1- Gnralits sur la gense dun pus principales localisations Les

germes en cause

La formation dun pus est un des signes les plus caractristiques dune infection. Le pus est

constitu de cellules activit phagocytaire (en gnral des polynuclaires neutrophiles altrs) et

de bactries (pas toujours trs nombreuses lexamen direct). Les cellules en activit

phagocytaire sont attires au foyer infectieux par diverses substances constitutives de la paroi des

bactries : la murine joue le rle le plus actif, mais dautres polysaccharides possdent, un

degr moindre, cette proprit. Les germes dont la paroi est la plus riche en murine

(Staphylocoques, Streptocoques) attirent massivement les polynuclaires, le pus est alors

abondant : ces germes sont dits pyognes. Les phagocytes subissent ensuite, au foyer infectieux,

certaines dgradations dues laction de substances scrtes par les bactries (leucocidines).

Il se forme du pus au cours dinfections urinaires, respiratoires, mninges, gnitales et mme

intestinales. Il est alors retrouv dans les urines, les expectorations, le liquide cphalorachidien,

les prlvements gnitaux, les selles.

1.1. Les pus ORL

Pus oculaires

Ils proviennent dinfections de la conjonctivite, de la corne, du canal lacrymal.

Les germes isols sont :

Souvent : Streptococcus pneumoniae, Haemophilus, Streptocoques des groupes

A, C, G, B

Plus rarement : Entrobactries (Kebsiella), Pseudomonas

Spcifique des infections oculaires : Moraxella lacunata

Pus de sinusites

Staphylococcus aureus

Streptocoques

Bactries anarobies de la flore de Veillon

1

ETUDE CYTOBACTERIOLOGIQUE DU PUS

Pus doreille

Ils accompagnent linflammation du conduit auditif au cours des otites externes. Les agents

tiologiques sont les mme que pour lil, sauf Moraxela lacunata trs rare au niveau de loreille.

1.2. Les pus cutans

Infection bactries pyognes

Staphylococcus aureus et les Streptocoques du groupe A se partagent la majorit des infections

cutanes. Les lsions bulleuses de limptigo, les infections des folliculites infectieuses est le

furoncle. Un anthrax provient de la runion de plusieurs furoncles.

Streptococcus pyognes (groupe A) est responsable de la plupart des lsions croteuses de

limptigo et des lsions purulentes daspect gangreneux.

Infections de plaies

Une plaie se forme lorsque le revtement cutan ou muqueux est altr sur une plus ou moins

grande surface. Cette altration constitue dj en elle mme un facteur favorisant linfection.

Dautres conditions de milieu sont, cependant, propices au dveloppement de bactries. Ainsi, la

formation dune plaie saccompagne de saignement et donc de la constitution de caillots ; dautre

part, les cellules les plus superficielles sont ncroses. Les produits de cette ncrose, les caillots

eux-mmes, forment autant de substrats utilisables par les bactries.

Le dveloppement microbien ne sera pourtant durable que si les dfenses de lorganisme

sont diminues : une infection de plaie sinstallera et persistera facilement sur des plaies de

grands brls ou daccidents de la route dont les rsistances linfection sont plus ou moins

perturbs, en particulier du fait dune diminution de lirrigation et de loxygnation des tissus

lss.

On explique ainsi que les germes isols des prlvements de plaie appartiennent presque

toujours lenvironnement immdiat de la lsion : Staphylocoques, Entrobactries (E.coli,

Proteus), Pseudomonas mais aussi Streptocoques. En milieu hospitalier, les germes

multirsistants jouent le rle essentiel.

1.3. Suppurations abdominales Autres localisations viscrales

2

Elles peuvent apparatre la suite dune opration chirurgicale de labdomen. Les bactries de

la flore intestinale sont lorigine de ces complications. On retrouve presque toujours dans une

suppuration abdominale une association de plusieurs bactries dont une au moins est anarobie.

Le tandem E.coli, Bactriodes fragilis est le plus usuel dans ces prlvements mais on peut

rencontrer aussi dautres bactries anarobies (Clostridium Streptopeptococcus) ou dautres

bactries arobies (Klebsiella, Proteus) ou encore lassociation de plusieurs germes anarobies.

Les abcs hpatiques splniques sont peupls, lorigine, partir dun abcs abdominal. Les

associations y sont encore frquentes (50%).

1.4. Abcs du cerveau

On recherche surtout les germes anarobies.

2. Les tapes de lexamen cytobactriologique dun pus

2.1. Prlvement et examen macroscopique

Le problme est diffrent selon que le pus collect provient dun abcs ferm, sans relation avec

le milieu extrieur ou dun abcs ouvert en communication permanente ou temporaire avec

lextrieur. Dans le premier cas, le prlvement se fait en gnral la seringue aprs dsinfection de

la peau ; il est ensuite transvas dans un tube strile. Dans lautre cas, la plaie est dsinfecte et

dbarrasse des dbris et scrtions qui la recouvrent. Lorsque le choix est possible, le prlvement

la pipette Pasteur ou lanse est prfr usage de lcouvillon.

Certaines localisations posent des problmes particuliers : dans le cas dinfection dune

plaie par exemple, lusage de la glose count tact (bioMrieux) semble prfrable la mise en

uvre des techniques de prlvements habituelles. Cette pratique permet en effet raliser

prlvement et mise en culture en un seul temps, donc de limiter les risque de contamination. La

suppression du dlai sparant le prlvement de lensemencement est, de plus, favorable ou

fragilis.

Autres cas particuliers : ceux des abcs du cerveau, des infections osseuses (ce sont ici des

biopsies qui sont envoyes au laboratoire).

Remarquons, enfin, que dans le cas dune infection oculaire, il ny a gure dautre solution que

de prlever avec un couvillon strile imbib de bouillon nutritif.

3

Lorsquun prlvement est assez abondant, lexamen macroscopique peut fournir des

renseignements intressants : lodeur nausabonde des pus anarobies, laspect granuleux, mal

li, des pus streptocoques, les pus crmeux Staphylocoques ou Pneumocoques sont des

lments dorientation dont il faut tenir compte.

2.2.Examen microscopique

Deux colorations sont indispensables : la coloration de GRAM pour orienter la flore, celle au

bleu de mthylne pour observer et dcrire la cytologie. Lexamen direct a donc une forte valeur

pour le choix des milieux disolement1.

On notera :

la prsence ou labsence de bactries (une ou plusieurs espces)

leur morphologie

leur position intra ou extracellulaire

en cas de pus polymicrobien, lespce dominante

leur abondance

Lexamen cytologique consiste apprcier le degr de daltration et le nombre des

polynuclaires neutrophiles et, ventuellement, la prsence dautres cellules.

Devant un pus amicrobien et / ou si la cytologie rvle une majorit de lymphocytes, la

recherche des Mycobactries simpose. Une coloration de Ziehl sera alors ncessaire.

2.3.Cultures

2.3.1. Choix des milieux

Les milieux disolement les plus appropris la reprise des germes observs lexamen direct

sont ensemencs, lorientation microscopique guidant le choix de ces milieux. On inocule aussi un

bouillon thioglycolate.

En labsence dindications fournies par lexamen direct, on peut ensemencer :

une glose chocolat incube sous CO2,

une glose lactose au pourpre de bromocrsol,1 Certaines prparations sont cependant trs pauvres en germes. Cela rend alors lorientation trs difficile, parfois impossible.

4

deux gloses Columbia au sang dont une incube en anarobiose, un bouillon

de Rosenow ou thioglycolate.

5