FRAUDES, 12è RdV des Managers de la qualité, comment garantir l'authenticité des produits, conférence d'Yvon Gervaise Rennes 3/04/2014

COMMENT GARANTIR L’AUTHENTICITÉ DES MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS ?DÉTECTION DES FRAUDES

M. Yvon GERVAISEExpert près la Cour d’Appel de RouenExpert Français auprès de l’OCDEDirecteur SGS Multilab

RENNES 3 avril 2014

2© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – ADRIA – 12è rendez-vous des managers de la qualité en IA - 03/04/2014 - RENNES

LES 3 POINTS CLÉS DE NOTRE CONFÉRENCE

1/ POINTS CLÉS POUR CONDUIRE UNE ANALYSE DE RISQUE PERTINENTE ET DÉFINIR SA CHAINE D’APPROVISIONNEMENT

2/ FACTEURS À INTÉGRER DANSL’ÉLABORATION D’UN PLAN DE CONTRÔLE AUTHENTIFICATION / DÉTECTION FRAUDEDÉTECTER, PRÉVENIR ET GÉRER LA FRAUDE

3/ PANORAMA DES PRINCIPALES MÉTHODES D’ANALYSES UTILISÉES POUR L’AUTHENTIFICATIONDES PRODUITS ET DES MATIÈRES PREMIÈRES ET INNOVATION ANALYTIQUE


INNOVATION ANALYTIQUEAUTHENTIFICATION DES MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS DÉTECTION DES FRAUDES

Matière première Produits finis de consommation

Recherche Développement Enregistrement

Nouvelle technique analytique

Sélection matières premièresFabricationCommercialisation

Caractérisation pureté Quantification impureté

Mise sur le marchéConformité technique et

règlementaire


POINTS CLÉS POUR CONDUIRE UNE ANALYSE DE RISQUE PERTINENTE ET DÉFINIR SA CHAINE D’APPROVISIONNEMENT

� De la pureté à l’impureté, de l’infiniment grand à l’infiniment petit

� Typologie d’une fraude• Tromperie sur l’origine et la qualité substantielle

– Facteurs d’authentification, appellation• Origine naturelle / origine biologique• Falsification chimique de denrées périmées pouvant entrainer de

graves intoxications• Importations de produits prohibés via des trafics d’étiquettes• Utilisation de substances prohibées : pesticides, médicaments

vétérinaires sur des denrées végétales, animales• Loyauté du produit par rapport à éventuelle tromperie

� Historique : quelques exemples avérés


POINTS CLÉS POUR CONDUIRE UNE ANALYSE DE RISQUE PERTINENTE ET DÉFINIR SA CHAINE D’APPROVISIONNEMENTHISTORIQUE – QUELQUES EXEMPLES AVÉRÉS

� Huile frelatée en Espagne (T.O.S.) 100 morts année 1980

� Glycols dans les vins Autrichiens début années 1980

� Année 1999 : contamination des aliments poulets en Belgique par PCB (pyralène)

� Blanchiment cargaison de sucre par bleu d’outremer

� Alcool frelaté par du méthanol (1986)


POINTS CLÉS POUR CONDUIRE UNE ANALYSE DE RISQUE PERTINENTE ET DÉFINIR SA CHAINE D’APPROVISIONNEMENTHISTORIQUE – QUELQUES EXEMPLES AVÉRÉS

-> Problème ancien et nouveau• de l’Antiquité à nos jours

– Ancienne Rome : coloration des vins– 13è siècle : 1ère règlementation pour protéger les populations– 1516: Loi sur la pureté de la bière en Allemagne– 18-19è siècle : les boulangers utilisent des agents de

blanchiment pour les pains– 1820 : Frederick Carl Accum publie un livre décrivant les

pratiques et les effets de l’altération des aliments– 1860 : Docteur John Postgate introduit les premiers moyens de

détection– 1er août 1905 : Loi sur la Répression des fraudes dans la vente

des marchandises et des falsifications des denrées alimentaires et produits agricoles


FACTEURS À INTÉGRER DANSL’ÉLABORATION D’UN PLAN DE CONTRÔLE AUTHENTIFICATION / DÉTECTION FRAUDEDÉTECTER, PRÉVENIR ET GÉRER LA FRAUDE

� Contexte de crise économique

� Occurrence d’un indice suspect

� Alerte

� Investigation• Indices• Analyses poussées

� Détecter

� Gestion alerte

� Identification du caractère frauduleux

� Gestion des priorités et traitement de l’alerte avec ressources adéquates


ÉVOLUTION DE L’ANALYSE DES FRAUDES

� Plan performance 2013/2014• Faire parler la matière

– Abaisser la limite de quantification– Substance profiling– Faire parler les isotopes stables et instables– Lancement de la fête de la science– Création d’un écosystème numérique

� PCA traitement mathématique• Intervalle de confiance • Développement du traitement de données


COMPRENDRE ET CERNER LES FACTEURS ET CONSÉQUENCES DU RISQUE DE FRAUDE

� Reconnaitre les mécanismes / situer les contextes

� Appliquer les techniques de détection

� Organiser / Association of Certified Fraud Examiners(ACFE) : professionnels de l’anti-fraude

� Avoir développé des méthodes et une expertise

� Retours d’expériences (expériences à l’international)

� Retour d’expérience de la pratique de l’expertise judiciaire

� Colloque fraude de composition en 2010 SECF : SGS MULTILAB

� Maîtriser l’investigation basée sur principe que tout produit, tout phénomène a une signature chimique ou biochimique


AUTHENTIFICATION DES MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS DÉTECTION DES FRAUDES

� « TOUT EST MÉLANGE »

Le corps pur s’apparente à une conjecture et n’admet dedéfinition qu’opératoire.

N’est-il qu’un inaccessible idéal éloigné de toute réalité?

Le cristal vient infirmer ce pessimisme radical

- cristaux de sucrose dans un pot de confiture (sont depureté acceptable)

Résultat d’une collision moléculaire en microseconde


PURETÉ DE L’ALIMENT AUTHENTICITÉ DÉTECTION DES FRAUDES

� Critères de pureté de matières premières dans les produitsde consommation alimentaires

� Méthodes d’analyses pour en assurer leur contrôle

� Traçabilité de la détermination de la teneur et de la pureté

� Pureté importante pour l’évaluation des produits

- matières premières agricoles- aliments (additifs alimentaires)- produits première transformation- produits de consommation alimentaire


PRINCIPE D’AUTHENTIFICATION DES PRODUITS VALEUR AJOUTÉE

� La détermination du degré de pureté consiste à quantifierles impuretés dans une substance, les marqueurs d’origine,les produits d’altération

� 2 grandeurs complémentaires

- teneur des composants principaux (pureté)

+ - teneur des impuretés

� Traçabilité de la détermination de la teneur et de la pureté

= 100% ?


COMMENT NOUS CONNAISSONS LES MATIÈRES PREMIÈRES ET ÉVALUONS LES PRODUITS FINIS : L’EXPERTISE ANALYTIQUE? AUTHENTIFICATION PRODUITS

Techniques du vivant:Biochimie

Biologie moléculaire

Processus de l’analyse de la

matière

Traitement de l’échantillon

Techniques spectrométriques

- Radioactivité- Spectrométrie de masse

Techniques séparatives

Chromatographie

Techniques du vivant :Écotoxicologie

Evolution de l’expertiseanalytique

1

2

3

5

4


LES DÉTERMINANTS DES PLANS DE CONTRÔLES : NORMES, RÈGLEMENTATION L’ENVIRONNEMENT CONCURRENTIEL DES ÉCHANGES

� Orientent� Structurent� Contraignent

D’un port à l’autre …

Les normes transportent des approches techniques juridiques favorisant ou défavorisant des intervenants

Normes ont pour objet:

� Sécuriser les échanges

� Facilité interopérabilité du commerce

� Principe protéger le consommateur : traçabilité -durabilité

L’environnement concurrentiel des échanges

Normes et régulation

internationales

ConnaissanceEvaluation

marchandise produit

Sciences analytiques

Caractérisation expertise


CONTRÔLE DES MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS (ASPECTS TECHNIQUES ET RÈGLEMENTAIRE) DANS LES ÉCHANGES MONDIAUX AUTHENTIFICATION DES PRODUITSDÉTECTION DE FRAUDE

� Intérêt des entreprises, des opérateurs à maitriser la conformité:

• Eviter des déconvenues

• Favoriser le positionnement

• Soutenir des stratégies à long terme

� Développement des échanges et corollaire

• Augmentation des normes et règles

• Acteurs publics et privés participent à leur élaboration.

• Tendance des États et organisations à déléguer l’élaboration aux experts

� Produits de consommation CPSIA (Consumer Product Safety Improvement Act- USA)


RECONNAISSANCES DU LABORATOIREL’ÉVALUATION DE CONFORMITÉ A AUSSI DES EXIGENCES…

� Compétence du laboratoire • moyens efficaces : réduire le risque d’importations de produits

défectueux

• Conformité aux normes, règlements suivant des tests

� Accréditation et instrument de reconnaissance de la compétence du laboratoire• Exactitude, fiabilité, confiance des résultats

� Reconnaissance BPL (Bonnes Pratiques de Laboratoire)

� Accréditation doit être reconnue au niveau international• COFRAC, organisme qui accrédite suivant ISO 17025.

• reconnaissance à travers des évaluations très rigoureuses de l’organisme ILAC (International Laboratory ACcreditation)

• MRA (Mutual Recognition Agreement): laboratoire reconnu globalement pour faciliter l’acceptation les résultats de test qui accompagnent


CONNAISSANCES ET RECONNAISSANCES DU LABORATOIRE DANS LA FILIÈRE CHIMIE, PHARMACIE, COSMÉTIQUE, CHIMIE FINE…

- Accréditation ISO 17025 COFRAC, EA, ILAC

- Agréments ministériels ,santé, environnementaux, ASN

FOSFA(Federation of Oils, Seedsand Fats Association)

KFDA(Autorités coréeenes)

COFRAC(Comité Français d’ACcréditation)

BPL(Bonnes Pratiques de laboratoire)

GAFTA(Grain and FeedTrade Association)


CONFORMITÉ DES PRODUITS ET LES INSTANCES DE LA RÉGULARISATION INTERNATIONALE

GHS, REACH, etc …


LA PERFORMANCE À L’ÈRE NUMÉRIQUE ET L’INTERACTION CLIENT

� Évolution technique / marché

� Normes

� Réglement

• http://twitter.com/expertscience– Information en temps réel (1600 comptes officiels)– Laboratoire SGS Multilab partenaire capable d’assurerune veille scientifique, technique, réglementaire– Monde connecté, interaction

� Veille scientifique, analytique, et produit - procédé

� Veille normative

� Veille réglementaire

-> Nouvel outil : twitter

@expertscience

L’ écosystème numérique de SGS MULTILAB…


OUTILS DE SCREENING DE COMPOSÉS NON CIBLÉS, TRAITEMENT A POSTERIORI

� Contrôle de l’origine• Analyses des composants -> pureté• Analyses des constituants mineurs -> impuretés• Analyses des marqueurs d’origines, de procédés• Analyses de molécules –> analyses élémentaires• Analyses d’isotopes stables, instables

– Exemple des vins: analyse par Carbone 14– Origine produits: origine géographique : certains ratio

isotopiques


PANORAMA DES PRINCIPALES MÉTHODES D’ANALYSES UTILISÉES 1/4

� Analyses physico-chimiques de composition• Identification et quantification des composants cibles

� Isotopes instables et stables• Origine des molécules et des produits

� Screening / profiling• Empreintes chromatographiques : HPLC/MS/MS• Empreintes spectrales: GC/MS/MS

� Recherche de marqueurs spécifiques

� Origine de biologie moléculaire• PCR• Biologie souche• Identification d’espèces et variétés


� IDENTIFICATION ET QUANTIFICATION DES ESPÈCES• A partir des protéines

– Iso-électrofocalisation (produits laitiers, poissons)– Détection d’antigènes– Spectrométrie de masse en développement

• A partir de l’ADN– ADN nucléaire, ADN mitochondriaux (produits transformés)– PCR toutes espèces

� LES MÉTHODES DE PROFILAGE CHIMIQUE ET BIOCHIMIQUE



� LES MÉTHODES DE PROFILAGE CHIMIQUE ET BIOCHIMIQUE


� Analyse chimique

- réaction en solution

- analyse titrimétrique

- analyse gravimétrique

- analyses électrochimiques, chimiométrie

- spectroscopie à émission atomique,

- spectroscopie électronique moléculaire U.V.

- spectroscopie de vibration IRFT

- spectroscopie XRF

- spectrométrie de masse

- techniques séparatives

- GC/MS/MS

- HPLC/MS/MS

� Évolution de la chimie analytique avancée


LES OUTILS DE DÉTECTION DE FRAUDE

� Spectrométrie de masse

UPLC/APGC-TOF/QTRAP

Méthode multimolécules / couverture chimique large de la trace (ppt) aux ultratraces. Identification par spectre de masse

� Autres méthodes• Spectroscopie infrarouge• RMN• Fluorescence X• ICP/AES et ICP/MS• Spectrométrie Ɣ, α, β (isotope instable)• GC, profil chromatographique GC haute résolution



LES RÉCENTES APPLICATIONS EN LC/MS/MSAUTHENTIFICATION DES PRODUITS ET INNOVATION ANALYTIQUE

FRAUDE EN CHINE MÉLAMINE DANS LES LAITS INFANTILESMÉTHODES D’ANALYSES …


DÉTERMINATION DE LA MÉLAMINE PAR HPLC/MS/MS

� Qu’est-ce que la mélamine ?

• Formule

La mélamine fait partie de la grande famille des résines aminées dérivées de l’urée, de la thio-urée et cyanamides.

Monomère des résines thermodurcissables


� Hydrolyse de la mélamine en acide cyanurique puis formation du complexe mélamine - acide cyanurique stabilisé par liaison hydrogène

• Formule :



MÉLAMINE DANS LES PRODUITS EN PROVENANCE DE CHINE

� 2007 : crise aux Etats-Unis

� 2008 : 4 bébés Chinois décèdent, des dizaines de milliers tombent malades

• Taux de protéine du lait entier en poudre : 26%• Mesure du taux de protéine : N x 6,38• La mélamine hétérocycle azoté donne une contribution en

protéine d’où une fraude car le taux de protéine est augmenté artificiellement


MÉLAMINE : CONTEXTE REGLEMENTAIRE

� Codex Alimentarius – Juillet 2010• Teneur maximale en Mélamine : 1 mg/kg• Produits concernés : Préparations en poudre pour nourrissons

• Teneur maximale en Mélamine : 2,5 mg/kg• Produits concernés : Autres aliments destinés à l’homme ou à

l’animale

� Règlement 574/2011 du 16/06/2011• Teneur maximale en Mélamine : 2,5 mg/kg• Produits concernés : Aliments des animaux


MÉLAMINE : CONTEXTE NORMATIF

� XP ISO/TS 15495 : Lignes directrices pour la détermination quantitative de la mélamine et de l’acide cyanurique par HPLC/MS-MS• LOQ au moins 10 fois inférieure à la limite maximale autorisée• Taux de recouvrement compris entre 80 et 110%• Répétabilité : Coefficient de variation inférieur à 15%• Reproductibilité interlaboratoire : Même critère

� Participation du laboratoire au groupe miroir GM13 « Contaminants des procédés » de la commission AFNOR/V03B



� Préparation de l’échantillon :• Incuber de la mélamine 13C et de l’acide cyanurique 13C à 1 g

d’échantillon pendant 1 heure• Ajouter 5 mL d’eau puis agiter 30 secondes• Ajouter 5 mL d’acétonitrile puis agiter 30 secondes• Ajouter 30 mL d’acétonitrile et 10 mL d’eau puis agiter pendant

5 minutes• Centrifuger

� Conditions chromatographiques :• HPLC : Colonne HILIC 250 x 2,0 mm (5 µm)• UPLC : Colonne HILIC 150 x 2,1 mm (1,7 µm)



� Conditions chromatographiques :• HPLC : acétate d’ammonium et acétonitrile en gradient (20

minutes)• UPLC : acide formique 3% et acétonitrile à 20 mM d’acétate

d’ammonium en gradient (6,5 minutes)

� Conditions de spectrométrie de masse :• Mélamine : Electrospray positif

2 transitions : 127>85 et 127>68• Acide cyanurique : Electrospray négatif

2 transitions : 128>85 et 128>42



Exemple de chromatogramme obtenu pour un échantillon de lait en poudre pour nourrisson supplémenté à 0,05 mg/kg en mélamine et 0,1 mg/kg en acide cyanurique


DÉTERMINANT ET ÉVALUATION : RETOUR D’EXPÉRIENCE CAS DE LA CONTAMINATION D’HUILE MINÉRALE DANS L’HUILE VÉGÉTALE

DÉTERMINANT

Chromatogramme typed’un étalon d’huile type B à 1g/l

� Contamination d’huile de tournesol par des huiles minérales 2008 : gestion de crise et suivi

� Règlement européen CE 1151/2009:

� soumet toute importation d’huile minérale à des conditions particulières:

� rapport d’analyse délivré par un laboratoire accrédité ISO 17025 pour l’analysedes huiles minérales dans l’huile végétale.

� Article 2 CE 1151/2009Paraffine minérale = hydrocarbure saturénombre de carbone compris entre C10 et C56exception alcane C27, C29, C31 endogène huile de tournesol


HUILE DE TOURNESOL EN PROVENANCE D’UKRAINEDÉTECTION ET QUANTIFICATION DE FRAUDE

� Contamination d’huile de tournesol par des huiles minérales• 2800 tonnes d’huile brute importée sur le port de Sète le 23 février

2008

� Analyses DGCCRF, ITERG, IFP, SGS• Quantification 305 mg/kg à 1040

� Validation d’un nouveau protocole analytique suivant l’exigence ISO 17025

� Obtention de l’accréditation COFRAC

� Le règlement européen CE n°1151/2009 soumet toute importation d’huile minérale à des conditions particulières

• Certification et notification préalable• Rapport d’analyse délivré par un laboratoire accrédité ISO 17025

pour l’analyse des huiles minérales dans l’huile végétale.• Décision n°768/2008/CE du 9/07/08 relative à un cadre commun

pour la commercialisation des produits


MÉTHODE D’ESSAIS


MÉTHODE D’ESSAIS

� OBJET ET DOMAINE D’APPLICATIONLa présente méthode décrit et s’applique au dosage de l’huile minérale dans des huiles végétales.La méthode a été validée pour 4 types d’huiles, à savoir : l’huile végétale de tournesol, huile végétales de tournesol brute, huile de colza et huile d’arachide.La méthode est applicable pour des teneurs en huile minérale ≥ à 50 mg/kg ( sachant que la LQ peut être abaissée à 25 mg/kg : voir étude de fidélité.) (la valeur de 50 mg/kg correspond à la limite recommandée par le FEDIOL –The EU Oil and Proteinmeal Industry (Mineral oil hydrocarbon in sunflower oil FEDIOL preliminary recommendations on analytical method and levels-Ref08SAF92Final)).Cette méthode a été initiée et sa validation réalisée, suite à la crise de l’année 2008 due à la contamination des huiles végétales en provenance d’Ukraine par de l’huile minérale.La validation a été réalisée pour des teneurs allant de 25 à 5000 mg/kg.Exigence de réaliser cette analyse dans le cas de certificat d’aptitude à la consommation humaine.Surveillance de leur matière première par certains clients (huiles brutes non raffinées).


MÉTHODE D’ESSAIS


MÉTHODE D’ESSAIS

� CONDITIONS CHROMATOGRAPHIQUES• Four : 40°C pendant 5 mn puis montée à 10°C/mn jusqu’à

3120°C pendant 5 mn • Injecteur : splitless, 250°C• Colonne Rxi-5ms, 20m*0.18mm*0.18 µm,ou équivalent.• Débit gaz vecteur (He) : 1.1 mL/min soit 26.2 psi• Acquisition en scan de m/z = 40 à m/z = 450 et en SIM sur

les ions 57.85 et 136.• Intégration entre 18 et 36 minutes sur le signal 57 en SIM,

puis manuellement sur l’ions 57 les pics qui ne semblent pas appartenir à la coupe, pour pouvoir les soustraire ensuite.

Les colonnes chromatographiques sont répertoriées dans la liste LI-0111.

Injection de µL, selon la sensibilité du chromatographe.


MÉTHODE D’ESSAIS


DOSAGE D’HUILE MINÉRALE DANS DES HUILES VÉGÉTALES


DOSAGE D’HUILE MINÉRALE DANS DES HUILES VÉGÉTALE

Chromatogramme type étalon d’huile minérale à 0,02 g/L (plus bas point de gamme)



Chromatogramme type étalons d’huile minérale à 1 g/L



Chromatogramme type échantillon d’huile de tournesol dopée à 300 mg/kg




ANALYSE DE COMPOSITION ET AUTHENTIFICATION DES PRODUITS À PARTIR DE LEUR FRACTION LIPIDIQUE: ACIDES GRAS ET STÉROLS

� Préparation : méthylation suivant la norme ISO 5508 et 5509

� Analyse en CPG des profils d’ester méthyliques

d’acides gras


EXEMPLE D’ANALYSE ET DÉTECTION DE FRAUDE DE COMPOSITION


MONOMERE DE POLYCONDENSATION

(industrie des polymères)

LES DÉRIVÉS DU BISPHÉNOL A

BADGE : Bisphénol A diglycil éther BAFGE : Bisphénol F diglycil éther

DÉTERMINANT �� ÉVALUATION CAS DU BISPHÉNOL A : SUBSTANCE LIMITÉE OU INTERDITE 1/4

POLYCARBONATE RÉSINES EPOXY


Ene

rgy

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00

30,00

35,00

40,00

45,00

Minutes5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00 50,00 55,00 60,00 65,00 70,00 75,00 80,00

BIS

PH

EN

OL

A

BA

DG

E.H

2O.H

Cl

BA

DG

E.H

Cl

BF

DG

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BF

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E.2

HC

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BA

DG

E.H

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BA

DG

E

NO

DG

E (m

élan

ge3,

4, 5

et 6

cycl

es)

BA

DG

E.2

H2O

� Textes de référence:• NF EN 14350-2 (Décembre 2004) :

« Articles de puériculture – Articlespour l’alimentation liquide »

• NF EN 155136 (Avril 2006) :« Matériaux et objets en contact avecles denrées alimentaires – Dérivésépoxy soumis à des limitations –Détermination du BADGE, du BFDGEet de leurs dérivés hydroxylés etchlorés dans les simulants d’aliments »

� Conditions chromatographiques• Colonne : Silice greffée C18

� Phase mobile : eau/acétonitrile en mode gradient

• Détection : λex=275 nm, λem=305 nm

DÉTERMINANT �� ÉVALUATION CAS DU BISPHÉNOL A : SUBSTANCE LIMITÉE OU INTERDITE 2/4ÉVALUATION : DE L’EMBALLAGE À L’ALIMENT


ACRYLAMIDE DANS LES PRODUITS ALIMENTAIRES –ÉVALUATION VALIDATION DE MÉTHODES HPLC/MS/MS

� Protocole de purification Waters OASIS: acrylamide in potato chips (2003).

� Protocole WATERS: acrylamide analysis using LC/MS/MS application overview (2002).

� Heatox project n°506820: Food quality and safety, Lund University (2007).• Protocole validé et accrédité COFRAC en

portée flexible• Nouveau rapport de l’EFSA 2011• Étude EAT2

Méthode validée et accréditée COFRAC



ÉVALUATION : PRISE EN COMPTE DU RECOURS À UNE MÉTHODE PLUS SPÉCIFIQUE

� Pourquoi la technique HPLC/MS/MS :• Exigence de spécificité pour les matrices plus complexes• Application pour les matrices alimentaires et les matières

plastiques

BISPHÉNOL S BISPHÉNOL A



PERFORMANCE ET INNOVATION CONTINUE

� Une nouvelle stratégie analytique en LC / MSMS

• Résolution pour les matrices alimentaires (interférent/extinction de signal) changement de protocole de traitement des échantillons dans la purification

combinaison extraction QuEChERS + purification sur MIP

• On obtient un RDT de 99% ! Via EI bisphénol A D16• Limite de quantification à l’échelle du ppb


• Molécules présentes dans les emballages plastiques,

Permettent d’augmenter la flexibilité des matières plastiques

• Perturbateurs endocriniens (risque de stérilité chez l’homme).

• Les plus courants: dibutyl phtalate, diisobutyl phtalate, bis(2-

ethylhexyl) phtalate…

• Exemple de matrices testées: huiles végétales, pâte à

tartiner, lait en poudre…

DÉTERMINANT

ÉVALUATION

DÉTERMINANT �� ÉVALUATION CAS PHTALATES : SUBSTANCE LIMITÉE OU INTERDITE


� Principes de la méthode NF EN 15662

Extraction solide-liquide

Echantillon + solvant organique + sels tampons

Agitation

Centrifugation et récupération du surnageant

Purification SPE dispersive

Mise en contact du surnageant avec les sels de

purification

Agitation Centrifugation etrécupération du

surnageant purifié

DÉTERMINANT �� ÉVALUATION CAS PESTICIDES : SUBSTANCE LIMITÉE OU INTERDITE (PRODUIT AGRICULTURE BIOLOGIQUE)


� Analyse par HPLC-MS/MS

• Exemple de chromatogramme d’un mélange de 50 pesticides :

• Si présence quantifiée, confirmation obligatoire :Par le ratio de la transition de confirmation

sur celle de la quantificationPar la comparaison du spectre de fragmentation

attendu et expérimental de la molécule

Blé contaminé en pirimiphos-méthyl Blé contaminé en pirimiphos-méthyl

DÉTERMINANT �� ÉVALUATION CAS PESTICIDES : SUBSTANCE LIMITÉE OU INTERDITE (PRODUIT AGRICULTURE BIOLOGIQUE)


DÉTERMINANTS ET ÉVALUATIONS VALEURS MAXIMALES ANTICOCCIDIENS FILIÈRE AMONT

• Règlement 1831/2003/CE: Utilisation des 11 molécules

autorisée dans l’alimentation animale mais arrêt progressif d’ici

le 31 décembre 2012

• Depuis 2003: Aucune solution de remplacement efficace n’a pu

être trouvée, ni développée (vaccins, phytothérapie,…)

• Abandon du projet de suppression: l’utilisation de ces molécules

est toujours autorisée

Initialement prévu :

Depuis les faits :

Aujourd’hui : retour à la case départ


• Maintien de ces molécules en amont de la filière

• Risque de transfert de ces molécules vers des aliments non

destinés aux animaux à traiter

• Fixation de valeur maximale pour chaque molécule, en fonction

du type d’alimentation Directive 2009/8/CE

Substances indésirables Aliments pour animaux non cibles Teneur maximale (mg/kg)

Salinomycine sodium (SAL), Narasine (NAR) et chlorhydrate de robénidine (ROB)

Matières premières des aliments pour animaux

Aliments composés pour:- (SAL) Dindes, équidés, oiseaux pondeurs et poulettes destinées à la ponte- (ROB) Oiseaux pondeurs et poulettes destinées à la ponte- (NAR) Dindes, lapins, équidés, oiseux pondeurs et poulettes destinées à la ponte- Poulets d’engraissement, poulettes destinées à la ponte, pendant la période précédant l’abattage- Autres espèces animales

0,7

0,7

0,7

0,7

0,7

2,1

Conséquences :



� Nécessité d’évaluer les 11 molécules autorisées

comme additifs dans l’alimentation animale

• Lasalocide

• Narasine

• Salinomycine

• Monensine

• Semduramycine

• Maduramycine

• Robénidine

• Décoquinate

• Halofuginone

• Nicarbazine

• Diclazuril

O

O

OOONaO

O O

HCH3

OH

CH3

H

CH3 CH3

OH

CH3HOH

CH3

CH3 CH3

CH3

CH3

H

Salinomycine



� Mise au point d’une méthode de dosage des 11 molécules d’anticoccidiens dans l’alimentation animale par HPLC/MS/MS



ÉVALUATION DES ANTICOCCIDIENS FILIÈRE AMONT ALIMENTATION ANIMALE

� Optimisation et validation de la méthode : HPLC

Spectromètre de masse MS/MS

Lasalocide Sodium 590,5 3 45 235 50 45 121 70 45Dinitrocarbanilide 301 2,5 20 137 15 20 107 50 20

Dinitrocarbanilide-d8 309 2,5 20 141 15 20 111 50 20Diclazuril 407 2,5 30 336 25 30

Monensine sodium 693 2,5 40 675 50 40 461 50 40Maduramicine

ammonium alpha934,5 3 30 647 30 30 630 40 30

Salinomycine sodium 773,5 3,5 60 431 60 60 531.5 55 60

Lactate d'Halofuginone 416 4,5 20 398 15 20 138 25 20

Chlorhydrate de Robénidine

334 4 30 138 35 30 155 30 30

Chlorhydrate de Robénidine-d8

342 3,5 35 159 40 35 142 50 35

Décoquinate 418 5 50 372 30 50 204 60 50

Décoquinate-d5 423 5 50 377 30 50 205 60 50Narasine 787,5 4.00 50 531 90 50 431 90 50

Nigéricine 747,5 4 60 729,5 20 60 703,5 75 60

ES +

Ion parent Ion fils Ion fils

Mode Ionisation

Molécule Masse (Da)Tension du

capillaire (kV)Tension du

cône (V)Masse (Da)

Energie de collision (eV)

Tension du cône (V)

Masse (Da)

Energie de collision (eV)

Tension du cône (V)

ES -


� Méthode optimisée en HPLC/MS/MS

� La séparation chromatographiqueAvant optimisation Après optimisation

Halofuginone

Lasalocide

Dinitrocarbanilide

Robénidine + Décoquinate

Monensine + Salinomycine

Robénidine

Décoquinate Monensine

Salinomycine

Maduramycine



� Performance de la méthode versus exigences règlementaires

Déterminants VM (Valeur Maximale) et évaluation LOQ (Limite de Quantification)

Molécule LOQ (µg/kg) VM (µg/kg)

Lasalocide sodium 100 1250

Monensine sodium 100 1250

Salinomycine sodium 100 700

Maduramycine ammonium alpha

10 50

Halofuginone 10 30

Chlorhydrate de robénidine 100 700

Dinitrocarbanilide 35 350

Décoquinate 50 400

Diclazuril 5 10

Narasine 100 700



DÉTERMINANTS ET ÉVALUATION DES RESIDUS MEDICAMENTEUX DANS DIFFERENTES FILIERES

� Déterminants : résidus de substances médicamenteuses vétérinaires dans l’alimentation humaine: Produits destinés à la consommation humaine : œufs, produits de la pêche, de la ruche, produits carnés, …• Règlement 37/2010 du 22/12/2009 relatif aux substances

pharmacologiquement actives et à leur classification pour les LMR

• Fixation de LPMR pour chloramplénicol, métabolites de nitrofuranes,

vert de malachite

� Évaluation : dans la filière produits animaux et de la pêche

• Programme COFRAC 99-6: Analyse de résidus de médicaments

vétérinaires chez les animaux, dans leurs produits et les denrées

alimentaires destinées à l'homme ou aux animaux


L’ÉVALUATION PREND AUSSI EN COMPTE LES MÉTABOLITES EXEMPLE SUR LES PRODUITS FINIS : RÉSIDUS NITROFURANES

Famille Exemples de molécules Matrices

Amphénicols Chloramphénicol Toute matrice

Métabolites des nitrofuranes

AOZ (métabolite de la Furazolidone)AMOZ (métabolite de la Furaltadone)AHD (métabolite de la Nitrofurantoine)

Semicarbazide (métabolite de la Nitrofurazone)

ŒufsProduits laitiers

Produits de la pêcheMuscle

MalachiteVert de MalachiteLeucomalachite

Produits de la pêche

Sulfonamides

SulfadiazineSulfadimérazine

SulfadoxineSulfadiméthoxine

Sulfaméthoxypyridazine

ŒufsMuscle

Produits laitiersProduits de la ruche

Tétracyclines

TétracyclineOxytétracycline

ChlortétracyclineDoxycycline

ŒufsMuscle

Produits laitiersProduits de la ruche

Beta-Lactames

Pénicilline-GPénicilline-VAmoxycillineCloxacilline

ŒufsMuscle

Alimentation animaleProduits laitiers

DÉTERMINANTS ET ÉVALUATION DES RÉSIDUS MÉDICAMENTEUX DANS DIFFÉRENTES FILIÈRES


• Exemple du Chloramphénicol:

LOQ = 0,2 µg/kg LPMR = 0,3 µg/kg

DÉTERMINANTS ET ÉVALUATION DES RÉSIDUS MÉDICAMENTEUX DANS DIFFÉRENTES FILIÈRES

ÉVALUATION


ÉVALUATION D’UN CONTAMINANT MULTI-DÉTERMINÉ - CAS DE LA SEMICARBAZIDE

• 2 origines:

Métabolite de la Nitrofurazone et produit néoformé (sous

produit du diazenedicarboxamide, utilisé pour la fabrication de

joints en plastique)

SGS Multilab propose le dosage de ces familles dans des denrées alimentaires par HPLC/MS/MS:

• Cas de la Semicarbazide:

LOQ = 0,5 µg/kg LPMR = 1,0 µg/kg

ÉVALUATION

DÉTERMINANT


DÉTERMINANT ET ÉVALUATION DE CONTAMINATION RADIOLOGIQUE ALIMENTAIRE

� Mesure de la radioactivité dans les matrices alimentaires• Radionucléide d’intérêt• Mesure par spectrométrie gamma I 131, Cs 134, Cs 137• Analyses des radionucléides non émetteur gamma Sr béta total

activité

• Americium 241 total mesure activité αααα total• Plutonium 239

� Atelier thématique laboratoire accrédité COFRAC

Fukushima : contrôle des traces radioactives chaîne alimentaireÉVALUATION CONTAMINATION RADIOACTIVE DES ALIMENTS ET PRODUITS

DÉTERMINANT

ÉVALUATION


DÉTERMINANTS DE L’ÉTIQUETAGE

� Aujourd’hui optionnel, mais obligatoire en cas d’allégation :� Étiquetage 2000/13 CE� AJR 2008/100 CE

� Règlement INCO 1169/2011 étiquetage information consommateur

a) Déclaration nutritionnelle obligatoire• Valeur énergétique• Matières grasses• AGS acides gras saturés• Glucide par différence• Sucres (saccharose, lactose, etc…)• Protéines• Sel

� La notion de groupe 1 et groupe 2 disparait

Évaluation AGS

AUTHENTIFICATION PRODUIT PANORAMA DES PRINCIPALES MÉTHODES


DÉTERMINANTS DE L’ÉTIQUETAGE

b) Complément possible ou obligatoire si allégués• Acides gras mono-insaturés• Acides gras polyinsaturés• Polyols• Amidon• Fibres alimentaires• Vitamines• sels minéraux

Dosage : chromatographie ionique

Détection : ampérométrie pulsée



DÉTERMINANTS NUTRITIONNELS QUALITÉ DES PRODUITS DE CONSOMMATION

� OBLIGATOIRES DANS UN PROCHE FUTUR SI ALLÉGATION• Vitamines• Minéraux

– (VNR ou AJR)

� Vitamines et sels minéraux pouvant être déclarés et valeurs nutritionnelles de référence

• Vitamines Hydrosolubles :

B1 : Thiamine

B2 : Riboflavine

B3 (PP) : Niacine

B5 : Ac Pantothénique

B6 : Pyridoxine

B8 (H) : Biotine

B9 : Ac Folique

B12 : Cobalamine

C : Ac Ascorbique

• Vitamines Liposolubles :

A : Rétinol

E : Alpha tocophérol

D3 : Cholécaliciférol

K 1 : Phylloquinone



DÉTERMINANTS ET APPORTS EN ÉNERGIE, NUTRIMENTS ET SELS MINÉRAUX

� Apports de référence en énergie et certains nutriments :

� Allégation nutritionnelle et santé 1924/2006 et mise à jour 2008

� Règlement 116/2010 du 9/02/10 :• Source d’oméga 3 et riche en AGMI, AGPI, AGI

Énergie ou nutriment Apport de référence

Énergie 8400 lJ (2000 kcal)

Graisses totales 70 g

Acides gras saturés 20 g

Glucides 260 g

Sucres 90 g

Protéines 50 g

Sel 6 g

Profil lipidique

Protéines

Lipides

Vitamines

Minéraux



ÉVALUATION : ANALYSE DES PARAMÈTRES LIÉS À L’ÉTIQUETAGE

� Évaluation = normes d’analyse produit alimentaire

• Protéines arrêté 08/09/77 (MO-75) ou Dumas• Lipides arrêté 08/09/77• Glucides par différence• Valeur énergétique calcul• Sucres HPCI (ME-187)• Fibres AOAC 985-29• Acides gras saturés ISO 5508-5509• Sodium arrêté 08/09/77 modifié (MO-147)• Produits laitiers, carnés méthodes spécifiques• Cendre arrêté 08/09/77• Humidité arrêté 08/09/77

(D.n°93-1130, 27sept.1993,art.6).

Protéines



CARACTÉRISATION DES GLUCIDES, SUCRES ET DÉRIVÉS SUCRÉS

� Sucres HPCI/électrochimie

� Polyols HPCI/électrochimie

� Amidon kit enzymatique/ Polarimétrie et HPCI

� Détermination des différents groupes :

- monosaccharides : glucose, fructose, galactose

- disaccharides : saccharose, lactose, maltose, isomaltose…

- polyols : sorbitol, manitol, xylitol, glycérol, lactitol

� Méthode d’analyse :

- HPCI

- Détection ampérométrique Évaluation profil glucidique



PROFIL GLUCIDIQUE EN VUE DE L’ÉTIQUETAGE

Objet Caractéristique mesurée

Principe de la méthode

Référence de la méthode

Remarques

Aliments diététiques et de régimeProduits agroalimentaires

Produits laitiers

Produits sucrés

Sucres :Fructose, glucose, saccharose, maltose, lactose

Préparation :Solubilisation aqueuseDégraissage (selon MG)Analyse :HPIC/Ampérométrie

Méthode interne(ME-0338)

adaptée des normes

AOAC 980-13AOAC 982-14

-

Aliments diététiques et de régimeProduits agroalimentaires

Aliments pour animaux (lactose)

Produits laitiers

Produits sucrés

Sucres :Fructose, glucose, saccharose, maltose, lactose

Préparation :Solubilisation aqueuseDégraissage (selon MG)Analyse :HPLC/Réfractométrie

Méthode interne(ME-0187)

adaptée des normes

AOAC 980-13AOAC 982-14

-

� Exemple de portée d’accréditation du laboratoire


ÉVALUATION DE LA QUALITÉ NUTRITIONNELLEACCRÉDITATION EN CHAMP FLEXIBLE

Objet soumis Caractéristique Principe de mesure

Produits d’origine végétaleAliments diététiques et de

régimeProduits agroalimentaires

Aliments pour animaux

Produits laitiers

Boissons sans alcool

Produits sucrés

Vitamines

Préparation :

Hydrolyse acide et/ou enzymatique

Extraction Solide/Liquide (par solvant)

Extraction Liquide/liquide

Purification :

Chromatographie semi-préparative

Immunoaffinité

Analyse :

LC/UV, LC/FLUO

� Exemple vitamines B12 et B9 :

Produits alimentaires (Aliments diététiques et de régime Matrices chocolatées Lait Produits céréaliers…)

Vitamine B12 Vitamine B9

Extraction: Traitement enzymatique Purification : Immunoaffinité Analyse : HPLC/UV

Méthode interne (ME-0340) -


ÉVALUATION PAR ANALYSES PHYSICO-CHIMIQUES EN VUE DE LA DÉTERMINATION DE LA COMPOSITION –LAB GTA 25/60, 61, 81, 118

� Composition,

� Critères de qualité et technologique,

� Étiquetage nutritionnel dans l’alimentation humaine et animale• Évaluation des minéraux / apports nutritionnels : règlementation

étiquetage EAT2• Portée flexible COFRAC

Objet soumis Caractéristique Principe de mesure

Alimentation Humaine

Alimentation Animale

Produits Céréaliers

Minéraux, Oligo-élements

Minéralisation

Voie sèche (four à moufle)Voie humide basse pression (digiprep)Analyse :

Spectrométrie d’Absorption Atomique à flamme (SAAF)Spectrométrie d'émission atomique par plasma à couplage inductif (ICP/AES)Spectrométrie d’émission par plasma à couplage inductif et spectromètre de masse (ICP/MS)


DÉTERMINANTS ET FREE FROM

� Sel

� Colorants artificiels 2008/1333 : mention supplémentaire dans l’étiquetage -> “peut avoir des effets indésirables sur l’activité et l’attention des enfants”.

– Jaune orangé (E 110), Jaune de quinoléine (E 104)– Carmoisine (E 122), Rouge allura (E 129)– Tartrazine (E 102), Ponceau 4R (E 124)

� Gluten 2009/41

� Acide gras trans : attente d’une décision


PROFIL LIPIDIQUE : AUTHENTIFICATION DES PRODUITS

� Les acides gras sont des molécules organiques composées d’une chaîne carbonée, terminée par une fonction carboxylique.

� Certains acides gras sont produits par notre organisme, d’autres doivent être apportés par l’alimentation.

� Il existe 4 grandes familles d’acides gras :

� Les acides gras saturés (AGS)• Pas de doubles liaisons• Rôle énergétique• On les trouve dans les viandes, charcuterie, produits

laitiers gras

� Les acides gras monoinsaturés (AGMI)• Une seule double liaison on les trouve dans les

huiles d’olives, de colza tendance à diminuer le taux de cholestérol

� Les acides gras polyinsaturés (AGPI)• Plusieurs doubles liaisons possibles -> tendance à

diminuer le taux de cholestérol

� Les acides gras trans• Géométrie de la double liaison est « trans » dans la

nature, la géométrie trans est peu fréquente.


PROFIL LIPIDIQUE : LES ACIDES GRAS OMÉGA-3

Ce sont des acides gras polyinsaturés dont la double liaison la plusproche du CH3 terminal est portée par le 3ème carbone.

Ce sont des acides gras essentiels.

Principaux oméga-3 :

Seul oméga-3 dit

« essentiel »

Oméga-3 qui

peuvent être

synthétisés par

l’organisme ou

apporter par

certains aliments



Source d’oméga-3

- Huile de lin, huile de noix,huile de colza

riche en ALA

- Poissons gras riche en EPA et DHA

- Légumes verts, salades,cheval, gibier, …10 % en ALAÉpinard

800 % en DHA

Saumon

60 % en ALAHuile

de noix

% ANC en Oméga-3

ANC : Apports Nutritionnels Conseillés en Oméga 3

2g / jour pour ALA et 120 mg / jour pour DHA



Ce sont des acides gras polyinsaturés dont la double liaison la plusproche du CH3 terminal est portée par le 6ème carbone.

Ce sont des acides gras essentiels.

Principaux oméga-6 :

Acide linoléique (AL)C18 : 2 ω6Seul acide gras essentiel

Acide arachidonique (AA) : C20 : 4 ω6Acide γ-linolénique (AGL) : C18 : 3 ω6 Acide dihomo-γ-linolénique (ADGL) : C20 : 3 ω6 Ces acides gras

peuvent être

synthétisés par

l’organisme



Source d’oméga-6

Teneur en g / 100 g

Huile de tournesol 50 à 70

Margarine au tournesol 30 à 50

Graisse de poulet 10 à 30

Œuf entier 1 à10


PROFIL LIPIDIQUE : LES ACIDES GRAS SATURÉSET TRANS

Les acides gras trans

Ce sont des acides gras insaturés possédant une ouplusieurs insaturations.

Leur géométrie « trans » est peu fréquente dans lanature. Ils sont essentiellement issus de techniquesindustrielles comme :

- Hydrogénation catalytique- traitements thermiques (pour les huiles)

Cependant, on peut tout de même en retrouver dansquelques aliments comme la viande de bœuf ou lesproduits laitiers (biohydrogénation ruminale).

Les 2 hydrogènes sont de part et d’autre du plan

de la liaison


PROFIL LIPIDIQUE : LES ACIDES GRAS SATURÉS ET TRANS

Exemple de rôle néfaste de ces acides gras

Quelques sociétés ont décidé de modifier, depuis le 1er mai2007, la composition de leurs huiles de fritures de manière àdiminuer la présence de ces acides gras saturés et trans.

Leur nouvelle huile est un mélange d’huile de colza oléique,d’huile de tournesol oléique et d’huile de colza (25/65/10).

Nouvelle huile de friture

Ancienne huile de friture

Taux d’acides gras trans

- de 2 % 12 %

Taux d’acides gras saturés

- de 10 % 15 %


PROFIL LIPIDIQUE : DOSAGE

� Dosage de la matière grasse :

• Arrêté du 08/09/1977, du 05/02/1980, NF ISO 8262-3, Weilbull,…

– Hydrolyse acide à chaud– Extraction soxhlet de la matière grasse à

l’aide d’un solvant.

� Profil lipidique : Détermination en acide gras saturés, mono insaturés, polyinsaturés, oméga 3, oméga 6, EPA, DHA et acides gras Trans.

• Méthodes :ISO 5508 – ISO 5509 – ISO 15304


VITAMINES : ALLÉGATIONS

� Sources de vitamines :

Si le produit contient plus de 15 %

des AJR pour les solides.

Si le produit contient plus de 7,5

% des AJR pour les liquides.

� Riche en vitamines :


des AJR pour les solides.


des AJR pour les liquides.

Règlement CE n°1924/2006 du 20 Décembre 2006VITAMINES AJR

Vitamine A

Vitamine D

Vitamine E

Vitamine K

Vitamine C

Vitamine B1

Vitamine B2

Vitamine B3

Vitamine B5

Vitamine B6

Vitamine B8

Vitamine B9

Vitamine B12

800 µg

5 µg

10 mg

100 µg

60 mg

1,4 mg

1,6 mg

18 mg

6 mg

2 mg

150 µg

200 µg

1 µg


Polyphénols

Acides phénoliques Flavonoïdes Tanins Stilbènes Lignanes Saponines Phytostérols/ PhytostanolsDérivés acide benzoïque Polymères de Resvératrol Matairésinol Glycosides Campestérol

Ex: acide gallique flavonoïdes triterpéniques StigmastérolDérivés acide cinnamique

Ex: acide caféique

Flavones Flavonols Isoflavones Dihydroflavonols Flavanones Anthocyanidines Flavanols

Apigénine Kaempferol Génistéine Dihydroquercétine Naringénine Cyanidine CatéchineChrysine Myricétine Daidzéine Hespérétine Péonidine EpicatéchineLutoléine Quercétine Génistine Taxifoline

Daidzine

O

OOH

OH

Chrysine

O

O

OH

OH

OH

OH

OH

Quercétine

O

OOH

OH

OH Génistéine

O

OH

OH

OH

OH

OH

OH

CatéchineOOH

OH

OH

OH

OH

+

Cyanidine

O

OOH

OH

OH

Naringénine

O

O

OH

OH

OH

OH

Dihydroquercétine

OH

OHOH

COOH Acide gallique

OH

OH

OH

Trans- resveratrol

O

OH

CH3CO

OH

O

OMe

Matairésinol

OH

Campestérol

O

O

O

OH

OH

OH

OH

OH

OHOH

OH

OH

OH

OH

OHOH

OH

OH

Tanin condensé

O

CH2OH

CH2OAc

O

COOH

OH

OH

O

O

OHOHCH2OH

O H

Saponine de soja


daidzéinedaidzéine

génistéinegénistéinedaidzinedaidzine

génistinegénistine

IsoflavonesIsoflavones


EXEMPLE 3 : LES PHYTOSTÉROLS

StructuresStructures

Sources : Sources :

� huiles végétales

� noix

� légumineuses

� légumes

DéfinitionDéfinition : hydrocarbures polycycliques se trouvant dans la fraction lipidique des plantes

OH

OH

OH

campesterol

stigmastérol

sitostérol

Les conférences et interventions du labo

Vidéo du laboratoire

Journal collaboratif

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FRAUDES, 12è RdV des Managers de la qualité, comment garantir l'authenticité des produits, conférence d'Yvon Gervaise Rennes 3/04/2014