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M2 Recherche MBVB Atelier “Sécrétion de facteurs de virulence” S. Bleves et R. Voulhoux Année 2010-2011 Durée de l’épreuve: 3 heures Analyser synthétiquement les résultats de chaque expérience en vous aidant des questions posées. Construire le résumé de l’article (15 lignes max). Donner un titre à l’article. Etablir une liste de 5 mots-clé. Question 1: Conséquences de la mutation pcrV sur: la sécrétion de type III (exp 1a) la cytotoxicité sur macrophages infectés (exp 1d) la survie de souris infectées (exp 1b) Que concluez-vous? Question 2: Rôle de PcrV dans la translocation de ExoY (exp 2 «left»)? Donnez le principe d’une autre approche expérimentale pour étudier la translocation d’un effecteur. Pourquoi les auteurs ont-ils préincubé les macrophages J774 avec ces différents anticorps avant l’infection (exp 2 «right»)? Que concluez-vous? Question 3: Effets des anticorps anti PcrV dans les essais d’immunisation de souris (exp 3b & 3c) et sur l’état de l’épithélium respiratoire (3d)? Question 4: Effet des anticorps anti PcrV sur la cytotoxicité de P. aeruginosa envers les macrophages J774 (exp 4a)? Question 5: Effet des anticorps anti PcrV sur la dissémination de P. aeruginosa (poumons et sang) et sur la survie des macrophages in vivo? Le matériel et méthodes est inclus en annexe à titre indicatif, MAIS n’a pas à être lu. Ne perdez pas de temps!

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M2 Recherche MBVBAtelier “Sécrétion de facteurs de virulence”

S. Bleves et R. VoulhouxAnnée 2010-2011

Durée de l’épreuve: 3 heures

• Analyser synthétiquement les résultats de chaque expérience en vous aidant des questions posées.• Construire le résumé de l’article (15 lignes max).• Donner un titre à l’article.• Etablir une liste de 5 mots-clé.

Question 1: Conséquences de la mutation pcrV sur:la sécrétion de type III (exp 1a)la cytotoxicité sur macrophages infectés (exp 1d)la survie de souris infectées (exp 1b)Que concluez-vous?

Question 2: Rôle de PcrV dans la translocation de ExoY (exp 2 «left»)? Donnez le principe d’une autre approche expérimentale pour étudier la

translocation d’un effecteur.Pourquoi les auteurs ont-ils préincubé les macrophages J774 avec ces différents

anticorps avant l’infection (exp 2 «right»)? Que concluez-vous?

Question 3: Effets des anticorps anti PcrV dans les essais d’immunisation de souris (exp 3b & 3c) et sur l’état de l’épithélium respiratoire (3d)?

Question 4: Effet des anticorps anti PcrV sur la cytotoxicité de P. aeruginosa envers les macrophages J774 (exp 4a)?

Question 5: Effet des anticorps anti PcrV sur la dissémination de P. aeruginosa (poumons et sang) et sur la survie des macrophages in vivo?

Le matériel et méthodes est inclus en annexe à titre indicatif, MAIS n’a pas à être lu. Ne perdez pas de temps!

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Titre

Résumé

Expérience 1

Voir légende figure 1aLe NTA est un chélateur d’ions divalents, la déplétion en ions Ca2+ du milieu de culture activant, en absence de cellules hôtes, le T3SS

de P. aeruginosa.

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ExsA est l’activateur transcriptionnel du SST3 de P. aeruginosa.

Voir légende figure 1d

Voir légende figure 1b

Expérience 2

Voir légende figure 2 “left” (6 1ères colonnes)

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Voir légende figure 2 “right” (5 dernières colonnes)

Expérience 3

Voir légende figure 3b, 3c & 3d

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Expérience 4

Voir légende figure 4a

Voir légende figure 5

Expérience 5

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Annexe: Matériel et Méthodes