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En matière de parasitisme humain, on pourrait écrire: « dis-moi qui te parasite, je te dirai qui tu es » je te dirai si tu es ignorant ou savant, imprudent ou avisé et surtout pauvre ou riche C.COMBES Dessins de Van N’GUYEN-ANH In Dictionnaire de Parasitologie de P.BOUREE

En matière de parasitisme humain , on pourrait écrire: 

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En matière de parasitisme humain , on pourrait écrire:  « dis-moi qui te parasite, je te dirai qui tu es » je te dirai si tu es ignorant ou savant , imprudent ou avisé et surtout pauvre ou riche C.COMBES. Dessins de Van N’GUYEN-ANH - PowerPoint PPT Presentation

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En matière de parasitisme humain, on pourrait écrire: 

« dis-moi qui te parasite, je te dirai qui tu es »

je te dirai si tu es ignorant ou savant, imprudent ou avisé et surtout pauvre ou riche

C.COMBES

Dessins de Van N’GUYEN-ANH

In Dictionnaire de Parasitologie de P.BOUREE

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Diagnostic parasitologique

Intérêt:

Diagnostic individuel

Enquête épidémiologique

Difficultés et limites

(Diagnostic d’orientation)

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Dessins de Van N’GUYEN-ANH

In Dictionnaire de Parasitologie de P.BOUREE

Cycle biologique d’Entamoeba histolytica

COPROLOGIE

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Diagnostic parasitologique

Milieux biologiques

Selles (coprologie) Kopros

Urines

Sang

Autres

Peau, LBA, MO, Muscles….

Ectoparasites

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Gandhi, activiste indépendantiste indien, estimait que le développement

des sanitaires était un objectif plus important que l'indépendance.

Parmi tous les périls, le moindre n’est pas le fécal

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Approvisionnement

en eau potable

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Assainissement

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Collecte des ordures…..

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Urbanisation

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Importance des parasitoses dans le monde

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maladies en extension (environnement)

. évolution du climat

. modifications des écosystèmes

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En Afrique, la moitié des lits d'hôpital sont occupés par des patients souffrant de maladies véhiculées par les matières fécales.

Compte rendu

L'accès aux toilettes, enjeu mondial de développement

LE MONDE | 28.10.08 | 15h05  •  Mis à jour le 28.10.08 | 15h05

Pour réduire la pauvreté dans le monde et améliorer la santé des déshérités, la méthode la plus simple est de construire des toilettes. C'est la conclusion à laquelle est parvenu le Réseau international sur l'eau, l'environnement et la santé (Inweh), branche canadienne de l'Université des Nations unies. Dans un rapport rendu public le 20 octobre, ce groupe de réflexion recommande aux gouvernements une approche plus coordonnée et intégrée des questions d'approvisionnement en eau potable et d'accès à des sanitaires fonctionnels.Les chiffres font frémir : environ 2,5 milliards de personnes - plus d'un tiers de l'humanité - utilisent des latrines qui n'offrent pas de garantie contre le développement de maladies liées aux matières fécales. Et 1,2 milliard n'ont d'autre ressource que de déféquer dans la nature, selon des données collectées par l'Organisation mondiale de la santé et l'Unicef. Ces personnes passent une demi-heure en moyenne chaque jour à faire la queue dans des installations publiques ou pour trouver un endroit isolé. Soit deux jours ouvrés par mois.L'impact sanitaire est considérable. Les maladies diarrhéiques tuent 1,8 million de personnes chaque année. On estime que 88 % de ces affections ont pour origine un manque d'hygiène et d'accès à des sanitaires sûrs. Les enfants, dont 5 000 meurent chaque jour, paient le plus lourd tribut.En Afrique subsaharienne, la moitié des lits d'hôpital sont occupés par des patients souffrant de maladies véhiculées par les matières fécales. Dans le monde, 200 millions de tonnes d'excréments humains finissent dans des rivières chaque année, contaminant les eaux de surface, voire les nappes phréatiques, avec leur lot de bactéries, virus et autres parasites.

Cet enjeu sanitaire figure rarement au premier plan de l'agenda international. "La question reste taboue, reconnaît Zafar Adeel, directeur de l'Inweh. Les politiques hésitent à aborder ces problèmes dans leurs

discours. Ce n'est pas "poli"." Les Nations unies ont surmonté cette aversion. 2008 a été déclarée année mondiale de l'assainissement. Et le développement des toilettes était l'un des objectifs du millénaire, définis en 2000 : diminuer par deux le nombre de personnes n'ayant pas accès à des sanitaires d'ici à 2015.

En Occident, "les systèmes de distribution d'eau sont souvent anciens. Seront-ils capables d'encaisser des événements climatiques extrêmes qui accompagneront le réchauffement de la planète ?, s'interroge-t-il. Il faut s'en soucier. Et le plus tôt sera le mieux."

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Environ 2,5 milliards de personnes - plus d'un tiers de l'humanité - utilisent des latrines qui n'offrent pas de garantie contre le développement de maladies liées aux matières fécales. Et 1,2 milliard n'ont d'autre ressource que de déféquer dans la nature,

Dans le monde, 200 millions de tonnes d'excréments humains finissent dans des rivières chaque année, contaminant les eaux de surface, voire les nappes phréatiques, avec leur lot de bactéries, virus et autres parasites.

La question reste taboue

En Afrique, la moitié des lits d'hôpital sont occupés par des patients souffrant de maladies véhiculées par les matières fécales.

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Selles

Parasites recherchés : kystes, œufs, larves, adultes

Prélèvement

Mesure des éléments parasitaires

Techniques de concentration

et techniques particulières

COPROLOGIE

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Entamoeba coli

Entamoebahistolytica

Entamoeba hartmanni

Endolimax Giardia Chilomastix Iodamoeba

Douve de Chine Petite Douve segmentée embryonnée

Bothriocéphale Taenia Hymenolepis nana

Hymenolepis diminuta

Ascaris typique atypique

Trichocéphale Oxyure Ankylostome Dipylidium

Grande Douve

Schistosomaintercalatum

Schistosoma mansoni

Schistosoma japonicum

Diagnostic coprologique

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100µm

50µm

10µm

50µm

Grande Douve

Schistosomaintercalatum

Schistosoma mansoni

Schistosoma japonicum

Trichocéphale Ascaris Dipylidium Oxyure Ankylostome

Douve de Chine Petite Douve Bothriocéphale Taenia Hymenolepis nana

Hymenolepis diminuta

Entamoeba coli

Entamoebahistolytica

Entamoeba hartmanni

Endolimax Giardia Chilomastix Iodamoeba

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dysenterie amibienne

Prélèvement

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Micromètre oculaire

Etalonnage du Microscope

Mesure des éléments parasitaires

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Micromètre objet

Micromètre oculaire

         Remplacer l’oculaire normal par l’oculaire micrométrique.    Disposer sur la platine du microscope le micromètre-objet.       Etablir la mise au point des 2 échelles et faire coïncider les « O » des deux échelles.         On repère une division du micromètre oculaire qui se superpose exactement à une• division du micromètre-objet ; ces deux divisions doivent être recherchées le

plus loin possible du « O », de façon à obtenir une meilleure précision. • On peut ainsi en déduire la longueur de chaque division du micromètre oculaire.• Effectuer l’opération pour les deux objectifs x 10 et x 40.

Etalonnage du MicroscopeDéterminer la longueur couverte en m par une division du micromètre oculaire

Exemple : 18 divisions du micromètre oculaire couvrent 300 m  1 division couvre donc 16,66 m 

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Micromètre oculaire

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Méthode diphasique: acéto-acétique / éther

Techniques de concentration

Méthode par flottation : réactif iodo-mercurique

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Méthode diphasique: acéto-acétique / éther

1- Dilution homogène selles + acéto-acétique

- Pré dilution : 1 goutte pour examen direct- Poursuivre la dilution- Laisser sédimenter 10 à 30 sec les gros débris

2- Émulsionner : oblitérer l’orifice avec le pouce et agiter vivement dilution fécale + éther

éther

dilution fécale

Examen Direct

émulsion

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3- Centrifuger 3 min à 2500 trs/min : 4 couches se superposent

Phase éthéréeDébrisPhase aqueuse

Culot d’enrichissement : PARASITES

4- Isolement du culot de centrifugation - Décoller l’anneau de débris avec les mors d’une pince

- Eliminer d’un geste sec les 2 phases liquides et l’anneau- Remettre rapidement le tube à l’horizontale Passer un tampon de coton sur les parois internes du tube - Agiter le tube pour remettre en suspension et prélever à la pipette Pasteur

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Méthode par flottation : réactif iodo-mercurique

Technique de JANECKSO et URBANYI modifiée

1- Dilution homogène Selles + Eau distillée

2 - Tamiser

3 - Centrifuger 2 à 3 min à 3000 trs/min Eliminer la phase aqueuse Diluer le culot avec le réactif iodomercurique

4 - Centrifuger 2 min à 2000 trs/min Prélever 4 à 5 gouttes du film superficiel

avec une anse métallique

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Technique de KATO et MIURA

(éclaircissement par la glycérine)

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NUMERATION DES ŒUFS Cette technique permet d’apprécier l’intensité d’une infestation (Ankylostomes),

de juger de l’efficacité d’une thérapeutique

Frottis épais de KATO et MIURA

Principe : technique de décoloration des selles qui permet de distinguer les œufs de parasites dans une préparation des selles rendue translucide.

- Glycérine 100 ml- Eau distillée 100 ml- Solution de vert malachite à 3 % 1 ml

Bandes de cellophane adhésive de 20 x 30 mm immergées dans la solution de glycérine pendant 24 heures.

Technique: Sur une lame porte-objet, déposer 50 mg de selles, recouvrir par une des bandes de cellophane imprégnée, presser à l’aide d’un bouchon de caoutchouc pour répartir régulièrement la selle; laisser éclaircir une heure à température ambiante. Examiner rapidement car un sur-éclaircissement risquerait de faire passer inaperçu certains œufs (Ankylostomes, Schistosomes). Les résultats sont rendus en nombre d’œufs par gramme de selles.

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sol humide t°> 25°

oeuflarve

larve strongyloïde infestante

techniques particulières

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Coproculture Strongles et Ankylostomes

Selles Eau

Méthode en boite de Pétri

Lames + papier filtre

Incubation 25 à 28 °C

Ajouter de l’eau chaque jour

Strongles : larve rhabditoide 2 jours larve strongyloide

Ankylostomes :œuf 24 heures larve rhabditoide 6 jours larve strongyloide

!!! Larves strongyloides infestantes par voie transcutanée

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sol humide t° > 20

larve rhabditoïdelarve strongyloïde infestante

Strongyloides stercoralis

Méthode de BAERMANN et LEE

concentration des larves des Strongles

techniques particulières

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Méthode de BAERMANN et LEE

Méthode biologique de concentration des larves des Strongles

Les larves se collectent dans la pipette en 2 à 3 heures . Soutirer 10 ml de liquide; centrifuger lentement; examiner le culot.

selles tamis + gaze

eau tiède

raccord caoutchouc + pince

pipette

larve strongyloïde

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Scotch test

Enterobius vermicularis

Taenia saginata

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Culture d’amibes

Etalement de selles

Sérum de cheval coagulé

Sérum de RINGER

Sérum de cheval coagulé

Etalement de selles

multiplication en 24 à 48 heures à 37°C

Prélèvement

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Examen d’une préparation microscopique

Recherche et identification d’œufs d’Helminthes et de kystes de Protozoaires

Examen systématique entre lame et lamelle de la préparation selon le schéma suivant

1 – parcourir la lamelle à l’objectif x 10; chaque élément intéressant est observé puis mesuré à l' objectif x 40

les œufs d’Helminthes sont ainsi identifiés.

l’identification des kystes de Protozoaires s’effectue ensuite à l’objectif x 100 à immersion; elle peut être facilitée par la coloration des structures nucléaires par la coloration Violet cristal – Fuchsine basique .

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PROTOZOAIRES

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Taille Pseudopodes Mobilité Cytoplasme Noyaux

Entamoeba coli

20 à 30µm Courts, larges,lents.

Plusieurs à la fois.

+ Endoplasme grossièrement

granuleux.

Grosses vacuoles bourréesd’inclusions.

Visibles à l’état frais.

Chromatine irrégulière.

Caryosome épais, en général excentré

Entamoeba histolytica

12 à 25µm

jusqu’à 40

Longs, hyalins.

Un seul à la fois.

++++ Endoplasme finement granuleux. Vacuoles petites et peu visibles. Hématies

Difficiles à voir à l’état frais.Chromatine régulière. Caryosome central et punctiforme.

Entamoeba histolytica / dispar

12 à 15 µm

jusqu’à 25

Effilés, hyalins, rapides

+++ Endoplasme finement granuleux.

Ectoplasme hyalin et transparent.

Difficiles à voir à l’état frais.Chromatine régulière. Caryosome central et punctiforme.

Entamoeba hartmanni

4 à 10µm Allongés, hyalins.

++ Ectoplasme et endoplasme peu distincts.

Petites vacuoles.

Difficile à voir à l’état frais.Chromatine épaisse en amas. Caryosome de grande taille, en général central.

Endolimax nanus

8 à 10 µm

jusqu’à 15

Arrondis, en boule, clairs.

+ Ectoplasme et endoplasme peu distincts.

Petites vacuoles.

Non visibles à l’état frais. Caryosome de grande taille, ovalaire, excentré.

Iodamoeba butschlii

8 à 15 µm Longs, en doigt de gant, réfringents.

+ Endoplasme et ectoplasme peu différenciés.

Vacuoles +++

Inclusions +++

Non visible si vivante; visible si morte.

Gras caryosome central, arrondi, entouré de granules.

FORMES VEGETATIVES D’AMIBES

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Taille Forme Cytoplasme Cristalloïdes Noyaux

Entamoeba coli

15 à 20 µm Arrondie

Ovalaire

Clair, hyalin,

réfringent

Vacuoles +

Difficiles

à voir

Forme d’aiguille

1 à 8

Chromatine irrégulière

Caryosome épais et excentré

Entamoeba histolytica

dispar

12 à 14 µm Arrondie Granuleux

Vacuoles ++

Présence irrégulière,

Forme de saucisse

1 à 4

Chromatine régulière

Caryosome central et punctiforme

Entamoeba hartmanni

3 à 10µm Arrondie Vacuoles +++ Présence irrégulière,

Trapus,

Forme de saucisse

1 à 4

Chromatine épaaisse

Caryosome de grande taille

Endolimax nanus

8 à 10 µm Ovoïde

Rectangulaire

Hyalin Néant 1 à 4

Caryosome en tâche

Iodamoeba butschlii

8 à 15 µm Polymorphe 1 vacuole

iodophile

Néant 1 à 4

Caryosome de grande taille entouré d’un halo claur

KYSTES D’AMIBES

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Entamoeba coliEntamoeba

histolytica

Entamoeba hartmani

Endolimax nanus

Giardia intestinalisChilomastix mesnilii

Iodamoeba butsclii

Rhizopodes

Flagellés

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Autres PROTOZOAIRES parasites de l’appareil digestif

Rhizopodes: - Amibes

Coccidies: Cryptosporidies

coloration d’Henriksen PohlenzCyclospora

Isospora belli Sarcocystis hominis

( Microsporidies )

coloration de Weber

- Blastocystis hominis

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Coloration des Cryptosporidies Technique

d’HENRIKSEN et POHLENZ

- Etaler sur une lame une goutte de selles liquides ou de culot de concentration- Fixer au Méthanol 5 mn puis sécher- Colorer par la Fuchsine phéniquée 1 heure- Rincer à l’eau du robinet- Différencier par H2SO4 à 2% 10 à 20 secondes- Rincer à l’eau du robinet- Contre-colorer au Vert de Malachite à 5% 5 mn - Rincer à l’eau du robinet puis sécher- Lecture à l’objectif x 100

Les Cryptosporidies prennent une teinte qui varie du rose pâle au rouge vermillon ,alors que les levures se colorent en vert.

Page 44: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Cryptosporidium sp

Page 45: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Cryptosporidium sp

Page 46: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Isospora belli

Page 47: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

HELMINTHES

Page 48: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Schistosomaintercalatum

Schistosoma mansoni

Schistosoma japonicum

Trématodes (schistosomes)

Page 49: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

oeufs

Sch. mansoni

150µm

ovoïde

jaune brun

embryonnés

éperon latéral

(développé et pointu)

Sch. haematobium

éperon terminal(court)

SCHISTOSOMES

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Douve de Chine Clonorchis sinensis

Petite Douve Dicrocoelium dendriticum ( segmentée ) ( embryonnée)

Grande Douve Fasciola hépatica

Trématodes (douves)

Page 51: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

oeufs

140µm jaune clair

ovoïde réguliersegmenté

coque lisse, mince

épaississement aboperculaire

clapet

DOUVES

Fasciola hepatica

Page 52: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Bothriocéphale Diphyllobothrium latum

Ténia Taenia saginata, T. solium

Hymenolepis nana

Hymenolepis diminuta

Cestodes

Page 53: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Taenia saginata – Taenia solium

embryophore

40 µm

embryon hexacanthesub-sphérique

coque épaisse, brune, striée radialement

oeufs

Page 54: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Ver entier : 2 à 10 m

Segment mûr éliminé isolément

Taenia saginata

Page 55: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Hymenolepis nana

40 µm embryon hexacanthe

filaments

oeufs

membrane externe mince

membrane interne

Page 56: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

CruditésMains sales

Eau

Nématodes

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typique atypique

TrichocéphaleTrichuris trichiura

OxyureEnterobius vermicularis

AnkylostomeAncylostoma duodenale

Necator americanus

Dipylidium caninum

AscarisAscaris lumbricoides

Nématodes

Page 58: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Oxyure Enterobius vermicularis

1 cm vers blancs filiformes

extrémité antérieure droite

bulbe oesophagien

lèvres buccales

extrémité post. effilée

bulbe oesophagien

adultes

parasites digestifs

Page 59: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Oxyure Enterobius vermicularis

oeufs

50 µm

ovoïde, incolorecoque lisse, épaisse asymétrique

troncature

embryonné

Page 60: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

AscarisAscaris lumbricoides

vers cylindriques beige rosé

femelle : 15 à 35 cm

mâle : 10 à 15 cm

extrémité antérieure effilée

extrémité postérieure incurvée

extrémité postérieure arrondie

vulve

adultes

parasites digestifs

Page 61: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

AscarisAscaris lumbricoides

oeufs

70 µm ovoïde brun foncé2 pôles légèrement aplatis

coque mamelonnée

segmenté

Page 62: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Ascaris lumbricoïdes

Page 63: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Trichocéphale Trichuris trichiura

adultes

3 à 5 cm

région antérieure filiforme ( = 3/5 de la longueur totale)

région postérieure épaisse

extrémité post. arrondie

extrémité post. incurvée

parasites digestifs

♀♂

Page 64: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Trichocéphale Trichuris trichiura

oeufs

50 µm

ovoïde brun orangé coque lisse 2 bouchons polaires proéminents   " aspect en citron "

segmenté

Page 65: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

1 cm extrémité antérieure coudée

bourse caudale

capsule buccale

adultesAnkylostomes hématophages

parasites digestifs

femelle

conique extrémité postérieureévasée

mâle

Page 66: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

AnkylostomesAncylostoma duodenale Necator americanus

capsule buccale

Ancylostoma duodenale

2 paires de crochets sub-égaux

adultes

Necator americanus

2 lames tranchantes

parasites digestifs

Page 67: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

ovoïde, symétrique

coque mince, incolore

blastomères individualisés de la coque

60 µm

diagnostic d’espèce sur les caractères larvaires

oeufs AnkylostomesAncylostoma duodenale Necator americanus

Page 68: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

ovoïde, symétrique

coque mince, incoloremassif cellulaire individualisé de la coque

60 µm

oeufs AnkylostomesAncylostoma duodenale Necator americanus

Page 69: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

larve rhabditoïde

200 à 300 µm

oesophage rhabditoïde

ébauche génitale développée

partie cylindrique

striction

renflement

Anguillule – StronglesStrongyloides stercoralisparasites digestifs

Page 70: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Artéfacts

Page 71: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

SPORES VEGETALESPouvant être confondues avec des kystes ou des œufs

Page 72: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

SPORES VEGETALES Pouvant être confondues avec les œufs d’Ascaris

Pollen d’artichaut

Page 73: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

SPORES de CHAMPIGNONSPouvant être confondues avec des kystes ou des œufs

Spore de morille

Spores de truffe

Spores de bolet de pin

Page 74: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

CRISTAUX

Charcot Leyden Acides gras

Oxalate de calcium

Page 75: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

ARTEFACTS DIVERS

Spire vaisseau du bois

Œuf d’acarienCellules palissadiques de légumineuses

Cellule à amidon Poil végétal

Page 76: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

CHAMPIGNONS

levures

arthrospores

Page 77: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Autres prélèvements

Page 78: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Urines

- Schistosoma haematobium 150µm

- éperon terminal court dans l’axe de l’œuf - pôle opposé à l’éperon arrondi

(parfois présents dans les selles indépendamment de toute souillure par les urines)

- Trichomonas vaginalis

Page 79: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Prélèvement vaginal

- Trichomonas vaginalis

30µm

forme végétative

Page 80: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Tubage gastroduodénal - Giardia intestinalis (forme végétative) - Strongyloïdes stercoralis (larves)- Douves hépatobiliaires (œufs)- Schistosoma japonicum (œufs)

LBA ou crachats - Paragonimus westermani (œufs)

- 100 µm- opercule aplati rompant le contour ovoïde

- Scolex invaginés lors de la rupture d’un kyste hydatique pulmonaire

- Strongyloïdes stercoralis (larves)

Muscle- larves de Trichinella spiralis

Page 81: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Coloration des Microsporidies

Technique de WEBER

- Réaliser un frottis très mince sur 1 cm2 avec 10 l de selle liquide, sécher- Fixer au Méthanol 5 mn puis sécher- Colorer au WEBER 90 mn- Décolorer dans l’alcool acétique 10 secondes- Rincer rapidement dans l’alcool à 90°- Déshydrater successivement 1 mn par alcool 95°, alcool absolu, xylène- Montage au Depex

Page 82: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Microsporidies

Page 83: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

Microsporidies

Page 84: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

L B A : Pneumocystis carinii

Page 85: En matière de  parasitisme humain , on pourrait écrire: 

L B A : Pneumocystis carinii