TP BIOTECHNOLOGIES

THEME « MESURES D’HYGIENE A L’HOPITAL »

Durée : 3 semaines Problématique : « Comment on se

contamine ? » Durée réponse à la problématique : 3

heures

Contexte pour mise en place de la problématique

Lycée J.Rostand Strasbourg MESURES D’HYGIENE A L’HOPITAL Créa : 04/12/11

Rev :

Microbiologie NSB2

Introduction Etape 1

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Destinataire : élèves de 1ère Biotechnologies

« Les plantes en pot et les fleurs coupées sont tolérées dans les chambres des malades (même si de nombreux champignons et bactéries se retrouvent dans la terre). L’eau des fleurs coupées doit contenir quelques gouttes d’eau de Javel, afin d’éviter le développement de nombreux micro-organismes. Elles sont interdites dans les services recevant des patients immunodéprimés ou à risque (réanimation, soins intensifs). »

Source : pôle santé sécurité soins du médiateur de la république-2006

Que penser vous de la mesure énoncée ? Dans l’état actuel de vos connaissances en biotechnologies pouvez-vous la justifier ?

Problématique : Pourquoi des mesures d’hygiènes sont établies sur l’eau de fleur à l’hôpital ?

J1 Observation des MO de l’eau au microscope après coloration au BMIsolement sur Drigalski et GTS

Fiche réalisation d’un frottis et coloration

J2 Observation des résultats d’isolementsRepiquage du MO de Drigalski sur gélose non sélective

Fiche milieu Drigalski

J3 Vérification de pureté sur gélose non sélectiveObservation au microscope après coloration de Gram

Fiche réalisation d’un frottis et coloration

Problématique : comment on se contamine ?

J3 (Préparation 15 min en cours)Elaboration du protocole et manipulation

J4 Observation des résultats(restitution 30 min en cours)

Suite Identification de famille (méthode dichotomique) et découverte de la place des MO pathogènes identifiés à l’hôpital

Description de la manipulation

I) Contamination de la personne 1 :

-Se laver les mains

-Dessiner la zone de contact ( Sur la main droite)

-Malaxer la pâte à pain

II) Contamination des autres*- 9 personnes se lavent les mains- Dessiner la zone de contact ( Sur la main droite) - Serrer la main dans l’ordre : P1 Serre à P2 ► P2 Serre à P3 ….

III) Mise en évidence de la contamination- Noter les boites de 1 à 10- Tremper de coton tige dans de l’eau physiologique puis prélever à l’aide celui-ci dans

la zone entourée sur la main des différentes personnes - Ensemencer à l’aide du coton tige en stries serrées une gélose Sabouraud +

chloramphénicol pour chacune des personnes - Tout le monde se lave les mains Remarque : Il ne faut rien toucher pendant toute la durée de l’experience

Objectifs de la séance

THEME MESURES D’HYGIENE A L’HOPITAL

Problématique Comment on se contamine ?

Pré -requis

Règles d’asepsie / propreté des mains Culture des levures Rôle des milieux sélectifs Ensemencement en stries serrées à l’aide d’un écouvillon

Objectifs

Connaissances (savoirs)

Contamination microbienne par voie cutanée Fermentation alcoolique pour la fabrication de pâte levée (oral)

Capacités (savoir-faire)

Préparation de pâte levée Réalisation d’un protocole, sans risque infectieux : G1 surtout Vérification de protocole : G2 Réfléchir à l’organisation pour l’étude d’un seul paramètre (contamination par contact main/main) Exploitation graphique des résultats

Attitudes (savoir-être)

Organisation Travail d’équipe / répartition des tâches

Contenu préparation et jour 1

Déroulement de la séance

Temps Activités professeur Activités élève Support

Intro thème

Réflexion collective

5 min TP

Présenter la mesure d’hygiène imposée dans les hôpitaux sur l’eau de fleur

Commenter la mesure. Trouver des problématiques à partir de cette mesure. Sur ce TP : comment l’eau de fleur peut contaminer le patient « Comment on se contamine ? » (de personne à personne)

Règle énoncée

Réflexion collective

15 min cours

Donner l’instruction. Ramasser les travaux pour préparer une synthèse

Travail par groupes de 4 ou 5 Décrire une expérience qui permet de mettre en évidence la contamination interhumaine

J1 TP Réflexion collective

30 min

Synthèse des travaux de la veille : demander des justifications ou commentaires

Justifier les activités proposées. Choisir les activités les plus judicieuses

Elaboration collective du protocole

Faire ressortir trois étapes dans l’expérience : contamination d’une personne / transfert aux autres / mise en évidence de la contamination Proposer une gélose sélective adaptée à l’isolement des levures : SAB + chloramphénicol Faire réfléchir au mode d’évaluation des résultats (comptage des colonies obtenues)

Elaborer le protocole au tableau

Manipulation 10 + 20 min

Encadrer, mettre à disposition le matériel Préparer la pâte levée. Incubation 30°C Réaliser la manipulation suivant le protocole Incubation 30°C 48h- Rangement

Donner travail à faire Chercher : « Pourquoi la pâte à pain lève ? »

Résultats de la manipulation

Contenu Jour 2 et bilan

G2 : pas de Jour 2comme le groupe 1 sauf J1 :Etudier le protocole élaboré par le groupe 1 pour l’améliorer si nécessaire.Trouver un autre procédé de mise en évidence de contamination interhumaine

Déroulement de la séance

Temps Activités professeur Activités élèves Support

J2 TP

Lecture collective des résultats

1 h

Fournir une version papier du protocole élaboré au tableau Mettre à disposition l’ordinateur Encadrer

Classer les boîtes et observer / analyser Compter les colonies (CL) Prendre des photos Construire un graphique nb colonies = f(n°élève) pour chaque type d’expérience Reprendre l’analyse des résultats Préparer une présentation pour le G2 : graphiques + photos + analyse sur diaporama (finir pour prochain cours)

Bilan

15 min cours

Fournir le diaporama sur clé USB G1 : présente les résultats au G2 avec vidéoprojecteur Diaporama élèves

10 min Aider les élèves à trouver l’essentiel à retenir. Déterminer l’essentiel à retenir Ecrire le bilan dans la fiche bilan.

5 min

Compléter les informations apportées par les élèves sur la levée de la pâte à pain. Première approche orale de la fermentation (étudiée prochainement)

Restituer le résultat de ses recherches sur la levée de la pâte à pain.

Bilan

Etabli et noté par les élèves dans la fiche bilan sur le thème « Mesures d’hygiène à l’hôpital »

S12 : Comment on se contamine ?Les MO peuvent être transmis d’un

individu à un autre par voie cutanée. Il faut se laver les mains avant de se rendre vers un patient aux défenses immunitaires affaiblies pour ne pas lui transmettre de MO pathogènes (exemple venant de l’eau de fleur).

Observations durant la séance

J1 Des élèves ne participent pas oralement à la recherche car

discrets. L’un d’eux note le protocole élaboré au tableau (de sa propre initiative)

G1 : un élève prend l’initiative d’améliorer le protocole après manipulation suite aux problèmes rencontrés. Il est rejoint par deux autres.

Au moment du serrage des mains : difficultés d’organisation : qui ensemence ? Nombre d’élèves prévus pour ensemencer trop faible / nombre d’élèves en attente.

Répartition des tâches prévue par un élève : G2 J1, G1 J2.J2

G1 : perte des données par non concertation « Qui relève les valeurs dans le cahier de labo ? »

Diaporama : pas d’élèves désignés pour présenter les résultats.