Objectifs

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / HammZ. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007amet 24 - 25 mai 2007

11

Réalisation d’une Structure Réalisation d’une Structure animalière protégée à animalière protégée à

l’Institut Pasteur pour la l’Institut Pasteur pour la production et production et

l’expérimentation sur l’expérimentation sur animaux standardisésanimaux standardisés


22

ObjectifsObjectifs

Production reproductive des Production reproductive des animaux: animaux: Fournir des animaux Fournir des animaux standardisésstandardisés

Expérimentation: Expérimentation: avoir les avoir les conditionsconditions pour la réalisation de pour la réalisation de l’expérimentation dans les l’expérimentation dans les conditions conditions requises pour le type de requises pour le type de manipulation souhaitéemanipulation souhaitée..


33

Référentiel normatif -1-Référentiel normatif -1-

Directive 86-609-CEE ( 24 novembre Directive 86-609-CEE ( 24 novembre 1986) relative à la protection des 1986) relative à la protection des animaux utilisés à des fins animaux utilisés à des fins expérimentales ou à d’autres fins expérimentales ou à d’autres fins scientifiques:scientifiques: assurer aux animaux assurer aux animaux des soins adéquats et empêcher les des soins adéquats et empêcher les douleurs ou souffrances inutilesdouleurs ou souffrances inutiles


44

Soins prodigués aux animauxSoins prodigués aux animaux

Conditions de vie hygiéniques;Conditions de vie hygiéniques;Limiter au maximum les restrictions Limiter au maximum les restrictions

apportées au comportement des animaux.apportées au comportement des animaux.Conditions physiques de l’environnement Conditions physiques de l’environnement

contrôlées;contrôlées;Le bien-être de l’animal doit faire l’objet Le bien-être de l’animal doit faire l’objet

d’une observation par une personne d’une observation par une personne compétente afin d’éviter toute souffrancecompétente afin d’éviter toute souffrance..


55

Référentiel normatif - 2-Référentiel normatif - 2-

Directive 2004-1-CEE: application Directive 2004-1-CEE: application des Bonnes Pratiques de des Bonnes Pratiques de Laboratoires telles que spécifiées Laboratoires telles que spécifiées par les directives de l’OCDE, par les directives de l’OCDE, traite traite de la conformité:de la conformité:Des installations d’essaisDes installations d’essaisDes modes opératoires normalisésDes modes opératoires normalisés


66

Référentiel normatif - 3 -Référentiel normatif - 3 -

Directive 2000-54-CEE du 18 septembre Directive 2000-54-CEE du 18 septembre 2000: protection des travailleurs contre 2000: protection des travailleurs contre les risques liés à des agents biologiquesles risques liés à des agents biologiques..

Classification des agents biologiques en Classification des agents biologiques en

fonction du danger qu’ils peuvent constituer fonction du danger qu’ils peuvent constituer

pour le personnel et l’environnement,pour le personnel et l’environnement,

Définition des niveaux de confinementDéfinition des niveaux de confinement


77

Statut

Génétique

Statut

Sanitaire

Environnement

Animaux standardisésAnimaux standardisés

Trois paramètres :Trois paramètres :


88

DéfinitionDéfinition

Animaux standardisésAnimaux standardisés = animaux = animaux définis par rapport à:définis par rapport à:Leur statut génétique,Leur statut génétique,Leur statut sanitaireLeur statut sanitaire,,

Maintenus dans un environnement Maintenus dans un environnement contrôlécontrôlé


99

Environnement contrôléEnvironnement contrôlé

Environnement protégé par:Environnement protégé par:Une barrière physique: maîtrise des Une barrière physique: maîtrise des

paramètres de l’ambiance;paramètres de l’ambiance;Séparation des secteurs: sale, propre et Séparation des secteurs: sale, propre et

technique;technique;Procédures opératoires normalisées Procédures opératoires normalisées

(soins et manipulations)(soins et manipulations)


1010

Statut GénétiqueStatut Génétique

Dépend du système d’élevageDépend du système d’élevage::

– Colonies non consanguinesColonies non consanguines (panmictiques (panmictiques):):

génétiquement non définiesgénétiquement non définies sauf pour certains sauf pour certains

caractères = outbred (ex: souche SWISS);caractères = outbred (ex: souche SWISS);

– Colonies consanguinesColonies consanguines:: génétiquement génétiquement

définiesdéfinies; accouplement (FxS ) > 20 générations; ; accouplement (FxS ) > 20 générations;

gènes fixés à l’état gènes fixés à l’état homozygotehomozygote = inbred ( ex: = inbred ( ex:

lignée Balb/C).lignée Balb/C).


1111

Statuts génétiquesStatuts génétiques

SourisSouris

Non Non consanguinesconsanguines

Swiss( OF1, NMRI…)Swiss( OF1, NMRI…)

Consanguines Consanguines

Balb/C; C57Black/6; Balb/C; C57Black/6; CBA; DBACBA; DBA22

MBT, MAI; PWKMBT, MAI; PWK

RatsRats Non Non consanguinsconsanguins

WistarWistar

CobayesCobayes Non Non consanguinsconsanguins

Albinos / ColoréAlbinos / Coloré

HamstersHamsters ConsanguinsConsanguins Doré (syrien)Doré (syrien)


1212

Statuts sanitairesStatuts sanitaires

AXENIQUE ou GERM FREEAXENIQUE ou GERM FREE (= 0 microbe) (= 0 microbe) RedérivationRedérivation..

GNOTOXENIQUEGNOTOXENIQUE: mono-,… : mono-,… (Gnotobiotique).(Gnotobiotique).

HETEROXENIQUEHETEROXENIQUE(agnotobio-(agnotobio-tique): tique): EOPS(SPF)EOPS(SPF); SSC; ; SSC; SOPF.SOPF.

HOLXENIQUEHOLXENIQUE: : ConventionnelConventionnel Néoholoxénique: Néoholoxénique: conventionnalisé conventionnalisé

Élevage sous Barrière

Élevage en isolateur

Animalerie conventionnelle


1313

Animaux EOPSAnimaux EOPS

Exempts Exempts d’Organismes d’Organismes Pathogènes Pathogènes SpécifiquesSpécifiques

Synonyme = IOPS Synonyme = IOPS (Indemnes OPS)(Indemnes OPS)

Bactéries :Bactéries :Bordetella bronchisepticaBordetella bronchisepticaPasteurella sp.Pasteurella sp.SalmonellaSalmonellaStreptobacillus moniliformisStreptobacillus moniliformisStreptococci Streptococci hémolytiques(sauf hémolytiques(sauf groupe D)groupe D)Maladie de TyzzerMaladie de Tyzzer

Si lésions / signes cliniques :Si lésions / signes cliniques :Clostridium sp.Clostridium sp.DermatophytesDermatophytesEscherichia coli ( + sérotype)Escherichia coli ( + sérotype)Klebsiella pneumoniae / oxytocaKlebsiella pneumoniae / oxytocaProteus sp.Proteus sp.Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosaStaphylococcus aureusStaphylococcus aureusTreponema cuniculi (+ sérotype)Treponema cuniculi (+ sérotype)Yersinia pseudotuberculosisYersinia pseudotuberculosis


1414

Animaux EOPSAnimaux EOPS

Parasites : Arthropodes Helminthes Eimeria sp. Giardia sp. Spironucleus sp. Klosiella sp. Encephalitozoon cuniculi Toxoplasma gondii Trichosomoides crassicauda

Virus:Sérologie ( tous les 3 mois) :

Virus de la pneumonie de la souris (PVM)

Virus de la maladie hémorragique du lapin (RHDV)

Poxvirus du lapin (myxomatose)

Rotavirus du lapin Virus Sendaï Virus simien 5 (SV 5)


1515

Statut

Génétique

Statut

Sanitaire

Environnement

Animaux standardisés Animaux standardisés + confinement+ confinement

Quatre paramètres :Quatre paramètres :

confinement


1616

Le niveau de confinementLe niveau de confinement

La manipulation d’agents biologiques (virus, La manipulation d’agents biologiques (virus,

bactéries, parasites…) est la composante majeure bactéries, parasites…) est la composante majeure

de l’expérimentation animale.de l’expérimentation animale.

L’évaluation du risque inhérent à la manipulation L’évaluation du risque inhérent à la manipulation

d’agents pathogènes a généré la même d’agents pathogènes a généré la même

classification que pour les laboratoires de même classification que pour les laboratoires de même

ordre.ordre.


1717

Le niveau de confinementLe niveau de confinement

Cette classification a été étendue à la Cette classification a été étendue à la

manipulation des Organismes manipulation des Organismes

Génétiquement Modifiés = OGMGénétiquement Modifiés = OGM

À chaque niveau de risque correspond un À chaque niveau de risque correspond un

niveau de confinement:niveau de confinement:


1818

CorrespondanceCorrespondance

Laboratoire Laboratoire Animalerie Animalerie

L1L1 A1(P1) conventionnelA1(P1) conventionnel

L2L2 A2(P2)A2(P2)

L3L3 A3(P3)A3(P3)

L4L4 A4(P4)A4(P4)


1919

DéfinitionsDéfinitions

Niveau 1Niveau 1 Risque faible (individu Risque faible (individu et collectivité)et collectivité)

Niveau 2Niveau 2Risque modéré pour Risque modéré pour

l’individu, limité pour la l’individu, limité pour la collectivitécollectivité

Niveau 3 Niveau 3 R. élevé pour l’individu R. élevé pour l’individu faible pour collectivitéfaible pour collectivité

Niveau 4Niveau 4 Risque élevé (individu Risque élevé (individu et collectivité)et collectivité)


2020

Caractéristiques du projet Caractéristiques du projet

Création d’une animalerie répondant aux Création d’une animalerie répondant aux

standards internationaux avec:standards internationaux avec:

Une zone de productionUne zone de production: : élevages élevages

reproducteursreproducteurs d’ d’animaux standardisésanimaux standardisés;;

Une zone d’expérimentation:Une zone d’expérimentation: boxes individualisésboxes individualisés

comportant une comportant une aire de manipulationaire de manipulation et une et une aire de aire de

stabulationstabulation


2121

Principes généraux Principes généraux 1- Séparation des types d’activité: 1- Séparation des types d’activité:

REPRODUCTIONREPRODUCTION / /

EXPERIMENTATIONEXPERIMENTATION 2- Séparation des espèces , des souches et des lignées2- Séparation des espèces , des souches et des lignées

3-3- Etage technique accessible de l’extérieurEtage technique accessible de l’extérieur


2222

Etage technique Etage technique


2323

Zone de reproduction: Animalerie Zone de reproduction: Animalerie d’élevage pour animaux EOPSd’élevage pour animaux EOPS


2424

Capacités de production Capacités de production escomptéesescomptées

Au démarrage: Au démarrage: Souris: 60 000 de diverses souches et Souris: 60 000 de diverses souches et

colonies. colonies. Rats: 3 000 Non consanguinsRats: 3 000 Non consanguinsCobayes: 2 000Cobayes: 2 000Hamsters: 1 000 syriens Hamsters: 1 000 syriens


2525

Principaux éléments de la barrière:Principaux éléments de la barrière:

Zone d’élevageZone d’élevage isolée isolée par une barrière de par une barrière de pressions positivespressions positives

Accès réglementéAccès réglementé Matériel autoclavéMatériel autoclavé, , à à

l’entréel’entrée Flux unidirectionnelsFlux unidirectionnels Séparation des zonesSéparation des zones

" Sales / Propres"" Sales / Propres"


2626

Paramètres physiquesParamètres physiques

Environnement: 6 salles d’élevage Environnement: 6 salles d’élevage indépendantes, de 30 mindépendantes, de 30 m2 2 chacune (ILAR*) chacune (ILAR*) P° positives; P° positives; θ = 22 θ = 22 ++ 1°C; 1°C; H° = 55 H° = 55 ++ 5%; 5%; Ventilation: 20 renouvellements horaires;Ventilation: 20 renouvellements horaires; Filtres HEPA (H14) au niveau de chaque Filtres HEPA (H14) au niveau de chaque

sallesalleFiltration de l’air à l’extraction :HEPA + Filtration de l’air à l’extraction :HEPA +

CharbonCharbon* * Institute For Laboratory Animals ResearchInstitute For Laboratory Animals Research


2727

Schéma de principe: gradient Schéma de principe: gradient de pressionsde pressions

Couloir saleCouloir sale

Zône centrale propre

Élevage PROPRE

SALE

SALE

+2

+4

+2

0

Élevage

+2


2828

Schéma de principe: les fluxSchéma de principe: les flux

Couloir saleCouloir sale

Matériel stérile

Arrivé personnel

Zône centrale propre

Élevage PROPREArrivée

animaux

SALE

SALE

Élevage


2929

zone d’expérimentation de zone d’expérimentation de niveau IIniveau II


3030

La Barrière et le confinementLa Barrière et le confinement

Zone d’élevage isolée Zone d’élevage isolée (pression positive)(pression positive)

Accès réglementéAccès réglementé Matériel autoclavé, Matériel autoclavé,

stérilisé à l’entréestérilisé à l’entrée Flux unidirectionnelsFlux unidirectionnels Séparation des zonesSéparation des zones

" Sales / Propres" " Sales / Propres"

Confinement IIConfinement II


3131

Structure d’un boxe Structure d’un boxe d’expérimentationd’expérimentation

PSM II

Paillasse

Stabulation

Stabulation

P

R

O

P

R

E

COULOIR SALE

SALE


3232

Ventilation des boxesVentilation des boxes

Air neuf Air viscié


3333

Prestations à l’échelle du paysPrestations à l’échelle du pays

En 3 phases:En 3 phases:

1.1. 2ème semestre 2008: fourniture d’animaux,2ème semestre 2008: fourniture d’animaux,

2.2. Année 2009: accueil d’expérimentateurs sur Année 2009: accueil d’expérimentateurs sur

cahier de charge et établissement d’un devis,cahier de charge et établissement d’un devis,

3.3. Plus tard(?): réalisation d’études à façon. Plus tard(?): réalisation d’études à façon.


3434

Merci pour votre attentionMerci pour votre attention

..!....!..

Documents

Objectifs