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CHROMATOGRAPHIES CHROMATOGRAPHIES ECHANGEUSES D’IONSECHANGEUSES D’IONS
Cours du Jeudi 17 Novembre 2011
SVI - STE
Professeur SAALAOUI.E
Schéma des techniques Schéma des techniques chromatographiqueschromatographiques
• NORMALE INVERSEENORMALE INVERSEEOH
OH
OH
OH
OH
OH
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
Polaires +++
Polaires + -
Polaires -Elu
tion
avec P
hase m
ob
ile A
PO
LA
IRE
Elu
tion
avec P
hase m
ob
ile P
OLA
IRE
Apolaires +++
Apolaires + -
Apolaires -
CHROMATOGRAPHIE ÉCHANGEUSE CHROMATOGRAPHIE ÉCHANGEUSE D’IONSD’IONS
• Le principe repose sur la séparation Le principe repose sur la séparation des composants d’un mélange en des composants d’un mélange en fonction de leur fonction de leur solubilisation solubilisation dans dans la phase soluble et la la phase soluble et la rétentionrétention de de la phase stationnaire.la phase stationnaire.
• Ainsi, les molécules qui ne migrent Ainsi, les molécules qui ne migrent pas à la même vitesse se retrouvent pas à la même vitesse se retrouvent séparées. séparées.
Chromatographie échangeuse d’ionsChromatographie échangeuse d’ions
Le principeLe principe::*solubilisation*solubilisation (mobile)(mobile)
*rétention*rétention (stationnaire)(stationnaire)
Phase stationnairePhase stationnaire ( (gptgpt..chargescharges))Positives Positives ou ou NégativesNégatives
GG++,-,-
Ions mobiles (ion échangeur)Ions mobiles (ion échangeur)compensateurcompensateur
Négatives Négatives ou ou Positives Positives GG+,- +,-
Forces d’attractions électriquesForces d’attractions électriques
CHROMATOGRAPHIE ÉCHANGEUSE D’IONSCHROMATOGRAPHIE ÉCHANGEUSE D’IONS
• La phase stationnaire porte La phase stationnaire porte des des groupements fonctionnels ionisésgroupements fonctionnels ionisés qui sont de qui sont de charge :charge :
• positive ou négative positive ou négative • sur lesquelles des sur lesquelles des ions mobilesions mobiles ((ion échangeurion échangeur) )
de charges opposées sont liées par des de charges opposées sont liées par des forces d’attractions électriquesforces d’attractions électriques : :
• On parle de chromatographie échangeuse de On parle de chromatographie échangeuse de cations ou d’anions. cations ou d’anions.
Principe de la CEPrincipe de la CEétape de lavageétape de lavage
La chromatographie d’échangeLa chromatographie d’échangeétape de la chargeétape de la charge
Etape d’élutionEtape d’élution
Schéma général de la CE
Nature des Chroma échangeuses Nature des Chroma échangeuses d’ionsd’ions
la nature selon le signe de l’ion mobilela nature selon le signe de l’ion mobile
+ + échangeuse de cationséchangeuse de cations
- - échangeuse d’ anionséchangeuse d’ anions
Ion mobile
- +
Groupement fonctionnel
Historiquement
Echangeurs naturels:les zéolites, famille de minéraux (silico-
aluminates) pouvant contenir des ions alcalins, ou alcalino-terreux, dans des sites relativement accessibles aux échanges avec une solution.
• défauts des zéolites naturels :-propriétés d'échange peu reproductibles,
• -instabilité aux acides et bases fortes ...• =>développement de hauts polymères
synthétiques ("résines"), reproductibles, résistant aux acides, base, oxydants, ...
Résine
•Réseau 3D de polystyrène (ou autre "haut polymère") sur lequel ont été greffés
• -des "groupements fonctionnels", – ionisés ou ionisables,– susceptibles de capter ou céder un ion
Molécules concernéesMolécules concernées
• Espèces ionisables Espèces ionisables (organiques ou minérales)(organiques ou minérales)
• Espèces ioniséesEspèces ionisées (organique ou minérales)(organique ou minérales)
• MMolécules solubles dans l’eauolécules solubles dans l’eau
• Peu volPeu volatilesatiles
Les groupements les plus Les groupements les plus utilisésutilisés
• Sulfonâtes: -SOSulfonâtes: -SO33- -
(fort)(fort)
• Ammonium Ammonium quaternairequaternaire
• Groupements acides –COOH Groupements acides –COOH (faible)(faible)
• Groupements basiques Groupements basiques (-NR(-NR22 ; NRH ;-NH ; NRH ;-NH22))
S
O
O
O-
N+
R1
R2
R3
Groupement cationique
•ammonium quaternaires NR3+,
ex:Dowex1 ammonium tertiaires NR2
+,
•sulfonium S+,...
•=> résine (d'échange) anionique
Groupement anionique
•sulfonate SO3-, => ex:
Dowex50 carboxylate CO2-,
•aminodiacétate N(CH2CO2-)2
•Phosphonate (PO3)-2,
=> résine (d'échange) cationique
Phase stationnairePhase stationnaire
• Particules sphériquesParticules sphériques– Faible diamètre 5 -20 Faible diamètre 5 -20 mm– Taille très homogèneTaille très homogène
• Macroporeux Macroporeux
• PPelliculaireselliculaires
• ;grpt fonctionnel greffagesupport inerte ;grpt fonctionnel greffagesupport inerte
Préparation de la résine• Cas des résines sulfonate et ammonium quaternaires• copolymère de styrène et divinylbenzène• sulfonation ou chlorométhylation + amination => • greffe des "groupements fonctionnels ==> résine • copolymère =
– ¤ styrène=> chaînes polymérisées allongées– ¤ divinylbenzène=> formation de 'ponts' entre les chaînes
• => "taux de pontage" = % de divinylbenzène du copolymère, noté par Xn
• Exemple: • Dowex 50X8 = Dowex 50 à 8% de divinylbenzène
Formes des supportsFormes des supports
•Grains Grains Copolymère styrène-divinylbenzène (PS-DVB) Copolymère styrène-divinylbenzène (PS-DVB)
RésinesRésines
Chromatographie par échange d’ionsChromatographie par échange d’ions
DEAE
Fines couches (1Fines couches (1m)m)Déposées sur des microbilles de verre (30-50Déposées sur des microbilles de verre (30-50m m
de de ))
De microbilles de silicesDe microbilles de silices
Formes des supportsFormes des supports
suitesuite• GrainsGrains
Copolymère styrène-divinylbenzène (PS-DVB)Copolymère styrène-divinylbenzène (PS-DVB)
RésinesRésines poudre+eau: gonfle donc –SOpoudre+eau: gonfle donc –SO33H devient –SOH devient –SO33
--
Eau à l’intérieur réticulation et efficacité Eau à l’intérieur réticulation et efficacité du geldu gel
8% est un bon pourcentage pour 8% est un bon pourcentage pour poreuxporeux
Compromis entre la résistance et l’efficacitéCompromis entre la résistance et l’efficacité
MMaiaissmacroporeux, on peut aller plus haut macroporeux, on peut aller plus haut
g/mEq5g/mEq5
suitesuite• PelliculairesPelliculaires• Résistance excellenteRésistance excellente• Meilleure efficacitéMeilleure efficacité• CE plus faibleCE plus faible ( (inconvénientinconvénient))
• Silices macroporeuxSilices macroporeux• meilleure résistancemeilleure résistance• granulométrie de 3 – 5umgranulométrie de 3 – 5um• un CE 0.05 – 1 mEq/gun CE 0.05 – 1 mEq/g• Bon débit avec une bonne efficacitéBon débit avec une bonne efficacité• Inconvénient zone de pH 2-7Inconvénient zone de pH 2-7
capacité disponible CD
• Nbre de Nbre de gpt fonctionnel ioniségpt fonctionnel ionisé par unité de par unité de masse ou de volumemasse ou de volume Résine Résine qui qui peuvent entrer peuvent entrer en interactionen interaction
• CE capacité d’échangeCE capacité d’échange
NNombre de gpt fonctioonel par unité de masse ou ombre de gpt fonctioonel par unité de masse ou de volume de la résine de volume de la résine
LaLa rétentionrétention• Rayon de stocks (taille;forme et charge)Rayon de stocks (taille;forme et charge)
• AA++stat stat + B + B++
mob mob BB++stat stat + A + A++
mob mob
• Kb/ka. Kb/ka. Constante d’échangeConstante d’échange ou sélectivité ou sélectivité
• ==ka/ka/kbkbBB++statstat * A * A++
mob mob // AA++stat stat * * BB++
mobmob= = KKBB*A*A++mobmob/CD/CD
•
• (CD) C(CD) Capacité de distributionapacité de distribution• Avec KAvec Kbbet KA les coefficients de partage des deux ions quiet KA les coefficients de partage des deux ions qui
• PPartagent entre les deux volumesVstat et Vmobartagent entre les deux volumesVstat et Vmob• CCoefficient de capacitéoefficient de capacité KKB B == ka / ka / kbkb **CD/CD/ AA
++mobmob
KKB B == ka / ka / kbkb **CD/CD/ AA++
mob mob K’ facteur de capacitéK’ facteur de capacitéK’B = KB* Vstat/Vmob et k’B = .(Vstat/Vmob)*(CD/A+mob)
éluantéluant• Bon éluant BBon éluant B++
mobmob
• Meilleure affinité pour l’échangeurMeilleure affinité pour l’échangeur• AA++
stat stat + B + B++mob mob BB++
stat stat + A + A++mobmob
• Il ne faut pas oublier les réactions chimiques ; formation de complexes Il ne faut pas oublier les réactions chimiques ; formation de complexes
chimiqueschimiques
• AA++mobmob + L + L mob mob ALAL++
mobmob
• BB++mobmob + L + L mob mob BLBL++
mobmob
• KKAl Al == ALAL++mobmob// AA++
mobmob * L * L mob mob
• KKBl Bl = = BLBL++mobmob// BB++
mobmob * L * L mobmob
• AA++stat stat + BL + BL++
mob mob BB++stat stat + AL + AL++
mobmob
La sélectivitéLa sélectivité
• Dépend de l’affinité du support pour les ionsDépend de l’affinité du support pour les ions• La plus petite et la plus chargée ont une bonne La plus petite et la plus chargée ont une bonne
affinitéaffinité• Les échangeurs d’anions: Les échangeurs d’anions: ordre décroissantordre décroissant• Les ammonium IVLes ammonium IVaireaire
• Citrate-SOCitrate-SO44--;oxalate ; NO;oxalate ; NO33
--;Cl;Cl--; formiate; acétate; ; formiate; acétate; OHOH- - et Fet F--
• Les échangeurs de cationsLes échangeurs de cations (sulfonâtes) (sulfonâtes)
• CaCa2+,2+,CuCu2+2+; Mg; Mg2+2+; K; K++; NH; NH44++; Na; Na++; H; H++ et Li et Li++
• LLe paramètre charge est plus important que la taillee paramètre charge est plus important que la taille..
Résines sulfonatesRésines sulfonates
Tableau MendeleïevTableau Mendeleïev
La sélectivitéLa sélectivité
• AA++stat stat + BL + BL++
mob mob BB++stat stat + AL + AL++
mobmob
BB++stat stat * AL * AL++
mob mob // AA++stat stat * BL* BL++
mobmob
Ce sont les constantes d’Ce sont les constantes d’associationassociation
= ’
’ = * (BLK / ALK(
ExemplesExemples
• Acides aminés élués par un gradient de protonAcides aminés élués par un gradient de proton
• Échangeuse de cationsÉchangeuse de cations
• Cations métalliques FeCations métalliques Fe3+3+
• EchangeuseEchangeuse dd’anions’anions
• K de Fe fct teneur ClK de Fe fct teneur Cl-- dans phase mobile dans phase mobile
Fe3+ + 4 Cl- FeCl4-
•A(r) + B(s) = A(s) + B(r)
• [(B)r . (A)s ]/[(B)s . (A)r ] = K
• constante à une température donnée
• !!! cas d'un échange entre ions de charges différentes
•2 Na+r + Ca2
+s <=> 2 Na+s + Ca2+r
• K(Na+/ Ca2+) = [ (Ca2+/r ).(Na+/s)² ] / [ (Ca2+/s ).(Na+/r)² ] =
P(Ca2+) / [ P(Na+)]²
Ce pilote pr la purification de protéines de solutions biologiques Ce pilote pr la purification de protéines de solutions biologiques ou la récupération de protéines de sousou la récupération de protéines de sous--produits alimentairesproduits alimentaires. . l‘l‘--lactolbumine et de la lactolbumine et de la --lactoglobuline dans le lactosérum sur du lactoglobuline dans le lactosérum sur du
Sphérosil grefféSphérosil greffé. . • - - Colonne en altuglas à un ou plusieurs étagesColonne en altuglas à un ou plusieurs étages
- Un distributeur, maille triangulaire- Un distributeur, maille triangulaire- Cuve d'alimentation en inox- Cuve d'alimentation en inox- Cuve de récupération en inox- Cuve de récupération en inox- Cuve contenant le liquide d'élution, en inox- Cuve contenant le liquide d'élution, en inox- Cuve contenant la solution de lavage en inox- Cuve contenant la solution de lavage en inox- Pompe centrifuge avec niveau de protection- Pompe centrifuge avec niveau de protection- Bac en charge pour les faibles pressions (option - Bac en charge pour les faibles pressions (option pour le lit fluidisé)pour le lit fluidisé)- Sonde de mesure de température dans le bac - Sonde de mesure de température dans le bac d'alimentationd'alimentation- Débitmètre- Débitmètre- Sonde de pH et son transmetteur (en option)- Sonde de pH et son transmetteur (en option)- Régulateur de température/résistance chauffante - Régulateur de température/résistance chauffante (en option), sonde de température(en option), sonde de température- Cinq prises d’échantillons par seringue pour - Cinq prises d’échantillons par seringue pour analyse en laboratoireanalyse en laboratoire
• http://www.deltalab.fr/produit.php?prodId=1259http://www.deltalab.fr/produit.php?prodId=1259
Échange du ligandÉchange du ligand
• Cations métalliques (fixés sur la Cations métalliques (fixés sur la stat)stat)
• peuvent se complexerpeuvent se complexer avec le ligand avec le ligand
• Donc Donc mob avec ligand éluant NHmob avec ligand éluant NH44++
Phase mobilePhase mobile• Le pH est très importantLe pH est très important• proche du pKaproche du pKa• TamponsTampons S Solutionsolutions• : acétate ou borate par ex: acétate ou borate par ex• Nature de l’ionNature de l’ion
– PPlus petite et chargéelus petite et chargéeFForce ioniqueorce ioniqueCoefficient de Coefficient de capacitécapacité– K’K’BB= = * (V* (Vstatstat/V/Vmobmob) ) CD/CD/AA++
mobmob
– Capacité inversement proportionnelle à Capacité inversement proportionnelle à A+mob mais proportionnelle avec la CD A+mob mais proportionnelle avec la CD
de la colonnede la colonne..
mob/
CD
Solvants organiquesSolvants organiques
• Rarement utilisablesRarement utilisables
• 3 à 10%3 à 10%
• MéthanolMéthanol
• AcétonitrilesAcétonitriles
• PropanolPropanol
• Amélioration de la sélectivité de la Amélioration de la sélectivité de la colonne ou la rétention des solutéscolonne ou la rétention des solutés
TempératureTempérature• Influence la cinétique de l’échangeInfluence la cinétique de l’échange
• Augmente l’efficacitéAugmente l’efficacité
• Obtention de pics finsObtention de pics fins
• Stabilité de certains échangesStabilité de certains échanges
DétectionDétection• DirecteDirecte
• IndirecteIndirecte
• DifférentielleDifférentielle
• AbsorptionAbsorption (directe et indirecte) (directe et indirecte)– Solutés incoloresSolutés incolores– anions inorganiques (chlorites, nitrites et bromates)anions inorganiques (chlorites, nitrites et bromates)– Groupements chromophoresGroupements chromophores– Dérivés utilisant la détection électrochimiqueDérivés utilisant la détection électrochimique
• détection Conductimétriquedétection Conductimétrique• bromure chlorates ; nitrates ; Nabromure chlorates ; nitrates ; Na++ ; K ; K++ et Li et Li++
• détectiondétection réfractaireréfractaire
ConclusionConclusion
•Différents supportsDifférents supports
•MécanismesMécanismes
•Paramètre de la phase mobileParamètre de la phase mobile
•La chromato d’échange d’ions estLa chromato d’échange d’ions est
•Une méthode puissanteUne méthode puissante
•Adaptée aux milieux biologiquesAdaptée aux milieux biologiques
Applications
• adoucir l'eau, épurer l'eau, ...• récupérer des composés ioniques dans des
solutions industrielles• jus de fermentation, bains de traitement
électrolytique,de traitement hydrométallurgique [Uranium, Terres Rares, ...]
• séparation chimique à des fins analytiques: spéciation (ex: CrIII/CrVI, AsIII/AsV, ...), séparation des Terres Rares, ...
• On injecte une très faible quantité de la On injecte une très faible quantité de la solution à analyser (50 à 100 ml) et les solution à analyser (50 à 100 ml) et les ions sont fixés sélectivement sur la ions sont fixés sélectivement sur la colonne chromatographique. colonne chromatographique.
• La Chromatographie Ionique est une La Chromatographie Ionique est une méthode particulièrement bien adaptée à méthode particulièrement bien adaptée à l’analyse des anions et cations majeurs l’analyse des anions et cations majeurs des eaux naturelles : Cl-, F-, NO3-, SO4--, des eaux naturelles : Cl-, F-, NO3-, SO4--, Na+, K+, Ca++, Mg++. Na+, K+, Ca++, Mg++.
T° ébT° éb..Paramètre de Paramètre de polarité polarité 00
Miscibilité Miscibilité à l’eauà l’eau
FluoroalcanesFluoroalcanes---- - -0.250.25nonnon
pentanepentane36.1°36.1°0.000.00nonnon
toluènetoluène 110.6°110.6°0.220.22nonnon
dichlorométhanedichlorométhane40°40°0.420.42nonnon
acétate d’éthyleacétate d’éthyle77°77°0.480.48nonnon
CH3 C
O
OCH2CH3
C
H
ClCl H
Quelques solvants usuels en CLQuelques solvants usuels en CL
CH3
Oouioui0.530.5366°66°Tétrahydrofurane Tétrahydrofurane
(THF)(THF)
ouioui0.600.6082°82°isopropanolisopropanol
oui oui élevéélevé100°100°eaueau
ouioui0.70.764.5°64.5°méthanolméthanol
ouioui0.70.778°78°éthanoléthanol
ouioui0.520.5281°81°acétonitrile acétonitrile
ouioui0.530.5356°56°acétone acétone
Miscibilité à Miscibilité à l’eaul’eau
Paramètre de Paramètre de polarité polarité 00
T° éb.T° éb.
Quelques solvants usuels en CLQuelques solvants usuels en CL
Interactions des solvants usuels en CLInteractions des solvants usuels en CL
O H X
CH3C
O
CH3
H X
N H XCCH3
Accepteurs de pont H
Accepteurs et donneurs de pont H
O
R
H
O
R
H
O
R
H
O
R
H
Quelques solvants usuels en CLQuelques solvants usuels en CL
L'eau L'eau
O
H
HH
OH
HO
H
HO
H
H
O H
O H
H
OH
H
Forces de cohésion importantes :Forces de cohésion importantes :
tension superficielle élevée
eau : 73 mN/m
méthanol : 23 mN/m
viscosité élevée
eau : 0,89 cP
méthanol : 0,54 cP
température d'ébullition exceptionnelle
H2O (MM 18) : 100°C
NH3 (MM 17) : - 33°C
méthanol : 65°C
constante diélectrique constante diélectrique très élevéetrès élevée
eau : 78
méthanol : 33
Quelques phases stationnaires en Quelques phases stationnaires en GCGC
O Si O Si O Si O
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
O Si O Si O Si O
CH3
CH3 CH3
CH3
CH3
O Si O Si O Si O
CH3
CH3 CH3
CH3
CH3
(CH2
C
N
)3
Polarité
croissante
Les phases stationnaires polaires Les phases stationnaires polaires en LCen LC
La silice : SiOLa silice : SiO22
Si
O
OO O Si
O
O OSi
Si
O O
O
OH
OSi
OO O
SiO
O Si
OO H
Si
O O
O H
Solide macromoléculaire
Groupes silanols en surfaceGroupes silanols en surface
Donneurs et accepteurs de pont H
Partiellement ionisés à partir d'un pH 3
Caractéristiques du solideCaractéristiques du solide :
Forme des grains : sphérique ou irrégulière
Granulométrie : 1,7 à 10 µm de diamètre moyen (ou plus pour la chromatographie préparative)
Porosité : taille moyenne des pores ( 60 - 1000 Å); plus de 95% de la surface du solide se trouve dans le volume poreux.
Pureté
Les phases stationnaires polaires Les phases stationnaires polaires en LCen LC
"Logique" d'élution : mode "normal""Logique" d'élution : mode "normal"
PS . PM + mi . PMadsorption
élution
PS . mi + PM . PM
Interaction forte Interaction forte
Pour un éluant donné, les mi seront élués par ordre de polarité croissante.
Éluant puissant = éluant polaire, ayant une forte affinité pour la PS, tous les m i sont élués rapidement (non sélectif)
Éluant sélectif = éluant apolaire (alcanes)
Gradient = polarité croissante
Échange sur la PS
Les phases stationnaires Les phases stationnaires polairespolaires
SiO2 + solvant SiO2. solvant + chaleur dégagée
Échelle de Échelle de
polaritépolarité °°
Pentane 0,00
Hexane 0,01
Toluène 0,22
Dichlorométhane 0,30
Acétate d'éthyle 0,48
MTBE 0,48
Acétonitrile 0,52
Tetrahydrofurane 0,53
Méthanol 0,70
En pratique sur silice, un solvant En pratique sur silice, un solvant polaire =polaire = dichlorométhane pur, acétate d'éthyle pur, un solvant contenant un faible %age d'alcool.
Modification chimique de la surface de la silice :
Si
O
OO OH
SiOO
OH
+ Cl Si
CH3
CH3
Si
O
OO O
SiOO
OH
Si
CH3
CH3
Les phases stationnaires apolaires Les phases stationnaires apolaires en LCen LC
Phase inverse C18
Reversed Phase RP-C18
Autres phases stationnaires Autres phases stationnaires grefféesgreffées
Modification chimique de la surface de la silice :
Transformation des silanols de surface :
R = -C8H17 (RP C8)
-CH2CH2CH2-Phényl
-CH2CH2CH2CN
-CH2CH2OCH2CH(OH)CH2OH
-CH2CH2CH2NH2
etc ...
Phases polaires
Les phases stationnaires Les phases stationnaires apolairesapolaires
"Logique" d'élution : mode "inverse""Logique" d'élution : mode "inverse"
Qui se ressemble, s'assemble ???Qui se ressemble, s'assemble ???
PS . PM + mi . PMadsorption
élution
PS . mi + PM . PM
Les phases stationnaires Les phases stationnaires polaires et apolaires : polaires et apolaires :
comparaison.comparaison.
Les plus polaires Les plus polaires sont plus rapidessont plus rapides
Polarité décroissantePolarité décroissanteExemple : HExemple : H22O + O +
proportion croissante de proportion croissante de CHCH33OHOH
très très polairepolaire
apolaireapolairePhase inverse Phase inverse (RP)(RP)
Les moins Les moins polaires sont plus polaires sont plus
rapidesrapides
Polarité croissantePolarité croissanteExemple : hexane + Exemple : hexane +
proportion croissante proportion croissante d’acétate d’éthyled’acétate d’éthyle
peu peu polairepolaire
très très polairepolaire
Phase Phase normale (NP)normale (NP)
Ordre d’élutionOrdre d’élutionGradient d’élutionGradient d’élutionPMPMPSPS
L'échange d'ionsL'échange d'ions
Échange d'anions
résine faible : DEAE (diéthylaminoéthyl), amino
résine forte : ammonium quaternaire
Échange de cations
résine faible : -CH2COO- (CM, carboxyméthyl)
résine forte : -SO3- (sulfonique)
ex : SP = sulfopropyl
X
X
X
X
résine
M
résine
M
M
M
Séparation et dosage d'ions. Exemples :
•les nitrates dans l'eau
•une protéine dans un liquide physiologique
M. Borkovec. Protocole des travaux partiques de chimie analytique II : La chromatographie ionique, 2008.
•Élution: processus par lequel les composants d'un échantillon se déplacent à travers la colonne suite au flux
permanent de la phase mobile.
•Éluant: le liquide ou le gaz constituant la phase mobile.
•Éluât: ce qui se retrouve en sortie de colonne, c à d l'éluant plus le composant qu'il contient' à un instant déterminé.
•Temps de rétention d'un composant: temps requis pour que ce composant arrive à
l'extrémité de la colonne. Puis il est mesuré. depuis le moment de l'injection jusqu'au sommet
du pic qui lui correspond.
•Volume de rétention d'un composant: volume de la phase mobile qui doit s'écouler pour que ce
composant soit élué. A débit constant, il est égal au temps de rétention multiplié par le débit.
•Résine est le résultat de la polymérisation d'un mélange de styrène et divinylbenzèns qui est sulfonaté (groupement S03
-H+ où H+ est échangeable).
•Elle est donc toujours échangeuse cationique au départ .
•Pour la rendre échangeuse anionique, on y greffe des amines quaternaires
(groupement N(CH3)3+0H- avec OH- échangeable).
•On utilise comme éluant un mélange Na2C03 1.80 mM et NaHC03 1.70 mM.
Schéma de la CISchéma de la CI
Exemples de colonnes DIONEX
Paramètres Paramètres chromatographiqueschromatographiques
RappelsRappels•la loi d’Ohm : V = RI•V est la tension appliquée, I le courant mesuré entre
les deux électrodes et R la résistance électrique.
•La conductance se définit alors comme suit:
en Siemens (S)On relie alors conductance et conductivité
par la relation : = KG
Les conductivités ioniques limites des ions
à 25°C et en ohm-1cm2equiv. -1.