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Les Entrobactries (4me
partie) : Les Entrobactries lactose - : les genres
Salmonella et Shigella ainsi que les
entrobactries DA +
Objectifs : * Mettre en vidence les caractres morphologiques,
culturaux et biochimiquespour orienter ltude vers la famille des
entrobactries.
* Raliser lensemencement dune macrogalerie en vue de la
dtermination de
lespce de lentrobactrie lactose - .
* A laide du tableau dichotomique, identifier lespce de
lentrobactrie
lactose - .
1er
jour
Manipulation : Par personne, vous disposez dune souche pure dune
entrobactrie lac -prsente sur GNi :
Souche numrote
prsente sur glose nutritive
Raliser une suspension bactrienne faible
( 1 colonie dans 5 mL deau distille strile)
Etude microscopique :
Raliser une coloration de
Gram
Ralisation du test
dorientation rapide
pour 1 entrobactrie :
Raliser le test de loxydase
Ensemencements
des milieux de la
galerie de famille :
VF
Hugh et Leifsonglucoss
Bouillon nitrat
Glose NutritiveOrdinaire
Ensemencements des
milieux de la galerie de
genre et despce :
Kligler-Hajna
Clarks et Lubs
Ure Indole
Mannitol-Mobilit
Citrate de Simmons
Isolements des bacilles Gram - sur :
Milieux slectifs : Hektoen,
SS
Milieu non slectif : CLED
Incuber botes et tubes 24 h 37C
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Compte-rendu :
Coloration de Gram Test respiratoire :
Observations Conclusion Observations Conclusion
Orientation
Souche n
2me
jour
Manipulation :
Lecture des diffrents milieux ensemencs : botes et tubes.
Raliser le tests complmentaires ncessaires la mise en vidence de
:
la nitrate rductase
la galactosidase
la voie fermentaire du glucose
la tryptophane dsaminase et de la tryptophanase
Compte-rendu :
1. Ensemencements
Milieux Observations Interprtations Conclusion
VF
Bouillon nitrat
Hugh et Leifson glucos
GN
Kligler
Clark et Lubs
Citrate de Simmons
Mannitol- Mobilit
Ure-Indole
Milieu ODC
2. Isolements
Observations : aspect des colonies Conclusion
Glose CLED
Glose Hektoen
Glose SS
3. Conclusion Proposer une identification de lentrobactrie
lactose - numrote et justifier votre dmarche logique danalyse :
Justification de lappartenance la famille des Entrobactries.
Justification de lappartenance au genre et lespce bactrienne.
