Recherche d’un effet préventif de l’association du PEG et d’un inhibiteurs de PDE4 dans un

modèle de troubles du développement alvéolaire

MASTER 2 CVHR

COUROUBLE Mélanie

Sous la direction de PH JARREAU et C MEHATS

Inserm U767Site Saint-Vincent de Paul

Inserm U841 Eq 06 Faculté de médecine-Créteil

Avril 2008

IntroductionIntroduction

• Dysplasie bronchopulmonaire (DBP): première description en 1967 par Northway

• Maladie pulmonaire chronique des prématurés

• Risque de DBP corrélé à l’âge gestationnel et au poids de naissance

• Incidence DBP :501-1500 g = 22%mais 501-750g = 46%

Fanaroff, AJOG 2007Jobe, AJRCCM 2001

IntroductionIntroduction

• Définition : ventilation et/ou oxygénodépendance à J28

• critère de sévérité : persistance de l’oxygénodépendance à 36SA d’âge corrigé

• Développement anormal alvéolaire et vasculaire

Jobe, AJRCCM 2001

Histologie de la DBPHistologie de la DBP

Nouveau-né prématuré

Développement normal

DBP

Peu d’alvéoles

structures alvéolaires larges

Capillaires dysmorphiques

Arrêt de l’alvéolisation Coalson, 2006Husain, 1998

Physiopathologie de la DBPPhysiopathologie de la DBP

DBP

Anténatal: Chorioamniotite - ventilation mécanique

- Infections/inflammation- Oxygène

Postnatal

Inflammation pulmonaire

agression

Immaturité pulmonaireFacteurs génétiques

Speer,2006Kinsella, 2006Jobe, 2001

cible thérapeutique+++

DBP

Postnatal

Inflammation pulmonaire

agressionagression

Immaturité pulmonaireFacteurs génétiques

Prévention and traitement de la Prévention and traitement de la DBPDBP

corticothérapiepostnatale

Stevenson, 2007Speer,2006Kinsella, 2006Jobe, 2001

- Ventilation optimisée- surfactant- adaptation SaO2

Anténatal: -corticothérapie-antibiothérapie

PDE4 inhibiteurs

DBP

Postnatal

Inflammation pulmonaire

agressionagression

Immaturité pulmonaireFacteurs génétiques

Prévention and traitement de la Prévention and traitement de la DBPDBP

corticothérapiepostnatale

Stevenson, 2007Speer,2006Kinsella, 2006Jobe, 2001

- Ventilation optimisée- surfactant- adaptation SaO2

Anténatal: -corticothérapie-antibiothérapie

↑survie

↑dégranulation

↑ production

d’ac. Arachidonique

↑ROS

↑LTC4

Phosphodiesterases 4 (PDE4)Phosphodiesterases 4 (PDE4)

Fan Chung, 2006

Pro-inflammatoire

PDE4

Neutrophile

Macrophage Lymphocytes T & B

EosinophileMastocyte

Fibroblaste

Muscle lisse

Cellule endothelial

e

Cellule épithelial

↑ROS

↑LTB4

↑chimiotactisme

↑IL8

↑phagocytose

↑dégranulation

↑IL2, IL4,IL5

↑proliferation

↑fibrosise

↑remodelage↑IL6, TNF

↑contraction

↑ TNF

↑LTB4

↑ production

d’ac. arachidonique

↓IL10

↑ Permeability vascular

↑ Adhesion protein expression

Phosphodiesterases 4 (PDE4)Phosphodiesterases 4 (PDE4)

•Étude Clinique : BPCO : phase III :

-Amélioration fonction respiratoire-Diminution de l’inflammation pulmonaire

Rabe, 2005Beavo, 2006Fan Chung, 2006Grootendorst, 2007

•inhibiteurs PDE4 : action anti-inflammatoire

rolipram

ATP cAMP 5’AMP

PDE4

modèle murin de DBPmodèle murin de DBP

• modèle hyperoxique

• modèle LPS intratrachéale

==> inflammation pulmonaire

défaut d’alvéolisation

Effets des inhibiteurs PDE4Effets des inhibiteurs PDE4

sur le modèle murin de DBPsur le modèle murin de DBP

rolipram

Augmentation de la Survie

effet anti-inflammatoire

Pas d’effet sur l’alvéolarisation

hyperoxie

Pas d’effet anti-inflammatoireeffect délétaire sur

l’alvéolarizationLPS

Effets des inhibiteurs PDE4Effets des inhibiteurs PDE4

sur le modèle murin de DBPsur le modèle murin de DBP

rolipram

Augmentation de la Survie

effet anti-inflammatoire

Pas d’effet sur l’alvéolisation

hyperoxie

Pas d’effet anti-inflammatoireeffet délétère sur

l’alvéolisationLPS

PEG LPS

!! Amélioration de l’alvéolisation

Pas d’effet anti-inflammatoire

Polyethylène glycol PEGPolyethylène glycol PEG

• polymère hydrosoluble

• Utilisé comme solvant du rolipram

• Possible activité de type matrice extra-cellulaire

• effets potentiels antiprolifératif et pro-apoptotique

Parnaud, 2001Karlsson, 2004Raeber, 2005

effets inh PDE4 et PEG sur des effets inh PDE4 et PEG sur des ratons exposés à l’hyperoxieratons exposés à l’hyperoxie

HYPOTHESE :

Action synergique des inh PDE4 et du PEG ?

• sur la survie

• sur l’inflammation

• et, le plus important sur l’alvéolisation

Ratons de typeSprague-Dawley

PEGPEG

+rolipram

Saline PEG Saline

normoxie hyperoxie

PEG+

rolipram

Protocole d’étudeProtocole d’étude

J0

HYPEROXIE / NORMOXIE

J6

sacrifice

J10

Supplémentation PEG 2.5%

+/- rolipram 0.25mg/kg

Ou sérum physio

Analyse de l’inflammation: LBA, cellularité, taux

de cytokines

Alvéolisation: morphométrie

Protocole d’étudeProtocole d’étude