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Journées des Recherches Respiratoires
566 Rev Mal Respir 2006 ; 23 : 509-91
103 Les facteurs de transcription : de nouvelles cibles pour la thérapie des maladies respiratoires ?
C. Rene, E. Lopez, M. Claustres, M-C. Romey
Introduction : L’expression des gènes impliqués dans les processusinflammatoires liés à la pathogenèse de nombreuses maladies pulmo-naires chroniques est finement régulée par le jeu des interactionsentre plusieurs facteurs de transcription. Par exemple, il a été montréque le facteur NRF2 (NF-E2-related factor) joue un important rôleprotecteur vis-à-vis du stress oxydatif, en prévenant les altérationspulmonaires liées à l’inflammation chronique des voies respiratoiresdans l’asthme. Les facteurs IRFs (Interferon response factor) sont géné-ralement impliqués dans la réponse immunitaire engendrée par dif-férents pathogènes [1]. Notre laboratoire a récemment démontrél’importance d’un antagonisme fonctionnel entre deux autres fac-teurs de transcription dans la régulation transcriptionnelle du gèneCFTR dont les mutations sont responsables de la mucoviscidose.Cette maladie étant également caractérisée par une atteinte pulmo-naire chronique, nous avons étudié l’implication des facteurs NRF2et IRFs dans la régulation de l’expression de ce gène.Méthodes : Des analyses in silico ont été utilisées pour rechercherla présence de sites de fixation pour les facteurs NRF2 et IRFs auniveau du promoteur CFTR minimal. Des expériences de retarde-ment de migration électrophorétique sur gel ont permis d’objectiverla fixation de ces facteurs au niveau du promoteur minimal. Afind’évaluer le rôle fonctionnel de ces protéines sur la régulation de latranscription du gène CFTR, des co-transfections transitoires d’unvecteur rapporteur contenant le promoteur CFTR minimal avec lesvecteurs d’expression de ces facteurs ont été initiées.Résultats : Après avoir montré l’expression tissu-spécifique desfacteurs NRF2 et IRFs dans les lignées épithéliales pulmonaires uti-lisées au laboratoire, et mis en évidence la présence d’un site de fixa-tion composite pour NRF2 et IRFs, nous avons montré la liaison invitro de ces facteurs sur la séquence d’intérêt. L’évaluation de l’effetde chacun de ces facteurs sur la transcription du gène CFTR est encours de réalisation.Conclusions : Nous démontrons pour la 1re fois la fixation de fac-teurs de transcription spécifiquement impliqués dans les réponsesinflammatoires sur le promoteur CFTR. L’évaluation du rôle de cesfacteurs devrait permettre d’indiquer si des activateurs spécifiquesdes ces protéines pourraient éventuellement être utilisés pour préve-nir les processus inflammatoires liés aux infections pulmonaires.
Référence
1 J Interferon Cytokine Res 2002 ; 22 : 5-14.
104 Hypervirulence d’un variant rugueux de la souche type de Mycobacterium abscessus
E. Catherinot1, J. Clarissou1, G. Etienne2, F. Ripoll1,J-F. Emile3, M. Daffe2, C. Peronne4, C. Soudais5,J-L. Gaillard1, M. Rottman1
Introduction : Au sein du groupe des mycobactéries à croissancerapide Mycobacterium abscessus est celle dont le pouvoir pathogèneest le plus marqué pour l’arbre respiratoire. M. abscessus peut être àl’origine d’infections sévères parfois rapidement fatales. M. abscessuspeut être isolé des prélevements cliniques sous une forme lisse (L)ou rugueuse (R). Nous avons déterminé la composition lipidique dela paroi de variants L et R et étudié leur virulence.Méthodes : Deux souches ont été utilisées : M. abscessus type(CIP 104536T), d’aspect lisse et 390-R et S [1]. Des variants R deM. abscessus CIP 104536T, ont été isolés après inoculation à dessouris C57Bl/6µMT. Une colonie R, CIP 104536T-R, a été sélec-tionnée, réisolée et conservée. La composition lipidique de la paroides variants L et R a été étudiée par chromatographie en couchemince. La mortalité après infection des souris C57Bl/6 inoculéespar voie intra-veineuse avec 10,7 UFC des variants L ou R de CIP104536T et de 390 a été observée. Des macrophages dérivées demoelle osseuse de souris C57Bl/6 ont été infectés à 5 bactéries parcellule par les variants L et R de CIP 104536T et de 390. La pro-duction de TNF a été évaluée 12 et 24 heures après infection.Résultats : Le contenu lipidique de la paroi des variants R de CIP104536T et de 390 diffère des variants L par l’absence de glycopep-tidolipides. L’infection par CIP 104536T-R est létale en 5 joursalors qu’aucune mortalité n’est observée après inoculation de CIP104536T. CIP 104536T-R entraîne une production significative-ment plus importante de TNF que CIP 104536T 12h et 24h aprèsinfection (p = 0,014 et 0,017 respectivement). Des résultats similai-res sont obtenus avec 390-R et 390-L.Conclusion : Les glycopeptidolipides font partie de la couche lipi-dique la plus externe de la paroi de M. abscessus. Ces résultats suggè-rent que les glycopeptidolipides exposés à la surface de M. abscessusinterfèrent avec la production de cytokines pro-inflammatoires parles macrophages et ont un rôle majeur dans la virulence deM. abscessus.
Référence
1 IAI 1999 ; 67 : 4700-7.
Laboratoire de Génétique Moléculaire, IURC, Montpellier, France.
Mots-clés : Infection-inflammation • BPCO.
1 Laboratoire de Microbiologie Hôpital R. Poincaré et EA 3647, Faculté de Médecine Paris-Ile de France-Ouest, Garches.2 Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale du CNRS-UMR 5089, Toulouse.3 Laboratoire d’Anatomo-Pathologie, Hôpital A. Paré, Boulogne.4 Département de Médecine Aiguë Spécialisée, Hôpital R. Poincaré et EA 3647, Faculté de Médecine Paris-Ile de France-Ouest, Garches.5 Laboratory of Human Genetics of Infectious Diseases, Université René Descartes-INSERM U550, Faculté de Médecine Necker-Enfants Malades, Paris.
Mots-clés : Infection • Inflammation.
