entero4enterobacterie4

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Les Entrobactries (4me

partie) : Les Entrobactries lactose - : les genres

Salmonella et Shigella ainsi que les

entrobactries DA +

Objectifs : * Mettre en vidence les caractres morphologiques, culturaux et biochimiquespour orienter ltude vers la famille des entrobactries.

* Raliser lensemencement dune macrogalerie en vue de la dtermination de

lespce de lentrobactrie lactose - .

* A laide du tableau dichotomique, identifier lespce de lentrobactrie

lactose - .

1er

jour

Manipulation : Par personne, vous disposez dune souche pure dune entrobactrie lac -prsente sur GNi :

Souche numrote

prsente sur glose nutritive

Raliser une suspension bactrienne faible

( 1 colonie dans 5 mL deau distille strile)

Etude microscopique :

Raliser une coloration de

Gram

Ralisation du test

dorientation rapide

pour 1 entrobactrie :

Raliser le test de loxydase

Ensemencements

des milieux de la

galerie de famille :

VF

Hugh et Leifsonglucoss

Bouillon nitrat

Glose NutritiveOrdinaire

Ensemencements des

milieux de la galerie de

genre et despce :

Kligler-Hajna

Clarks et Lubs

Ure Indole

Mannitol-Mobilit

Citrate de Simmons

Isolements des bacilles Gram - sur :

Milieux slectifs : Hektoen,

SS

Milieu non slectif : CLED

Incuber botes et tubes 24 h 37C

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Compte-rendu :

Coloration de Gram Test respiratoire :

Observations Conclusion Observations Conclusion

Orientation

Souche n

2me

jour

Manipulation :

Lecture des diffrents milieux ensemencs : botes et tubes.

Raliser le tests complmentaires ncessaires la mise en vidence de :

la nitrate rductase

la galactosidase

la voie fermentaire du glucose

la tryptophane dsaminase et de la tryptophanase

Compte-rendu :

1. Ensemencements

Milieux Observations Interprtations Conclusion

VF

Bouillon nitrat

Hugh et Leifson glucos

GN

Kligler

Clark et Lubs

Citrate de Simmons

Mannitol- Mobilit

Ure-Indole

Milieu ODC

2. Isolements

Observations : aspect des colonies Conclusion

Glose CLED

Glose Hektoen

Glose SS

3. Conclusion Proposer une identification de lentrobactrie lactose - numrote et justifier votre dmarche logique danalyse :

Justification de lappartenance la famille des Entrobactries. Justification de lappartenance au genre et lespce bactrienne.