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UMR CNRS 6022 Génie Enzymatique et Cellulaire (Directeur : A. Friboulet) ème 1 : Biocatalyse et Alternatives Métaboliques ème 2 : Biocatalyse supramoléculaire et anisotrope bolisme lipidique végétal (Dr. B. Thomasset) se et caractérisation de la diversité biocatalytique (Dr. B. Bihan-Aval ymères biomimétiques, impression moléculaire et nanostructuration (P des solides et systèmes biomimétiques (Pr. C. Sarazin) èles biomimétiques membranaires (Pr. S. Pulvin et Dr. S. Morandat)

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(Directeur : A. Friboulet)

Thème 1 : Biocatalyse et Alternatives Métaboliques

Thème 2 : Biocatalyse supramoléculaire et anisotrope

•Métabolisme lipidique végétal (Dr. B. Thomasset)

•Génèse et caractérisation de la diversité biocatalytique (Dr. B. Bihan-Avalle)

•Polymères biomimétiques, impression moléculaire et nanostructuration (Pr. K. Haupt)

•RMN des solides et systèmes biomimétiques (Pr. C. Sarazin)

•Modèles biomimétiques membranaires (Pr. S. Pulvin et Dr. S. Morandat)

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Equipe : Modèles biomimétiques membranaires

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La membrane biologique, un édifice très complexe

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mica

Eau

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Liposomes Monocouches de Langmuir

Bicouches supportées

Les modèles membranaires biomimétiques

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• Transfert par Langmuir-Blodgett

• Fusion de liposomes

Support Hydrophile Support Hydrophobe

La préparation des modèles lipidiques biomimétiques

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La technique d’analyse de choix : la microscopie à force atomique (AFM)

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Directive REACH (Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals) entrée en vigueur le 1er juin 2007 :

• évaluation de la toxicité de 30 000 substances chimiques, • et limitation de l’expérimentation animale au strict minimum.

Evaluation de la toxicité membranaire d’une substance à l’échelle nanométrique :

NANOTOXICITE

Collaboration avec Karim El Kirat (MCF, UMR CNRS 6600)

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Molécules Nanoparticules

• Antibiotiques• Antifongiques• Peptides associés à des maladies (virales comme HIV et grippe ou neurodégénératives comme Alzheimer, Creutzfeldt-Jacob …)• Détergents industriels• Pro- et anti-oxydants• …

• Dendrimères• Nanotubes de carbone• Fullerènes• Nanoparticules des moteurs diesel• Dioxyde de titane (peintures blanches, dentifrices, crêmes solaires, surfaces auto-nettoyantes... ) • …

Les toxiques à tester

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0’10’30’60’90’120 ’

- MORANDAT S. & EL KIRAT K. (2006), Membrane resistance to Triton X-100 explored by real-time atomic force microscopy, Langmuir 22, 5786-5791.

(20 x 20 µm²; z=10 nm)

Un détergent non ionique : le TX-100

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0'5'10'15'20'30'40'50'70'

(20 x 20 µm²; z=10 nm)

- MORANDAT S. & EL KIRAT K. (2006), Membrane resistance to Triton X-100 explored by real-time atomic force microscopy, Langmuir 22, 5786-5791.

Un détergent non ionique : le TX-100

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DOPC/SM1:1 (mol/mol)

DOPC/SM/Chol2:1:1 (mol/mol/mol)

(20 x 20 µm²; z=10 nm)

0 min 5 min 30 min 120 min

EL KIRAT K. & MORANDAT S. (2007), Cholesterol modulation of membrane resistance to Triton X-100 explored by atomic force microscopy, Biochim. Biophys. Acta 1768, 2300-9.

Effet sur les microdomaines membranaires

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A B

EL KIRAT K. & MORANDAT S. (2007), Cholesterol modulation of membrane resistance to Triton X-100 explored by atomic force microscopy, Biochim. Biophys. Acta 1768, 2300-9.

Effet sur les microdomaines membranaires

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(0,75 x 0,75 µm²; z=1,5 nm)

- EL KIRAT K., PARDO-JACQUES A. and MORANDAT S. (2007), Interaction of non-ionic detergents with biomembranes at the nanoscale observed by atomic force microscopy, Int. J Nanotechnology , in press.

Insertion du TX-100 et du Tween-20

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mica

A

B

i ii iii

- EL KIRAT K., PARDO-JACQUES A. and MORANDAT S. (2007), Interaction of non-ionic detergents with biomembranes at the nanoscale observed by atomic force microscopy, Int. J Nanotechnology , in press.

Insertion du TX-100 et du Tween-20

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pI = 10,6

Acides aminés basiquesAcides aminés acides

Hème

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- MORANDAT S. & EL KIRAT K. (2007), Real-time atomic force microscopy reveals cytochromec-induced alterations in neutral lipid bilayers, Langmuir, in press.

Une protéine soluble, le cyt c

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- MORANDAT S. & EL KIRAT K. (2007), Real-time atomic force microscopy reveals cytochrome c-induced alterations in neutral lipid bilayers, Langmuir, in press.

0’5’8’12’17’22’32’48’

Une protéine soluble, le cyt c

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- MORANDAT S. & EL KIRAT K. (2007), Solubilization of supported lipid membranes by octyl glucoside observed by time-lapse atomic force microscopy, Colloids Surf. B 55, 179-184.

0’3’7,5’10’15’20’30’40’

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(15 x 15 µm²; z=10 nm)

Un autre détergent non ionique : le -OG