Cultures in vitro 1S

But du TP

Antisepsie

Asepsie

Travail en zone stérile

Mise en culture

Sources

But du TP:

Mettre en culture des fragments de St Paulia dans un ou des milieux nutritifs

La difficulté:Ne pas mettre en culture d'autres êtres vivants que le St Paulia (bactéries, champignons)

-d'une stérilisation de la surface des fragments à implanter et des milieux de culture.

-d ’empêcher les microorganismes de re-contaminer la culture après antisepsie.

D ’où la nécessité:

C’est l’antisepsie

C’est le travail en asepsie.

Antisepsie

Les moyens utilisés: antiseptiques (pour les plants) ou désinfectants (pour les outils)

•L ’eau de Javel (hypochlorite de sodium).

On ajoute un agent mouillant (détergent) à la Javel ou on utilise un produit du commerce (Domestos).

•L’alcool

•Le chauffage à la flamme ou le flambage des outils plongés dans l’alcool).

Asepsie

•Port du masque

•Travail sous le cône stérile produit par un bec Bunsen

•Lavage des mains et avant bras

•Cheveux attachés (l’idéal est le port d’un bonnet)

Zone protégée

Organisation de la zone stérile

D

A1

B

2

4

C

3

E B1

C

2

4

3

C1

2

4

3

Alcool et outils

Rinçage

Domestos et fragment

végétal

Rinçage 2Rinçage 3

Mise en culture

Sources

Clonage de Saint Paulia:

http://pagesperso-orange.fr/davidsandra/saintpaulia/X.htm