Revue Fran~aise de Transfus ion et d ' Immuno-h6ma to log i e Tome XXI. - - N ° I . - - 1978 11

Les ph6notypes Hm r6cessifs par M. H R U B I S K O , F. KLINDA, V. KRISLO et O. MERGANCOVA

Clinique d'H6matologie et de Transfusion Sanguine, BRATISLAVA.

L 'I~.TUDE des transf6rases de groupes sanguins ABH a permis de clarifier le probl6me des ph6notypes ~ Bombay ,, et des autres

ph6notypes H d6ficitaires.

Pour les ph6notypes ~ H m r6cessifs ,~, l 'absence de 2-~-L-fucosyl- transf6rase est caract6ristique. Mais l 'absence d'activit6 fucosyltrans-

f6rasique par les m6thodes actuel lement utilis6es ne signifie pas

l 'absence totale de product ion de r6cepteur H membranaire . De plus, les voies de synth6se des antig6nes H, sur tout au niveau de l '6rythrocyte ne sont pas encore bien 61ucid6es. On a prouv6 par des

tests in vitro que les rdcepteurs H 6taient pr6sents sur certaines h6rnaties H d4ficitaires, en quanti t6 tr6s m in ime ; on ne peut n6anmoins 61iminer la possibilit6 de crypto-antig6ne. La pr4sence de

traces d'antig6nes A ou B sur les h6maties <, Bombay ,, consti tue une preuve indirecte de la pr6sence des r6cepteurs H.

I1 faut r emarquer que l 'on a longtemps dout6 de la pr6sence des r6cepteurs A, B ou H sur les h6maties ~< Bombay ,~. Ils ne furent

prouv6s que par des m6thodes indirectes in vitro et par des techniques plus ou moins sensibles, dont la reproductibil i t6 fut

contest6e par quelques-uns. La pr6sence de r6cepteurs H sur les h6maties ,, Bombay ,, fut confirm6e plusieurs fois par SALMON et coll. [11]. En util isant un s6rum anti-H assez puissant, provenant

du proposi tus d 'une famille de ~ Bombay slovaque ,, (GER., OAlh), ces auteurs ont montr6 que cet anti-H, apr6s fixation, 6tait 61u4

de toutes les h6maties ,, Bombay ,, test6es, sauf des h6maties du

12 HRUBISKO M. et coll.

p r o p o s i t u s e t d e s a s~eur . I l s o n t a i n s i c o n c l u h l ' h 6 t 6 r o g 6 n 6 i t 6 d e s

p h 6 n o t y p e s ,, B o m b a y ,,. M a i s m 6 m e s u r l e s h 6 m a t i e s , B o m b a y ,,

G E R . , d e s r 6 c e p t e u r s H s o n t p r 6 s e n t s , p u i s q u e SCHENKEL-BRUNNER e t

co l l . [ 1 2 ] o n t p u l e d 6 m o n t r e r a p r 6 s t r a i t e m e n t p a r l a n e u r a m i n i d a s e .

D e p l u s , i l s o n t e n s u i t e p u t r a n s f o r m e r c e s h 6 m a t i e s OA1 h e n A.

P a r l a t e c h n i q u e d e f i x a t i o n - 6 1 u t i o n , LEVINE [8 ] a p r o u v 6 1'exis-

t e n c e d e r 6 c e p t e u r s B s u r d e s 6 r y t h r o c y t e s ,, B o m b a y ,,, LANSET e t

co11. [ 7 ] c e l l e d e s r 6 c e p t e u r s A, n o u s a v o n s n o u s - m 6 m e s r e t r o u v 6

c e s f a i t s [ 5 ] . DZlEZRKOWA-BORODE~ a e n t r e p r i s u n e v a s t e 6 t u d e h c e

s u j e t [ 2 ] .

L a d 6 m o n s t r a t i o n d e l a p r 6 s e n c e d ' A B H s u r l e s h 6 m a t i e s <, B o m -

b a y ,, a 6 t6 r 6 a l i s 6 e p a r d e s t e s t s i n v i t r o . C o m m e o n n e p e u t 6 1 i m i n e r

d e s a r t e f a c t s , n o u s a v o n s e s s a y 6 d e r e p r o d u i r e i n v i v o l e s r 6 s u l t a t s

TABLEAU I

Les groupes sanguins et anticorps des receveurs.

RECEVEUR

N ° GROUPE

1 O

2 O

3 O

4 O

5 B

6 B

7 O

8 O

9 A

10 A

11 O

12 O

13 O

14 O

15 O

TITRE DE L'ANTICORPS

Saline 2-M-E *

Anti-A Anti-B Anti-A Anti-B

32 32 N6g. N6g.

128 128 N6g. N6g.

128 128 2 2

64 32 N6g. N6g.

512 - - 4 - -

1 024 - - 16 - -

1 024 512 64 32

256 64 16 N6g.

- - 1 2 8 - - 2

- - 1 024 - - 32

32 32 N6g. N6g.

128 256 2 16

512 512 32 32

512 512 16 16

1 024 1 024 16 16

HISTOIRE DU RECEVEUR

2 grossesses

non- irnmunis6

n o n - immunis6

non- immunis6

immunis6

immunis6

immunis6

3 grossesses

immunis6

irnmunis6

grossesse B

immunis6

immunis6

immunis6

irnmunis6

* 2-M-E -- tes t de 2-mercaptho-6thanol.

PHENOTYPES Hm RECESSIFS 13

obtenus in vi t ro. Nous avons inject6 20 ml d 'hdmat ies OA1 h, ,Bombay , ,

marqudes au 51Cr ~t hu i t vo lon ta i res (Tabl. I) , six d ' en t r e eux dtaient

de groupe O, deux de groupe B, les deux suje ts B dta ient immunisds

p a r une subs tance AB du c o m m e r c e : la prdsence d ' an t i co rps anti-A

i m m u n 6tai t prouvde en t re au t re pa r le tes t au d imercapto-d thanol .

Des six vo lon ta i res O, l 'un dtai t immunisd pa r in jec t ion de subs-

tances AB, deux femmes poss6da ien t des an t i corps immuns p a r

grossesse (une p a r deux enfants B, l ' au t re pa r t ro is enfants A).

Les t ro is au t res ne poss6da ien t pas d ' an t i co rps immuns . Les t i t res

sont repor tds dans le tableau I.

Chez l 'un des receveurs B (FIG. 1), don t le t i t re d ' an t i co rps est

r e l a t ivement has (1/4), chez la femme ayant eu deux enfants B et

chez deux receveurs non immunisds , la survie des hdmat ies ,~ Bom-

1oo

90

80

70-

6O

5O-

40

30

20

10

o ~

A t I an t i - A n aux . . . . . . . k O ant i - All

I I

FIG. 1. - - L a s u r v i e d e s d r y t h r o c y t e s OAt h c h e z les r e c e v e u r s B e t O.

bay ,, OA1 h dtai t dans les l imi tes normales . Les l imi tes normales de

la survie des d ry th rocy tes dans no t re l abo ra to i r e sont de 90 ~t 74 %

le 8 ~ jour , soit en t e rme de demi-vie d 'hdmat ies marqudes au 51Cr:

T~0 51Cr: 37 /~ 23 jours . A un receveur B, dont le t i t r e de l 'anti-A

6tait de 1/16 et h t ro is receveurs O possddan t des an t i corps anti-A

immuns , la survie des hdmat ies OA1 h dtai t diminude, m oddr dm e n t

dans t ro is cas et s igni f ica t ivement dans un cas. Le sdrum des rece-

veurs ne con tena i t aucun an t i corps i r rdgul ier .

Ainsi ces rdsu l ta t s conf i rmen t ceux obtenus in v i t ro et pe rmet -

tent de r en fo rce r la concept ion de SALMON [11] su r l 'hdtdrogdndit6

14 H R U B 1 S K O M. et coll.

des ant ig6nes H des di f f6rents groupes de , Bombay ,,, malgr6 une

sp6cifici t6 H commune. On peu t aussi d6mon t re r l 'h6t6rog6ndit6

du ph6notype ~ B o m b a y ,, que nous avons p r6c6demment d6cri t et

d6nomm6 ~ Bombay- l ike ), [6] et l ' ins6rer dans la c lass i f ica t ion de

R)~cE et SAN6ER [ i0 ] au niveau de la classe I I I .

Dans cet te famille, il y a t rois filles et un garcon de groupe

OB~r,, une s~eur O~m et un enfant de la g6n6rat ion su ivante OAkum,

v r a i s e m b l a b l e m e n t issu d 'une consanguinit6. Tous ces su je ts sont

L e ( a - - b + ) et s6crbtent les subs tances H, Lewis, A et B suivant ie

groupe, des an t icorps anti-A, anti-B et anti-H, de t i t re assez 61ev6,

ma i s on ne re t rouve aucun signe de des t ruc t ion augment6e des globu-

les rouges, aussi b ien in vivo qu ' in vi t ro.

L ' an t i corps anti-H des su je ts ~ pa ra -Bombay ), a 6t6 d6fini pa r

RACE et SANanR [10] comme un ant i -HI et non pas un anti-H. C'est

pourquoi , ~ l 'occas ion d 'un nouveau pr61~vement de cet te famil le

nous avons 6tudi6 ce p rob l6me p a r des tes t s in v i t ro et in vivo.

L ' an t i corps de ces su je ts est neu t r a l i s ab le p a r la salive de s6cr6teurs,

mais non p a r la salive de non s6cr6teurs, ni p a r la salive de su je ts

, B o m b a y , , I posi t i fs . La survie des 6ry throcytes O (FI6. 2) est

4.1

0

0

100'

90.

80.

70-

60-

50-

40-

30-

20-

10.

~ 0 au 0 I Km

, i i $d

Fro. 2. -- La survie des 6rythrocytes O chez un sujet OBn-m .

dv idemmen t r~duite. Dans la c i rcu la t ion d 'un des su je t s O B t t m , le

8 ~ j o u r ne surv iva ien t que 10 % des h6mat ies O, soit une demi-vie

de 2 jours .

Nous avons examin6 la survie des hdmat ies OBam et OAB~m chez

sept vo lon ta i res (Tabl. H, N °s 9-15) qui 6ta ient tous immunis6s pa r la

PHENOTYPES Hm RECESSIFS

subs t ance AB ; u n e f e m m e 6tai t i m m u n i s 6 e p a r u n e ,, g rossesse B ,,.

Deux receveurs A et deux r eceveu r s O on t re~u 20 m l d ' 6 ry th rocy t e s

m a r q u 6 s de l ' u n des su je t s OBi~m (FIG. 3). Chez u n su j e t A et u n su j e t O

la surv ie des h 6 m a t i e s 6 ta i t i n f 6 r i e u r e h la n o r m a l e au 8' jour . Dans

le p r e m i e r cas, 70 % des h6ma t i e s su rv iva i en t , dans le 2 e cas, 59 %,

soit u n e demi-vie de 20 et 11 jou r s . Tro is a u t r e s vo lon t a i r e s o n t

re~u les h6mat i e s des a u t r e s m e m b r e s H m (FIG. 4). La surv ie au 8 e

j o u r 6tai t de 68, 40 et 7 % soit r e s p e c t i v e m e n t u n e demi-vie de 18

,oo]~

u u 50-

.T. 40- 0 i . . x -A2'- l ! -e- Ha 0 In | i - i l

) 0 -

20-

10-

t ! i

l | i

FIG. 3. - - La survie des 4rythrocytes OBT_Im chez deux receveurs A et deux receveurs B immunis6s. ,oo

90

8 0

e 7 0

--~ . 6 0 ̧ I

so.

• 40" a.

'tO,

2 0 -

10.

0|HmaVx 0 imm

13

i i I I j

FIG. 4. - - La survie d'autres 6rythrocytes O B B m

chez les receveurs O immunis6s.

16 HRUB1SKO M. et coll.

j o u r s , 1 h e u r e et s e u l e m e n t 6 m i n u t e s chez le 3 e r e c e v e u r . Chez ce

d e r n i e r (n ° 14), l ' e x a m e n r6p6t6 une ann6e a p r 6 s a d o n n 6 les m 6 m e s

r 6 s u l t a t s ( l igne pointi116e). De p lus , nous a v o n s i n j e c t6 aux volon-

t a i r e s n ° 1 e t n ° 8 des 6 r y t h r o c y t e s OA1 h e t OAB~m (FIe. 5). Le r e c e v e u r

n ° 1, a y a n t eu 2 <~ g r o s s e s s e B ,,, ne r e c o n n a i s s a i t p a s les h 6 m a t i e s

OA1 h c o m m e i n c o m p a t i b l e s , m a i s on c o n s t a t a i t u n e r 6 d u c t i o n de la

demi -v i e des 6 r y t h r o c y t e s OAkum (demi -v ie 5 j o u r s ) . Le r e c e v e u r

n ° 8 r e c o n n a i s s a i t les deux t y p e s d ' 6 r y t h r o c y t e s c o m m e i n c o m p a t i b l e s

p a r c e qu ' i l ava i t 6t6 i m m u n i s 6 p a r ses 3 g r o s s e s s e s a n t 6 r i e u r e s ( e n f a n t s

A) ; la demi -v ie des g lobu le s rouges 6 ta i t p o u r les OAI~ de 4 j o u r s , p o u r

100-

80-

70. ~ bO, • • SO-

lO. lie. 1 + 0 II llm 3 0 J,

% , , , . 8+0~ B -

,o • O~ ~. llec. 8 * I

! , , i i

FIG. 5. - - La survie des 6 ry throcy tes Oalh et OAB~m chez les m~mes receveurs, f e m m e s immun i s~es p a r la grossesse .

I00-

90.

8 0 .

70-

- 6 0 .

5 0 ,

4 0 .

30 .

20 . I

10.

I | - '

FI6. 6. - - La survie crois6e ent re deux couples d '6 ry th rocy tes OBnm.

P H E N O T Y P E S Hm RECESS1FS 17

les OABHm de 2 jours. I1 faut signaler la s i tuat ion ex t raord ina i re qui existe h l ' in t6r ieur de cet te famil le de ,, p a r a -Bombay ,, o/1 l 'on observe un mosa ic i sme des antigbnes et des ant icorps incompat ib les sans y d6celer d ' in teract ion. La survie des 6rythrocytes auto est d 'ai l leurs normale, entre 23 et 28 jours.

Au contraire , l ' examen de la survie des h6mat ies chez deux couples, donneur OBHm receveur OBHm, de la m 6 m e f ra t r ie et vice versa (FIG. 6) m on t r a i t une d iminut ion au 8 ¢ jour de 67 et 64 % soit une demi-vie de 19 et 14 jours, p o u r le p r e m i e r couple ( t ra i t plein) et pour le 2 e couple ( t ra i t pointill6) 64 et 50 % soit une demi-vie de 14 et 8 jours.

Malgr6 l ' identi t6 g6ndtique et le ph6notype semblable, les anti- corps de ces suje ts peuvent dis t inguer les antig~nes f ra ternels et r6duire ainsi la survie de ces hdmaties. Ces ph6nombnes peuvent s 'expl iquer pa r l 'h6t6rog6n6it6 des antig~nes d6j~t ment ionn~e plus haut mais 6galement pa r celle des ant icorps , et 6ventuel lement pa r un m6canisme d 'au to-protec t ion inconnu, dont l 'act ion rendra i t pos- sible la coexistence d 'an t icorps et d 'ant ig6nes de m 6 m e sp6cificit6.

En r6suman t les connaissances actuelles sur les ph6notypes r6cessifs, p o u r lesquels nous avons propos6 la ddn6minat ion pr61i- minaire H m parce que nous pensons que le gbne H est pr6sent chez ces sujets, nous pouvons cons ta te r que le caract~re pr incipal est l ' inhibition de la synth6se no rma le de l 'antigbne H soit s u r les- 6rythrocytes, soit dans les s6cr6tions, ou dans les deux t issus h la lois ( t issu h6matopoi6t ique et t issu glandulaire)

On connai t donc h l 'heure actuelle trois types de suppress ion r6cessive du H (Tabl. II) . Le p r e m i e r est le ph6notype ~, B o m b a y ,, originel, p rodu i t p a r l 'act ion suppress ive de deux g6nes de r6gulat ion xx, ne p e r m e t t a n t ni la synth6se de la f o rme glycoprot6ique, ni celle de la fo rme glycolipidique ( type de Levine).

TABLEAU II

Les trois types de la suppression ou modif icat ion du g~ne (et de l'antig~ne) H.

(A, B, O) OHxx

(A, B, O) Oi~zz

ABO (H) sese

2

18 HRUB1SKO M. et coll.

Le second phdnotype est reprdsentd pa r no t re famil le H m : rdunion de deux g~nes rdcessifs zz, s u p p r i m a n t un iquemen t la syn- thbse de la f o r m e glycolipidique dry throcyta i re du H, sans aucune inf luence sur la f o r m e glycoprotdique sdcr6tde.

La t ro is i6me catdgorie de phdnotypes << B o m b a y ,,, types par t ie ls ou incomple t s classds pa r RACE et SANGER dans la deuxibme catdgorie

des phdnotypes H ddficitaires sont dus h u n mode de t r ansmiss ion gdndtique rdcessive.

L 'expl icat ion de ces phdnombnes (Tabl. III) n 'es t pas encore trbs claire. L'idde originale de LEVlNE faisant in tervenir au lieu du g~ne X

TABLEAU III

La revue des hypotheses du fond gdndtique des phdnotypes ,~ para-Bombay >> incomplets ou interm~diaires.

Ah, Bh, (AHm, BHm)

Hx2x? Hzz s e s e ?

Voie compldrnentaire ?

suppldmentaire ?

(considdrd c o m m e un g6ne appa r t enan t au syst6me opdra teur rdgu- l a teur du g~ne de s t ruc ture H) un allble plus faible X2, est peu vrai- semblable . Chez les sujets Ah et Bh (selon nous H m ) on ne ddtecte pas de fucosyl t ransfdrase dans le sdrum. Une au t re hypothbse propo- sde p a r RACE et SANGER est l ' in tervent ion s imultande de deux paires de g~nes zz et sese. Nous comprenollS real cet te hypothbse, puisque nous avons mon t rd que l 'act ion de deux allbles z ne p e r m e t t a i t pas la synthbse d 'une fucosyl t ransfdrase et donc de l 'antig6ne H ndces- saire h la synthbse de l 'antigbne A ou de l 'ant ig6ne B ddtectds pa r agglut inat ion sur ces hdmaties A~, Bh (ou Aam et Biota). On peu t envisager c o m m e hypothbse une in terac t ion des g~nes qui p rennen t p a r t ~t la synth6se des antigbnes ABH, h une voie compldmenta i re ou supp ldmenta i re jusqu ' ic i inconnue, ou connue un iquemen t dans le sys tbme ABO. Nous avons ddmontr6 qu 'une compldmenta t ion inter- alldlique dans le syst~me ABO [4] est possible en ddcrivant le renfor-

PHENOTYPES Hm RECESSIFS 19

c e m e n t de Bx p a r le g6ne A 2 s i tu6 en << t r a n s ,,, d o n n a n t u n p h 6 n o t y p e

A2B. Une a u t r e i n t e r a c t i o n , m a i s e n t r e Ax et B a 6t6 d 6 m o n t r d e p a r

Ducos et col l . [1 ].

Donc p l u s i e u r s h y p o t h 6 s e s s o n t e n c o r e p o s t u l d e s , s eu l e l ' expl i -

ca t ion dd f in i t i ve des p h d n o t y p e s H m rdcess i f s p e r m e t t r a p e u t - ~ t r e de

fa i re un cho ix p a r m i el les .

S U M M A R Y

The s u r v i v a l of ,, B o m b a y ,, e r y t h r o c y t e s as we l l as t h a t of ,< p a r a

B o m b a y ,, r e d ce l l s ( f i r s t a n d t h i r d c l a s s a c c o r d i n g to R a c e a n d

S a n g e r c l a s s i f i c a t i o n ) h a s b e e n s t u d i e d a m o n g n o n c o m p a t i b l e a n d

<< p a r a B o m b a y ,, i n d i v i d u a l s . Th is s h o w s n o t on ly t h e h e t e r o g e n e i t y

of these p h e n o t y p e s (as a l r e a d y d e s c r i b e d b y S a l m o n a n d co w o r k e r s )

b u t a l so t h e p r e s e n c e of h i g h l y d i f f e r e n c i a t e d A B H f o r m e d an t i gens .

H d e f i c i e n t r e c e s s i v e p h e n o t y p e s a r e n o t e x p l a i n e d b y the p re -

sence of a n a m o r p h e h gene. T h e y a r i s e f r o m t h e a c t i v i t y (o r b e t t e r

f r o m the n o n a c t i v i t y ) o f t h e r e g u l a t i o n genes of w h i c h t h e r e c e s s i v e

a l le les x a n d z in d o u b l e dose do n o t e n a b l e a n o r m a l f u n c t i o n i n g

of t he H gene. The a p p e l a t i o n H = fo r ,< B o m b a y ,, p h e n o t y p e s ( l s t

c lasse) a n d the a p p e l a t i o n H = fo r H i n r e c e s s i v e (3d. c l a s s ) p h e n o t y p e s

a r e p r o p o s e d . G e n e t i c s as we l l as t h e s y n t h e s i s of Ah, Bh (Atom, Barn)

p h e n o t y p e s h a v e n o t y e t b e e n c l a r i f i ed . I n t e r a c t i o n of zz a n d sese

genes, o r a c c o m p l e m e n t a t i o n in t h e << t r a n s ,, p o s i t i o n have to b e looked at .

Docteur M. HRUBISKO, Par t i zanska 4, 80100 BRATISLAVA, (Czechoslovakia).

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