67e Congrès de la Société nationale francaise de médecine interne, 5, 6 et 7 juin 2013, Marseille / La Revue de médecine interne 34S (2013) A32–A84 A33

Résultats.– Les paramètres hémodynamiques (fréquence cardiaque,pression artérielle) et l’indice de masse corporelle étaient simi-laires chez les patients ScS et les témoins. Le diamètre de l’artèrebrachiale était comparable dans les deux groupes, ainsi quel’épaisseur intima-média carotidienne. Les patients ScS présen-taient une réduction significative de la FMD et de l’hyperhémiepost-ischémique par rapport aux sujets témoins. En revanche,les valeurs de FMD indexées à l’augmentation des forces decisaillement étaient similaires dans les deux groupes, témoignantd’une fonction endothéliale endothélium-dépendante préservée auniveau de l’artère brachiale chez les patients ScS. En analysant leprofil des flux Doppler, nous avons observé que l’indice de résis-tance était similaire dans les deux groupes au repos, mais qu’il étaitsignificativement augmenté lors de la levée de l’ischémie dans legroupe ScS, témoignant d’une réduction de la vasodilatation induitepar l’ischémie en aval de l’artère brachiale.Discussion.– La vasodilatation de l’artère brachiale induite par leflux (endothélium-dépendante) est préservée au cours de la ScS.La mesure de la dilatation de l’artère brachiale dépendante del’endothélium chez les patients ScS est sous estimée du fait de lafaible hyperhémie réactionnelle observée ; l’importance de cettedilatation étant directement liée à l’augmentation des forces decisaillement lors de la levée de l’ischémie. La limitation de lavasodilatation induite par l’ischémie chez les patients ScS en estprobablement à l’origine.Conclusion.– Au total, cette étude suggère une atteinte microcircu-latoire exclusive dans la vasculopathie liée à la ScS.Référence[1] Rossi P, et al. Clin Physiol Funct Imaging 2010;30:453–9.

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CO003Souffrance et régénération endothéliale dans lasclérodermie systémiqueB. Granel a, L. Arnaud b, F. Bernard a, P. Rossi a, Y. Frances a,P. Berbis c, J. Serratrice a, J.-M. Durand a, G. Kaplanski a,N. Bardin d, F. Dignat George b,F. Sabatier b, Centre d’investigation clinique de l’AP–HMa Médecine interne, AP–HM, Marseille, Franceb Laboratoire d’hématologie, AP–HM, Marseille, Francec Dermatologie, AP–HM, Marseille, Franced Laboratoire d’immunologie, AP–HM, Marseille, France

Introduction.– L’endothélium vasculaire joue un rôle majeur dans laphysiopathologie de la sclérodermie systémique et de ses compli-cations vasculaires. Les dommages subis par l’endothélium et sacapacité endogène de réparation peuvent être évalués de manièreoriginale et non invasive par la mesure combinée des cellules endo-théliales circulantes (CEC), microparticules endothéliales (MPE) etprogéniteurs endothéliaux circulants (PEC et CFU-EC), associée autaux soluble de facteur angiogénique, le VEGF. Le but de ce travailest d’étudier la réponse endothéliale dans la sclérodermie.Patients et méthodes.– Il s’agit d’une étude cas versus témoins. Lescas sont 40 patients sclérodermiques (61 % de forme cutanée limi-tée, durée moyenne de la maladie de 11 ans, durée du syndromede Raynaud de 17 ans). Le score moyen de Rodnan est de 12/51 et50 % des patients ont des troubles trophiques des extrémités. Les12 témoins sains sont appariés sur l’âge, le sexe et le score OMS derisque cardiovasculaire.Sont étudiés : CEC (isolation par immunoséparation magnétiqueet quantification par microscopie à fluorescence), MPE (quanti-fication par cytométrie en flux selon un phénotype annexineV+CD31 + CD41–) et PEC (quantification par cytométrie en flux selonun phénotype 7AAD-CD34 + CD45 + KDR+ et par leur capacité àdévelopper des colonies in vitro par un test clonogénique de typeCFU-EC). Le VEGF est dosé par Elisa.Résultats.– Marqueurs de souffrance endothéliale : les patientsprésentent un taux de CEC significativement plus élevé que les

témoins (11,98/mL ± 32,77 vs 3,09/mL ± 7,16). Parmi les patients,23 % (10/44) ont un taux élevé de CEC avec des valeurs supérieuresà 10/mL. Nous n’observons aucune différence significative dans lestaux de MPE entre patients et témoins.Marqueurs de réparation : un nombre significativement supérieurde CFU-EC est observé chez les patients comparé aux témoins(14,56 ± 14,30 vs 5,27 ± 8,07, p = 0,02). Corroborant ces résultatsle taux de VEGF est plus élevé chez les patients que les témoins(p = 0,06). Les patients ayant un taux de CEC supérieur à 10/mLont moins de progéniteurs endothéliaux (CFU-EC), p = 0,09. Nousne montrons pas de différence dans le nombre de PEC entre lespatients et les témoins (68,24/mL ± 81,90 vs 59,29/mL ± 51,31).Conclusion.– Ces résultats préliminaires confirment la coexistenced’une souffrance/réparation endothéliale au cours de la scléroder-mie. La définition d’un score de la réponse endothéliale dans cesdeux versants permettra d’identifier les patients à haut risque vas-culaire. Une corrélation avec le phénotype clinique des patients seraréalisée sur l’ensemble de la population (50 ScS et 50 témoins) dèsla fin des inclusions. En conclusion, cette étude propose une stra-tégie d’exploration non invasive de la réponse endothéliale dans lasclérodermie systémique.

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CO004Les neurotrophines sont impliquées dans leremodelage vasculaire de l’artérite à cellulesgéantesK.-H. Ly a, A. Régent b, E. Molina c, P. Sindou c, C. Le-Jeunne d,A. Brézin e, F. Labrousse f, P.-Y. Robert g, A.-L. Fauchais a,E. Vidal-Cathala a, L. Mouthon b, M.-O. Jauberteau-Marchan c

a Médecine interne A, CHU de Dupuytren, Limoges, Franceb Médecine interne, hôpital Cochin, Paris, Francec Laboratoire d’immunologie Ea 3842, faculté de médecine, Limoges,Franced Médecine interne, hôpital Hotel-Dieu, Paris, Francee Ophtalmologie, hôpital Cochin, Paris, Francef Anatomie pathologique, CHU de Dupuytren, Limoges, Franceg Ophtalmologie, CHU de Dupuytren, Limoges, France

Introduction.– L’artérite à cellules géantes (ACG) est une vascula-rite primitive caractérisée par une hyperplasie intimale pouvantaboutir parfois à une obstruction luminale des branches de l’aorteet de l’artère carotide externe. La physiopathologie du remodelagevasculaire dans l’ACG est mal comprise. Les neurotrophines (NT)et leurs récepteurs (NTR), sont des protéines impliquées dans lacroissance, la différenciation et la survie des neurones. On distinguele nerve growth factor (NGF), le brain-derived neurotrophic factor(BDNF), la neurotrophine 3 (NT-3) et la neurotrophine 4/5 (NT-4/5).Les NT produisent leurs effets en interagissant avec leurs récep-teurs : les récepteurs sélectifs tropomyosine kinase (Trk) (TrkA,TrkB et TrkC) et un récepteur non sélectif p75NTR. Les NTs sontégalement impliquées dans la prolifération, la migration et la sur-vie des cellules endothéliales après l’activation de TrkA et TrkB etdans la migration des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV)après activation de TrkA par le NGF [1]. Nous émettons l’hypothèseque les NT sont impliquées dans le remodelage vasculaire de l’ACG.Patients et méthodes.– Nous avons inclus des patients consécutifsayant subi une biopsie temporale artère (BAT) pour une suspiciond’ACG. Les CMLV ont été cultivées à partir des BAT. Nous avonssélectionné quatre patients avec une BAT positive et quatre sujetstémoins. L’expression protéique des NT et des NTR a été déterminéepar immuno-histochimie (IHC) sur coupe paraffine d’artères tem-porales avec une quantification semi-quantitative. L’expression destranscrits d’ ARNm des NT et des NTR extraits des CMLV a été éva-luée par PCR quantitative en temps réel (qPCR). La concentration duNGF et du BDNF a été mesurée par technique enzyme-linked immu-nosorbent assay (Elisa) dans les sérums des patients (n = 29) et decontrôles (n = 48) et dans le surnageant des CMLV de patients (n = 8)

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et de contrôles (n = 8). Un test de prolifération cellulaire a été réalisésur des CMLV de patients (n = 4) et de contrôles (n = 4) par incorpo-ration de BrdU. Toutes les expériences ont été réalisées avec desamorces et des anticorps dirigés contre le NGF, le BDNF, NT3, TrkA,TrkB, TrkC et p75NTR. Les tests de prolifération ont été réalisés avecdu NGF et du BDNF exogène et des inhibiteurs des récepteurs TrK(K252a) et de p75NTR.Résultats.– En IHC les artères temporales de patients (n = 22) et decontrôles (n = 20) montraient une immunoréactivité pour le NGF, leBDNF et leTrkB et seuls les patients présentaient une immunoréac-tivité pour NT3 et P75NTR. L’immunomarquage était plus intensechez les patients pour du NGF dans la médias des artères (p = 0,005)et pour le BDNF dans l’adventice (p = 0,01), la média (p = 0,008)et l’intima (p = 0,04). La concentration sérique de NGF était plusimportante chez les patients en Elisa (p = 0,008). Il n’y avait pas dedifférence significative entre les patients et les contrôles concer-nant la concentration sérique du BDNF et la concentration de NGFet de BDNF dans le surnageant des CMLV. Une augmentation del’expression des transcrits de BDNF et TrkB extraits des CMLV a étéobservée chez les patients avec une différence significative pourTrkB (différence > 2). Le BDNF exogène semble diminuer la prolifé-ration des CMLV des patients alors que l’inhibition des TrK et dep75NTR semble augmenter cette prolifération.Conclusion.– Nos résultats suggèrent que les NT et les NTR sontimpliqués dans le remodelage vasculaire de l’ACG en particulierle BDNF. Dans les CMLV, le BDNF peut se lier à TrkB ou à p75NTR.La signalisation via TrkB favorise plutôt la survie cellulaire alorsque l’activation de p75NTR conduit plutôt à l’apoptose. Chez lespatients atteints d’ACG, le BDNF semble plutôt se lier à p75NTR.Cette voie pro-apoptotique pourrait être favorisée afin de limiterl’hyperplasie intimale dans les artères des patients atteints d’ACG.D’autres expérimentations effectuées sur un plus nombre de CMLVseront nécessaires pour confirmer ces résultats.Référence[1] Caporali A, Emanueli C. Cardiovascular actions of neurotrophins.

Physiol Rev 2009;89(1):279–308.

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CO005Étude de la vasculocompétence endothéliale aucours du purpura thrombotiquethrombocytopénique auto-immun de l’adulte :résultats préliminaires du PHRC National ENDO13A. Widemann a, C. Pasero a, L. Arnaud a, R. Lacroix a, F. Sabatier a,P. Poullin b, F. Dignat-George a,G. Kaplanski c, Les investigateurs du PHRC National Endo13a Laboratoire d’hématologie Umr 1076, Assistancepublique–Hôpitaux de Marseille, Marseille, Franceb Service d’hémaphérèse et autotransfusion, Assistancepublique–Hôpitaux de Marseille, Marseille, Francec Service de médecine interne, CHU la Conception, AssistancePublique–Hôpitaux de Marseille, Marseille, France

Introduction.– Le purpura thrombotique thrombocytopéniqueauto-immun (PTT-AI) est une microangiopathie thrombotique dueà la présence d’auto-anticorps inhibiteurs de l’enzyme ADAMTS13,conduisant à l’accumulation de facteur von Willebrand (fvW) dehaut poids moléculaire et à des phénomènes thrombotiques dif-fus dans la microcirculation. Les modèles animaux déficitaires enADAMTS13 ont montré que le déficit enzymatique ne peut expli-quer à lui tout seul la survenue du PTT, qui nécessite une phased’activation endothéliale.Nous avons développé un certain nombre d’outils biologiquespermettant de suivre de manière non invasive l’activation et larégénération de l’endothélium, traduisant la vasculocompétencel’endothéliale. De facon à évaluer in vivo et de facon prospectivel’activation endothéliale, ces outils ont été utilisés chez des patientsatteints de PTT-AI, au cours d’un PHRC National obtenu en 2008.

Patients et méthodes.– Des patients atteints de PTT-AI en phase aiguëont été inclus de facon prospective et des prélèvements sanguinsréalisés à j0, j7, jsortie, T3mois et T6mois permettant l’étude :– des marqueurs de lésion endothéliale tels que les cellulesendothéliales circulantes (CEC) (mesurées par immunoséparationmagnétique), la P sélectine soluble (CD62Ps) (Elisa, R&D Systems),le facteur von Willebrand (fvW) (Elisa, American Diagnostica) ;– des marqueurs de régénération endothéliale : CD34+/CD45+

(mesurés en cytométrie en flux). Les études statistiques ont étéréalisés à partir de tests non paramétriques, et les résultats sontexprimés en médiane (percentile 25 %–percentile 75 %).Résultats.– Vingt-trois patients atteints de PTT-AI(ADAMTS13 < 10 % et Ac anti-ADAMTS13 positifs) ont été inclus àpartir de huit centres francais entre 2008 et 2011. Les marqueursde lésion endothéliale CEC (28 CEC/mL [15–96,5], N < 10/mL),CD62Ps (55,3 ng/mL [50,8–91,4], N : 29 ng/mL [18–40]) et fvW(1,79 UI/mL [1,35–1,975], N : 0,5–1,3 UI/mL) sont significativementaugmentés pendant la crise. Ces différents marqueurs se norma-lisent en phase de rémission ([CEC : j0 : 28/mL (15–96,5), M3 :1/mL (0–5), p < 0,05] ; CD62Ps : j0 : 55,3 ng/mL [50,8–91,4], M3 :29,5 ng/mL [24,2–37,0], p < 0,01 ; fvW j0 : 1,79 UI/mL [1,35–1,975],M3 : 1,31 UI/mL [1,04–1,65], p < 0,05).Les CEC (groupe 1 : 22/mL [6–69,5] vs groupe 2 : 51/mL [17,5–152])et la 62Ps (groupe 1 : 54,9 ng/mL [32,3–77,1] vs groupe 2 :89,3 ng/mL [53,4–111,2]) ont tendance à être plus élevées dans lesformes les plus graves de la maladie (groupe 2), c’est-à-dire cellescompliquées de décès, de séquelles neurologiques et de rechutes.Les progéniteurs hématopoiétiques sont également plus élevésau cours de la phase aiguë de la maladie (9412 cellules/mL[7 712–14 642], N : 500–6500 cellules/mL) et se normalisenten phase de rémission (j0 :9412 cellules/mL (7712–14 642) vsM3 :1745 cellules/mL (1144–3980), p < 0,001), mais on ne constatepas de corrélation avec le gravité de la maladie.Discussion.– Cette étude a permis de suivre in vivo et de faconprospective de nombreux marqueurs de lésion et de régénérationendothéliale au cours de l’évolution du PTT-AI. Elle montre uneaugmentation significative de ces marqueurs en phase aiguë de lamaladie et leur normalisation en phase de rémission, témoignantd’une activation endothéliale effective au cours du PTT-AI.Conclusion.– Les marqueurs de lésion et de régénération endo-théliale confirment qu’une importante activation endothéliale estprésente lors de la phase aiguë du PTT-AI.

http://dx.doi.org/10.1016/j.revmed.2013.03.229

CO006Rôle de la blessure calcique et desimmunoglobulines G circulantes dans la mortcellulaire et la microvésiculation endothéliale aucours du purpura thrombotiquethrombocytopénique auto-immun de l’adulteM. Brun a, A. Widemann b, R. Bachelier b, S. Robert b, P. Poullin c,F. Dignat-George b, G. Kaplanski d

a Medecine interne Pr Harle, hôpital de la Conception, Marseille,Franceb Unité Inserm 1076 Pr Dignat-George, faculté pharmacie, Marseille,Francec Service d’hémaphérèse, hôpital de la conception, Marseille, Franced Service de médecine interne, hôpital de la conception, Marseille,France

Introduction.– Le purpura thrombotique thrombocytopéniqueauto-immun (PTT-AI) est lié à la présence d’auto-anticorps inhibantla protéase ADAMTS13, entraînant l’accumulation plasmatique defacteur von Willebrand de haut poids moléculaire et une coa-gulation diffuse dans la microcirculation artérielle [1]. L’absencede l’enzyme ne suffit cependant pas à induire la maladie, unephase d’activation endothéliale est nécessaire comme l’ont mon-