Annales de pathologie (2008) 28, 131—134

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HISTOSÉMINAIRE SFP

Pièges morphologiques et immunohistochimiquesen pathologie ganglionnaire : observation no 9.Lymphome folliculaire « in situ »

Pierre Brousseta,∗, Henri Ducoinb, Camille Laurenta

a Laboratoire d’anatomie et cytologie pathologique, CHU Purpan,place Baylac, 31059 Toulouse cedex, Franceb Laboratoire d’anatomie pathologique, clinique Saint-Jean-Languedoc,31400 Toulouse, France

Accepté pour publication le 5 avril 2008Disponible sur Internet le 7 juillet 2008

Renseignements cliniques

Patient de 46 ans présentant une adénomégalie localisée à la région cervicale, juguloca-rotidienne, bilatérale. Il s’agit de petits ganglions en chapelet que le patient a découvert

de manière fortuite. Pas de signe général ni altération de l’état général. Discret syndromeinflammatoire biologique (CRP = 30). Pas d’antécédent notable.

Diagnostic proposé

Lymphome folliculaire (LF) « in situ ».

Description microscopique

L’aspect morphologique de cette adénopathie, à faible grossissement, est celui d’unehyperplasie folliculaire modérée, sans infiltration périganglionnaire, avec respect del’architecture ganglionnaire.

Les follicules ne sont pas confluents et les voies lymphatiques intraganglionnaires sontperméables. Le manteau périfolliculaire est persistant (Tableau 1).

À un plus fort grossissement, les centres germinatifs hyperplasiques sont le siège d’uneintense activité modérée associée à une phagocytose de débris nucléaires avec quelquesstructures présentant une répartition zonale (Fig. 1). Sur d’autres plages, l’aspect descentres germinatifs apparaît plus monotone (Fig. 2).

∗ Auteur correspondant.Adresse e-mail : brousset.p@chu-toulouse.fr (P. Brousset).

0242-6498/$ — see front matter © 2008 Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.doi:10.1016/j.annpat.2008.04.005

132 P. Brousset et al.

Tableau 1 Critères morphologiques et immunohistochimiques utilisés dans le diagnostic différentiel entre LF et hyper-plasie lymphoïde folliculaire.

e differential diagnosis between follicular lymphoma and follicular

ulair

rphe

nepfmB(zgf(c

FFcgLgt

Morphological and immunohistochemical features useful for thlymphoid hyperplasia.

Caractéristiques Hyperplasie follic

Architecture Conservée

Follicules Taille variableForme variableDensité faible

Centres Couronne nette

Germinatifs PolarisationCytologie polymoMitoses +++

Phagocytose +++

Tissu Abondant

Interfolliculaire C. réactionnelles

Immunohistochimie Réseau CRD régulierManteauPolytypiqueCentre polytypique (MBcl-2−

L’immunohistochimie montre une immuno-architectureormale avec une répartition harmonieuse des zones Bt T. L’anti-BCL2 montre une absence de marquage de lalupart des centres germinatifs. Cependant, dans quelquesormations, on note des amas de cellules fortementarquées (Fig. 3 et 4). L’intensité de l’expression decl2 est nettement supérieure aux cellules réactionnellesFig. 3 et 4). Quelques cellules sont visibles dans lesones interfolliculaires et à distance dans des centreserminatifs apparemment réactionnels (Fig. 5). Dans lesollicules BCL2+, l’index de cellules en cycle est réduitFig. 6). Le double marquage BCL2/BCL6 confirme la natureentrofolliculaire B des cellules tumorales (Fig. 7).

igure 1. Aspect prédominant de la formation ganglionnaire.ollicule réactionnel avec une répartition zonale des cellulesentrofolliculaires. Index mitotique élevé, macrophages à corps tin-ibles. HE × 300.ymph node with reactive follicles. Note the zonal distribution oferminal centre cells with high mitotic index and macrophages withingible bodies. HE × 300.

C

Lnllllglcscdl

FtAt

e LF

Détruite

Taille ± constanteForme régulièreDensité élevée

Couronne ± absente

Pas de polarizationCytologie monomorpheMitoses ±Phagocytose = 0

Peu abondant

C. réactionnelles + C. tumor

+, D−)

Réseau CRD ± dissociéManteau absentMonotypiqueCentre monotypique (M, D)Bcl-2+

ommentaires

e LF représente en moyenne 40 % des cas de lymphomeon Hodgkinien dans les pays occidentaux et 70—75 % desymphomes de bas grade [1]. Il s’agit d’un lymphome déve-oppé à partir des cellules centrofolliculaires observées danses follicules secondaires. On distingue quatre grades selon’abondance des centroblastes (grade 1, 2, 3A, 3B). Les LFanglionnaires sont le plus souvent porteurs d’une trans-ocation t(14 ; 18)(q32 ; q21) qui juxtapose le gène de lahaîne lourde des immunoglobulines avec le gène BCL2 quie trouve donc surexprimé. BCL2 n’est pas exprimé dans lesentres germinatifs normaux alors que plus des trois quartses LF expriment la protéine [1]. Il est important de signa-er que les LF cutanés sont BCL2− et ne portent pas de

igure 2. Autre champ montrant un centre germinatif plus mono-one riche en centrocytes. Peu de macrophages. HE × 300.nother field with a suspicious germinal centre composed of mono-onous centrocytes. Macrophages are scarce or absent. HE × 300.

Pièges morphologiques et immunohistochimiques en pathologie ganglionnaire 133

Figure 3. Étude immunohistochimique avec un anticorps anti-BCL2 (clone 124, Dako) montrant quelques centres germinatifsmarqués. Peroxydase × 200.Immunohistochemistry with anti-BCL2 antibody showing positivegerminal centres. Peroxidase × 200.

Figure 5. Étude immunohistochimique avec un anticorps anti-BCL2 (clone 124, Dako) montrant une faible proportion de cellulesdu germinatifs marquées (colonisation minime). Noter encore quel’intensité du signal est supérieure à celui observé dans les cellulesréactionnelles (témoins internes). Peroxydase × 350.Another picture with a small proportion of BCL2+ lymphoma cells

Figure 6. Immunodétection de MIB1/Ki67 montrant un moindre

Figure 4. Étude immunohistochimique avec un anticorps anti-BCL2 (clone 124, Dako) montrant une importante proportion de

cellules du centre germinatif marquées. Noter que l’intensité dusignal est supérieure à celui observé dans les cellules réactionnelles(témoins internes). Peroxydase × 350.Another picture with large amounts of BCL2+ germinal centre cells.Note that the staining is higher than in positive control cells. Per-oxidase × 350.

translocation t(14 ; 18). Les LF sont des pathologies rela-tivement indolentes mais souvent largement disséminéesaux autres organes (la moelle est infiltrée dans 50 % descas). Sur une période de huit ans, l’équipe d’Elaine Jaffeà Bethesda a observé 23 cas de LF dits « in situ » sur un totalde 900 LF diagnostiqués dans le centre [2]. Grâce à uneapproche de microdissection laser/PCR, ils ont pu montrerqu’un certain nombre de cas étaient monoclonaux et por-taient la translocation t(14 ; 18) [2]. Quelques cas étaientassociés à une dissémination d’un authentique LF. Ces don-nées suggèrent que les LF « in situ » sont soit des extensionsminimes de LF classiques, soit des formes débutantes de LF.Il n’existe pas assez de cas et de recul pour savoir si lesformes purement folliculaires évoluent systématiquementvers des formes folliculaires et infiltrantes plus ou moinsdisséminées.

within germinal centres (minimal involvement). Peroxidase × 350.

index mitotique dans les follicules lymphomateux. Peroxy-dase × 250.Reduction of the mitotic index in neoplastic germinal centres.MIB1, peroxidase × 250.

Diagnostics différentiels

Hyperplasie folliculaire associée à l’infectionpar le VIH [3]

L’aspect observé dans la forme à hyperplasie folliculaireprédominante est habituellement comparable à celuiobservé dans la toxoplasmose, associant :• l’hyperplasie folliculaire ;• l’amincissement du manteau périfollicullaire ;• l’amas de cellules épithélioïdes ;• les cellules B monocytoïdes ;• l’hyperplasie vasculaire avec prolifération des veinules

postcapillaires ;• l’hémorragie des centres germinatifs et érythrophagocy-

tose peuvent s’observer ;• les cellules multinucléées de Warthin-Finkeldey parfois

visibles ;

1

FcDmP

•

M

L••••

••

•

•

T

Ladvp

Ll

Iko•

•

FlBa

•

•

••

34

igure 7. Double marquage anti-BCL2/anti-BCL6 montrant uneolocalisation dans les cellules lymphomateuses. Peroxydase × 200.ouble staining with anti-BCL2 and anti-BCL6 antibodies, confir-ing the germinal centre origin of the lymphoma cells.

eroxidase × 200.

en immunohistochimie, positivité des CRD du centregerminatif, pour l’anticorps anti-p24 qui reconnaît uneprotéine du VIH.

aladie de Castleman [4]

’aspect observé dans la forme vasculohyaline associe :l’hyperplasie folliculaire ;la prolifération vasculaire ;l’hyalinisation des centres germinatifs ;les nombreuses CRD dans les centres germinatifs CD21 etCD35+ ;l’aspect en pelure d’oignon, dans la zone du manteau ;la région interfolliculaire hyperplasique, comprenant de

nombreux vaisseaux hyperplasiques de type veinules post-capillaires ;à ce niveau, présence également de nombreux plas-mocytes, polynucléaires éosinophiles, immunoblastes etmonocytes plasmocytoïdes KP1+ ;l’association fréquente au virus herpes hominis virus 8(HHV8) (50 % des cas VIH− et 100 % des cas VIH+).

oxoplasmose [4]

es aspects sont assez similaires à ceux observés pour lesdénites des patients VIH+. Ici, on notera une exubérancees amas de cellules histiocytaires épithélioïdes parfoisisibles dans les centres germinatifs. Les trophozoïtes duarasite sont très rarement visibles.

ymphome de Hodgkin a prédominanceymphocytaire nodulaire [1]

l s’agit d’une forme très particulière de la maladie de Hodg-in, à laquelle il faut savoir penser. L’aspect classiquementbservé est les suivants :l’hyperplasie folliculaire, avec effacement de l’archi-tecture normale ;la colonisation des centres germinatifs par des lympho-cytes du manteau (transformation progressive) ;

R

[

[

[

[

P. Brousset et al.

igure 8. LF BCL2- avec une infiltration de cellules CD10+ danses zones interfolliculaires (signe le diagnostic). Peroxydase × 320.CL2-negative follicular lymphoma with extra follicular infiltrations shown with anti-CD10 immunostaining. Peroxidase × 320.

les cellules tumorales, lorsqu’elles sont nombreuses,peuvent se grouper ;enfin, des histiocytes et cellules épithélioïdes sont parfoisprésents dans les centres ou à leur périphérie ;la présence possible de cellules de Warthin-Finkeldey ;ces cellules tumorales expriment le CD20, l’EMA, Oct2 etparfois le CD30. Elles n’expriment pas le CD15. Absenced’infection Epstein-Barr virus (EBV).

POINTS IMPORTANTS À RETENIR

Devant toute formation ganglionnaire présentantdes follicules hyperplasiques avec centres clairsvolumineux ne faisant pas sa preuve sur le planétiologique :

• toujours réaliser un immunomarquage avec un anti-

BCL2 même si les centres clairs ne sont pasmonotones (a fortiori s’ils le sont) ;

• si on soupconne le diagnostic de LF BCL2−, utiliser unanti-CD10 qui montre des cellules lymphomateusesCD10+ dans les zones extrafolliculaires (Fig. 8) ;

• toujours rechercher une infection VIH à l’aide d’unanticorps anti-p24 gag.

éférences

1] Jaffe ES, Stein H, Wardiman JW, editors. World Health Organiza-tion classification of tumours. Pathology and genetics of tumoursof haematopoietic and lymphoid tissues. Lyon: IARC Press; 2001.

2] Cong P, Raffeld M, Terya-Feldstein J, Sorbara L, Pitaluga S,Jaffe ES. In situ localization of follicular lymphoma: des-cription and analysis by laser capture microdissection. Blood2002;99:3376—82.

3] de Paiva GR, Laurent C, Godel A, da Silva NA, March M,Delsol G, et al. Discovery of human immunodeficiency virusinfection by immunohistochemistry on lymph biopsies frompatients with unexplained follicular hyperplasia. Am J SurgPathol 2007;31:1534—8.

4] Sternberg SS. Reactive lymph nodes. Histol Pathol 1996:233—53.