Inventaire des infections observées chez Platax orbicularis et Polydactilus

sexfilis en Polynésie française(référentiel)

Ifremer SPE - IfremerNathalie Cochennec-Laureau Rarahu DavidPeva Levy Ambre Van CamGeorges Nédelec SPECathy Tréguier George RemoissenetEric GassetYannick Gueguen

Depuis 2001, programme de développement de l’élevage de deux nouvelles espèces lagonaires

Ce développement a été confronté à des morbidités et mortalités d’origines infectieuses : virale, bactérienne et parasitaire

Objectif : donner une description des anomalies identifiées et des traitements préventif et/ou curatif proposés

Introduction

P. orbicularis

P. sexfiilis

Lorsqu’un poisson est malade, cela se traduit par la présence de :

symptômes : anomalies du comportement du poisson, diminution de l’appétence, activité natatoire modifiée, modification de la couleur des écailles, de la livrée….

lésions : anomalies observables de l’intégrité corporelle, malformation du poisson, présence de plaies et ou de pustules, perte d’écaille, exophtalmie, opacité des yeux….

Ces anomalies diminuent les performances biologiques du poisson et son aspect extérieur et peuvent ainsi limiter la commercialisation de l’animal

Rappels

L’origine de ces anomalies peuvent être d’ordre physique, chimique ou biologique. Elles peuvent intervenir seules ou en synergie pour perturber les fonctions physiologiques du poisson

physiques : propriétés physiques de l’eau : T°, concentration en matières dissoutes (MES). Ex : la T° peut influencer la virulence de certains agents pathogènes

chimiques : composition de l’eau ; pH, gaz dissous (oxygène, ammoniac..), toxines ou polluants. La présence plus ou moins importante de l’ammoniac peut être toxique pour le poisson. Elle varie en fonction de la T°, salinité… La nourriture peut aussi altérée la qualité de l’eau

biologiques : développement massif et non contrôlé de bioagresseurs : virus, bactéries, champignons, ecto- et endo- parasites…

Rappels

• Prophylaxie médicale– traitement inadapté en milieu ouvert– peu de vaccins disponibles

Prophylaxie

• Prophylaxie sanitaire- basée sur un diagnostic fiable, rapide et spécifique dépendant des

hypothèses infectieuses émises - possibilité de biosécuriser sanitairement les individus (sélection d’animaux

indemnes de maladies déclarées)

• Prophylaxie zootechnique- poissons en bonne condition plus aptes à résister aux infections (mise en

place de bonnes pratiques d’élevage)

Phase larvaire et sevrage

- Organismes intracellulaires obligatoires* (bactéries)

• Infection par Epitheliocystis-like

- Nodavirus

* parasite intracellulaire obligatoire = parasite qui se développe uniquement à l'intérieur d'une cellule

Organismes intracellulaires obligatoiresEpitheliocystis-like:

Symptômes : coloration foncée de la peau, décoloration des branchies. Détresse respiratoire

Diagnostic(1) état frais : nombreux organismes et bactéries observés sur apposition des lames

branchiales, Gram (-)(2) histologie : présence d’organismes intracellulaires de l’épithélium branchial et

tégumentaire (élargissement des cellules)

Traitement – prévention : antibiothérapie inadaptée car bactéries intracellulaires obligatoires. Éradication. Améliorer la zootechnie : Souvent associée à un mauvais état général

*

*

oeil

cerveau

Nodavirus

MO

Platax orbicularis (j20)

Lates calcarifer(j18)

oeil

cerveau

Symptômes : mortalité importante entre j+14 et j+20 en fonction des espèces infectées. Nage en vrille en surface

Diagnostic de suspicion(1) histologie : présence de nombreuses vacuoles dans le cerveau, au niveau de la

rétine et de la moelle épinière

Témoin ++

-

+ -

Nodavirus

Traitement – prévention : pas de traitement connu. Essai de vaccination. Biosécurisation en sélectionnant des géniteurs sains

Diagnostic de confirmationBiologie moléculaire : • RT-QPCR : système de

reconnaissance directe du virus et d’amplification moléculaire (► TRIDENT)

• Hybridation in situ : portion ARN du virus marquée par une sonde spécifique de l’ARN viral : complexe visible par coloration violette-noire au niveau des tissus infectés (cerveau, tissus nerveux et au niveau de la rétine)

Juvéniles en cage

- Ectoparasites

• Infection par crustacés du genre Caligus spp.• Infection par ciliés du genre Cyptocaryon spp., Brookynella spp.• Infection par vers plats monogene du genre Neobenedenia spp.

- Bactérioses

Crustacés du genre copépode

1 mm

Symptômes : abrasion de la peau et présence de mucus au niveau des branchies et de la peau. Très rarement présence d’ulcération

Diagnostic (1) état frais : présence de stade adulte de Caligus sur frottis de peau ou de branchie.

Les femelles sont reconnaissables à la présence de sacs ovigères. Ces copépodes s’accrochent à leur hôte par une paire d’antennes et par leurs maxillipèdes (bouche – flèches)

Traitement - prévention : briser le cycle du parasite en effectuant des bains de formol à 200 ppm à terre. Mise à sec des structures d’élevage (4 – 6 semaines)

Caligus sp.

Protozoaires Ciliés

théronte de type Cryptocaryon sp. cycle de multiplication

A

Phase infestante

Symptômes : points blancs sur la peau ou les branchies des poissons infectés. Diminution de l’appétence. Détresse respiratoire

Diagnostic(1) état frais : observation de nombreux organismes ciliés

Traitement – prévention : maladie très contagieuse. Briser le cycle de multiplication : Hyper ou hyposalinité affectent le stade libre, nageant, infectieux, le théronte(stade critique de la maladie).

Formol (100 à 250 ppm) pendant au moins 8 jours pour éliminer les formes enkystées. A ajuste en fonction du cycle de développement. Mise à sec et désinfection des bassins

Protozoaires Ciliés

Symptômes : les poissons se frottent. Présence d’un film blanc gris sur le poisson. Détresse respiratoire

Diagnostic (1) état frais : présence d’organisme cilié caractéristique avec son système

d’attachement

Traitement – prévention : parasite opportuniste. Infestation chez poissons affaiblis associés à d’autres ciliés…Formol (100 à 250 ppm)

Vers plats monogènes

Symptômes : les poissons se frottent. Perte d’écaille, sécrétion de mucus, quelques micro-hémorragies cutanées. Exophtalmie, opacité de l’oeil

Ectoparasite Monogene (Neobenedenia sp). Organe de fixation en forme de crochet

Diagnostic : observation de vers plats = famille des monogènes fréquemment rencontrés en milieu tropical. Ils infectent les nageoires, les branchies, la bouche. L’identification de l’espèce se fait par analyse morphométrique des organes d ’attachement (suspicion de Benedenia seriolae)

Traitement – prévention : dessalure et traitement H2O2 pour éliminer les adultes fixés. A confirmer l’efficacité sur les œufs qui se fixent sur tous les substrats (filets…). Traitement par bâche

Lymphocystose (maladie causée par un virus ADN)

Symptômes : apparition sur les nageoires et la peau d’excroissance en forme de mûre ou de chou-fleur, débutant par un kyste blanc dont la taille augmente progressivement

Diagnostic 1. histologie : présence de plages virales dans les cellules épithéliales de la peau

entraînant une augmentation de la taille et une déformation de celles-ci.2. biologie moléculaire : diagnostic de confirmation (non utilisé au COP)

Traitement – prévention : affecte de nombreuses espèces de poissons. Pas de traitement anti-viral. Sacrifier les poissons pour limiter la contagion. C’est une maladie d’évolution chronique, plutôt inesthétique que pathogène

Adultes et géniteurs

-Ectoparasites

• Infection par vers plats monogene du genre neobenedenia spp.• Infection par champignon

-Bactérioses

-Nodavirus

A B

Champignons

Symptômes : les poissons se frottent aux bacs. Perte d’écaille, lésions de la peau

Diagnostic :État frais : présence de nombreux filaments cloisonnés rappelant les mycelium de

champignons au niveau des plaies

Traitement – prévention : organismes opportunistes observés une fois en association avec bactériose secondaire. Pas de traitement efficace connue

Isolement sur marine agar et TCBS

Symptômes : nécroses et hémorragies importantes au niveau de la tête et du corps

Syndrome de la « tête rouge »

Diagnostics par état frais et histologique : pas de présence de parasites connus

Bactériologie : mise en évidence de deux espèces de Vibrio majoritaire (V. harveyi et V. campbelli) probablement des infections secondaires

Traitement - prévention : antibiothérapie à l’Oxytétracycline (balnéation). Amélioration zootechnique car poisson « stressable »

Problèmes majeurs actuels

Stage de master 2 Ambre Van Cam -> Objectif : améliorer les connaissances sur ces épisodes de mortalité, morbidité, rechercher éventuellement une cause infectieuse et adapter, si possible, un traitement curatif et/ou préventif

- Suivi d’un lot de P. orbicularis âgés de 56 jours (7-8 gr)- suivi journalier de la mortalité, du comportement des poissons- échantillonnage hebdomadaire pendant 4 semaines puis toutes les deux semaines pendant 4 semaines supplémentaires : 1080 poissons échantillonnés

- observation de la présence de lésions externes, opacité des yeux, examen microscopique, bactériologie, pour recherche d’agents infectieux

-mortalité suite aux transferts de juvéniles de P. orbicularis en cages dans le milieu naturel. -hypothèses environnementales, zootechniques, suspicion d’infection…

Résultats : observation majoritaire de parasites monogène

oeufs

Résultats : évolution de l’infestation au cours du temps

Début de l’infection entre 7 et 14 jours post-transferts

Résultats : essais de différents traitements

Formol H202 eau Témoins -douce

Essais de traitements curatifs sur poissons âgés de 174 jours élevés en cage et présentant de nombreuses lésions cutanées et ophtalmiques (suspicion de monogènes)

Formol et H2O2 : 200 ppm en bain statique d’une heure (12 jours)

Eau douce : bains flash tous les 7 jours (2 bains flash)

Efficacité des trois traitements sur 12 jours pour diminuer les lésions

Conclusions

• La morbidité des juvéniles semble associée, dès la deuxième semaine post-transfert, au développement rapide d’un parasite du genre monogène (sur la durée de l’expérience)

• Elle se caractérise principalement par la présence de lésions d’opacité au niveau des yeux et quelques rares lésions au niveau du corps

• Le traitement semble efficace pour limiter voire éliminer le symptôme : opacité des yeux

• Les lésions observées depuis plusieurs années sur P. orbicularis, plus âgés élevés en cage présentant de nombreuses lésions, ont probablement comme cause initiale une infection par des parasites du genre monogène

• Sans diagnostic précoce et traitement adapté (curatif et/ou préventif) de l’infection initiale, des infections secondaires par des ciliés voire des infections bactériennes se développent et entraînent des baisses de performances physiologiques et des mortalités

Hypothèses

• Définir précisément le cycle d’infection du parasite, et sa cinétique de développement• Définir précisément les doses de traitement à adapter au milieuouvert : choix d’un traitement curatif ou préventif ?• Évaluer leur efficacité sur les parasites monogènes adultes et les oeufs• Préconiser des mesures de prévention basées sur une adaptation des techniques d’élevage avec une meilleure connaissance du cycle du parasite (site de fixation des œufs…..)

Perspectives

Progresser dans le développement de bonnes pratiques d’élevage qui doit prendre en compte la santé de l’animal, la prévention, la prophylaxie zootechnique et la qualité et la qualification des poissons

Suivi du comportement

Pratiques standards d’élevage

Not free

NoNo

Poor

High

Mauvaise performance Performance moyenne Belle qualité

Zootechnie adaptée

Diagnostic précoce

Prévention

Traitement adapté

Observation de lésion

Non

Oui

ouiNon

Non

non

oui

oui

oui

Probabilité d’obtenir des poissons présentant de bonnes performances physiologiques

Réflexion à mener pour améliorer les bonnes pratiques d’élevage

oui

oui

oui

Merci pour votre attention