acide clavulanique 8 16
Phnoxymthylpnicilline EPI EPI
Oxacilline EPI EPICloxacilline EPI EPIDicloxacilline EPI EPIFlucloxacilline EPI EPI
Mecillinam EPI EPI
24
24
V.1.0 MAI 2014 Concentrations critiques PK/PD
CphalosporinesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes
S R >Cfaclor EPI EPICfadroxil EPI EPICfalexine EPI EPICfazoline 1 2 En prparation.Cfpime 4 8 Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne d'au moins 2 g x 2 et une
forte dose d'au moins 2g x 3.Cfixime EPI EPICfotaxime 1 2 Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne d' 1 g x 3 et une forte
dose d'au moins 2g x 3.Cfoxitine EPI EPICefpodoxime EPI EPICeftaroline 0,5 0,5 Bas sur une cible PK/PD pour les bactries Gram ngatif. Les concentrations critiques s'appliquent pour
une perfusion quotidienne d'1h de 600 mg x 2.Ceftazidime 4 8 Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne d'1g x 3 et une forte dose
d'au moins 2 g x 3.Ceftibuten EPI EPICeftriaxone 1 2 Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne de 1 g x 1 et une forte
dose d'au moins 2 g x 1.Cfuroxime iv 4 8 Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne de 750 mg x 3 et une forte
dose d'au moins 1,5 g x 3.Cfuroxime oral EPI EPI Les concentrations critiques s'appliquent pour une dose intraveineuse quotidienne de 1 g x 1 et une forte
dose.
25
25
V.1.0 MAI 2014 Concentrations critiques PK/PD
CarbapnmesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies indiques
S R >Doripnme 1 2 La concentration critique infrieure correspond au doripnme 500 mg x 3 / j administr en perfusion
intraveineuse d1 heure.La concentration critique suprieure correspond une posologie de 1000 mg x 3 / j administre en perfusion intraveineuse de 4h, qui doit tre utilise pour les infections svres.
Ertapnme 0,5 1 Les concentrations critiques s'appliquent pour l'ertapnme 1000 mg x 1 / j par jour administr en perfusion intraveineuse de 30 min. en dose unique.
Imipnme 2 8 La concentration critique infrieure correspond limipnme 500 mg x 4 / j administr en perfusion intraveineuse de 30 min. La concentration critique suprieure correspond une posologie de 1g x 4 / j qui doit tre utilise pour les infections svres.
Meropnme 2 8 Les concentrations critiques sappliquent pour le mropnme 1000 mg x 3 / J administr en perfusion intraveineuse de 30 min. pour la dose la plus faible. Une posologie de 2g x 3 / j a t prise en compte pour tablir la concentration critique suprieure et doit tre utilise pour les infections svres.
MonobactamesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes (voir section 8 dans les documents justificatifs)
S R >Aztronam 4 8 En prparation.
FluoroquinolonesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes (voir section 8 dans les documents justificatifs)
S R >Ciprofloxacine 0,5 1 Les concentrations critiques s'appliquent pour une posologie orale de 500 mg x 2 (ou 250 mg x 2 pour les infections
urinaires non compliques), jusqu' 750 mg x 2, et une posologie intraveineuse de 400 mg x 2 jusqu' 400 mg x 3. Lvofloxacine 1 2 Les concentrations critiques s'appliquent pour une posologie orale de 500 mg x 1 500 mg x 2 et une
posologie intraveineuse de 500 mg x 1 500 mg x 2.Moxifloxacine 0,5 1 Les concentrations critiques s'appliquent pour une posologie orale et intraveineuse 400 mg x 1.Acide nalidixique EPI EPINorfloxacine 0,5 1 Les concentrations critiques s'appliquent pour une posologie orale de 400 mg x 2.Ofloxacine 0,5 1 Les concentrations critiques s'appliquent pour une posologie orale de 200 mg x 2 400 mg x 2 et une
posologie intraveineuse de 200 mg x 2 400 mg x 2.
26
26
V.1.0 MAI 2014 Concentrations critiques PK/PD
AminoglycosidesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes
S R >Amikacine 8 16 Les concentrations critiques s'appliquent pour des posologies intraveineuses d'amikacine de 15 mg/kg/jour.
En l'absence de donnes PK/PD, celles-ci ont t dtermines sur la base de la PK et des concentrations critiques pr-existantes.
Gentamicine 2 4 Les concentrations critiques sappliquent pour des posologies intraveineuses de gentamicine de 3-4,5 mg/kg/jour. En labsence de donnes PK/PD, celles-ci ont t essentiellement dtermines sur la base de la PK et des concentrations critiques pr-existantes.
Netilmicine 2 4 Les concentrations critiques sappliquent pour des posologies intraveineuses de netilmicine de 4-6 mg/kg/jour. En labsence de donnes PK/PD, celles-ci ont t essentiellement dtermines sur la base de la PK et des concentrations critiques pr-existantes.
Tobramycine 2 4 Les concentrations critiques sappliquent pour des posologies intraveineuses de tobramycine de 3-4,5 mg/kg/jour. En labsence de donnes PK/PD, celles-ci ont t essentiellement dtermines sur la base de la PK et des concentrations critiques pr-existantes.
GlycopeptidesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes (voir section 8 dans les documents justificatifs)
S R >Teicoplanine EPI EPITelavancine EPI EPIVancomycine EPI EPI
Macrolides, lincosamides et streptogramines
Concentrationscritiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes (voir section 8 dans les documents justificatifs)
S R >Azithromycine EPI EPIClarithromycine EPI EPIErythromycine EPI EPIRoxithromycine EPI EPITlithromycine EPI EPI
Clindamycine EPI EPIQuinupristine/dalfopristine EPI EPI
27
27
V.1.0 MAI 2014 Concentrations critiques PK/PD
TtracyclinesConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes
S R >Doxycycline EPI EPIMinocycline EPI EPITtracycline EPI EPITigcycline 0,25 0,5 Les concentrations critiques s'appliquent pour la tigcycline intraveineuse la posologie de 100 mg suivie
de 50 mg toutes les 12 heures pour les infections de la peau et des tissus mous et des infections intra-abdominales compliques.
DiversConcentrations
critiques(mg/L)
Les concentrations critiques PK/PD sont fondes sur les posologies suivantes
S R >Chloramphnicol EPI EPIColistine EPI EPIDaptomycine EPI EPIFosfomycine iv EPI EPIFosfomycine orale EPI EPIAcide fusidique EPI EPILinzolide 2 4 Les concentrations critiques s'appliquent pour le linzolide la posologie orale et intraveineuse de 600 mg x 2.Mtronidazole EPI EPIMupirocine EPI EPINitrofurantoine EPI EPIRifampicine EPI EPISpectinomycine EPI EPITrimthoprime EPI EPITrimthoprime-sulfamthoxazole EPI EPI
28
28
V.1.0 MAI 2014
4. TAB
LEA
UX
DE
S C
ON
CE
NTR
ATIO
NS
CR
ITIQU
ES
PO
UR
LINTE
RP
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TATIO
N D
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CM
I ET D
ES
D
IAM
TR
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CR
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ES
DE
S ZO
NE
S D
INH
IBITIO
N
NO
TES
1. Les tableaux C
A-S
FM / E
UC
AS
T des concentrations critiques cliniques contiennent galement les
diamtres des zones dinhibition correspondantes.
2. Les concentrations critiques P
K/P
D (non relies une espce) sont listes sparm
ent sur la dernire page.
3. Les astrisques sous form
e de chiffres sont relatifs aux concentrations critiques. Les astrisques sous form
e de lettres sont relatifs aux diamtres critiques.
4. U
n diamtre critique exprim
S 50 m
m est un diam
tre critique arbitrairement choisi hors chelle
afin de correspondre des situations de concentrations critiques pour lesquelles les souches sauvages sont catgorises interm
diaires (cest dire quil nexiste pas de souches pleinement sensibles).
5. A
fin de simplifier les tableaux C
A-S
FM / E
UC
AS
T, la catgorie intermdiaire nest pas liste. E
lle est interprte com
me tant la valeur entre les concentrations critiques S
et R. P
ar exemple, pour
des concentrations critiques prsentes S 1 m
g/L et R > 8 m
g/L, la catgorie intermdiaire est 2-8
(techniquement >1-8). P
our des diamtres critiques prsents S
22 mm
et R < 18 m
m, la catgorie
intermdiaire est 18-21 m
m.
6. P
our les couples Stenotrophom
onas maltophilia et trim
thoprime-sulfam
thoxazole, S. aureus et pnicilline
G, ainsi que entrocoque et vancom
ycine, il est important de suivre les instructions de lecture spcifiques
ncessaires une interprtation correcte de la diffusion en milieu glos. D
es photographies avec des exem
ples de lecture sont prsentes la fin des tableaux de concentrations critiques correspondants. P
our les instructions de lecture gnrales et dautres instructions spcifiques, se rfrer au Guide de
Lecture CA
-SFM
/ EU
CA
ST.
7. P
our cfuroxime et fosfom
ycine, il existe des concentrations critiques pour les voies orales et intraveineuses.
8. P
our certaines espces, lEU
CA
ST ne propose pas encore de donnes de diam
tres critiques et de concentrations critiques. Le C
A-S
FM / E
UC
AS
T propose les donnes antrieures du CA
-SFM
, selon la m
thodologie initiale du CA
-SFM
2013 : gonocoques, mningocoques, bactries anarobies et
Cam
pylobacter spp.
9. - indique quil nest pas recom
mand de tester la sensibilit dans la m
esure ou lespce est peu sensible un traitem
ent avec cet antibiotique. Les souches peuvent tre dcrtes R dem
ble.
10. EP
I: lments de preuve insuffisants, signifie que les preuves de sensibilit de lespce en question
manquent pour envisager une utilisation en clinique. U
ne CM
I accompagne dun com
mentaire peut
apparatre mais sans catgorisation clinique S
ou R.
29
29
V.1.0 MAI 2014 Enterobacteriaceae
4. 1. Enterobacteriaceae
Mthode par diffusion en milieu glosMilieu de culture : glose Mueller-HintonInoculum : 0,5 McFarlandIncubation: atmosphre normale, 351C, 182hLecture : mesurer les diamtres dinhibition sur un fond noir clair par une lumire rflchie.Contrle de qualit : Escherichia coli ATCC 25922
Liste standard Liste complmentaire
AmpicillineAmoxicilline/acide clavulanique
TicarcillinePipracilline/tazobactamCefadroxyl ou cfalexine
CfoxitineCfotaxime ou ceftriaxone
CfiximeImipnme ou mropnme ou doripnme
AmikacineGentamicine
Acide nalidixiqueOfloxacine ou norfloxacine
CiprofloxacineCotrimoxazoleNitrofuranesFosfomycine
Ticarcilline/acide clavulaniquePipracillineMcillinamCfuroximeCeftazidimeCfpimeAztonamNetilmicine
TobramycineLvofloxacineMoxifloxacine
ChloramphnicolTigcycline
TrimthoprimeColistine
Azithromycine
30
30
V.1.0 MAI 2014 Enterobacteriaceae
Pnicillines I, II, IIIConcentrations
critiques(mg/L)
S R >
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R 4 mg/L sont rsistants la mticilline principalement du fait de la prsence d'un gne mec additionel. La mthode de diffusion en milieux glos permet la dtection de la rsistance la mticillne.
Cfoxitine (dpistage), staphylocoques coagulase ngative
Note3 Note3 30 26 24 3. Pour les staphylocoques coagulase ngative autre que S. lugdunensis, la dtermination de la CMI de la cfoxitine est moins fiable que la mthode de diffusion en milieu glos pour la dtection de la rsistance la mticilline.
Ceftaroline, S. aureus 14 14 5 21B 19B 4/B. Les S. aureus sensibles la mticilline sont sensibles la ceftaroline. Pour les S. aureus rsistants la mticilline avec des diamtres d'inhibition de la ceftaroline compris entre 19-21 mm, la CMI doit tre ralise pour dterminer la sensibilit.
Moxalactam (dpistage) S. aureus, S. lugdunensis,et S. saprophyticus
En cours En cours En cours
En cours
Moxalactam (dpistage) Staphylocoques coagulase ngative
En cours En cours En cours
En cours
Carbapnmes IConcentrations
critiques(mg/L)
S R >
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R 16 mg/l) est exceptionnelle. La sensibilt diminue est rare (prvalence de 1% chez S. aureus). Elle est dfinie par la prsence dune sous-population rsistante (caractre htrogne), qui rend difficile sa dtection in vitro.
La recherche dune sensibilit diminue aux glycopeptides (GISA) doit tre ralise pour toute souche de S. aureus en cas dutilisation thrapeutique envisage. Cette dtection ne doit pas tre ralise par diffusion en milieu glos. Elle peut tre effectue par la dtermination de la CMI par mthode de diffusion en gradient, par dilution en glose ou par microdilution en milieu liquide. Cependant, la prsence dune sous-population rsistante de S. aureus ntant pas dtecte par les mthodes autres que la microdilution en milieu liquide, un test de dtection complmentaire doit tre ralis.Si le test de dtection est ngatif (S. aureus non GISA) la CMI dtermine par diffusion en gradient peut tre rendue.Si le test de dtection est positif (S. aureus GISA), il convient de ne pas rendre la CMI au clinicien, en raison de la prsence dune sous-population rsistante. Rendre alors sensibilit diminue aux glycopeptides. La souche peut tre adresse utilement dans un centre rfrent pour confirmation par la mthode danalyse de population.
Les 3 mthodes de dtection complmentaires proposes sont les suivantes :- Test teico 5 : ensemensement dune glose Mueller-Hinton (MH) additionne de 5 mg/L de teicoplanine, par dpt de 10 l dune suspension de 6.108 UFC/ ml (Mc Farland 2), incubation 35-37C et lecture 24 et 48 heures. Un tmoin ngatif (S. aureus ATCC 25923) et un tmoin positif (Staphylococcus haemolyticus CIP 107204) sont utiliser. La sensibilit diminue est mise en vidence par la prsence de 4 colonies ou plus. - Macro bandelette : Test de sensibilit la teicoplanine et la vancomycine par diffusion en gradient (bandelettes) sur milieu cur-cerveau avec un inoculum McFarland 2. La sensibilit diminue est mise en vidence lorsque la croissance de la souche nest pas inhibe par 8 mg/l de vancomycine et de teicoplanine, ou par 12 mg/l de teicoplanine seule. - Mthodes en milieu liquide manuelle ou automatise : les souches de sensibilit diminue sont dtectes comme tant rsistantes.Teicoplanine S. aureus 2 2 NoteA NoteA A. La mthode de diffusion n'est pas utilisable car elle ne permet pas la diffrenciation
entre les souches sensibles de celles de sensibilit diminue aux glycopeptides ne faisant pas intervenir la prsence du gne vanA.
Teicoplanine, staphylocoques coagulase ngative
4 4 NoteA NoteA
Telavancine, SARM 1 1 NoteA NoteA
Vancomycine, S. aureus 2 2 NoteA NoteA
Vancomycine, staphylocoques coagulase ngative
2 2 NoteA NoteA
51
51
V.1.0 MAI 2014 Staphylococcus spp.
Macrolides, lincosamides et streptogramines
Concentrationscritiques(mg/L)
S R >
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R 128 mg/L ou une zone dinhibition
57
57
V.1.0 MAI 2014 Enterococcus spp.
AminosidesI(suite)
Concentrationscritiques(mg/L)
S R >
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R 512 mg/L ou une zone dinhibition
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
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disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
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disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R
Charge du
disque(g)
Diamtres critiques
(mm) S R