Carte d’Identité MEtabolique(projet «CIME»)Henri_Benech).pdf · Résumé 8. 2D6 2C19 Génotype Génotype PL_01 1/1 Normal 1/17 Normal WM_03 1/4 Normal 1/17 Normal PM_05

Carte d’Identité MEtabolique (projet

« CIME ») :

« Pharmacocinétique des substrats du

cocktail CIME et premiers résultats

de phénotypage de sujets basé sur l'activité

d'enzymes (CYP et transporteurs) du

métabolisme des médicaments »

1

Henri BENECH

Institut de biologie et de tecnologies de Saclay

CEA

Plan

• Rappel du projet

• Essai clinique CIME1 – résultats plasmatiques• Objectifs

• Volontaires

• Tolérance

• Bioanalyse

• Profils plasmatiques

• Analyses pharmacocinétiques non compartimentales

• Observation des génotypes / phénotypes

• Publications/poster

•Conclusions

• Suites…CIME2…

2

0

20

40

60

80

100

120

140

160

A B C D E F G H I

Enzymes

% Activité

Cocktail de

substrats

Administration Analyse des échantillons

Échantillons : sang/urine/salive

Phénotype enzymes de la

DMPK

Per os

UPLC-MSMS

Intérêt de phénotyper:

- interactions médicamenteuses,

- effet de candidats médicaments,

- conditions particulières (âge, exposition à des toxiques

Utilisateurs :

- industrie pharmaceutique,- cliniciens. Analyse des données

• Pourquoi ? / Comment ?

12

3

2

31

CIME

3

0

20

40

60

80

100

120

140

160

A B C D E F G H I

Enzymes

% Activité

Cocktail de

substrats

Administration Analyse des échantillons

Échantillons : sang/urine/salive

Phénotype enzymes de la

DMPK

Per os

UPLC-MSMS

Intérêt de phénotyper:

- interactions médicamenteuses,

- effet de candidats médicaments,

- conditions particulières (âge, exposition à des toxiques

Utilisateurs :

- industrie pharmaceutique,- cliniciens. Analyse des données

• Pourquoi ? / Comment ?

12

3

2

31

CIME

4

CYP1A2 CYP2C8 CYP2C19 CYP2D6CYP3A4

Fonction réabsorption

tubulaire

Tolbutamide Omeprazole DextromethorphanMidazolam

Memantine

3OHrepaglinide

Repaglinide

4OHtolbutamide

5OHomeprazole

Omeprazole

sulfone3methoxymorphinan

DextrorphanAcetaminophen UGT

Acetaminophen

glucuronide

Paraxanthine

1OHmidazolam

Pgp Digoxine

OATP Rosuvastatine

Caféine

CYP2C9

• Choix enzymes/substrats:

Rappel

4OHmidazolam

5

Carte d’Identité Metabolique

(projet « CIME ») :

« Pharmacocinétique des substrats du

cocktail CIME et premiers résultats

de phénotypage de sujets basé sur l'activité

d'enzymes (CYP et transporteurs) du

métabolisme des médicaments »

6

Henri BENECH, Marcel DELAFORGE, Natacha LENUZZA, Gregory NICOLAS (CEA)

Essai clinique CIME1

Investigateur principal

Dr. Xavier Duval (CIC Bichat – Claude Bernard, Paris)

Promoteur : INSERM

Financement : CEA (programme Technologies Pour la santé : J. Grassi)

Experts extérieurs au CEA

Pr. Philippe Beaune, Pr. Laurent Becquemont, Pr. Christian Funck-Brentano, Pr

France Mentré

Objectif principal:Décrire la pharmacocinétique des 10 substrats du cocktail CIME et de leurs métabolites,

après administration unique et simultanée à des doses préétablies

Objectifs secondaires :- Etudier la tolérance clinique et biologique du cocktail des 10 substrats

- Evaluer l’adéquation des doses choisies

- Evaluer l’influence des génotypes sur la pharmacocinétique des substrats et de leurs

métabolites (en fonction des génotypes des volontaires inclus)

- Déterminer quels sont les temps de prélèvements qui apportent le maximum

d’information sur la pharmacocinétique d’un maximum de composés7

Présentation des volontaires

n=10 Unité Moyenne Médiane CV (%) Intervalle

Age années 31.5 31.5 24.5% [19-42]

Taille cm 173 172 5.5% [158-190]

Poids kg 69 69 13.5% [58-90]

BMI kg/m² 23.3 21.9 15.6% [19.9-29.7]

Genre 6 hommes, 4 femmes

Genre Age

(années)

Taille

(cm)

Poids

(kg)

BMI

(kg/m²)

Inclus le Administration le

PL_01 M 25 190 72.8 20.1 16/08/2010 23/08/2010

WM_03 F 30 161 73.3 28.2 10/09/2010 20/09/2010

PM_05 M 24 170 58.0 20.0 09/11/2010 30/11/2010

LV_07 M 38 183 69.3 20.5 02/12/2010 13/12/2010

PJ_08 M 40 176 69.3 22.2 06/12/2010 13/12/2010

BF_09 F 42 174 90 29.7 21/12/2010 17/01/2011

TT_13 M 33 170 62.5 21.6 17/02/2011 08/03/2011

PJ_14 F 19 173 73.1 24.4 18/02/2011 08/03/2011

CC_19 M 27 171 58.5 19.9 07/06/2011 27/06/2011

BN_18 F 37 158 65.0 26.0 16/08/2011 23/08/2011

Caractéristiques individuelles

Résumé

8

2D6 2C19

Génotype Génotype

PL_01 *1/*1 Normal *1/*17 Normal

WM_03 *1/*4 Normal *1/*17 Normal

PM_05 *1/*4 Normal *1/*1 Normal

LV_07 *4/*5 Lent *2/*17 Normal

FJ_08 *1/*6 Normal *1/*17 Normal

BF_09 *1/*1 Normal *1/*17 Normal

TT_13 *1/*1 Normal *1/*1 Normal

PJ_14 *1/*3 Normal *1/*1 Normal

CC_19 *1/*1 Normal *1/*1 Normal

BN_18 *1/*1 Normal *1/*1 Normal

9

Tableau sur les génotypes 2D6 et 2C19

10

- 19 points de

prélèvements

plasmatiques par

volontaire (temps : 0,

0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2,

2.5, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12,

24, 48, 72 h et 7 j)

11

Substrats

(forme sel de référence)

Doses choisies

du cocktail

Doses utilisées

dans d’autres

cocktails

Dose thérapeutique

maximale décrite chez

adultes

Ratio dose

cocktail/dose

thérapeutique

(%)

Acétaminophene

(ou Paracétamol)60 mg 1000 mg 6

Caféine 73 mg 50-200 mg 400 mg 18

Dextrométhorphane

(Bromohydrate)18 mg 30 mg 120 mg 15

Digoxine 0,25 mg 0.5 mg 0.5 mg 50

Mémantine (hydrochloride) 5 mg 20 mg 25

Midazolam

(maléate)4 mg 1,5-8 mg 15mg 40

Oméprazole (magnésium) 10 mg 20-40 mg 40mg 25

Repaglinide 0,25 mg 4 mg 6

Rosuvastatine (calcique) 5 mg 40 mg 25

Tolbutamide 10 mg 125-500 mg 500 mg 25

Tableau 7 : Comparaison des doses choisies des substrats du cocktail avec les doses utilisés dans d’autres cocktails et

leurs doses thérapeutiques.

Tolérance – Evénements indésirables

Adverse events Number of

patients

(n = 10)

Number of

episodes

Delay after

administration

Somnolence 8 8 40min - 6h

Dizziness 3 3 40min; 40min; 12h

Blood pressure drop 2 3 3h; 8h; 3h

Headache 2 1 7h; 48h

Euphoria 1 1 30min

Nausea 1 1 14h

Atrial extrasystole 1 1 8h30

Diarrhea 1 1 3h

Abdominal pain 1 1 48h

Tolérance – Evénements indésirables léger

modéré

E Relation avec CIME exclue

E E

E

Tolérance – Suivi biologique

Unit Baseline (n=10) End-point (n=10)

CARDIOVASCULAR SYSTEM

Sitting systolic blood pressure mmHg 122±12 [102; 144] 112±8 [101;125] *

Sitting diastolic blood pressure mmHg 73±11 [53; 91] 64±6 [55;74] *

Sitting pulsing rate bpm 67±6 [60; 78] 67±5 [60;75]

HEMATOLOGY

Prothrombine rate % 98 ±3 [91;100] 97±6 [83;100]

Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]

Red Blood Cells T/l 4.81±0.45 [4.09;5.50] 4.57±0.41 [3.90;5.10] *

Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *

Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *

Mean corpuscular volume fl 86.4±2.9 [82.9;92.0] 86.7±2.6 [84.1;92.0]

Mean corpuscular hemoglobin pg 29.8±1.3 [28.1;32.3] 29.8±1.2 [28.3;32.2]

Mean corpuscular hemoglogin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]

Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]

Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]

Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]

Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]

Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]

Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]

KIDNEY FUNCTION (BIOCHEMISTRY)

NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]

K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]

Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]

CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]

HEPATIC FUNCTION

SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]

SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]

Alcalin phosphatases U/l 62±15 [40;77] 63±15 [42;86]

Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]

Analyse statistique: comparaison des valeurs à V1 (inclusion) et à V6 (7 jours post-administration) par un t-test apparié







HEMATOLOGY


Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]


Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *

Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *



Mean corpuscular hemoglogin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]

Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]

Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]

Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]

Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]

Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]

Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]


NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]

K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]

Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]

CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]

HEPATIC FUNCTION

SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]

SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]


Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]


Différence non retrouvée

entre V2 (juste avant

administration) et V6







HEMATOLOGY


Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]


Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *

Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *



Mean corpuscular hemoglobin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]

Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]

Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]

Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]

Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]

Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]

Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]


NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]

K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]

Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]

CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]

HEPATIC FUNCTION

SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]

SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]


Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]


Valeurs individuels

normales

Tolérance – Suivi du système cardiovasculaire

Pression artérielle

Tolérance – Suivi du système cardiovasculaire

ECG

Fréquence cardiaque

Tolérance – Suivi spécifique Glycémie

Tolérance – Suivi spécifique

Digoxinémie (sur site à la pharmacie Bichat)

PK des 10 substrats du cocktail CIME et de leurs métabolites, après

administration unique et simultanée à des doses préétablies

Influence d’un génotype 2D6 lent sur la pharmacocinétique des substrats et de leurs métabolite

Bioanalyse des 10 substrats du

cocktail CIME et de leurs métabolites

22

Videau et al, RCMS 2010

Exemple de chromatogrammes:

23

Analyse des échantillons plasmatiques

Méthode mise au point et

validée sur un

ensemble

UPLC/Quattro

Premier XE (WATERS)

Videau et al, RCMS 2010

24

Analyse des échantillons plasmatiques

Transfert de la méthode

sans modification sur

un appareillage de

nouvelle génération

Xevo TQ (WATERS) en

2010

Dosage des échantilllons

plasmatiques de

l’étude clinique CIME1

Pourcentage d’ILQ (en excluant les T0)

Sans les T0

Volontaire Nb ILQ sur 24h

Nb ILQ sur 24h

(18 molécules) Nb ILQ total

Nb ILQ total

(18molécules)

Nb echantillons

total

Nb echantillons

total (18

molécules) % ILQ 24h %ILQ total

% ILQ 24h

(18molécules)

%ILQ total (18

molécules)

PL01 78 48 127 91 380 342 20.5 33.4 14.0 26.6

WM03 76 52 138 108 380 342 20.0 36.3 15.2 31.6

PM05 55 38 100 77 380 342 14.5 26.3 11.1 22.5

LV07 64 48 104 84 380 342 16.8 27.4 14.0 24.6

FJH08 71 41 117 81 380 342 18.7 30.8 12.0 23.7

BF09 84 54 129 93 380 342 22.1 33.9 15.8 27.2

TT13 62 38 126 96 380 342 16.3 33.2 11.1 28.1

PJ14 72 47 111 80 380 342 18.9 29.2 13.7 23.4

CC19 52 36 111 90 380 342 13.7 29.2 10.5 26.3

BN18 85 58 135 102 380 342 22.4 35.5 17.0 29.8

Nb total ILQ sur 24h

Nb total ILQ sur

24h (18

molécules) Nb Total ILQ

Nb total ILQ

(18 molécules Nb échantillons

Nb échantillons

(18 molécules)

% total ILQ sur

24h % total ILQ

% total ILQ sur

24h (18

molécules

% total ILQ

(18molécules)

699 460 1198 902 3800 3420 18.4 31.5 13.5 26.4

25

PK des composés CIME – Méthodologie (II)

Données manquantes (ie. sous la LOQ) :

mise à LOQ/2 de la première valeur sous la

LOQ après Cmax et de la dernière valeur sous

la LOQ avant Cmax. Les autres valeurs sous la

LOQ sont ignorées.

LOQ/2 supprimé

0 2 4 6 8

Time (h)

0

50

100

150

Con

cent

ratio

n (n

g/m

L)

OME - 1 OME - 7

Cime Clinical Trial Data (2011-10-28)

0 0.25 0.5 0.75 1 1.5 2 2.5 3 4 5 6 8 10 12 24 48 72 168

PL01 0 0 0 LOQ LOQ LOQ 0 0 0 0 0 0

LV07 LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ 0 0

Exemple de l’oméprazole pour 2 volontaires

PK des composés CIME – Méthodologie (III)

Données non nulles en t=0 (juste avant administration du cocktail):

0 5 10 15 20

Time (h)

200

400

600

800

1 000

1 200

1 400

Con

cent

ratio

n (n

g/m

L)

CAF - 8

Cime Trial

0 5 10 15 20

Time (h)

200

300

400

500

600

700

Con

cent

ratio

n (n

g/m

L)

CAFPAR - 8

Cime Trial

Suppression de la caféine résiduelle Suppression de la paraxanthine résiduelle+

Suppression de la paraxanthine produite par métabolisation de la caféine résiduelle

PK des composés CIME – Résultats (I)

• Paramètres PK calculés pour les 10 substrats et pour 7 métabolites sur 10.

3-métoxymorphinan et 4-hydroxymidazolam: détecté pour certains patients, mais pas assez dedonnées valides (i.e. >LOQ validée a priori)

3-hydroxyrépaglinide : problème d’identification par rapport au standard

0 2 4 6 8 10 12

Time (h)

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

Con

cent

ratio

n (n

g/m

L)

DEXMET - 1 DEXMET - 3 DEXMET - 5 DEXMET - 7 DEXMET - 8 DEXMET - 9 DEXMET - 13 DEXMET - 14 DEXMET - 19 DEXMET - 18


0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

Time (h)

0

0.5

1

1.5

Con

cent

ratio

n (n

g/m

L)

MID4OH - 1 MID4OH - 3 MID4OH - 5 MID4OH - 7 MID4OH - 8 MID4OH - 9 MID4OH - 13 MID4OH - 14 MID4OH - 19 MID4OH - 18


CYP1A2 CYP28 CYP2C19 CYP2D6CYP3A4

Fonction rénale

Tolbutamide Omeprazole DextromethorphanMidazolam

Mémantine

3OHrepaglinide

Repaglinide

4OHtolbutamide

5OH-

omeprazole

Omeprazole

sulfone3 –methoxy-

morphinan

Dextrorphan

Acetaminophen UGTAcetaminophen

glucuronide

Paraxanthine

1OHmidazolam

Pgp Digoxine

OATP Rosuvastatine

Caféine

CYP2C9

4OHmidazolam

3MM

4OHMDZ

28

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Cmax

(met)

AUC0-inf

(met)Rm

Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -

Moyenne 1091 4645 877 6459 0.73

Médiane 1057 4565 842 6408 0.68

CV 24% 28% 14% 15% 30%

Intervalle [732-1630] [2978-6461] [768-1085] [5082-7705] [0.45-1.10]29

UGT1A1/6/9

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Unité ng/ml ng.h/ml

Moyenne 0.532 10.07

Médiane 0.522 10.57

CV 36% 42%

Intervalle [0.274-0.849] [4.45-16.01]30

P-gp

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)


Moyenne 6.97 442

Médiane 7.05 451

CV 17% 17%

Intervalle [4.86-8.41] [303-557]31

Réabsorption tubulaire rénale

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Cmax

(met- 1OH)

AUC0-inf

(met-1OH)Rm


Moyenne 21.6 65.2 31.6 90.1 1.00

Médiane 21.0 59.6 33.2 85.3 0.73

CV 24% 38% 52% 51% 81%

Intervalle [13.9-31.8] [31.9-109.6] [9.67-56.1] [35.7-165.4] [0.34-2.48]32

CYP3A4

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Cmax

(met)*

AUC0-inf

(met)*Rm*


Moyenne 1.76 2.74 0.139 0.188 494

Médiane 1.66 2.49 0.129 0.183 482

CV 55% 57% 22% 32% 38%

Intervalle [0.52-3.66] [1.03-5.36] [0.110-0.189] [0.097-0.311] [276-833]33

*n=8

CYP2C8

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Cmax

(met)

AUC0-inf

(met)Rm


Moyenne 1323 14 039 7.11 103 146

Médiane 1317 13 347 6.23 110 124

CV 27% 27% 36% 24% 42%

Intervalle [790-1976] [8 976-21 017] [3.74-11.31] [69.2-135] [80.5-253]34

CYP2C9

Cmax

(sub)

AUC0-inf

(sub)

Cmax

(5OH)

AUC0-inf

(5OH)

Rm

(5OH)

Cmax

(sulfone)

AUC0-inf

(sulfone)

Rm

(sulfone)

Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml - ng/ml ng.h/ml -

Moyenne 101 174 100 220 0.81 30.1 96.7 1.91

Médiane 98.5 154 95.8 222 0.74 25.6 90.8 1.70

CV 45% 41% 43% 24% 38% 58% 43% 35%

Intervalle [36.7-172] [84.7-336] [40.9-160] [124-279] [0.48-1.33] [11.3-71.0] [47.1-198] [1.14-2.87]

35

CYP2C19

----- Homozygote sauvage (*1/*1) (5 patients)

----- Hétérozygote sauvage/muté (*1/*17) (4 patients)

----- Double muté (*2/*17) (1 patient)

CYP 2C19

LV_07

Cmax

(sub)

AUC0-inf

(sub)

Cmax

(dextrorphan)

AUC0-inf

(dextrorphan)Rm


Moyenne 2.44 76.33 5.21 28.27 13.62

Médiane 0.91 8.75 4.08 28.87 0.29

CV 148% 253% 58% 50% 307%

Intervalle [0.43-11.74] [2.18-622.45] [0.55-10.49] [4.70-47.71] [0.06-132]37

CYP2D6

----- Double muté (*4/*5) (1 patient)

----- Homozygote sauvage (*1/*1) (5 patients)

----- Hétérozygote Sauvage/mutés (*1/*3, *1/*4, *1/*6) (4 patients)

LV_07

38

CC_19

CC_19

• Détection des

génotypes particuliers à

partir du ratio

métabolique (sujet

LV_07)

• Information

supplémentaire à partir

de l’AUC du substrat

(sujet CC_19)

Absorption plus importante via une

faible activité de la P-gp et/ou du 3A4 au niveau

intestinal ?

39

P-gp assez active (plus les

concentrations plasmatiques

sont faibles et plus la P-gp est

active )3A4 peu actif (ratio

mdz/met élevé)

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)

Cmax

(met)AUC0-inf (met) Rm

Uniténg/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -

Moyenne 2064

(1973)17 691

(16 621)620

(554)10 873

(10 455)1.57

(1.53)

Médiane 1715

(1658)15 224

(14 800)679

(524)9 385

(8 322)1.49

(1.48)

CV 54%

(54%)69%

(67%)34%

(31%)48%

(49%)23%

(18%)

Intervalle [1472-5145]

[1292-4882][9 217-51 390]

[9 217-47 331][340-1023]

[340-859][7 472-25 046]

[7 472-23 646][0.98-2.11]

[1.16-2.00]

(données corrigées)

Avant correction

(Après correction)

id cMax auc0Inf

LV_07 4.74% 5.56%

FJ_08 12.26% 13.20%

BF_09 1.61% 1.63%

CC_19 19.49% 21.97%

BN_18 5.12% 7.90%

cMax auc0Inf Rm

LV_07 5.05% 4.64% 0.96%

FJ_08 16.91% 26.77% 18.53%

BF_09 6.37% 5.20% 3.77%

CC_19 - - -

BN_18 16.05% 5.59% 2.45%

caféine

paraxanthine

Différence relative entre

paramètres avant et après

correction

n=9 pour le métabolite,

données corrigées

CYP1A2

Cmax

(sub)AUC0-inf (sub)


Moyenne 5.32 66.2

Médiane 1.91 16.8

CV 208% 210%

Intervalle [1.09-36.8] [12.8-461]41

PL_01

OATP1B

(OATP-C, BCRP

43

1.Données salivaires confirment

le sujet « outliers » pour

dextromethorphan et caféine

mais pas rosuvastatine

1.Urines en cours.

44

2D6

(Dextromethorphan /

Dextrorphan)

2C8

AUC substrat

3A4

(Midazolam/

1OH-

Midazolam)

OATP1B1

( substrat)

Absorption

Dextromethorphan

Caffeine

(absorption)

PL_01 --PM_05 +LV_07 -- --PJ_14 -CC_19 - -- -- ++BN_18 -- ++

Objectif secondaire :

Quels sont les temps de prélèvements qui apportent le maximum

d’information sur la pharmacocinétique d’un maximum de composés ?

Temps de prélèvements informatifs – Corrélations simple point

• Stratégie 1: identification des points informatifs par corrélation linéaire entre la métrique complète (i.e.

Ratio AUCsub/AUCmet ou CLsub) et une métrique simple-point (i.e. Csub/Cmet ou Csub)

Metabolic ration (i.e. AUCsubstrate/AUCmetabolite) vs single-point

concentration ratio (Csubstrate/Cmetabolite)

(1) (2a) (2b) (3) (4) (5) (6) (7) p-value > 0.05

1A2 2D6 2D6 2C9 2C19 3A4 3A4 UGT p-value ≤ 0.05

0.5h nc nc nc nc nc nc p-value ≤ 0.01

0.75h nc nc nc nc nc p-value ≤ 0.001

1h nc nc nc nc nc nc not calculated

1.5h nc nc nc

2h * nc nc (1) caffein/paraxanthine

2.5h * * (2a) dextromethorphan/dextrorphan (all the volunteers)

3h * * (2b) dextromethorphan/dextrorphan (except CC19 and LV07)

4h * * (3) tolbutamide/4-oh-tolbutamide

5h * * nc nc (4) omeprazole/5-oh-omeprazole

6h * nc nc (5) midazolam/1-oh-midazolam

8h * nc nc nc nc nc (6) omeprazole/omeprazole sulfone

10h nc nc nc nc nc (7) acetaminophen/acetaminophen glucuronide

12h nc nc nc nc nc

24h nc nc nc nc nc nc nc

48h nc nc nc nc nc nc nc nc



Temps de prélèvements informatifs – Corrélations simple point

Clearance vs single-point concentration (substrate only)

(1) (2a) (2b) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) p-value > 0.05

1A2 2D6 2D6 2C9 2C19 3A4 2C8 UGT OATP Tub. Pgp p-value ≤ 0.05

0.5h nc nc p-value ≤ 0.01

0.75h nc p-value ≤ 0.001

1h nc nc nc not calculated

1.5h nc

2h nc (1) caffein

2.5h (2a) dextromethorphan(all the volunteers)

3h (2b) dextromethorphan(except CC19 and LV07)

4h nc (3) tolbutamide

5h nc nc (4) omeprazole

6h nc nc (5) midazolam

8h nc nc nc nc nc (6) repaglinide

10h nc nc nc nc nc (7) acetaminophen/acetaminophen glucuronide

12h nc nc nc nc nc (8) rosuvastatin

24h nc nc nc * nc nc nc nc (9) memantine

48h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc (10) digoxin

72h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc

168h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc

Stratégie inefficace pour identifier des points pertinents pour décrire l’AUC

Pas d’amélioration des résultats en recherchant des combinaisons de points par régression linéaire multiple

Perspectives/suites du projet :

1. Diminuation des doses du cocktail (� tests de

LC-MS/MS les plus récents ; WATERS)

2. Forme galénique : Bertin Pharma

3. Etude clinique CIME 2 à plusieurs segments

(inducteurs/inhibiteurs) : ANR Recherche Partenariale et

Innovation Biomédicale (RPIB ; dead-line 23 mars 2012)

� INSERM Promoteur?

4. Etude chez des patients : montrer que des patients

phénotypés ont un meilleur devenir que des patients

non phénotypés48

Temps de prélèvements informatifs – Approche de population (en cours)

• Stratégie 2: Etablissement d’un modèle de population

ke

kem

k21 k12

km

kaXa X

Xp

Xm

Dose

Modèle 2 compartiments pour le substrat, 1 compartiment pour le métabolite,

administration orale

Fixed effects Random effects

unit Estimate RSE Estimate RSE

Tlag h 0.114 15% 0.268 53%

ka /h 6.94 39% 0.964 29%

K /h 0.276 6% 0.168 27%

V L 49.5 6% 0.16 28%

k12 /h 0.0602 19% 0.387 39%

k21 /h 0.152 18% 0.323 52%

km/Vm /h /L 0.0178 4% 0.0931 31%

kem /h 0.572 5% 0.124 31%

Paramètres du modèle de population (Monolix) pour l’acétaminophène et

son métabolite

Population de référence

2 ou 3 points de

prélèvements pour

un nouveau patient

Paramètres PK (i.e.cinétique complète)

AUC substrat

AUC metabolite

Clairance

etc…

Documents

Carte d’Identité MEtabolique(projet «CIME»)Henri_Benech).pdf · Résumé 8. 2D6 2C19 Génotype Génotype PL_01 *1/*1 Normal *1/*17 Normal WM_03 *1/*4 Normal *1/*17 Normal PM_05

Carte d’Identité MEtabolique(projet «CIME»)Henri_Benech).pdf · Résumé 8. 2D6 2C19 Génotype Génotype PL_01 1/1 Normal 1/17 Normal WM_03 1/4 Normal 1/17 Normal PM_05