MOISISSURES ET ENVIRONNEMENT - Muco CFTR...MOISISSURES ET ENVIRONNEMENT Steffi ROCCHI UMR 6249 CNRS chrono -environnement Service de Mycologie CHRU Jean Minjoz BESANCON [email protected]

MOISISSURESETENVIRONNEMENT

SteffiROCCHIUMR6249CNRSchrono-environnement

ServicedeMycologieCHRUJeanMinjoz [email protected]

12èmes JournéesScientifiquesdelaSociétéFrançaisedelaMucoviscidose

INTRODUCTION

12à14h/jourenmoyennedansleslogements

POLLUANTSBIOLOGIQUES

Moisissures

Bactéries Acariens

Expositionimportantedifférentspolluants

INTRODUCTION

15m3 d’air/jour/adulte103à108sporesfongiques/m3

(OMS2009)

170spores/m3

>1000spores/m3

1010spores/m3

INTRODUCTION

Mécanismes dedéfense

Facteursdevirulence


(OMS2009)

PASD’EFFET

INTRODUCTION


(OMS2009)

INFECTIEUX ALLERGIQUE

TOXIQUE

INTRODUCTION


(OMS2009)

INFECTIEUX ALLERGIQUE

Infection fongiqueinvasive

(Patients immunodéprimés)

AsthmeAllergies(IgE)

Mycosesbroncho-pulmonairesallergiques

(IgE +IgG)Pneumopathies d’hypersensibilité

(IgG)

PATIENT/PERSONNE ENVIRONNEMENT• Immunité/Traitements• Génétique/Ethnie

•Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition

(Seltzer &Fedoruk,Pediatr ClinNorth Am2007)

INTRODUCTION

ENVIRONNEMENT •Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition

Revueinpress :Medical diagnosticsforindoormoldexposure(Hurrab etal.,Int.JofHygiene andEnvironmental Health,inpress)

Patientsàrisquequidoiventêtreprotégés:

- Patientsimmunodéprimés- Patientsmucoviscidose- Patientsasthmatiques

Lerisqueallergiqueaudomicile=leplusétudié

• Difficultésméthodologiques:PrélèvementsponctuelsCulture=viable

• Peud’étudesavecdesmesures

moisissuresvisibles

Problèmedestandardisation

+de100cohortesdenaissancedanslemonde(30ans)


- Patientsasthmatiques

INTRODUCTION

• En dehors des traitements antifongiques, la prévention repose sur lamaîtrise de l’environnement

• Déséquilibre entre les mesures prises à l’hôpital et l’environnement dulogement (seulesquelquesrecommandations)

Très peu demesure d’expositionà domicile


INTRODUCTION

- Patientsimmunodéprimés

• Connaissancesun peu plusdocumentées

• Déplacement CMEI (< 3% logementsBourgogne-Franche-Comté)

- Patientsmucoviscidose

COLONISATIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE

(Pihet etal.,Medical Mycology2009)

Expectorationsdepatients(mucoviscidose)

COLONISATIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE

(Pihet etal.,Medical Mycology2009)

Expectorationsdepatients(mucoviscidose)

ALLERGIQUE

Aspergillose Broncho-PulmonaireAllergique (ABPA)

Formed’allergiepulmonairesévèreetcomplexe(IgE etIgG)lésionspulmonairesgraves

1à11%despatientsatteintsdemucoviscidose

A.fumigatus fréquent dansl’air(intérieur /extérieur) Momentd’acquisition?(Ramsayetal.,ExpertReviewofRespiratoryMedicine2016)

Étudeexpositionàl’hôpital:Comparaisonentremoisissuresisoléesdansleserviceet

danslesexpectorationsdespatients(Naganoetal.,Medical Mycology2010)

EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE

1) Domiciles (Sidot et al., J Cyst Fibrosis 2007) :Recrutement:Patientsavec expectorations+ à S. apiospermum6 logements : prélèvementsair, eau, surface, terre des plantes

Plantes = sources de S. apiospermum

ÉtudesexpositionàScedosporium :

2) Différentssols (Kaltesis et al., MedMycol 2009 et Guaro et al. MedMycol 2006) :Industriels, champs agricoles, aires de jeux …

Reliéà la contaminationorganiquedes sols

3) Comparaison sols (ruraux urbains) (Harun et al., MedMycol 2010) :25 sites

Relié à l’activité humaine (grandes villes avec traffic,tourisme)


3) Prélèvements humides de surface dans 34 domiciles comparés entre les2 groupesde patients :

- marqueursaspergillairesabsents- marqueursaspergillairesprésents

Aucun lien entre exposition et pathologies aspergillairesdiagnostiquées (Pricope et al., poster SFMM 2014)

1) Concentrations(Aspergillus)mesurées (culture)2 logementspatientsABPA

Baisse exposition= prévention (Beaumont et al., Allergy 1984)

2) Evaluationparquestionnaireenvironnementalpatientsasthmatiques(n=202)etpatientsavecABPA(n=101)

Environnementrural=lienABPA(Agarwal etal.LungIndia 2014)

ÉtudesexpositionàA.fumigatus :


qPCR AspergillusfumigatusPOUSSIERE2moisChambre

16patients(CRCM) CULTURE


CHRUBESANCON


CHRUBESANCON

Aspergillusfumigatus

CULTURE

3’

5’

Amorce

SondeRQ

PRINCIPE

ncycles

Mesurefluorescence

QuantifierADN

qPCRPOUSSIERE2moisChambre

16patients(CRCM)



qPCR Aspergillusfumigatus

4patientsABPA

CULTURE

2patientsenrémission

üIgE spécifiquesA.fumigatusüIgE totaux>500IU/mLüprécipitines A.fumigatus ouradiologiecompatible(Stevensetal.,2003)

7patientssensibilisés

5patientsØ

POUSSIERE2moisChambre

16patients(CRCM)


CHRUBESANCON


0

100

200

300

400

500

P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P11 P12 P13 P14 P15 P16

Cultureliquidederinçagedeslingettes(toutesmoisissures)

UFCto

tales/m

3

De21à432UFC/25cm2(Étudepatientshématologiede16à416UFC/25cm2)

Logements"standards"

Logementsdepatients

(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)



0

100

200

300

400

500

P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P11 P12 P13 P14 P15 P16

UFCto

tales/m

3

Ø/ sensibilisés/rémission /ABPA

Cultureàpartirdescapteurs=pasdedifférencepatientsABPAA.fumigatus détectéenculturedans5logements


Logementsdepatients

Cultureliquidederinçagedeslingettes(toutesmoisissures)



Patients A.fumigatus (fg/µL)P15 6,53P14 6,40P13 6,37P5 5,44P10 4,29P16 3,44P9 2,46P8 2,11P11 2,10P6 1,91P2 1,17P7 0,90P4 0,52P3 0,39P12 0,07P1 0,00

RésultatsqPCRA.fumigatus




Patients A.fumigatus (fg/µL) ClassificationP15 6,53 ABPAP14 6,40 ABPAP13 6,37 ABPAP5 5,44 RémissionP10 4,29 RémissionP16 3,44 ABPAP9 2,46 SensibiliséP8 2,11 SensibiliséP11 2,10 SensibiliséP6 1,91 SensibiliséP2 1,17 ØP7 0,90 SensibiliséP4 0,52 ØP3 0,39 ØP12 0,07 SensibiliséP1 0,00 Ø

qPCR

A.fu

migatus

(fg/µL)

No ABPA ABPA

01

23

46

5

ABPAVSlesautres

glm :p-value=0,001

(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)LienA.fumigatuset ABPA

RésultatsqPCRA.fumigatusÉtudesexpositionàA.fumigatus :


Analysedelogementsde:- 13patientsaveccolonisationaspergillaire- 13patientssanscolonisationaspergillaire

Poussièresparcapteurs(Sapet etal.2015,JofCystic Fibrosis)

PasdelienentreA.fumigatusàdomicileet colonisation

Analyseparculture

• Duréesd’exposition différentes(14j- 10semaines)• Pasmêmerecrutement• Pasmêmetechniquesd’analyse

Culture=viableIMPORTANCEsurveillanceàdomicile



SOUCHESA.fumigatusRÉSISTANTES

De+en+decassouchesrésistantes

ABPA:TraitementsazolésaulongcourtAZOLÉS

MutationsdugèneCYP51Acodantpourl’enzymecibledesantifongiquesazolés (14-alphadéméthylase)

Deuxmodesd’acquisitionderésistanceauxazolés :- Suiteautraitementaulongcours(aspergillosechronique,ABPA)

Mutationsponctuelles(changement(s) acideaminé)- Acquisesdansl’environnement(patientssanstraitements)

Mutations+complexes(TR34ou46+changement (s)acideaminé)

SuividessouchesrésistantesauCHRUdeBesançon:Isolatspatientsmucoviscidose(Janv-Fév2017):6 TR34/L98H

France,Allemagne, Danemark,Belgique(Burgel etal.,2012AAC;Fisheretal.,2014JAC;Morioetal,2012JAC;Mortensenetal.,2011JClinMicrobiol ;Vermeulenetal.,2015AAC)

A.fumigatus

(25%desfongicides)

mutationsTR34/L98H

TR46/Y121F/T289A

AZOLÉS

Isolatsdansl’environnement(Europe,Asie,Afrique,Amérique)

SOUCHESA.fumigatusRÉSISTANTES/ENVIRONNEMENT

ÉtudesCHRUdeBesançon:-Environnementhospitalier(2015-2017):2TR34/L98H-Environnement (agriculturecéréalière, scieries,maraichers) TR34/L98H ++-Logements(1700capteurs):2TR34/L98Het1TR46/Y121F/T289A

Quellienentrecessouches?Rechercheàdomicilechezpatients

5molécules≈Médecine

HYPOTHESE

Mercipourvotreattention

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