1

Benchikh.N1; Nachi.M1 ; Moussaoui.R1 ; Belarbi.CF1 ; Messaoudi.A1; Arabi.A2;Bekadja.MA2 ; Zatla.L3 ; Touhami.H3 ; Zouaoui - Benhadji.Z4 ; Mesli.N5; Benmansour. M;

Mehalhal.N6.1.Service de Biochimie, EHU 1er novembre, Oran ,Algérie

2.Service d’Hématologie et de Thérapie Cellulaire, EHU 1er novembre, Oran, Algérie.3.Service d’Hématologie, CHU Oran, Algérie.

4.Service d’Hématologie, CHU Sidi-Bel-Abbès, Algérie.5.Service d’Hématologie, CHU Tlemcen, Algérie.

6.Service d’Hématologie, EPH de Mascara, Algérie.

La recherche de la mutation JAK2 V617F au cours des syndromes myéloproliferatifs au niveau de

l’Ouest Algérien. Etude multicentrique portant sur 255

patients.

IXème Congrès National d’Hématologie-Tlemcen 2012

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Introduction

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• Une mutation acquise du gène Janus Kinase 2 (JAK2) qui transforme valine en phénylalanine en position 617 (V617F) est impliquée de façon certaine dans la pathogénie des syndromes myéloprolifératifs .

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• La mutation JAK2 V617F est située dans le domaine JH2 ou domaine pseudo-kinase de JAK2, qui régule négativement l’activité kinase de la protéine.

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• Elle entraîne une activation de la voie de signalisation même en l’absence de cytokines essentielles pour l’hématopoïèse (EPO, TPO, G-CSF).

• La mutation entraine donc une activation constitutive du signal dans les cellules de la lignée myéloïde et une production excessive de cellules sanguines matures.

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• La mutation JAK2 V617F est présente dans plus de 90% des PV et environ 50% des TE et des MFP.

Levine RL, et al., Nature Reviews Cancer, 2007

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• L’objectif de notre travail, est de rapporter le bilan d'activité de la recherche de la mutation V617F JAK2 au niveau de notre établissement hospitalier.

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Matériel et méthodes

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• Etude rétrospective (multicentrique, régionale).

• 255 patients • Mars 2009 - Janvier2012, • Services d’hématologie de l’Ouest

Algérien.– EHU Oran– CHU Oran – HMRU Oran– CHU Tlemcen– CHU SBA– EPSP de Mascara, Mostaganem, Saïda, Ain

Témouchent, Ain Turk.

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• Les patients ont été répartis en six groupes de pathologies en fonction des renseignements cliniques transmis au laboratoire:

Polyglobulie primitive ou secondaire Thrombocytémie SMP atypique Splénomégalie myéloïde Myélofibrose Maladie thrombo-embolique

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Techniques de génotypage de JAK2

• Extraction d’ADN à partir de 10 ml de sang total prélevé sur tube EDTA.

• Recherche de la mutation V617F du gène JAK2: PCR allèle spécifique ou ARMS-PCR (Chen et al., 2007)

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Principe de la réaction de PCR

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CTCTCTCTCACTTTGATCTCCATATTCCAGGCTTACACAGGGGTTTCCTCAGAACGTTGATGGCAGTTGCAGGTCCATATAAAGGGACCAAAGCACATTGTATCCTCATCTATAGTCATGCTGAAAGTAGGAGAAAGTGCATCTTTATTATGGCAGAGAGAATTTTCTGAACTATTTATGGACAACAGTCAAACAACAATTCTTTGTACTTTTTTTTTTCCTTAGTCTTTCTTTGAAGCAGCAAGTATGATGAGCAAGCTTTCTCACAAGCATTTGGTTTTAAATTATGGAGTATGTGTCTGTGGAGACGAGAGTAAGTAAAACTACAGGCTTTCTAATGCCTTTCTCAGAGCATCTGTTTTTGTTTATATAGAAAATTCAGTTTCAGGATCACAGCTAGGTGTCAGTGTAAACTATAATTTAACAGGAGTTAAGTATTTTTGAAACTGAAAACACTGTAGGACTATTCAGTTATATCTTGTGAAAAAGGAAAGCAATGAAGTTAAAAGTAGAAGGTTACAATGCCCAAACAATAGAGTATTA

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463 pb279 pb229 pb

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Résultats & discussion

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Répartition des patients selon les établissements hospitaliers

Etablissement hospitalier Nombre de patients

EHU Oran  112 CHU Oran  62HMRU Oran  10CHU Tlemcen  32CHU de S.B.A  28EPH de Mascara 2EPH de Mostaganem 1EPH de Saïda 3EPH de Ain Témouchent  2EPH de Ain Turk   3Total 255

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EHU Oran; 43.94%

CHU Oran; 24.32%

HMRU Oran; 3.93%

CHU Tlemcen; 12.55%

CHU SBA; 10.98%

Mascara; 0.78% Mostaganem; 0.39%Saida; 1.17%Ain Témouchent; 0.78%

Ain Turk; 1.17%

Répartition selon les établissements hospitaliers

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Répartition des patients selon le diagnostic suspecté

SMP suspecté Nombre (%)

Polyglobulies (primitive ou secondaire)

94 (36,86)

Thrombocytémies 97 (38,03)

Myélofibrose 05 (1,96)

Splénomégalies myéloïdes 17 (6,66)

SMP atypiques 30 (11,76)

Maladies thromboemboliques 12 (4,70)

Total 255 (100)

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Polyglobulies36,86%

Throm-bo-

cytémie38,03%

Myélofibrose1,96%

Splénomégalie

myéloide6,66%

SMP atypiques11,76%

Maladies thrombo-

emboliques4,70%

Répartition selon le Syndrome myéloprolifératif suspecté

Résultats du génotypage de JAK2 V617F

SMP suspecté (n) Nombre de cas mutés

Prévalence de la mutation

V617F de JAK2 (%)

Polyglobulies primitives ou secondaires (94) 61 64,89

Thrombocytémies (97) 40 41,23

Myélofibrose (5) 03 60

Splénomégalie myéloïde (17) 05 29,41

SMP atypique (30) 10 33,33

Maladies thromboemboliques (12) 05 41,66

Total (255) 124 48,6321

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Polyglobulie

s

Thrombocyt

émies

Myélofibrose

Splén

omégali

e myé

loide

SMP at

ypiques

Maladies

thrombo-em

boliques

Total

64.89%

41.23%

60.00%

29.41% 33.33%41.66%

48.63%

Prévalence de la mutation V617F de JAK2

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Conclusions

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• Notre étude est la première à évaluer la mutation JAK2 V617F chez des patients avec un SMP diagnostiqué ou suspecté en Algérie.

• La méthode choisie: rapide, sensible et peu couteuse.

• Nos résultats confirment que la découverte de cette mutation a considérablement révolutionné le diagnostic des SMP.

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• L’absence de la mutation V617F JAK2 devrait nous inciter à rechercher d’autres mutations (mutation du récepteur de Tpo « mutation W515L», mutations de l’exon 12 de JAK2 …).

• L’utilisation de la mutationV617F JAK2 en tant que marqueur quantitatif par PCR en temps réel de suivi de réponse au traitement au cas où une thérapie ciblée verra le jour.

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