Anomalies moléculaires dans les LAM à caryotype normal :

impact pronostique

Hervé Avet-Loiseau, Laboratoire d’HématologieCHU de Nantes

Falini et al., Blood 2007;109:874-885

Duplications en tandem (ITD), ou mutations ponctuelles

ITD: dimérisation du récepteur Activation constitutive

FLT3 ITD

Allèle sauvage à 332 pb Allèle avec ITD

FLT3 ITD + mutations

Anomalies fréquentes : ~ 30% ITD ds LAM-NK~ 10% mutations

Plus rares chez l’enfant

Anomalies sans doute secondaires

Anomalies instables (mauvais marqueur MRD)

Intérêt quantifier ratio ITD/WT ?

Inhibiteurs + spécifiques (PKC-412, CEP-701,…)

Figure 3. Clinical outcome for non-APL AML patients stratified according to FLT3/ITD and FLT3/TKD status. (A) CIR and (B) OS.

Mead et al., Blood 2007;110:1262-1270.

FLT3 ITD / mut FLT3

NPM1

Nucléophosmine : 5q35

Falini et al., Blood 2007;109:874-885

Mutations NPM1

Duplication 4 pb en position 956 (exon 12)

Perte signal localisation nucléolaire

Localisation cytoplasmique exclusive

~ 50% des LAM-NK

Pronostic favorable (si FLT3 ITD neg)

Marqueur intéressant pour MRD

Mutations NPM1

Allèle sauvage Allèle avec insertion

Brown, P. et al. Blood 2007;110:979-985

Mutations NPM1

Mutations CEBPA

CCAAT/enhancer-binding protein = CEBPA. 19q13

Facteur de transcription important pour granulopoièse

Mutations dans parties C- et N-terminales

~ 15% des LAM-NK

Gène difficile à séquencer.

Pronostic favorable.

Hyperexpression ERG

ERG = ETS-related gene, 21q22

Fig 2. Event-free survival (EFS) according to ERG expression levels in (A)FLT3-internal tandem duplication (ITD)–negative patients, (B) FLT3-ITD–positive patients, (B)(C) NPM1-mutated patients, and (D) NPM1-unmutated patients.

Marcucci et al. JCO 2007;25:3337-3343.

220 pts, < 60 ansLAM-NKPas d’allo

Fig 3. (A) Event-free survival (EFS) and (B) disease-free survival (DFS) according to ERG expression levels in FLT3-ITD–negative/NPM1-mutated patients.

Marcucci et al. JCO 2007;25:3337-3343.

Hyperexpression ERG

Conclusions

1- De + en + de données indépendantes : validité ?

2- Analyses moléculaires : indispensables dans LAM

3- Quelle stratégie d’analyse ?

Caryotype médullaire

Si Normal :FLT3 ITD et NPM1

Si FLT3 ITD neg:CEBPA, ERG, BAALC?

Conclusion

1- De + en + de données indépendantes : validité ?

2- Analyses moléculaires : indispensables dans LAM

3- Quelle stratégie d’analyse ?

4- Organisation des analyses ?

Moelle pour caryotype

Moelle pour ARN (% blastes)RQ-PCR, transcriptome

Moelle pour ADN (% blastes)

PCR, séquence, µarray

Plate-Formes d’Analyses Moléculaires

(Nationales? Interrégionales?)