C25 Les Moisissures D_interet Médical

FormationB iolog ie md icaleN 25

Mars 2002

LES MOISISSURESDINTRT MDICAL

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Cher Confrre,

Le Cahier de Formation que nous vous proposons ci-aprs nous entranepour un voyage passionnant dans lunivers des Myctes, lun des cinqordres du vivant.Outre un rappel bienvenu des bases scientifiques en la matire, la lecturedu glossaire est en soi une action de formation et une mise jour desconnaissances, indispensable avant dentreprendre la consultation de cetouvrage.La relation des moisissures avec des pathologies devenues frquentesoffre un terrain de choix la collaboration et au dialogue avec lescliniciens.Cest dire limportance de ce Cahier en pratique quotidienne. Limportanceet la qualit de liconographie permettent lidentification prcise et rapidede lagent causal souponn.Ce Cahier de Formation, uvre dexperts reconnus, ouvre un nouveaufront du savoir pour ceux qui, au cours de leurs tudes, nont pas euloccasion de se pencher sur cette discipline.Nous vous souhaitons une bonne rception de cet ouvrage et espronsque sa qualit technique rpondra vos attentes.Nous vous prions dagrer, Cher Confrre, nos cordiales et confraternellessalutations.

Adrien BEDOSSAPrsident

LES MOISISSURES DINTRT MDICAL

Ouvrage ralis par le Laboratoire de Parasitologie-Mycologiedu CHU dAngers 4, rue Larrey

49033 Angers cedex

BIOFORMA

Dominique ChabasseProfesseur des Universits - Praticien HospitalierChef de Service

Jean-Philippe BoucharaMatre de Confrence des Universits - Praticien Hospitalier

Ludovic de GentilePraticien Hospitalier

Sophie BrunAssistante Hospitalo-Universitaire

Bernard CimonAttach (Matre de Confrence des Universits IUT dAngers)

Pascale PennAttache

L I S T E D E S A U T E U R S

S O M M A I R E

INTRODUCTION .......................................................................................................... 9

I - GNRALITS SUR LES CHAMPIGNONS ....................................................... 111 - Dfinitions, champignons et mycoses...................................................................... 11

2 - Classification des champignons dintrt mdical................................................... 122.1- Introduction....................................................................................................... 122.2- Taxinomie ......................................................................................................... 12

a - Les Mastigomycotina .................................................................................. 12b - Les Zygomycotina ...................................................................................... 13c - Les Ascomycotina ....................................................................................... 14d - Les Basidiomycotina................................................................................... 15e - Les Deuteromycotina .................................................................................. 15

II - CRITRES DIDENTIFICATION ......................................................................... 171 - Examen macroscopique des cultures ....................................................................... 17

2 - Examen microscopique des cultures........................................................................ 182.1- Le thalle vgtatif ............................................................................................. 18

a - Le thalle siphon ou coenocytique.............................................................. 18b - Le thalle sept ou cloisonn........................................................................ 18

2.2- La couleur des hyphes ...................................................................................... 182.3- Lorigine endogne ou exogne des spores ...................................................... 18

a - Spores endognes ........................................................................................ 18b - Spores exognes.......................................................................................... 19

2.4- Laspect des spores ........................................................................................... 192.5- La prsence de chlamydospores ....................................................................... 192.6- Les diffrents modes de formation des conidies .............................................. 19

2.6.1- Le mode thallique................................................................................... 19a - Le type thallique solitaire ou terminal .................................................. 20b - Le type thallique arthrique.................................................................... 20

2.6.2- Le mode blastique .................................................................................. 20

a - Le type blastique solitaire ........................................................................... 20b - Le type blastique acropte .......................................................................... 20c - Le type blastique synchrone........................................................................ 20d - Le type blastique sympodial ....................................................................... 20e - Le type blastique rgressif .......................................................................... 21f - Le type blastique percurrent (ou blastique annellidique)............................ 21g - Le type blastique phialidique...................................................................... 21h - Le type blastique porique............................................................................ 21

2.7- Le mode de groupement des conidies .............................................................. 22a - En grappes................................................................................................... 22b - En masse ..................................................................................................... 22c - En ttes ou balles .................................................................................. 22d - En chanes basiptes ................................................................................... 22e - En chanes acroptes ................................................................................... 22

2.8- Le mode dimplantation des cellules conidiognes.......................................... 222.8.1- Cellules conidiognes indiffrencies ou peu diffrencies.......................... 222.8.2- Cellules conidiognes diffrencies .............................................................. 222.9- La prsence de structures protectrices compactes............................................ 23

2.9.1- Dorigine asexue................................................................................... 23a - Les pycnides.......................................................................................... 23b - Les acervules......................................................................................... 23

2.9.2- Dorigine sexue..................................................................................... 23a - Les gymnothces ................................................................................... 23b - Les clistothces ................................................................................... 23c - Les prithces........................................................................................ 24

3 - Dmarche diagnostique dune moisissure dintrt mdical ................................... 24

III - TUDE DES PRINCIPALES MOISISSURES DINTRT MDICAL.......... 351 - Les Mucorales .......................................................................................................... 36

1.1- Epidmiologie................................................................................................... 361.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 361.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 361.4- Morphologie microscopique............................................................................. 361.5- Genres prsents ............................................................................................... 37

Absidia............................................................................................................... 38Mucor ................................................................................................................ 40Rhizomucor........................................................................................................ 42Rhizopus ............................................................................................................ 44

2 - Les Aspergillus ......................................................................................................... 462.1- Epidmiologie................................................................................................... 462.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 462.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 472.4- Morphologie microscopique............................................................................. 472.5- Espces prsentes............................................................................................ 48

Aspergillus fumigatus ........................................................................................ 52Aspergillus flavus............................................................................................... 54Aspergillus niger................................................................................................ 56Aspergillus terreus ............................................................................................. 58Aspergillus nidulans .......................................................................................... 60Aspergillus versicolor ........................................................................................ 62Aspergillus du groupe glaucus .......................................................................... 64Aspergillus candidus.......................................................................................... 66

3 - Les autres Mucdins ou hyalohyphomyctes......................................................... 683.1- Epidmiologie................................................................................................... 683.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 683.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 693.4- Morphologie microscopique............................................................................. 693.5- Genres et espces prsents.............................................................................. 69

Acremonium (ex Cephalosporium) .................................................................... 70Beauveria bassiana............................................................................................ 72Chrysosporium keratinophilum.......................................................................... 74Chrysosporium (Geomyces) pannorum .............................................................. 76Fusarium ........................................................................................................... 78Fusarium moniliforme ( F. verticillioides) ...................................................... 80Fusarium oxysporum ......................................................................................... 82Fusarium solani................................................................................................. 84Onychocola canadensis ..................................................................................... 86Paecilomyces ..................................................................................................... 88Penicillium ......................................................................................................... 90Scedosporium apiospermum .............................................................................. 94Scopulariopsis brevicaulis ................................................................................. 98Scytalidium hyalinum......................................................................................... 100Trichoderma ...................................................................................................... 102Trichothecium .................................................................................................... 104

4 - Les Dmatis (ou phaohyphomyctes) et les Coelomyctes ................................. 1064.1- Epidmiologie................................................................................................... 1064.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 106

4.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 1064.4- Morphologie microscopique............................................................................. 1074.5- Genres et espces prsents.............................................................................. 107

Alternaria ......................................................................................................... 108Aureobasidium pullulans .................................................................................. 110Bipolaris ........................................................................................................... 112Cladosporium ................................................................................................... 114Curvularia ........................................................................................................ 116Exophiala.......................................................................................................... 118Phialophora ...................................................................................................... 120Scytalidium dimidiatum .................................................................................... 122Ulocladium ....................................................................................................... 124Phoma............................................................................................................... 126

5 - Dmarche diagnostique au laboratoire .................................................................... 1285.1- Prlvements ..................................................................................................... 1285.2- Examen direct ................................................................................................... 1285.3- Culture .............................................................................................................. 1285.4- Incubation ......................................................................................................... 1295.5- Examen des colonies fongiques........................................................................ 1295.6- Culture sur lame................................................................................................ 1305.7- Interprtation..................................................................................................... 131

RFRENCES GNRALES CONSEILLES ........................................................ 133RFRENCES SPCIFIQUES ................................................................................... 133GLOSSAIRE................................................................................................................... 145

ANNEXES ....................................................................................................................... 155

1 - Eclaircissants............................................................................................................ 155

2 - Colorant des cultures................................................................................................ 156

3 - Milieux disolement ................................................................................................. 156

4 - Autres milieux utiliss en mycologie ...................................................................... 157

Les progrs en mdecine ont permis de mieux matriser lvolution de nombreusesmaladies jadis rapidement fatales. Le dveloppement des traitements immunodpresseurset lapparition de nouvelles maladies comme le syndrome dimmunodficience acquise(SIDA), mais aussi la multiplication des facteurs iatrogniques et lextension des greffesdorganes ou de tissus (moelle osseuse), lorigine de nombreuses infections nosoco-miales, sont autant de circonstances qui expliquent lextension actuelle des mycoses.La liste des nouveaux champignons mergeant en mdecine ne cesse de saugmenter.Beaucoup despces, en particulier des champignons filamenteux appels moisissures , issues du sol, de lair ou des plantes et jadis inconnues du biologiste, ouqualifies de contaminants de laboratoire , sont rellement impliques dans un pro-cessus pathologique.Le but de cet ouvrage est dapporter au biologiste, confront un champignon, unedmarche diagnostique pratique ainsi que les lments morphologiques ncessaires sonidentification. Notre propos se limitera aux espces filamenteuses ou moisissures.

INTRODUCTION

9Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002

1. DFINITIONS, CHAMPIGNONS ET MYCOSES

Les champignons, appels aussi myctes, sont des organismes eucaryotes uni- ou pluri-cellulaires, incluant des espces macroscopiques (macromyctes) et dautresmicroscopiques (micromyctes), daspect filamenteux ou levuriforme.Cosmopolites, ils sont retrouvs partout dans la nature. Ils jouent un rle essentiel derecyclage des matires organiques en puisant leur nergie partir des sources carbonesexternes (htrotrophie).Dans la classification du monde du vivant, les champignons constituent aussi un rgne part, distinct de celui des plantes ou des animaux.Leur particularit morphologique est dtre troitement lis leur substrat nutritif grce un rseau myclien trs dvelopp.Sur un plan biochimique, les champignons sont caractriss par la prsence dune paroiconstitue essentiellement de polysaccharides, notamment des glucanes et de la chitine.Lergostrol constitue le principal strol de leur membrane, et la synthse de la lysineseffectue par la voie de lacide amino-adipique.Une autre de leur caractristique remarquable est leur reproduction. Ils produisent en effetun grand nombre de spores, ce qui leur assure un pouvoir de diffusion (et decontamination) considrable. Ces spores sont issues de plusieurs modalits dereproduction sexue ou asexue qui seront la base de leur classification.Si les macromyctes sont bien visibles lil nu cause de leurs carpophores (organesreproducteurs) abondants dans les sols certaines saisons, ils intressent peu les biologistesmdicaux car ce ne sont pas des agents habituels de mycoses. En revanche, les micro-myctes qui font lobjet de notre tude, peuvent tre lorigine dinfections humainesparfois redoutables. Ces champignons, habituellement microscopiques, deviennent danscertaines circonstances, visibles dans notre environnement. Cest ce que lon appellecouramment les moisissures , vritables agglomrats de filaments mycliens etdorganes fructifres recouvrant des substrats divers (fruits ou vgtaux en dcomposition,vieux murs, tapisserie, ), et capables de produire des quantits extraordinaires de spores.Les champignons, partout prsents, tablissent aussi avec les espces animales ou vgtalesdes interactions qui vont du saprophytisme au parasitisme, en passant parfois par lecommensalisme, ou encore participent des phnomnes symbiotiques, traductionvraisemblable de leur co-volution avec les vgtaux dune part, et les animaux dautre part.Le pouvoir pathogne des champignons peut sexprimer de diverses faons. En produisantdes toxines, ils peuvent tre lorigine dintoxication alimentaire, ou de mycotoxicoses


I. GNRALITS SUR LES CHAMPIGNONS

par laccumulation de ces toxines dans des vgtaux et leur consommation par lhommeou lanimal. Diffrent est le dveloppement du champignon dans lorganisme humain ouanimal (colonisation, invasion, dissmination) ; ce parasitisme est lorigine de maladiesappeles mycoses (car produites par des myctes).Ce sont les principaux agents de mycoses produites par les micromyctes filamenteux quiseront abords dans cet ouvrage.

2. CLASSIFICATION DES CHAMPIGNONS DINTRT GNRAL

2.1- IntroductionLe rgne des champignons comprend des divisions, elles-mmes subdivises en classes.Celles-ci englobent les ordres qui rassemblent les familles.Les noms se terminent par : mycotina pour les divisions, myctes pour les classes. Le suffixe -ale est employ pour dsigner les ordres, le suffixe -aceae pour les familleset le suffixe -adeae pour les sous-familles. Une famille comprend des genres quienglobent des espces, celles-ci peuvent se subdiviser en varits. Chaque champignon porte un nom qui suit les rgles de la nomenclature binomiale (genre etespce) nonces par Carl Von Linn au 18e sicle.Lidentification des champignons est essentiellement morphologique. Un micromyctepeut parfois se prsenter sous diffrentes formes : une forme sexue ou tlomorphe etune forme asexue ou anamorphe, les deux formes portant des noms diffrents. Lorsqueplusieurs aspects coexistent pour la forme asexue, on parle de synanamorphes. Lorsquelespce fongique existe dans la mme culture sous forme sexue et asexue, on parledholomorphe. En pratique, lorsquun champignon est dcouvert en culture, il portera lenom de la forme isole. Lorsquil existe sous les deux formes (anamorphe ettlomorphe), cest le nom de la forme sexue qui sera retenu en priorit.

2.2- TaxinomieLa classification de Hawksworth, Sutton et Ainsworth (1970) modifie par Kwon Chunget Bennett (1992), puis par de Hoog (1995), est la plus utilise actuellement (Figure 1).On diffrencie quatre divisions selon les modalits de la reproduction sexue : lesMastigomycotina, les Zygomycotina, les Ascomycotina et les Basidiomycotina. En outre,lorsque la reproduction sexue nest pas connue, la division est appele Deuteromycotinaou Fungi imperfecti.

a - Les MastigomycotinaLes Mastigomycotina qui sont trs rarement impliqus en pathologie humaine, serpartissent en deux classes : les Chytridiomyctes et les Oomyctes. Ils sont caractrisspar la prsence de spores munies de flagelles (un pour les Chytridiomyctes, deux pourles Oomyctes). Cependant, aujourdhui la nomenclature ne retient dans le rgne deschampignons que les Chytridiomyctes, en raison de la prsence de chitine dans leur paroiet de leur nutrition qui se fait par absorption.


Domaine : Eucaryotes Rgne : Champignons Division : Ascomycotina

(phylum) Basidiomycotina Zygomycotina Chytridiomycotina (Deuteromycotina)

Figure 1 : Classification gnrale des champignons.* Champignons connus seulement par leur stade asexu, en attente de classification.** Actuellement les espces issues de cette division ne sont plus classes parmi les champignons vrais.

b - Les ZygomycotinaCette division qui est caractrise par la production de spores sexues appeles zygospores,comporte de nombreux pathognes : les Mucorales, agents des mucormycoses et lesEntomophthorales, agents des entomophthoromycoses (Figure 2). Ils sont considrs,avec les Mastigomycotina, comme des champignons infrieurs. Deux caractristiques lesdiffrencient des autres champignons dits suprieurs (Ascomycotina etBasidiomycotina) : le myclium vgtatif est plus large, souvent dilat, peu ou pascloisonn et la reproduction asexue est dite endogne. Chez les Mucorales, par exemple,les spores sont produites lintrieur dun sac appel sporocyste, do le nom desporocystophore donn aux filaments porteurs de ce sac. Chez les Entomophthorales, lesspores asexues sont produites lextrmit de filaments et sont habituellement projetes distance, elles portent le nom de ballistospores.


Champignonssuprieurs

Champignonsinfrieurs

Basidiomycotina

Champignons

AscomycotinaZygomycotina

Chytridiomycotina

Oomycotina**

Deuteromycotina*(champignons imparfaits)

Figure 2 : Classification des Zygomyctes.Seuls les genres marqus d'une astrisque seront abords dans cet ouvrage.

c - Les AscomycotinaDans ce groupe qui comprend aussi un grand nombre de pathognes de lhomme (levuresascospores, champignons filamenteux tels que les Aspergillus, les dermatophytes, ), lesspores issues de la reproduction sexue (appeles ascospores) sont produites de manireendogne lintrieur dun sac appel asque. Ces asques, gnralement octospors, serontlibres (levures ascospores ou Hmiascomyctes) ou produits lintrieur dun organeprotecteur de forme variable appel ascocarpe (Ascomyctes vrais ou Euascomyctes).Les Hmiascomyctes (levures ascospores) et les Ascomyctes filamenteux serpartissent en six ordres diffrents au moins :1. Les Onygnales : Les ascospores sont produites principalement dans des gymnothces

et la reproduction asexue seffectue selon le type thallique solitaire.2. Les Eurotiales : Les ascospores sont produites dans des clistothces, et la reproduction

asexue seffectue selon le type phialidique ou annellidique.3. Les Microascales : Lascocarpe est clos, il contient des asques et des ascospores brunes

et la reproduction asexue seffectue selon le type annellidique.


Rgne CHAMPIGNONS

Phylum Zygomycotina

Classe Zygomyctes

Ordre Mucorales Entomophthorales

Famille Mucoraceae CunninghamellaceaeSyncephalastraceaeSaksenaceae

Genre Mucor sp.*Absidia sp.*Rhizopus sp.*Rhizomucor sp.*

4. Les Ophiostomatales : Les ascorcarpes sont des prithces et la reproduction asexueseffectue selon le type sympodial.

5. Les Sordariales : Les anamorphes sont hyalins. Les ascocarpes sont des prithces, etla reproduction asexue seffectue selon le type phialidique.

6. Les Dothidales : Les anamorphes sont mlaniss. Les ascocarpes sont des clistothcesou des prithces.

NB : Pneumocystis carinii forme (ou varit) hominis est actuellement rattach auxAscomyctes. Sa position taxinomique prcise au sein de cette division est encore discute.

d - Les BasidiomycotinaIls sont caractriss par la production de spores sexues (appeles basidiospores) formespar bourgeonnement lapex de cellules allonges, les basides. Les Basidiomyctes ontun thalle cloisonn avec prsence de boucles au niveau des cloisons. Les cloisons desfilaments mycliens ( clamp connexion ) comportent le plus souvent un pore centralunique de structure complexe appel dolipore.La plupart des Basidiomyctes sont des saprophytes de lenvironnement ou parfois despathognes de plantes, mais ils sont peu impliqus en pathologie humaine. Ceux quivivent en parasite chez lhomme sont le plus souvent des Cryptococcus, notammentC. neoformans dont la forme parfaite appartient au genre Filobasidiella. Dautres levuresappartenant aux genres Malassezia, Rhodotorula et Trichosporon dont les formes sexuesne sont pas connues, ont des caractres communs avec les Basidiomyctes.Les Basidiomyctes comprennent deux groupes principaux : les Htrobasidiomyctes(Ustilaginales) basides divises ou ramifies et les Holobasidiomyctes basides simples.Chez les Holobasidiomyctes qui sont essentiellement des macromyctes, deux ordres sontexceptionnellement impliqus en pathologie humaine : les Aphyllophorales et lesAgaricales.

e - Les Deuteromycotina (champignons imparfaits ou Fungi imperfecti)Cest dans cette division quon retrouvera le plus grand nombre de ces espces dintrtmdical. Cet ensemble, trs htrogne, englobe toutes les espces se multipliant sur lemode asexu. Des donnes rcentes reposant dune part sur la microscopie lectronique,dautre part sur la biologie molculaire (comparaison des squences dADN ribosomiquepar exemple), permettent dtablir des liens troits avec de nombreux Ascomyctes ouBasidiomyctes. En pratique, le maintien de cette division savre utile car beaucoupdespces nexpriment pas en culture leur reproduction sexue.Les Deuteromycotina sont diviss en trois classes (Figure 3) : Les Blastomyctes qui regroupent lensemble des champignons levuriformes. Les Hyphomyctes qui regroupent tous les champignons filamenteux thalle sept

dont les cellules conidiognes (productrices de spores ou conidies) sont libres. Les Coelomyctes qui rassemblent les champignons filamenteux dont les cellules

conidiognes sont contenues dans des organes protecteurs appels pycnides ou acervules.


Schmatiquement, on oppose deux types dHyphomyctes : les hyalins ou clairs(hyalohyphomyctes) appartenant la famille des Moniliaceae et les foncs ou noirsappels Dmatis ou phaohyphomyctes appartenant la famille des Dematiaceae.Cet ouvrage se propose de ne traiter que les champignons filamenteux dintrt mdical.Les espces tudies vont appartenir principalement aux Deutromyctes, et le plussouvent aux Hyphomyctes. Plus rarement, ils se recrutent parmi les Coelomyctesproducteurs de pycnides, ou parmi les Zygomyctes.

Figure 3 : Classification des Deutromyctes.Seuls les genres marqus dune astrisque seront abords dans cet ouvrage.


Rgne CHAMPIGNONS

Phylum Deuteromycotina(Fungi Imperfecti)

Classe Blastomyctes Coelomyctes Hyphomyctes

Ordre Cryptococcales Moniliales

Moniliaceae DematiaceaeFamille (hyalohyphomyctes) (phaohyphomyctes)

Genre Candida sp. Nattrassia sp. Acremonium sp.* Alternaria sp.*Cryptococcus sp. Phoma sp.* Aspergillus sp.* Aureobasidium sp.*Malassezia sp. Beauveria sp.* Bipolaris sp.*Trichosporon sp. Chrysosporium sp.*

Cylindrocarpon sp.Cladosporium sp.*Curvularia sp.*

Fusarium sp.* Exophiala sp.*Onychocola sp.* Phialophora sp.*Paecilomyces sp.* Scytalidium sp.*Penicillium sp.* Ulocladium sp.*Scedosporium sp.*Scopulariopsis sp.*Scytalidium sp.*Trichoderma sp.*

BIOFORMA

Schmatiquement, lidentification dune espce repose sur des critres macroscopiques(aspect gnral des colonies) et microscopiques (tude des filaments vgtatifs, desorganes de fructification et des spores). Certaines donnes (temprature, vitesse de pousse,sensibilit au cycloheximide) seront des complments utiles lidentification.

1. EXAMEN MACROSCOPIQUE DES CULTURES / MORPHOLOGIEMACROSCOPIQUE

La vitesse de pousse est dj une bonne orientation. Elle peut tre rapide comme chez lesAspergillus et les Mucorales, plus lente chez les dermatophytes (non traits ici) et certainesDmatis, ou mme trs lente comme chez Onychocola canadensis, agent donyxis. Lavitesse de pousse varie aussi en fonction de la richesse de linoculum. Elle est en effetdautant plus rapide que linoculum est important. Les cultures issues du revtementcutan poussent habituellement bien 25-30 C, celles issues de prlvements profonds 37 C. Une atmosphre humide est favorable la pousse et laration des tubes ou desbotes doit tre correcte (ne pas visser fond les tubes).Laspect des colonies est galement un bon critre dorientation. Les champignonslevuriformes donnent des colonies lisses, glabres, humides, daspect brillant ou mat,parfois rugueuses. A loppos, les filamenteux dont il sera essentiellement question ici, ontune texture diffrente : duveteuse, laineuse, cotonneuse, veloute, poudreuse ougranuleuse. Parfois certaines colonies de filamenteux peuvent avoir une apparence glabreen raison de labsence ou de la pauvret du myclium arien. Le relief des colonies (plates,plisses, crbriformes, ), tout comme leur consistance, est aussi observer. Ellespeuvent en effet tre molles, friables, lastiques, cartonnes ou dures.Il convient de prciser aussi la taille des colonies, petites, tendues, voire envahissantescomme chez les Mucorales.La couleur de la colonie est galement un lment pertinent dorientation ainsi que laprsence dun pigment dans la glose bien que ces derniers critres sont soumis auxconditions de culture. En gnral, les hyalohyphomyctes restent clairs : coloniesblanches, mais aussi crmes ou colores (vertes, brunes, oranges, violettes, grises, ).Par contre, les phaohyphomyctes deviennent rapidement foncs ou noirs. Le pigment etsa couleur, diffusible ou non dans la glose, doivent tre nots. Enfin lobservationmacroscopique des cultures devra rechercher en surface, et surtout au centre de la culture,les structures de fructification sexue (clistothces) ou asexue (pycnides) ainsi que desamas mycliens ou mches (cormies).


II - CRITRESDIDENTIFICATION


2. EXAMEN MICROSCOPIQUE DES CULTURES / MORPHOLOGIEMICROSCOPIQUE

Un ou mieux plusieurs fragments de culture seront prlevs lose pour les culturesglabres, ou au scotch (test du drapeau) pour les cultures filamenteuses et poudreuses, etensuite dposs dans une goutte de bleu lactique entre lame et lamelle.Plusieurs prlvements au centre et en priphrie de la colonie sont parfois ncessaires.De mme, il faut savoir rpter les montages afin de saisir le meilleur moment (culturesni trop jeunes, ni trop ges) pour observer la conidiognse.On analysera successivement :

2.1- Le thalle vgtatifTous les champignons possdent un appareil vgtatif constitu de filaments (ou hyphes),lensemble est appel thalle ou myclium. On distingue schmatiquement :

a - Le thalle siphon ou coenocytiqueIl est constitu dlments tubulaires peu ou pas ramifis, de diamtre large et irrgulier(5 15 m en moyenne) et non cloisonns. Ces filaments caractrisent les champignonsinfrieurs (Zygomyctes, Chytridiomyctes). En pratique mdicale, ils orientent, sous nosclimats, vers un diagnostic de Mucorales.

b - Le thalle sept ou cloisonnIl correspond aux champignons dits suprieurs : Ascomyctes, Basidiomyctes etDeutromyctes filamenteux. Ces filaments ont un diamtre troit (2 5 m) et rgulier :leurs bords sont parallles. Ils sont diviss par des cloisons ou septa en articles uni oupluricellulaires.

2.2- La couleur des hyphesLa paroi des hyphes peut tre mlanise (ou fonce). Les Hyphomyctes dont lesfilaments restent clairs (ou hyalins) sont appels Mucdins ou hyalohyphomyctes. Enrevanche, les Hyphomyctes qui ont une paroi pigmente ou fonce seront appelsDmatis ou phaohyphomyctes.

2.3- Lorigine endogne ou exogne des sporesOn peut mettre en vidence deux modes de formation des spores asexues :

a - Spores endognesCes spores (ou endospores) sont produites lintrieur dun sac ferm port par unfilament spcialis. Ainsi chez les Mucorales, les spores asexues naissent lintrieur desacs appels sporocystes (ou sporanges) et seront libres par dchirement de la paroi dusporocyste maturit.

b - Spores exognesChez les Basidiomyctes, les Ascomyctes et les Deutromyctes, les spores asexues sontformes de manire exogne, gnralement par bourgeonnement partir dune cellulespcialise appele cellule conidiogne. On appelle les spores ainsi produites des conidies.

2.4- Laspect des sporesLa forme des spores et leurs modalits ventuelles de septation taient initialement labase de la classification des Deutromyctes. Selon leur aspect, on distinguait cinqgroupes de spores chez les champignons dintrt mdical : les amrospores : spores unicellulaires de petite taille (exemples : Penicillium,

Aspergillus) les didymospores : spores bicellulaires (exemple : Trichothecium) les phragmospores : spores pluricellulaires cloisons transversales (exemples :

Drecheslera, Bipolaris, Curvularia) les dictyospores : spores pluricellulaires cloisons transversales et longitudinales

(exemples : Alternaria, Ulocladium) les scolcospores : spores troites, effiles, souvent incurves et cloisonnes

transversalement (exemple : Fusarium)Ces critres ont aujourdhui une importance secondaire dans la classification, et enpratique seuls les termes de dictyospores, et un degr moindre de phragmospores, restentutiliss.

2.5- La prsence de chlamydosporesLes chlamydospores sont des spores de rsistance qui sont formes partir dun article dufilament myclien ou son extrmit. Elles ont une paroi paisse.Contrairement aux autres spores, elles ne possdent pas de mcanisme de librationpermettant leur dissmination maturit.Bien que peu spcifiques puisquelles se retrouvent chez pratiquement toutes les espceslorsque les conditions sont dfavorables (culture trop ge, appauvrissement du milieunutritif), elles peuvent cependant constituer une aide au diagnostic lorsquellesapparaissent prcocement (par exemple chez certaines espces du genre Fusarium).

2.6- Les diffrents modes de formation des conidiesChez les Deutromyctes (ou champignons imparfaits), une cellule (ou article)spcialise ou non du thalle devient une cellule conidiogne (cellule produisant lesconidies). Cette cellule peut tre issue directement des filaments vgtatifs ou bien portepar un filament spcialis appel conidiophore. Deux grands modes de conidiognsedoivent tre diffrencis.

2.6.1- Le mode thalliqueIci la formation des spores seffectue partir dlments prexistants du thalle. On endistingue deux variantes principales :


a - Le type thallique solitaire ou terminal (holothallique)Un article (ou groupe darticles) latral ou terminal de lhyphe sindividualise en unespore unicellulaire (ou pluricellulaire) appele aleurie (exemples : les dermatophytes, lesChrysosporium et Scedosporium).

b - Le type thallique arthriqueLe filament (ou lhyphe) se diffrencie en spores de manire progressive et rtrograde(depuis le sommet jusqu la base), puis les spores ainsi formes, daspect rectangulaire,sont libres. Ces conidies sont appeles arthrospores (exemples : Geotrichum sp. etScytalidium hyalinum pour les hyalohyphomyctes, Scytalidium dimidiatum pour lesphaohyphomyctes).2.6.2- Le mode blastiqueDans ce cas, les spores sont formes par bourgeonnement partir de cellules conidiognesdiffrencies ou non, puis une cloison se forme lmergence du bourgeon et la cellulefille (ou spore) se spare de la cellule mre.Ce mode de conidiognse est le plus rpandu. On en distingue galement plusieursvariantes :

a - Le type blastique solitaireCest lexemple des levures appeles aussi blastospores. Une spore est produite partirde la cellule mre par simple bourgeonnement (exemples : Candida, Malassezia, ). Dansce mode de conidiognse, chaque site de bourgeonnement ne fonctionne quune seulefois. Cependant une mme blastospore peut produire plusieurs cellules filles, de maniresuccessive et en des sites diffrents mais contigus.

b - Le type blastique acropteChaque cellule mre bourgeonne une ou plusieurs conidies qui leur tour produisent denouvelles conidies et ainsi de suite. Les conidies restent accoles les unes aux autresformant une chane de spores dite acropte, la plus jeune des spores (dernire produite)tant situe lextrmit de la chane. En outre, cette chane est plus ou moins ramifie,puisquune mme cellule mre peut bourgeonner plusieurs cellules filles de maniresuccessive et en des sites diffrents, mais contigus (exemples : Cladosporium, Alternaria).On visualise facilement le point dattache des conidies entre elles (cicatrices debourgeonnement) lorsquelles sont libres.

c - Le type blastique synchroneIl y a alors bourgeonnement simultan de plusieurs conidies partir dune celluleconidiogne qui est renfle sa partie apicale (exemple : Botrytis, non trait ici).

d - Le type blastique sympodialLes conidies naissent toujours par bourgeonnement, mais aprs chaque bourgeonnement,la cellule conidiogne reprend sa croissance latralement. Cette alternance dephnomnes de bourgeonnement terminal et de reprise de croissance latrale se traduit


par un aspect en sympode ou en zig-zag de la cellule conidiogne o chaque anglecorrespond un site de bourgeonnement (exemples : Beauveria et Sporothrix schenkii,agent de la sporotrichose).

e - Le type blastique rgressifIci les conidies sont formes la fois dlments prexistants du thalle et dlmentsnoforms. Elles sont produites en effet lune aprs lautre par bourgeonnement ausommet de la cellule conidiogne. Mais ces bourgeonnements successifs saccompagnentdune fragmentation progressive et rtrograde de la cellule conidiogne. La celluleconidiogne se raccourcit au fur et mesure de son fonctionnement. Les conidiesapparaissent par ailleurs bicellulaires et disposes en grappes (exemple : Trichotheciumroseum).

f - Le type blastique percurrent (ou blastique annellidique)La cellule conidiogne (appele annellide), parfois peu diffrencie du filament, produit son extrmit apicale une conidie, puis reprend sa croissance son sommet. Elle formeensuite une deuxime conidie qui repousse la premire, et ainsi de suite.Les spores restent ainsi accoles les unes aux autres en chanes basiptes, la plus jeunetant la base de la chane, chane non ramifie puisque les spores sont issues dunecellule conidiogne site de bourgeonnement unique. Cependant, cet difice est fragile,et se dissocie souvent au montage. De plus, les reprises de croissance successivesinduisent au sommet de la cellule conidiogne une succession danneaux peu visibles,llaboration de la nouvelle paroi seffectuant lors de ces reprises de croissance seulement partir des couches paritales internes de la cellule conidiogne (exemple :Scopulariopsis).

g - Le type blastique phialidiqueLa cellule conidiogne, appele phialide, apparat souvent bien diffrencie. Elle a uneforme de bouteille renfle au milieu avec une base troite et une partie apicale effile, etse termine parfois par une collerette plus ou moins visible.Les phialides sont poses directement sur des hyphes vgtatifs (exemple : Phialophora),ou au contraire, sur un filament spcialis appel conidiophore, plus ou moins ramifi. Lesconidies formes par bourgeonnement sont accoles les unes aux autres en chanesbasiptes, la plus jeune tant la base (exemples : Aspergillus, Penicillium), ou glissent lesunes sur les autres pour se rassembler en amas ou balle au sommet de la phialide(exemple : Acremonium).

h - Le type blastique poriqueLa conidie quand elle se dtache du filament porteur (conidiophore), laisse sur ce dernierune empreinte visible, en forme de dpression, le pore, do le terme de porosporesdonn aux spores ainsi produites (exemples : Alternaria, Stemphylium, Ulocladium,Bipolaris, Curvularia).


2.7- Le mode de groupement des conidiesOn peut observer plusieurs modalits de groupement des conidies lextrmit descellules conidiognes :

a - En grappesLes grappes de spores rsultent de la production de conidies solitaires par une celluleconidiogne qui saccrot (type blastique sympodial ; exemple : Beauveria) ou seraccourcit (type blastique rgressif ; exemple : Trichothecium roseum) au fur et mesurede son dveloppement.

b - En masseCe mode de groupement sobserve chez les espces dont les conidies sont produites sur letype blastique synchrone (Botrytis).

c - En ttes ou balles A lextrmit apicale de certaines phialides, les conidies produites restent agglomres parune substance adhsive qui maintient lensemble au sommet de la phialide (Acremonium,Trichoderma).

d - En chanes basiptes Type blastique percurrent chez les hyalohyphomyctes (Scopulariopsis) Type blastique phialidique avec des phialides disposes en ttes aspergillaires

(Aspergillus) ou organises en pinceau (Paecilomyces, Penicillium)

e - En chanes acroptesType blastique acropte chez les phaohyphomyctes (Cladosporium, Alternaria)

2.8- Le mode dimplantation des cellules conidiognesLes cellules conidiognes peuvent natre de structures plus ou moins labores issues dumyclium vgtatif.

2.8.1- Cellules conidiognes indiffrencies ou peu diffrenciesCertaines sont intgres dans les hyphes, intercalaires ou situes en position terminale(Aureobasidium). Dautres naissent latralement, mais restent peu diffrencies desfilaments vgtatifs (Exophiala).

2.8.2- Cellules conidiognes diffrenciesa - directement insres sur les filaments vgtatifs (Acremonium, Fusarium)b - bien distinctes des filaments vgtatifs, portes par des conidiophores disperss sur lethalle vgtatif : regroupes lextrmit dilate du conidiophore, formant une tte aspergillaire

(Aspergillus)


regroupes en verticille au sommet du conidiophore : pinceau (Penicillium) disposes en verticilles le long du conidiophore (Verticillium)c - bien distinctes des filaments vgtatifs, portes par des conidiophores groups : conidiophores disposs paralllement les uns aux autres, agrgs en une gerbe sporifre

appele cormie ou synnema (Graphium, Scedosporium) conidiophores agrgs en coussinets superficiels appels sporodochies (Myrothecium,

non trait ici)

2.9- La prsence de structures protectrices compactes, issues de la reproductionasexue ou sexue

2.9.1- Dorigine asexueEn pratique, seules les pycnides peuvent tre observes sur les milieux de culture utilissen mycologie mdicale, les acervules ne se formant que dans les tissus de lhte vgtal.

a - Les pycnidesCe sont des nodules mycliens (parfois visibles lil nu), creux, composs dune paroipaisse forme par un feutrage compact de filaments mycliens. La face interne de la paroiest tapisse de conidiophores produisant des conidies. Les pycnides ont un petit orifice(ostiole) qui souvre maturit pour librer les spores (Phoma). Ils caractrisent, au seindes Coelomyctes, les Sphaeropsidales.

b - Les acervulesCe sont des agrgats de filaments mycliens enchevtrs, solidement attachs sur unvgtal dlimitant une cavit avec une ouverture. A lintrieur, on retrouve une assise deconidiophores produisant les conidies. Ce mode de groupement des conidiophorescaractrise, au sein des Coelomyctes, les Mlanconiales.

2.9.2- Dorigine sexueDans de rares cas, on peut observer pour les moisissures dintrt mdical la formeparfaite du champignon. Si celle-ci apparat ds lisolement, le champignon prendra lenom de sa forme sexue. Dans la plupart des cas, ce sont des Ascomyctes qui produisentdes asques renfermant maturit 8 ascospores. Une structure, lascocarpe, protge lesasques. On en distingue plusieurs types :

a - Les gymnothcesLascocarpe clos est entour dun rseau dhyphes pridiens priphriques lches :dermatophytes du genre Nannizzia (Microsporum) ou Arthroderma (Trichophyton). Enpratique, ce type dascocarpe nest pas rencontr chez les moisissures dintrt mdical.

b - Les clistothcesLascoscarpe est arrondi et lisse, mais il ny a pas de rseaux mycliens priphriques. Ilest clos et sa paroi se fissure maturit pour librer des asques sphriques contenantchacun 8 ascospores (Emericella nidulans, Pseudallescheria boydii).


c - Les prithcesLascocarpe est voisin du clistothce, mais prend une forme de bouteille avec, lextrmit rtrcie, une ouverture appele ostiole. Il renferme des asques allongs,entours dune paroi simple membrane (unituniqus) ou deux membranes (bituniqus)et contenant chacun 8 ascospores (exemples : Chaetomium, Sordaria, non tudis ici).

3. DMARCHE DIAGNOSTIQUE DUNE MOISISSUREDINTRT MDICAL

Les cls didentification qui vont suivre ont pour objet de faciliter la dmarche dudiagnostic morphologique afin darriver au genre (ou espce).Aprs un arbre dcisionnel bas sur les caractristiques des filaments mycliens, sontprsentes des cls didentification correspondant aux diffrents groupes tudis dans cetouvrage : Mucorales, Mucdins, Dmatis et Coelomyctes (Figures 4 8).


Figure 4 : Dmarche gnrale du diagnostic dune moisissure.


Champignons microscopiquesou micromyctes

Filaments mycliens cloisonns= Septomyctes

Filaments mycliens siphons= Siphomyctes

Zygomyctes

Ascomyctes

Basidiomyctes

Deutromyctes

Thalle septConidies produites

lintrieur de pycnides ou dacervules

Coelomyctes

Thalle septPas dorganes protecteurs des cellules conidiognes

Hyphomyctes

Filaments mlaniss(brun fonc noirs)

Dmatis

Filaments hyalins(clairs ou incolores)

Mucdins

Deutromyctes

Thalle levuriforme

Blastomyctes

Figure 5 : Cl didentification des Mucorales.


Filaments larges, irrguliers,non cloisonns(Siphomyctes)

Spores produites dans un sporocyste(Mucorales)

Prsence dune columelleSporocystes renfermant de nombreuses spores maturit

(Mucoraceae)

Absidia sp. Rhizopus sp.

Large apophyse conique+

chlamydosporespeu nombreuses ou absentes

Courte apophyse anguleuse+

rhizodes bien visibles la base des sporocystophores

Absence dapophyse

Rhizodes difficilement visibles la base des sporocystophores

Absence de rhizodes(tranglement du sporocystophore

la base de la columelle)

Rhizomucor sp.Mucor sp.

Figure 6 : Cl didentification des Mucdins.


Filaments septs,fins et rguliers, hyalins

(Mucdins)1. Conidies issues dlments prexistants du thalle

1.1. Conidies solitaires (aleuries)1.2. Conidies en chanes (arthrospores)

2. Conidies produites par bourgeonnement

2.1. Conidies disposes en grappes 2.2. Conidies disposes en ttes ou balles2.3. Conidies disposes en chanes basiptes

1.1. Mucdins produisant des aleuries

Chrysosporium sp.

Aleuries unicellulairesterminales ou latrales

Scedosporium sp.

Aleuries unicellulairesovodes ou claviformes,

sessiles ou lextrmit de courts conidiophores

(+ cormies dannellides)

Dermatophytes(non traits dans cet ouvrage)

Prsence daleuriesintercalaires

(parfois de rares sporesbicellulaires)

Prsence de macroconidies(pas daleuries intercalaires)

Figure 6 (suite) : Cl didentification des Mucdins.


1.2. Mucdins produisant des arthrospores

Geotrichum sp.(non traits dans cet ouvrage)

Arthrospores unicellulaires paroi lisse

dabord rectangulaires, puis les angles smoussent

Arthrospores uni ou bicellulaires paroi verruqueuse

et dapparitition tardive(chanes articules angle droit)

Arthrospores uni ou bicellulaires paroi lisse

et dapparition prcoce

Scytalidium hyalinumOnychocola canadensis

2.1. Mucdins conidies disposes en grappes

Beauveria sp.

Conidies unicellulairesde petite taille

sur une cellule conidiogne croissance sympodiale

Trichothecium sp.

Conidies bicellulairesde grande taille

disposes en grappes au sommet de la cellule conidiogne

Figure 6 (suite) : Cl didentification des Mucdins.


2.2. Mucdins conidies disposes en ttes ou en ballesau sommet de phialides

Conidies hyalines

Conidies vertes maturit

Fusarium sp.Acremonium sp.

Conidies unicellulaires ovaleset conidies pluricellulaires

falciformes+

phialides cylindriquessolitaires ou groupes

Conidies unicellulaires ovodes ou oblongues

+phialides aciculairesdirectement inseres

sur les filaments vgtatifs

Conidies unicellulaires globuleuses+

phialides en forme de quille,en verticilles sur des conidiophores

ramifis angle droitou sur leurs branches latrales

Trichoderma sp.

Figure 6 (fin) : Cl didentification des Mucdins.


2.3. Mucdins conidies unicellulaires disposes en chanes basiptes

Conidies produites par des phialides inserres lextrmit

dilate dun conidiophore large et non cloisonn

(disposition en tte aspergillaire)

Conidies produites par des phialides groupes en verticilles lextrmit

non dilate dun conidiophore fin et cloisonn(disposition en pinceau)

Conidies ampulliformes(aspect de mongolfire)

produites par des annellides solitaires ou groupes lextrmit

dun conidiophore court, fin et cloisonn

Phialides col peu dveloppdisposes en pinceaux serrs

Phialides col effildisposes en pinceaux divergents

Penicillium sp. Paecilomyces sp.

Aspergillus sp. Scopulariopsis sp.

Figure 7 : Cl didentification des Dmatis.


Filaments septs, fins et rguliers,brun fonc noirs

(Dmatis)

1. Dictyospores (spores pluricellulaires cloisonnes transversalement et longitudinalement)2. Phragmospores (spores pluricellulaires multiseptes cloisonnes seulement transversalement)3. Spores unicellulaires disposes en amas

4. Spores unicellulaires ou bicellulaires disposes en chanes

1. Dmatis produisant des dictyospores

Ulocladium sp.

Dictyospores solitairesdpourvues de bec

Alternaria sp.

Dictyospores en chanesou bec marqu

Figure 7 (suite) : Cl didentification des Dmatis.


2. Dmatis produisant des phragmospores

Curvularia sp.

Spores lgrement incurves(cellule centrale

volumineuse et fonce)Spores fusiformes

(parfois un tube germinatifdans laxe de la conidie)

Bipolaris sp.

3. Dmatis produisant des spores unicellulaires disposes en amas

Phialophora sp.

Spores en amas au sommetde phialides colleretteplus ou moins marque

Exophiala sp.

Spores hyalines ou brun plesaccumulant lextrmit

des annellides peu diffrencies ou glissant le long de leur paroi

BIOFORMA

Figure 7 (fin) : Cl didentification des Dmatis.

Figure 8 : Cl didentification des Coelomyctes.


Spores asexues produitesdans des pycnides

(Coelomyctes)

Nattrassia mangiferae(ex Hendersonula toruloidea)

Synanamorphe de Scytalidium dimidiatum(arthrospores brunes uni ou bicellulaires)

Pycnides brun fonc noiressouvent groupes

+spores hyalines ou brunes

bicellulaires(10-14 x 4-5 m) m)

Pycnides brunesle plus souvent isoles

+spores hyalinesunicellulaires

(2-7

Phoma sp.

Cladosporium sp.

Blastospores en chanes acroptes

(renforcement de colorationaux extrmits)

Arthrospores hyalines ou brunessolitaires ou en chanes

rectangulaires ou en tonnelet

Scytalidium dimidiatum

Arthrospores bruneset blastospores hyalines

en grappes le long dhyphes pais

Aureobasidium pullulans

4. Dmatis produisant des spores uni ou bicellulaires disposes en chanes

J.M.Bpub

Ce chapitre prsente de faon synthtique les principaux genres et espces de moisissuressusceptibles dtre incrimines dans un processus pathologique.Seront abords successivement : les Mucorales les Aspergillus les autres Mucdins les Dmatis et les Coelomyctes.Chaque champignon est prsent sous forme dun fiche illustre comportant, outre sadescription morphologique, des renseignements pidmiologiques et cliniques utiles linterprtation.Ce chapitre sera complt par une prsentation de la dmarche diagnostique au laboratoire.


III - TUDE DES PRINCIPALESMOISISSURES

DINTRT MDICAL


1- LES MUCORALES

1.1- pidmiologieLes Mucorales sont des champignons cosmopolites trs rpandus. Saprophytes du sol oils se nourrissent partir de vgtaux, des crales ou des excrments, ils contaminentfrquemment les denres alimentaires (fruits, lgumes, ). Certaines espces sontpathognes de plantes.

1.2- Pouvoir pathogneRedoutables opportunistes, les Mucorales sont des agents de zygomycoses (Rhizopusoryzae, Rhizomucor pusillus, Absidia corymbifera, Mucor circinelloides, ), notammentchez les sujets diabtiques et les patients atteints dhmopathies. Ils sont loriginedatteintes rhinocrbrales, cutanes (chez les grands brls) et viscrales (pulmonaires,digestives, rnales, ).

1.3- Caractres culturauxCes zygomyctes se dveloppent bien sur tous les milieux utiliss en mycologie. Leurcroissance rapide est cependant inhibe par le cycloheximide (Actidione). Les tempraturesoptimales de croissance varient de 20 C pour les Mucor ou 20-25 C pour les Rhizopus, 36 C pour les Absidia, mais les espces incrimines dans les zygomycoses humaines sonttrs thermophiles et prsentent des tempratures maximales de croissance plus leves(40 C). Dune manire gnrale, la croissance en culture est rapide et extensive sur glosede Sabouraud ou PDYA (Peptone-Dextrose-Extrait de levure-Agar). Les colonies prsententun dveloppement arien souvent important, en particulier chez les Rhizopus, et envahissentde manire quasi-totale les botes de culture en 5 7 jours.1.4- Morphologie microscopiqueLe thalle est constitu de filaments siphons (coenocytiques), non (ou peu) cloisonns, dediamtre large (5-15 m) et irrgulier. Le champignon met gnralement des stolons quicourent la surface du support glos et adhrent au substrat par des sortes de racinesappeles rhizodes (Figure 9). Des stolons partent des filaments dresss, lessporocystophores (aussi appels sporangiophores), filaments porteurs des organes dereproduction, les sporocystes (ou sporanges). La partie apicale du sporocystophore se dilateen une vsicule, appele columelle, qui fait saillie lintrieur du sporocyste daspectglobuleux ou piriforme selon les espces. Ce sont dans ces sporocystes que sont produitesles spores (spores internes parfois appeles sporocystospores ou sporangiospores). Cesspores surface lisse, strie ou granuleuse selon les espces, sont libres maturit pardchirement de la paroi du sporocyste. La paroi peut, cependant, persister autour de lapexdu sporocystophore (au niveau de la columelle) sous forme dune collerette. Chez certainsgenres (Absidia, Rhizopus, ...), le sporocystophore prsente son extrmit un largissementplus ou moins marqu juste au-dessous du sporocyste, quon appelle apophyse. A linverse,chez les Mucor, un tranglement du sporocystophore est souvent observ sous la columelle.On observe parfois des chlamydospores, terminales, intercalaires ou en chanes.

La diffrenciation des familles au sein de cet ordre se fera sur un ensemble de critres :lexistence ou non de ramifications sur les sporocystophores, la forme des sporocystes,la prsence dune columelle faisant saillie dans le sporocyste et labondance des sporesdans les sporocystes maturit. Quant la diffrenciation des genres au sein de lafamille des Mucoraceae (qui comprend la plupart des Mucorales dintrt mdical), ellese fera sur laspect des sporocystophores et leur groupement ventuel, sur la forme dela columelle et les caractristiques de sa surface, mais surtout sur la prsence ou nondune apophyse et sa taille, la prsence ou non de rhizodes, et labondance deschlamydospores.

1.5- Genres prsents Absidia sp. Mucor sp. Rhizomucor sp. Rhizopus sp.

Figure 9 : Appareil reproducteur des Mucorales.


Spores

Sporocyste

Columelle

Apophyse

Sporocystophore

Rhizodes

Stolons

BIOFORMA


Absidia(Cohn) Saccardo et Trotter (1912)

Espce type : Absidia corymbifera Caractres culturaux Colonies croissance rapide, envahissant rapidement la bote ou le tube, et de texture

floconneuse. Couleur grise en surface, incolore au verso. Pousse plus rapidement 37 C qu 25 C (croissance possible jusqu 48 52 C). Morphologie microscopique Filaments larges (5 15 m) peu ou pas septs. Sporocystophores isols ou groups, fixs au milieu des stolons et ramifis en grappe

ou en corymbes. Ils se terminent par une large apophyse conique (vasement en formedentonnoir).

Sporocystes de 10 120 m de diamtre, daspect piriforme avec une columellehmisphrique.

Spores cylindriques lisses, jauntres, de 3,4 4,6 m de long sur 2,8 3,8 m de large. Rhizodes peu nombreux, situs sur les stolons distance des sporocystophores. Chlamydospores absentes ou peu nombreuses, contrairement au genre

Chlamydoabsidia non dcrit dans cet ouvrage.

CommentairesAbsidia corymbifera est, au sein du genre Absidia, la seule espce reconnue commepathogne. Cette espce qui peut pousser jusqu 50 C, est implique dans des infectionsopportunistes chez limmunodprim avec atteintes pulmonaires, neuromninges,rnales ou cutanes.Les Absidia se distinguent des Mucor, Rhizopus et Rhizomucor par leur apophyse biendveloppe (en forme dentonnoir).


4

1 2

3

Absidia sp. :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Sporocystophore ramifi termin par une columelle faisant saillie dans le sporocysteglobuleux (3, objectif 4). Aprs dchirement du sporocyste, la collerette permet devisualiser la large apophyse conique (4, objectif 100).


MucorMicheli ex Fries (1832)

Espces types : Mucor circinelloidesMucor plumbeus

Caractres culturaux Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture laineuse. La couleur varie du gris au brun en surface, le verso est incolore. La temprature optimale de croissance de ces champignons est de 25 C.

Morphologie microscopique Filaments larges peu ou pas septs. Pas de stolons ni rhizodes. Sporocystophores issus le plus souvent du thalle vgtatif. Ils se terminent par une

columelle ovode sans apophyse et prsentent souvent un retrcissement sous lacolumelle.

Sporocystes globuleux. Spores rondes ellipsodales, lisses ou ornementes de spicules. Chlamydospores parfois prsentes et abondantes

CommentairesLes champignons du genre Mucor sont trs rarement impliqus comme agents de mycoses(mucormycoses).Ils se distinguent des Absidia par labsence dapophyse et des Rhizopus par labsence derhizodes. Par rapport aux Rhizomucor, thermophiles, avec lesquels la confusion estpossible, la plupart des Mucor ne poussent pas 37 C, et ils ne possdent pas derhizodes.

BIOFORMA


Mucor sp. :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Sporocystophore portant un sporocyste globuleux (3, objectif 40 et 4, objectif 10) dpourvu d'apophyse (5, objectif 40 et 6, objectif 20). Notez la prsence de chlamydospores (3) et l'tranglement du sporocyste sous la columelle (3, 5, 6).

1 2

3

4

5

6


Rhizomucor(Lucet et Constantin) Wehmer ex Vuillemin (1936)

Espce type : Rhizomucor pusillus

Caractres culturaux Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture laineuse. Les colonies sont brun ple au dpart, devenant brun sombre en vieillissant ; le verso

reste incolore. Loptimum thermique est de 37 C, mais la croissance est possible jusqu 54 C. Morphologie microscopique Filaments larges peu ou pas septs. Les rhizodes et les stolons sont prsents, mais parfois difficiles reconnatre. Les sporocystophores sont assez courts, avec des ramifications subterminales en

sympodes. Les sporocystes sont foncs (noirs), recouverts dasprits. La columelle est bien dveloppe, mais il ny a pas dapophyse. Les spores sont globuleuses (3 4 m de diamtre), lisses et hyalines. CommentairesSeul Rhizomucor pusillus est considr actuellement comme un pathogne opportuniste.Ce champignon thermophile est lorigine de mucormycoses rhinofaciales, crbrales,pulmonaires et gnralises. Le terrain de prdilection est le patient leucmique.Les Rhizomucor diffrent des Mucor par la prsence de rhizodes (pas toujours biendvelopps), et par leur thermophilie (temprature maximale 54 C), la tempratureoptimale de croissance des Mucor tant de 25-30 C. Par ailleurs, contrairement auxAbsidia, ils nont pas dapophyse. Enfin, par rapport aux Rhizopus, les sporocystophoressont bien ramifis et les rhizodes moins dvelopps.


1 2

3 4

Rhizomucor sp. :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Rhizodes et court sporocystophore ramifications subterminales (3, objectif 4).Aprs rupture du sporocyste, on visualise une columelle bien dveloppe sans apophyse (4, objectif 40).

BIOFORMA


RhizopusEhrenberg (1820)

Espces types : Rhizopus oryzae et Rhizopus rhizopodiformis Caractres culturaux Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture cotonneuse. Les colonies, blanches au dpart, deviennent grises et fonces en vieillissant. Loptimum thermique est de 25 C ou 37 C selon les espces, mais la croissance est

possible jusqu 50 C pour R. rhizopodiformis. Morphologie microscopique Filaments larges non ou peu septs. Stolons, rhizodes et sporocystophores sont bien diffrencis. Ces 3 lments naissent

dune mme origine : le nud. Les sporocystophores bruns sont isols ou disposs en bouquets de 2 6 lments. Les sporocystes sont globuleux avec une columelle globuleuse ou cylindrique et une

apophyse courte et anguleuse. Aprs rupture du sporocyste, la columelle saffaisse surle sporocystophore (aspect en parapluie).

Les spores sont ovodes. Des chlamydospores peuvent tre prsentes, isoles ou disposes en chanes.

CommentairesRhizopus oryzae et Rhizopus rhizopodiformis sont les principaux agents desmucormycoses. Thermophiles, ils dterminent des atteintes rhinocrbrales, mais aussipulmonaires et intestinales. Les patients rceptifs sont les diabtiques en acidoctose, lesgrands brls, les patients atteints dhmopathies malignes ou sous-aliments(kwashiorkor, ).En rgle gnrale, on diffrencie bien les Rhizopus des autres Mucorales par la prsencede rhizodes bien dvelopps, situs au niveau des nuds et par la disposition frquentedes sporocystophores en bouquets.


6

5

4

3

21

Rhizopus sp. :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Rhizodes situs au niveau du noeud (3, objectif 10). Aprs rupture du sporocyste, lacollerette permet de visualiser une courte apophyse, puis la columelle se replie en para-pluie sur le sporocystophore (R. oryzae, 4 et 5, x 40; R. rhizopodiformis, 6, x 20).

2- LES ASPERGILLUS

2.1- pidmiologieLes Aspergillus sont des champignons cosmopolites, trs rpandus dans le milieuextrieur. Ce sont des champignons ubiquistes : on les rencontre aussi bien en milieu rural(silos grains, foin, paille tasse et humide, crales ou fruits moisis, matires organiquesen dcomposition) quen milieu urbain, et aussi bien lextrieur qu lintrieur deshabitations (poussires accumules derrire les meubles, cadres, faux plafonds, conduitsdaration, plantes en pots, ).Les diffrentes enqutes aromycologiques rvlent que les spores aspergillaires se situentau 4e rang des spores fongiques de lair (aprs les spores dAlternaria, de Cladosporium etde Penicillium).

2.2- Pouvoir pathogne

Aspergillus fumigatus est lespce la plus pathogne, responsable denviron 80 90 % desaspergilloses humaines. Dautres espces sont aussi impliques. Par ordre dcroissant defrquence, citons A. flavus, A. niger, A. terreus, A. nidulans.Les Aspergillus sont des pathognes opportunistes. Leur dveloppement chez lhtencessite lexistence de conditions favorables, locales (caverne tuberculeuse, cancerbroncho-pulmonaire, broncho-pneumopathie chronique obstructive, emphysme,dilatation des bronches, mucoviscidose, ) ou gnrales (corticothrapies prolonges,hmopathies malignes, chimiothrapie aplasiante, SIDA, ). En outre, des facteursenvironnementaux (abondance des spores aspergillaires dans lair inhal lors de lamanipulation du fumier, du foin moisi) ou lis au champignon (taille des sporesaspergillaires, thermotolrance, facteurs de virulence) contribuent la frquence de lapathologie aspergillaire.Les Aspergillus sont ainsi lorigine de diverses mycoses : des otomycoses, des kratites,des onyxis, des atteintes cutanes, ou encore des mycoses profondes rsultant duneinoculation traumatique des spores. Toutefois, les Aspergillus sont principalement despathognes respiratoires, linfestation seffectuant par inhalation des conidies vhiculespar le vent. On les rencontre lorigine de sinusites ou de surinfections bronchiques aucours des broncho-pneumopathies chroniques obstructives et de la mucoviscidose. Maisla pathologie aspergillaire chez le sujet non immunodprim est domine parlaspergillome, qui est li au dveloppement du champignon dans une bronche ou dans leparenchyme pulmonaire, sous forme dune boule fongique appele truffe aspergillaire. Ledveloppement du champignon seffectue alors dans une cavit le plus souventprexistante (caverne tuberculeuse, bulle demphysme, ) et se traduit par des troublesrespiratoires avec hmoptysies et, sur le plan radiologique, par limage classique en grelot.Les formes les plus graves sont cependant observes chez les patients fortementimmunodprims, notamment chez les patients sous chimiothrapie aplasiante pour



prparation la greffe de moelle osseuse. Linfection revt alors un caractre invasif, etprsente une volution trs rapide et souvent fatale.

2.3- Caractres culturaux

Ces champignons prsentent une croissance rapide sur milieu de Sabouraud additionndantibiotiques. Ils sont cependant, pour la plupart, inhibs par le cycloheximide. Aprs 24 48 h de culture, on observe des colonies plates, formes de courts filaments ariensblancs. Cest en effet avec la maturation des structures conidiognes (48 96 h selon lesespces) que ces colonies vont prendre leur teinte caractristique, brune, verte, jaune ounoire selon les espces.La couleur de la culture permet ainsi une orientation rapide du diagnostic despce. Aurecto, les colonies sont gris-vert pour A. fumigatus, vert-jaune pour A. flavus et les espcesdu groupe glaucus, vert fonc chamois pour A. nidulans, brun cannelle pour A. terreus,chamois clair, jaunes et roses pour A. versicolor, jaunes puis noires pour A. niger. Ellesrestent blanches pour A. candidus. Le revers de la colonie est incolore jaune, il peut aussibrunir ou rougir avec lge (A. nidulans).Les Aspergillus se dveloppent habituellement bien sur les milieux classiques demycologie comme le milieu de Sabouraud. Si ncessaire, leur fructification peut trestimule par repiquage de la colonie sur glose au malt ou sur milieu de Czapek quiconstituent les milieux de rfrence pour ces champignons. Enfin, les Aspergillus poussent 22-25 C et 37 C pour les espces thermophiles (A. fumigatus).

2.4- Morphologie microscopique

Les Aspergillus sont caractriss par un thalle vgtatif form de filaments myclienshyalins, de diamtre fin et rgulier, septs et ramifis. Lidentification du genreAspergillus reposera sur la mise en vidence des ttes aspergillaires lexamenmicroscopique des colonies. Sur les filaments vgtatifs, prennent en effet naissance desfilaments dresss, non cloisonns. Ces derniers, quon appelle conidiophores, seterminent par une vsicule de forme variable sur laquelle sont disposes les cellulesconidiognes ou phialides. La conidiognse seffectue en effet sur le mode blastiquephialidique, par bourgeonnement lapex des phialides dune srie de spores ou conidiesqui restent accoles les unes aux autres en chanes non ramifies, basiptes, la plus jeunetant la base de la chane.Les spores, toujours unicellulaires, sont de forme variable, globuleuses, subglobuleuses ouelliptiques. Diversement pigmentes, elles peuvent tre lisses ou recouvertes daspritsplus ou moins marques.Les phialides peuvent tre insres directement sur la vsicule (ttes unisries), ouportes par des petits articles insrs sur la vsicule, les mtules (ttes bisries).Lensemble vsicule ( mtules) phialides conidies constitue la tte aspergillaire quicaractrise le genre Aspergillus.

Quant au diagnostic despce, il sera port sur un ensemble de critres macroscopiques etmicroscopiques (Figures 10 12). critres macroscopiques : la vitesse de pousse laspect des colonies maturit : surface (duveteuse, veloute, poudreuse ou

granuleuse), relief (colonies planes ou surleves), couleur au recto et au verso critres microscopiques : la taille du conidiophore, la prsence ou non dune pigmentation ou dchinulations la taille et la forme de la vsicule laspect gnral de la tte aspergillaire qui est li limplantation des phialides sur la

vsicule : tte en colonne si les phialides sont disposes seulement sur la partiesuprieure de la vsicule ; tte ronde, radie, si elles sont insres sur tout le pourtour dela vsicule

la prsence ou non de mtules la pigmentation, la taille et la surface des conidies lexistence ou non dune reproduction sexue : prsence ou non de clistothces, et de

cellules en noisette ou Hlle cells .En effet, pour certaines espces, apparaissent parfois en culture des formations sexues(stade tlomorphe). Ce sont des clistothces contenant des asques arrondis renfermantchacun 8 ascospores. Les Hlle cells , ou cellules en noisette, sont des formationsarrondies, rfringentes paroi paisse qui accompagnent souvent les formes sexues, maisquon peut galement observer isolment, indpendamment de la reproduction sexue.

2.5- Espces prsentes (par ordre dimportance en mycologie mdicale) Aspergillus fumigatus Aspergillus flavus Aspergillus niger Aspergillus terreus Aspergillus nidulans Aspergillus versicolor Aspergillus du groupe glaucus Aspergillus candidus


Figure 10 : Appareil reproducteur des Aspergillus.

Figure 11 : Cl didentification des Aspergillus prsents.


Conidies

Phialides

Mtules

Vsicule

Conidiophore(large, non cloisonn)

Cellule podale

Filament vgtatif)

Ttes toujours unisries(phialides insres directement sur la vsicule)

Ttes radiesou en colonnes divergentes

Vsicule ronde ou en massue

Aspergillus du groupe glaucus

et

Ttes en colonnescompactes

Vsicule hmisphrique

A. fumigatus

et

Figure 11 (suite) : Cl didentification des Aspergillus prsents.


Coloniesde couleur variable

Ttes toujours bisries(phialides insres sur la vsicule par lintermdiaire de mtules)

Ttes radies

A. versicolor

Coloniesnoires

A. niger

Ttes en colonnes

Colonies vert cresson(+ cellules en noisette)

A. nidulans

Colonies beiges marron(pas de cellules en noisette)

A. terreus

Ttes unisries ou bisries(phialides insres directement sur la vsicule ou par

lintermdiaire de mtules)

A. flavus

Colonies vert jauneColonies blanchtres

A. candidus

Figure 12 : Organes de fructification des Aspergillus.1 et 2 : Morphologie des ttes aspergillaires. En fonction des modalits dimplantationdes phialides sur la vsicule, on distingue des ttes unisries (1) ou bisries (2), et desttes en colonne (1) ou radies (2).3-5 : organes de reproduction sexue chez Emericella nidulans (tlomorphedAspergillus nidulans) : clistothce (3), asques et ascopores (4) et cellules en noisette (5).


Aspergillus fumigatusFresenius (1863)

Caractres culturaux Recto : colonies blanches, puis bleu-vert, virant ensuite au vert-fonc gris noirtre. Verso : incolore, jaune, vert ou brun-rouge suivant les souches. Croissance trs rapide 37 C (24 48 h). Optimum thermique : 40-42 C (mais il se dveloppe trs bien 45 C et pousse

jusqu 57 C). Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : court, 300 m, lisse et incolore

avec vasement progressif au sommetvsicule : hmisphrique, 20 30 mphialides : directement portes par la vsicule, dresses, densment groupesconidies : globuleuses, vertes, chinules, petites (2,5 3 m de diamtre)tte aspergillaire : unisrie, en colonne compacte, assez grande (jusqu 100 m de long) Pas de reproduction sexue connue Pas de Hlle cells

Commentaires

Aspergillus fumigatus est lagent le plus frquent des aspergilloses humaines et animales.Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la couleur de sescolonies maturit, par lvasement progressif du conidiophore son sommet, et par sesttes unisries en colonnes. Contrairement aux autres espces, il se dveloppe bien 45 C.



1 2

3 4

Aspergillus fumigatus :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires l'objectif 20 (3) et 40 (4), avec un vasement progressif du conidiophore et des phialides densment groupes sur une vsicule hmisphrique.

Aspergillus flavusLink (1809)

Caractres culturaux Recto : colonies duveteuses poudreuses, dabord blanches, puis jaunes, puis vert-

jaune. Verso : incolore, ros ou brun-rouge fonc. Croissance rapide (2 3 jours). Optimum thermique : 37 C.

Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : long, 1 mm et parfois jusqu 2,5 mm, hyalin, verruqueux avec des

asprits (surtout visibles prs de lapex, mais inconstantes)vsicule : sphrique, 25 45 mphialides : directement insres sur la vsicule ou portes par des mtulesconidies : globuleuses subglobuleuses, vert ple, chinules, 3,5 4,5 m de

diamtrette aspergillaire : unisrie ou bisrie, 300 400 m de long, radie, puis se scindant

en plusieurs colonnes sporales mal individualises Pas de reproduction sexue connue Pas de Hlle cells

CommentairesAspergillus flavus est un agent daspergillose pulmonaire ou gnralise chez limmuno-dprim.Sur le plan morphologique, il se distingue des autres espces dAspergillus par la couleurvert-jaune de ses colonies et par ses conidiophores paroi verruqueuse.



1 2

3 4

Aspergillus flavus :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires bisries visualises l'objectif 40 (3 et 4), et caractrises par leur aspect radi et leur vsicule sphrique. Les spores sont globuleuses subglobuleuses, de couleur vert ple.

Aspergillus nigerVan Tieghem (1867)

Caractres culturaux Recto : colonies dabord blanches, puis jaunes, et enfin granuleuses noires. Verso : incolore jaune ple. Croissance rapide (2 3 jours). Optimum thermique : 25-30 C (mais il peut pousser jusqu 42 C). Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : lisse, hyalin ou bruntre dans sa moiti suprieure, trs long (1,5

3 mm)vsicule : globuleuse, 30 100 m (en moyenne 45 75 m)phialides : insres sur la vsicule par lintermdiaire de mtules disposes sur

tout le pourtour de la vsiculeconidies : globuleuses (3,5 5 m de diamtre), brunes, chinules trs

verruqueuses, souvent disposes en chanestte aspergillaire : bisrie radie, noire maturit Pas de reproduction sexue connue Pas de Hlle cells

CommentairesAspergillus niger peut provoquer chez le sujet non immunodprim des aspergillomes,mais aussi des otites, voire des sinusites. Il est plus rarement rencontr chezlimmunodprim, lorigine dinfections cutanes, pulmonaires ou gnralises.Sur le plan morphologique, il est caractris par ses ttes aspergillaires radies, bisries,noires maturit.



1 2

5 6

4

3

Aspergillus niger :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires visualises lobjectif 4 (3), 20 (4) et 40 (6). Notez la longueur duconidiophore et l'aspect radi des ttes aspergillaires noires maturit. 5, dtail desspores (objectif 100).

Aspergillus terreusThom (1918)

Caractres culturaux Recto : colonies duveteuses poudreuses, de teinte beige brun noisette ou cannelle. Verso : jaune brun orange. Croissance rapide (3 5 jours). Optimum thermique : 25-30 C (mais il pousse aussi 37 C). Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : lisse, incolore, de 100 250 m de longvsicule : globuleusephialides : portes par des mtules insres surtout sur la partie suprieure de la

vsiculeconidies : de petite taille (1,5 2,5 m), lisses, globuleuses lgrement

elliptiques,parfois associes des aleuries solitaires, rondes ou ovales, de 6 7 m de diamtre, base tronque, formes latralement sur lemyclium vgtatif, en profondeur

tte aspergillaire : bisrie, en colonne vase (aspect dventail) Pas de reproduction sexue connue Pas de Hlle cells

CommentairesAspergillus terreus peut tre lorigine daspergilloses pulmonaires et crbrales chezlimmunodprim. Ce champignon est galement souvent isol des expectorations chezles patients atteints de mucoviscidose.Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la couleur brune oucannelle de ses colonies, ses ttes aspergillaires en colonne et parfois lexistence deconidies solitaires base tronque produites directement sur le myclium.



Aspergillus terreus :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires bisries visualises l'objectif 10 (4) et 40 (3), avec une disposition en colonne vase (aspect en ventail).

1 2

3

4

Aspergillus nidulans(Eidam) Winters (1884)

Caractres culturaux Recto : colonies duveteuses poudreuses de couleur habituellement vert fonc ou vert

cresson, jauntre pour les souches productrices de clistothces. Verso : rougetre, pourpre. Croissance rapide (3 5 jours). Optimum thermique : 25 30 C (mais il pousse aussi 37 C). Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : brun, lisse, sinueux, trs petit (75 100 m de long en moyenne, ne

dpassant pas 300 m)vsicule : sphriquephialides : portes par des mtules insres sur la partie suprieure de la vsiculeconidies : rondes, vertes, chinules, 3 3,5 m de diamtre, souvent disposes

en chanestte aspergillaire : bisrie en colonne, courte et compacte (65-100 30-35 m) Reproduction sexue : Emericella nidulansPrsence de clistothces globuleux, de 100 300 m de diamtre. Brun-orang maturit, ils ont une paroi bien dlimite, et renferment de nombreux asques globuleux,octospors. Les ascospores (3-4,5 2-3,5 m), rouges maturit, prsentent deux crtesquatoriales. Prsence de Hlle cells :Cellules arrondies (10 20 m de diamtre), paroi trs paisse et rfringente, disposesautour des clistothces ou parses sur le myclium vgtatif.

CommentairesCe champignon qui peut occasionner des sinusites ou des infections pulmonaires chezlimmunodprim, se distingue des autres Aspergillus par ses colonies vert fonc reversrougetre, ses conidiophores courts et bruns, ses ttes en colonne bisries et la prsencede Hlle cells.



3

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6

7

1 2

Aspergillus nidulans :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires bisries visualises lobjectif 10 (5), 20 (3) et 100 (4), associessur la figure 5 des Hlle cells. Clistothces (6), asques sphriques octospors etascopores rouges (7) visualiss lobjectif 4 (6) ou 100 (7).

Aspergillus versicolor(Vuillemin) Tiraboschi, 1929

Caractres culturaux Recto : colonies peu extensives dabord blanches, puis de couleur varie, rose,

jauntre, ocre ou verte, parfois sur une mme colonie. Verso : incolore ou variant du jaune au brun rougetre. Certaines souches sont rsistantes au cycloheximide. Croissance lente (5 7 jours). Optimum thermique : 25-30 C (il peut cependant pousser de 4 C 40 C). Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : lisse, jauntre, gnralement long mesurant de 500 700 mvsicule : ovale, 12 16 m de diamtrephialides : portes par des mtules insres sur tout le pourtour de la vsiculeconidies : globuleuses, de 2 3,5 m de diamtre, chinulestte aspergillaire : bisrie, radieEn outre, on peut noter pour cette espce, cot des ttes aspergillaires, la prsence depinceaux voquant un Penicillium (bouquets de 2 3 phialides disposs en verticilles lextrmit de conidophores courts, fins et cloisonns). Pas de reproduction sexue connue On peut retrouver parfois des Hlle cells semblables aux cellules en noisette

dEmericella nidulans

CommentairesIl est exceptionnellement retrouv dans des tissus profonds chez limmunodprim. Parcontre, il est frquemment isol dans des prlvements de peau et de phanres, parfois entant quagent donychomycoses.Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la polychromie de sescolonies et la prsence de pinceaux associs aux ttes aspergillaires.



Aspergillus versicolor :Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).Ttes aspergillaires bisries observes l'objectif 40 (3 et 5) et 100 (4), associes sur la figure 5 des formes de type Penicillium .

3

4 5

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Aspergillus du groupe glaucusLink (1809)

Caractres culturaux Recto : colonies peu extensives, planes, poudreuses, de couleur verte. Des tches jaune

vif peuvent apparatre lorsque les cleistothces sont produits en grand nombre. Verso : jaune orang brun fonc. Croissance rapide (3 5 jours). Optimum thermique : 25-30 C.

Morphologie microscopique Multiplication vgtative :conidiophore : lisse, incolorevsicule : ronde ou en massuephialides : courtes, trapues, directement insres sur la vsiculeconidies : globuleuses ou ovales, grandes (6-8 3-5 m de diamtre), le plus

souvent finement rugueusestte aspergillaire : unisrie, radie ou en forme de colonnes lches Reproduction sexue : EurotiumPrsence de clistothces de 75 200 m de diamtre. De couleur jaune maturit, ilsprsentent une paroi bien dl

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