La degradation de la L-lysine chez le ra “germ-free”

338 BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA

BBA 26172

LA DEGRADATION DE LA L-LYSINE CHEZ LE RAT " G E R M - F R E E "

P A U L B O U L A N G E R a, R O G E R O S T E U X a, E D M O N D SACQUETb ET H E C T O R C H A R L I E R ~

~Laboratoire de Chimie Biologique, Facultd de Mddecine et Pharmacie, Lille (France) et bService des Anirnaux sans germes, Groupe des Laboratoires du C.N.R.S., Gif-sur-Yvette (France)

(Re~u le 7 Mars, 1969)

SUMMARY

L-Lysine degradation in the 'germ-free' rat The fate of uniformly 14C-labelled L-lysine (I), 21-piperideine-2-carboxylic acid

(II) and uniformly 14C-labelled L-pipecolic acid (III) in intact 'germ-free' rats has been explored. The fraction of initial radioactivity recovered in respiratory CO2 within the first 6 h amounts to IO % for I, 0.6 % for I I and less than o.I % for I I I . Pipecolic acid is excreted unchanged in the urine, and it was impossible to detect the presence of a-aminoadipic or piperidone-carboxylic acid.

These results are compared with those of other authors and discussed. I t seems to be well established that pipecolic acid is, in fact, not metabolized by the germ- free rat ; it is not on the major a-aminoadipic acid pathway of lysine degradation, but on a side path.

INTRODUCTION

Dans le sch6ma de la d6gradation de la lysine chez les mammif~res, propos~ par ROTHSTEIN ET MILLER 1, il est admis que le passage ~t l'acide a-aminoadipique se fait par enl~vement du groupe NH 2 en a (par transamination ou d6samination), cyclisation de l'a-c~to acide form6 et transamination intramol6culaire selon le sch6ma de la page 343. Cette conception implique soit l 'isom6risation directe des acides pip6ri- d~ine-2-carboxyliques (z~i~ -/]6), qui n 'a pu 8tre 6tablie exp~rimentalement et qui est consid6r~e comme tr6s peu probable (voir r6f. 2), soit le passage par le stade d'acide pip6colique, celui-ci dtant transform6 rapidement en acide a-aminoadipique, lui-mSme activement m6tabolis~ chez le rat in vivo. Or, nous avons d~s 196o (r~f. 2) fair des r6serves sur la "rdactivit6" de l'acide pip6colique dans l 'organisme : en effet A la suite de l'injection intra-p6riton~ale d'acide DL-I14C~pip6colique (uniform. marqu6) chez le rat, le seul compos6 marqu6 identifi6 darts l 'urine est l'acide pip6colique; mSme dans les exp6riences avec surcharge, il n 'est pas possible de d6celer la moindre trace d'acide a-aminoadipique radioactif. Les exp6riences in vitro en presence d'homog6nat de foie de rat conduisent ~ des observations analogues. Ces constatations pouvant s 'expliquer par une d6gradation tr~s rapide de l'acide a-aminoadipique et des compos~s interm6diaires, nous avons entrepris une s6rie d'essais permettant de lever les doutes ~t cet 6gard. Nous rapportons ici nos r6sultats, qui ont fait l 'objet de deux notes pr~liminaires 3,4; ils ont ~t~ obtenus avec des rats "germ-free": c'est en effet le seul

Biochim. Biophys. Acta, 184 (1969) 338-344

DEGRADATION DE LA L-LYSINE 339

proc6d6 permettant de pr6venir avec certitude, chez l'animal lui-m~me et pendant le recueil des urines, l'interf~rence du m~tabolisme microbien et par suite toute erreur d'interpr6tation.

MATERIEL ET M]~THODES

Rats "germ-free". Les animaux utilis6s sont des rats "st6riles" Lobund. Les in- jections intra-p6riton~ales sont faites st6rilement dans l'isolateur et les animaux sont plac6s dans des cages A m*tabolisme permettant le recueil des urines; un "t6moin" est effectu6 en pla~ant directement le produit 6tudi6 dans le r*cipient ~t urine d'un rat qui ne re~oit pas d'injection.

Urines. Les urines sont recueillies g6n6ralement au bout de 6 ou 8 h, 24 h, 48 h et parfois 72 ou 96 h. Elles sont soumises A un fractionnement sur 6changeurs de cations (Permutite 50 ou Amberlite IR 12o) puis d'anions (Amberlite IR 4 B), afin de s6parer les acides amin6s des substances acides et neutres; les fractions sont ensuite soumises ~ une 61ectrophor~se sur papier ~ pH 3-9, en tampon volatil acide ac6tique- pyridine, sur feuille de 28 cm × 4o cm. Les bandes radioactives sont localis6es par autoradiographie (film Kodirex monocouche), d6coup6es et 61u6es; la radioactivit6 est mesur~e en couche mince au moyen d'un compteur A fenStre et ~ flux continu (Tracerlab-Saphymo) ou par scintillation en milieu liquide (appareil Packard Tricarb). Les constituants sont identifi6s par chromatographie sur papier en 2 dimensions (ph6nol-NH3 3 % et butanol-acide ac6tique-eau, 4: i :5, v/v/v) et 6ventuellement par 61ectrochromatographie sur papier (61ectrophor~se ~ pH 3.9, suivie d'une chromatographie ascendante dans le butanol ac6tique); l'identification est facilit6e par l'emploi de t6moins externes et internes.

CO 2. Le CO 2 exhal6 est recueilli par un dispositif classique de pi~ges ~ soude situ6 en dehors de l'isolateur et reli6 aux cages ~ m6tabolisme sp~ciales plac6es l ' interieur de celui-ci; la radioactivit6 a 6t6 mesur6e directement sur la solution par scintillation en milieu liquide.

Produits marqu&. Nous avons utilis6 de la L-t14C~lysine (uniform. marqu6e) en provenance du Centre d'Amersham et du Service des Mol6cules marqu6es du C.E.N. de Saclay. Le produit es.t purifi6 imm6diatement avant l'emploi par 61ectrophor~se sur papier ~t pH 3.9 (on r6cup~re exclusivement la bande correspondant ~t la lysine). L'acide A1-E14Clpip6rid6ine-2-carboxylique (uniform. marqu6) est obtenu par d6s- amination de la L-[14Cllysine (uniform. marqu6e) in vitro par la L-amino-acide-oxydase du foie de DindonS; l'acide DL-~14C~pip6colique (uniform. marqu6) est pr6par~ par r6duction catalytique (PtO2, H2) du produit pr6c6dent; Faction de la D-amino-acide- oxydase du rein de Mouton ou de Porc sur l'acide DL-t14Clpip6colique (uniform. marqu6e) conduit ~ l'acide L-~C~pip6colique (uniform. marqu6) qui n'est pas compl~tement priv6 d'isom&re D. Nous avons aussi pr6par6 l'acide L-[~aC~pip6colique (uniform. marqu6) par r6duction de l'acide A~-pip6rid6ine-2-carboxylique par un homog6nat de foie ou de rein de Dindon.

RESULTATS

Une premiere s6rie d'exp6riences, sans recueil du CO~, a donn6 les r6sultats suivants.

(a) Produit injectd: Acide 21-~14C~pipdriddine-2-carboxylique (Essai 179). Dur6e


34 ° P. BOULANGER et al.

de l'exp6rience : 96 h; radioactivit6 totale de l'urine: 3645oo coups/min; radioactivit6 de la fraction "amino-acides" : 283 ooo coups/rain. Electrophor~se A pH 3.9 : une bande principale "neutre" correspondant A 95 % de la radioactivit6, identifi~e ~ l'acide pip~colique; quelques bandes cathodiques et anodiques tr~s discr~tes, non identifi- ables, parmi lesquelles il est impossible de d6celer la pr6sence d'acide e-aminoadipique (ou de sa lactame). Radioactivit6 de la fraction "acide": 62ooo coups/min; cette fraction se retrouve dans l 'urine t~moin; elle correspond ~ des produits de d6gradation spontan6e et on n 'y retrouve notamment pas d'acide pip~ridone-carboxylique.

(b) Produit injectd: Acide L-[14c~pipdcolique (Essais 165 et 17o ). Dur~e des ex- p4riences: 48 et 72 h; radioactivit4 totale de l'urine: 43800 et 358000 coups/rain, soit dans le premier essai 31% et dans le second essai 60 % de la radioactivit4 iniect4e; radioactivit4 de la fraction "amino-acide": 42600 et 342600 coups/min, soit 96 To de la radioactivit4 totale. Electrophor~se ~ pH 3.9: une bande principale d'acide pip4colique correspondant ~ 97 To de la radioactivit4 ; une tr&s faible bande anodique, plus rapide que l'acide e-aminoadipique, n'a pu ~tre identifi4e.

Une deuxi~me s4rie d'exp~riences comporte le recueil et l'analyse du CO 2 respiratoire; elle est r4sum4e dans le Tableau I.

T A B L E A U I

RI~PARTITION DE LA RADIOACTIVIT]~ DANS LE C O S RESPIRATOIRE ET L'URINE APRILS INJECTION DE L-LYSINE, D'ACIDE A1-pIP]~RIDI~INE-2-CARBOXYLIQUE ET D'ACIDE DL-PIPI~COLIQUE

Radioactivitd (coups/min)

A c i d e A c i d e DL- P r o d u i t i n j e c t 6 L - L y s i n e (I) A l - p i p ~ r i d ~ i n e - p i p 6 c o l i q u e ( I I I )

2 - c a r b o x y l i q u e (II) Q u a n t i t 6 i n j e c t 6 e 4 0 2 8 i o o 4 3 8 6 o o o 2 443 95 ° C O S e x h a l 4 395 9 7 6 25 008 1 464

U r i n e d e 6 h : T o t a l e 3 2 o o o o 2 o65 5 o o I 3 9 6 4 o o F r a c t i o n " a m i n o - a c i d e s " 219 6 o o i 4 6 o o o o i 365 3oo F r a c t i o n " n e u t r e s " + " a c i d e s " I o o 3 o 0 605 5 ° o 31 i oo

U r i n e d e 48 h 143 5 o 0 427 o o o - - U r i n e d e 72 h - - 4 8 500 - -

La L-lysine est oxyd~e dans la proportion de lO % en 6 h; dans le mSme temps, la quantit6 de 1'CO2 form6e ~ partir de l'acide I~L-pip6colique n'atteint pas o.i %. L'acide A 1-pip~rid6ine-2-carboxylique occupe une position interm6diaire, avec un taux d'oxydation d'environ 0.6 %. Corr~lativement, la radioactivit6 urinaire est d 'autant plus 6lev6e que la d6gradation est plus faible: 57 % dans les six premifires heures pour l'acide DL-pip~colique, 47 % pour l'acide Al-pip6rid6ine-carboxylique (57 % en 72 h), 8 % pour la L-lysine (11.5 % en 48 h).

Les substances radioactives 6limin~es ont 6t~ identifi6es : il s'agit essentiellement d'acide pip~colique (99 % de la radioactivit6 de la fraction "amino-acides" de III, 60 % environ de I et II : dans ce dernier cas, l'acide pip~colique est souill6 d'acide Al-pip6riddine-2-carboxylique 41imin6 tel quel). Dans l'Essai I (L-lysine), l'urine contient aussi de la lysine intacte (23 % de la radioactivit6 de la fraction "amino-

Biochim. Biophys. Acta, 184 (1969) 3 3 8 - 3 4 4

DEGRADATION DE LA L-LYSINE 341

acides", voir aussi la note *). Ni l'acide x-aminoadipique, ni sa lactame n'ont pu 8tre caract6ris6s dans aucun des cas.

Un troisi~me essai a 6t6 effectu6 avec de l'acide L-[14C]pip6colique (pr6par6 par r6duction enzymatique de l'acide Al-pip6rid6ine-2-carboxylique). Les r6sultats sont reproduits dans le Tableau II : on voit que l'acide L-pip6colique n'est pratiquement pas oxyd6.

T A B L E A U I I

RI~PARTITION DE LA RADIOACTIVIT]~ DANS LE CO 2 RESPlRATOIRE ET L'IJRINE APR~S INJECTION D'ACIDE L- [14C] PIP]~COLIQUE

Radioactivitd % de la radio- (coups/rain) activitd injectde

Acide L-pip~colique inject6 4 973 ooo - - CO 2 exhal6 7 560 o.15 Urine de 6 h I 395 ooo 28 Urine des 3 ° h suivantes I o54 ooo 21 Urine totale de 36 h 2 439 ooo 49

DISCUSSION

Les r6sultats que nous rapportons confirment ceux que nous avons publi6s antdrieurement : l'acide pip~colique n'est pratiquement pas oxyd6 chez le rat "germ- free" et sa position d'interm~diaire dans la d6gradation de la lysine par la voie ~-aminoadipique ne paralt donc pas ~tablie.

Les arguments invoqu~s en faveur du sch6ma classique par ROTHSTEIN ET GREENBERG et al?,6, 7 6taient les suivants: (I) l 'injection de [eASN]lysine est suivie chez le rat de l'61imination urinaire d'acide a-aminoadipique contenant un ldger exc~s d'azote lourdl; (2) lorsqu'on introduit dans l'organisme de l'acide pip~colique radioactif, on trouve du 14CO~ dans Fair expir6 et l'urine contient de l'acide glutarique radioactif provenant lui-mSme de la d~gradation de l'acide a-aminoadipique6; (3) les

* A ti tre de comparaison, nous r6sumons ci-dessous les r6sultats d 'une experience effectu6e dans des condit ions identiques chez un ra t "germ-free" et compor tan t l ' injeetion intrap6riton6ale de L-Ei4C]lysine et d 'une surcharge d'acide L-~-aminoadipique non marqu6 (75 mg pour un ra t de 350 g).

Radioactivitd % de la quantitd (coups/rain) injectde

L-Lysine inject6e 4 325 ooo CO 2 exhaM (6 h) 511 450 i i . o Urine de 48 h 361 765 8.3 Fract ion "amino-ac ides" 171 IX5 3.9 Frac t ion "acide" 19o 64o 4-4

La fraction acide est pass6e sur Dowex I -X8 et l'41ution est faite par de l 'acide formique 6 M ; le pic radioactif unique est soumis pour identification k une 61eetrochromatographie sur papier: le compor tement est tr~s voisin de celui de l 'acide glutarique. La fraction aminoacide comprend essentieUement de l 'acide pip6colique (6o%), de l 'acide At-pip6rid~ine-2-carboxylique (environ 3o%) et de la lysine (moins de lO%); on ne d6e61e pas d'acide 0¢-aminoadipique.

Biochim. Biophys. Acta, I84 (1969) 338-344

342 P. BOULANGER et al.

mitochondries de foie de rat, en pr6sence d'acide DL-pip~colique marqu6, produisent du 14CO2 (jusqu'/~ lO. 5 % de la radioactivit6), ainsi qu'une faible quantit~ d'acide e-aminoadipique radioactifs; (4) les mitochondries de foie de boeuf d6gradent l'acide Dr-pip6colique marqu6 en donnant soit du 14CO~, soit de l'acide a-aminoadipique radioactif (en pr6sence d 'un exc+s de m6tabolite non marqu6)L

I1 faut remarquer que l'exc+s d'azote lourd trouv6 dans l'acide a-aminoadipique lors de la premiere experience 6tait tr~s faible (o.35 %); d 'autre part, les animaux intacts utilis6s ~taient des rats conventionnels (Wistar ou Sprague-Dawley), chez lesquels l ' intervention du m6tabolisme des microorganismes n'~tait pas exclue; enfin, dans tousles essais in vivo, la radioactivit6 de l'acide ~-aminoadipique form6 A part ir de racide pip6colique marqu6 6tait tr+s faible et le pourcentage par rapport A la radioactivit~ initiale inf6rieur A 1%. I1 reste que la formation de 14CO2 par les mitochondries de foie de rat et de boeuf A part ir d'acide DL-[6-t4Clpip6colique est ap- pr6ciable (de l'ordre de IO % de la radioactivit6 initiale) et qu'en presence d'une surcharge d'acide c~-aminoadipique, le m6me pourcentage de radioactivit6 est "pi6g~" dans ce compos6 (et dans sa lactame). D'autre part, il faut ajouter que l'~ventualit6 du passage r6versible de l'acide pip6colique A l'acide Al-pip6rid6ine-2-carboxylique et A l'acide Al-pip~rid6ine-6-carboxylique est 6tay6e par la caract~risation d'hydro- g6nases catalysant sp6cifiquement la r6duction de chacun des d6riv6s non satur~s 8.

I1 est difficile d'expliquer les divergences entre nos r6sultats et ceux de ROTtt- STEIN ET MILLER 1 et de ROTHSTEIN et al. 7. On peut 6videmment invoquer une s6pa- ration des pools de m6tabolites endog+ne et exog+ne: l'acide pipdcolique injectd par voie p6riton6ale ne parviendrait pas au niveau des sites cellulaires o/1 racide pip6co- lique endog+ne serait normalement d6grad6; la barri~re serait lev6e par risolement des mitochondries.

Cependant, plusieurs notes et m6moires r6cents rapportent des observations favorables A notre conclusion.Tout d'abord, HIGASI-IINO et al. °, ao ont d6montr6 la formation de saccharopine ou e-N(L-glutaryl-2)-L-lysine par les mitochondries de foie de rat en pr6sence de L-lysine et d'~-c6toglutarate, en ana6robiose; la saccharopine est oxyd~e et scindde en 8-semi-ald6hyde c~-aminoadipique par un extrait de mitochondries (obtenu par cong61ation-d6cong61ation et surtout par sonication) en pr6sence de NAD. Ces constatations permettent d'envisager chez les mammif+res un catabolisme de la lysine par une voie inverse de la s6quence r6actionnelle de la biosynth+se de la lysine chez les levuresn-~: cette seconde voie implique l 'enl~vement du gronpe NH 2 en s (par transamination) et le passage A l'acide a-aminoadipique par l 'interm6diaire du semi-ald6hyde (en 6quilibre avec sa forme cyclisde, l 'acide Al-pip6rid6ine-6-carboxylique). I1 est assez probable, dans ce cas, que la formation de saccharopine (observ6e seulement en ana6robiose) est due A une r6action secondaire de r6duction de la base de Schiff, interm6diaire de la transamination.

Les observations de HIGASHINO eta/ .° , 1° ont 6t6 confirm6es par HUTZLER ET DANCIS 14 avec des tissus humains (en ana6robiose); ces auteurs ont en outre isol6 du foie humain et partiellement purifi6 renzyme responsable (saccharopine-synth6tase ou lysine: x-c6toglutarate:NADPH oxydorgductase). Un argument suppl6mentaire a 6t6 fourni par l 'identification de la saccharopine dans l'urine d'une malade atteinte de dfficience intellectuelle, qui excr~tait aussi des quantit6s 61ev6es de lysine, de citrulline et d'homocitrullinO s.

Plus r6cemment, GROVE ET HENDERSON 16 ont compl6t6 les donn~es pr6c6dentes


DI~GRADATION DE LA L-LYSINE 343

en ttdmontrant le passage de la saccharopine A l'acide ~-aminoadipique et ~ l'acide glutamique en pr6sence de mitochondries de foie et de rein de rat en adrobiose. Ces auteurs ont aussi observ6 que, chez le rat intact, rinjection intrap6riton6ale de L-lysine marqufe et d'une surcharge en saccharopine non marqu6e 6tait suivie de l'61imination, dans l'urine, de saccharopine non radioactive : autrement dit, l'existence de cet interm6diaire in vivo n'est pas prouv6e. Ce r6sultat n6gatif est en faveur de l'hypoth~se formul6e plus haut de la formation de la saccharopine par une r6action secondaire de r6duction; normalement, en a6robiose, la base de Schiff s'isom6riserait et se scinderait directement en acide glutamique et semi-ald6hyde ~-aminoadipique.

Des essais analogues in vivo avec surcharge r6v~lent une oxydation importante de la lysine marqu6e (14CO2 = 29.3I To de la radioactivit6 initiale) et la formation d'acide pip6colique et d'acide ~-aminoadipique, celui-ci en tr~s faible quantit6 (0.2 %). D'autre part, GROVE ET HENDERSON is constatent aussi que la D-lysine marqu6e ne donne pratiquement pas de 14CO2 en pr6sence de mitochondries de foie et de rein; in vivo, on obtient tr~s peu de 14CO2 (o.6 %) et l'urine contient de la D-lysine (26 et 40 %) et de l'acide pip6colique (21 et 31%), avec une petite quantit6 d'acide ~-aminoadipique (0.2 %). L'acide pip6colique isol6 de l'urine est de la forme L, apr~s injection aussi bien de D-lysine que de L-lysine*; la comparaison entre les essais montre en outre que la D-lysine donne relativement beaucoup plus d'acide pip6colique que la L-lysine. Enfin, selon les m~mes auteurs, n i l e foie de rat en perfusion, ni les mitochondries ne d6gradent l'acide L-pip6colique.

Les observations de GROVE ET HENDERSON is ne sont 6videmment pas favorables l'hypoth~se d'un comportement diff6rent des m6tabolites endog~nes et exog~nes.

H2 N-CH2-CH2-C H2-CH2-CH- C OOH

kysin e NH2

" \ ®

Serfli- ald6hyde Ac[de ~-aminoadiplque ~ ~-pip~rid6[ne-6-_carl~×yl[que

HOOC ICI-I-COOh

/ 4 Acide "xx~x~ (~3 ///~-PiP6r6icfine- 2- / / / -carboxylique

~ C O O b t

Acide o~-c~to-

NH 2 Acide ~.-am[noadipique Acide plp6colique

- ~'-aminocaproi'que

(~:Voie "pip6colique" (r6f.1)

(~):Voie ¢~-aminoadipique "dlrecte"

* Dans une note rdcente, YAGI et al. 17 montrent la possibilit6 de formation d'acide pip6colique 5, partir de la Ddysine en prdsence de D-amino-acide-oxydase en a~robiose, l 'acide Al-pipdriddine - 2-carboxylique servant d'accepteur pour l'hydrog~ne enlevd ~ la lysine. Dans ce cas, on peut penser qu'il s'agit d'acide D-pipdeolique.


344 p. BOULANGER et al.

I1 apparait donc bien, conform6ment A notre conclusion ant6rieure, que l'a~ide pip6colique est relativement "inerte" chez le rat et se trouve sur une voie de d6ri- vation, en "cul-de-sac", du m6tabolisme normal de la lysine.

REMERCIEMENTS

Nous remercions Mademoiselle Th. Ernout, collaboratrice-technique du C.N.R.S., d'avoir aid6/~ la r6alisation mat6rielle de ce travail.

Rt~SUM]~

La destin6e de la L-[l*Cjlysine (uniform. marqu6e) (I), de l'acide Al-[14C]- pip6rid6ine-2-carboxylique (uniform. marqu6e) (II) et de l'acide L-[14C]pip6colique (uniform. marqu6e) (III) a 6t6 6tudi6e chez le rat "germ-free". La radioactivit6 retrouv6e au cours des 6 premi+res heures dans le CO 2 exhal6 est de io % pour I, 0.6 % pour II , moins de o.I % pour I II . L'acide pip6colique est 61imin6 tel quel dans l'urine et dans aucun cas on ne d6c+le la pr6sence d'acide a-aminoadipique ou de sa lactame.

Ces r6sultats sont compards/t ceux de la litt~rature et discut6s. I1 apparait que l'acide pip~colique est un m6tabolite relativement "inerte" chez le rat, et se trouve sur une voie de d6rivation, en "cul-de-sac", du m6tabolisme normal de la lysine.

B I B L I O G R A P H I E

I M. I~_OTHSTEIN ET L. L. MILLER, J. Biol. Chem., 211 (1954) 851. 2 P. BOULANGER ET R. OSTEUX, Z. Physiol. Chem., 321 (196o) 79. 3 P- BOULANGER, E. SACQUET ET R. OSTEUX, Compt. Rend., 257 (1963) 788. 4 P" BOULANGER, E. SACQUET, R. OSTEUX ET I-I. CHARLIER, Compt. Rend., 259 (1964) 932. 5 P. BOULANGER, J. BERTRAND ET R. OSTEUX, Biochim. Biophys. Acta, 26 (1957) 143. 6 3/i. ROTHSTEIN ET D. M. GREENBERG, J. Biol. Chem., 235 (196o) 714 • 7 M. ROTHSTEIN, K. E. COOKSEY ET D. M. GREENBERG, J. Biol. Chem., 237 (1962) 2828. 8 A. J. ASPEN ETA. MEISTER, Biochemistry, I (1962) 60o. 9 K. I-IIGASHINO, K. TSUKADA ET I. LIEBERMAN, Bioehem. Biophys. Res. Commun., 20 (1965) 285.

IO I~. HIGASHINO, M. FUJIOKA,:T. ASKI ET Y. YAMAMURA, Biochem. Biophys. Res. Commun., 29 (I967) 95.

I I M. H. I4~uo, P. P. SAUNDERS ET H. P. BROQUIST, J . Biol. Chem., 239 (1964) 508. 12 J. S. TRUPIN ET H. P. BROQUIST, J. Biol. Chem., 240 (1965) 2524. 13 E. E. JONES ET H. P . BROQUIST, J. Biol. Chem., 24o (1965) 253I. 14 J. HUTZLER ET J. DANClS, Bioehim. Biophys. Acta, 158 (1968) 62. 15 N. A. J. CARSON, B. G. SCALLY, D. W. NEILL ET I. J. CARRE, Nature, 218 (1968) 679. 16 J. GROVE ET L. M. HENDERSON, Biochim. Biophys. Acta, 165 (1968) 113. 17 K. YAGI, K. OKAMURA, A. TAKAI ETA. KOTAKI, J. Bioehem. Japan, 63 (1968) 814.

Bioehim. Biophys. Acta, 184 (1969) 338-344

Documents

La degradation de la L-lysine chez le ra “germ-free”