Annales de pathologie (2008) 28, 105—109

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HISTOSÉMINAIRE SFP

Pièges morphologiques et immunohistochimiques enpathologie ganglionnaire. Observation no 3.Lymphome à cellules du manteau, forme blastoïde

Bruno Chetaillea,∗, Sophy Laibeb,Christine Arnouletc, Luc Xerri a

a Laboratoire d’anatomie pathologique, département de biopathologie, institutPaoli-Calmettes, 232, boulevard Sainte-Marguerite, B.P. 156, 13273 Marseille cedex 9, Franceb Laboratoire de cytogénétique, département de biopathologie, institut Paoli-Calmettes,232, boulevard Sainte-Marguerite, B.P. 156, 13273 Marseille cedex 9, Francec Laboratoire de cytologie hématologique, département de biopathologie, institutPaoli-Calmettes, 232, boulevard Sainte-Marguerite, B.P. 156, 13273 Marseille cedex 9, France

Accepté pour publication le 5 avril 2008Disponible sur Internet le 7 juillet 2008

Renseignements cliniques

Il s’agit d’un ganglion inguinal gauche prélevé chez une patiente de 75 ans qui présente untableau clinique de lymphome agressif : polyadénopathie superficielle (inguinale et cervi-cale) et profonde (iliaque et rétropéritonéale), importante altération de l’état général,amaigrissement, augmentation des LDH (280 UI/l, valeur normale 125—248 UI/l) et de laß2microglobuline (6,4 mg/l, valeur normale inférieure à 2,2 mg/l). NFS normale en dehorsd’une anémie (9 g/dl) microcytaire. Cinq pour cent de cellules lymphoïdes atypiques ontété signalées dans le sang circulant.

Diagnostic proposé

Lymphome à cellules du manteau, dans une forme blastoïde, avec expression faible du CD5non mise en évidence en immunohistochimie.

Description macroscopique

Le ganglion prélevé mesure 2 cm et présente les caractéristiques macroscopiques clas-siques d’une atteinte lymphomateuse non hodgkinienne : aspect blanchâtre, charnu(« chair de poisson »), homogène, sans remaniement nécrotique ni hémorragique. Un frag-ment a été mis en suspension pour étude en cytométrie de flux.

∗ Auteur correspondant.Adresse e-mail : chetailleb@marseille.fnclcc.fr (B. Chetaille).

0242-6498/$ — see front matter © 2008 Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.doi:10.1016/j.annpat.2008.04.002

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igure 1. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.pposition ganglionnaire. Population monomorphe de cellules deaille moyenne à chromatine assez fine (Giemsa × 200)lastoid mantle cell lymphoma. Lymph node touch imprint showsniform population of medium sized lymphoid cells with dispersedhromatin (Giemsa stai × 200).

escription histologique

’architecture ganglionnaire est totalement détruite parne nappe diffuse de cellules lymphoïdes de taille petitemoyenne à noyau rond, chromatine assez fine, nucléole

bsent ou de petite taille (Fig. 1 et 2). Il existe deombreuses mitoses ainsi que des corps apoptotiques. Enmmunohistochimie sur tissu fixé (formol), les cellules lym-homateuses présentent un marquage franc et diffus poure CD45 et le CD20 (Fig. 3). Le CD3 et le CD5 sont superpo-ables : ils ne marquent que des petits lymphocytes T, sansarquage sur les cellules lymphomateuses (Fig. 4). Celles-ci

ont, en revanche, marquées de facon plus faible et hétéro-ène par le CD43 (Fig. 5). Elles ne sont pas marquées pare CD10 (Fig. 6), le CD34, la TdT. La cycline D1 marquentensément près de 100 % des noyaux des cellules lympho-ateuses (Fig. 7) ; près de 70 % des cellules sont marquéesar le Ki67-MIB 1 (Fig. 8). Enfin, l’étude par FISH met en évi-

igure 2. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.appe diffuse de cellules lymphomateuses de taille moyenne, chro-atine assez fine. (HES × 200).lastoid mantle cell lymphoma. Diffuse architectural efface-ent. Medium-sized lymphoid cells with dispersed chromatin.

HES × 200).

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B. Chetaille et al.

igure 3. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.es cellules lymphomateuses expriment le CD20 de facon intense etiffuse (IHC × 200).lastoid mantle cell lymphoma. Strong and diffuse immunostainingf lymphomatous cells with anti-CD20 antibody (IHC × 200).

ence un réarrangement du gène codant pour la cycline D1équivalent moléculaire de la translocation (11 ;14)) (Fig. 9).

ommentaires

e cas présenté est particulier par sa présentation cytolo-ique (variante blastoïde classique de lymphome à cellulesu manteau) et par la négativité des cellules tumorales pour’anti-CD5 en immunohistochimie sur tissu fixé.

linique

a présentation clinique de la forme blastoïde de lymphomecellules du manteau n’est pas différente de celle de

a forme classique : âge médian au diagnostic autour de0 ans, prédominance masculine (2:1), maladie très sou-ent disséminée au moment du diagnostic (polyadénopathie,

igure 4. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.es cellules lymphomateuses ne sont pas marquées par l’anti-CD5ur tissu fixé inclus en paraffine. Seuls sont marqués quelques plusetits lymphocytes T réactionnels (IHC × 200).lastoid mantle cell lymphoma. Lymphomatous cells are not stai-ed with anti-CD5 antibody on formalin-fixed paraffin-embeddedissue. Only few T-lymphocytes are strongly positive (IHC × 200).

Pièges morphologiques et immunohistochimiques en pathologie ganglionnaire 107

Figure 5. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.Marquage faible et hétérogène des cellules lymphomateuses parl’anti-CD43. Quelques petits lymphocytes T réactionnels sont plusintensément marqués (IHC × 400).Blastoid mantle cell lymphoma. Lymphomatous cells are weaklystained with anti-CD43 antibody. Few T-lymphocytes are seen, morestrongly positive (IHC × 400).

moelle/sang périphérique et rate fréquemment envahis).L’atteinte digestive est fréquente (jusqu’à 30 % des cas)[1,2]. Dans notre cas, la présentation clinique particulière-ment « bruyante » faisait suspecter d’emblée un lymphomeagressif.

La forme blastoïde peut se rencontrer soit « de novo »,soit lors d’une rechute d’un lymphome du manteau initiale-ment de forme classique [1,2].

Histologie, immunohistochimie

L’OMS reconnaît deux formes cytologiques de variante blas-toïde de lymphome à cellules du manteau [1] :• la forme blastoïde classique (illustrée par notre cas) :

les cellules sont de taille petite à moyenne, à contoursnucléaires assez réguliers, ressemblent à des lympho-blastes par leur chromatine fine (mais néanmoins plusirrégulière que celle d’un lymphoblaste), avec un très

Figure 6. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.Les cellules lymphomateuses ne sont pas marquées par l’anti-CD10(IHC × 400).Blastoid mantle cell lymphoma. Lymphomatous cells are not stai-ned for anti-CD10 antibody (IHC × 400).

Figure 7. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.

Prés de 100 % des cellules lymphomateuses sont marquées par l’anti-cycline D1 (IHC × 200).Blastoid mantle cell lymphoma. Nearly 100% of the lymphoma-tous population is strongly stained with anti-Cyclin D1 antibody(IHC × 200).

fin nucléole. L’activité mitotique est intense (au moins20—30 mitoses/10 hpf) ;

• la forme blastoïde pléïomorphe : cellullarité hétérogènecomportant des grandes cellules fortement nucléolées.

Comme pour le lymphome à cellules du manteau clas-sique, l’architecture peut être nodulaire ou, le plus souvent,diffuse.

Le profil immunohistochimique est identique à celui dulymphome à cellules du manteau classique : CD45+ (intenseet diffus), marqueurs B (CD20, CD79a)+, CD5+, CD43+,CD10−, CD23−, bcl-2+, cycline D1+ [1,2].

Cependant, la forme blastoïde présente certaines parti-cularités :• l’index de prolifération Ki67-MIB-1 est volontiers plus

élevé [3]. Cette donnée est en accord avec le liendésormais bien établi entre l’activité de prolifération dulymphome du manteau et son agressivité [4] ;

Figure 8. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.Environ 70 % des cellules lymphomateuses sont en cycle (IHCKi67 × 50).Blastoid mantle cell lymphoma. About 70% of lymphomatous cellsare stained with anti-Ki67 antibody (IHC × 50).

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igure 9. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.tude par FISH du réarrangement du gène cycline D1 sur chro-osomes métaphasiques (sonde de séparation CCND1). Cellule

pparaissant tétraploïde et comportant deux équivalents molécu-aires de la t(11 ;14)(séparation du signal de fusion en deux signauxouge et vert).lastoid mantle cell lymphoma. FISH study of cyclin D1 gene (break-part CCND1 probe). The normal red-green fusion signal is replacedy two red and green signals indicating a chromosomal break.

le nombre de cellules cycline D1+ est également volon-tiers plus élevé et le marquage plus intense que dans lesformes classiques [3] ;la surexpression de CDK4 est fréquente [3,5]. Ce gèneintervient au coté de la cycline D1 dans la régulationdu cycle cellulaire. Le produit de sa surexpression peutêtre recherché en immunohistochimie : dans notre cas,environ 60 % des cellules lymphomateuses présentaient unmarquage pour l’anti-CDK4 (Fig. 10).

Ainsi l’expression combinée de Ki67-MIB-1, cycline D1 etDK4 par plus de 50 % des cellules serait une caractéris-ique de la variante blastoïde de lymphome du manteau parapport à la forme classique [3].

Concernant la négativité du CD5 en immunohistochimieans notre cas : le CD5 et le CD43 sont tous les deux des

igure 10. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.nviron 60 % des cellules lymphomateuses sont marquées par l’anti-DK4 (IHC × 200).lastoid mantle cell lymphoma. About 60% of lymphomatous cellsre stained with anti-CDK4 antibody (IHC × 200).

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igure 11. Lymphome à cellules du manteau, variante blastoïde.tude de la population lymphocytaire ganglionnaire en cytométriee flux. 64,2 % des cellules du ganglion lymphomateux sont des lym-hocytes B CD19+/CD5+.lastoid mantle cell lymphoma. Flow cytometry study of lymphode shows that 64.2% of the cells are CD19+/CD5+ B lymphocytes.

arqueurs des lymphocytes T normaux. Ils sont exprimése facon aberrante par les lymphocytes B tumoraux desLC/lymphomes lymphocytiques et des lymphomes à cel-ules du manteau. L’expression du CD43 est donc assezuperposable à celle du CD5. Dans notre cas, la faible posi-ivité du CD43 sur les cellules lymphomateuses en l’absencee positivité du CD5 doit faire envisager un bas niveau’expression du CD5 non mis en évidence sur tissu fixé etaire évoquer la possibilité d’un lymphome à cellules duanteau. La recherche d’une surexpression de la cycline1 permet alors de poser définitivement le diagnostic.

L’étude en cytométrie de flux réalisée sur cellules nonxées en suspension confirme que prés de 65 % des cellulesu ganglion lymphomateux coexpriment CD19 (marqueur B)t CD5 (Fig. 11).

Le bas niveau d’expression du CD5 n’est pas rapportéans la littérature comme étant particulièrement rattaché

la variante blastoïde.

iagnostic différentiel

l est largement dominé par les lymphomes lymphoblas-iques, mais :

l’immense majorité des lymphomes lymphoblastiquessont T (plus de 90 % des cas) et leur épidémiologie est trèsdifférente de celle des lymphomes à cellules du manteau :il s’agit d’une tumeur de l’adolescent, le plus souvent desiège médiastinal ;le lymphome lymphoblastique B est très rare : ce dia-gnostic doit être porté avec beaucoup de prudence,après avoir éliminé un lymphome de Burkitt (cytologiedifférente), un lymphome B diffus à grandes cellulesBurkitt-like et une forme blastoïde de lymphome à cel-lules du manteau (cycline D1+). Le plus souvent, il s’agirad’une localisation tissulaire d’une leucémie aiguë lympho-blastique B dont le diagnostic est connu (porté sur le sanget/ou la moelle) ;les « vrais » lymphoblastes sont volontiers plus petits etont une chromatine plus fine que la forme blastoïde clas-sique de manteau ;les lymphoblastes (B comme T) sont, sur tissu fixé, faible-ment marqués par le CD45, voire totalement négatifs (bas

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Pièges morphologiques et immunohistochimiques en patholo

niveau d’expression), au contraire du manteau blastoïdequi exprime fortement le CD45. Ils expriment, de faconvariable, la TdT, le CD34, le CD10. Bien sûr, ils n’exprimentpas la cycline D1. Le deuxième diagnostic différentielest représenté par les lymphomes B à grandes cellules(LBGC).

Les lymphomes B diffus à grandes cellules

• Par rapport à la forme blastoïde classique : les cellulesde LBGC sont volontiers plus grandes, leur chromatineest irrégulière et claire, marginée contre la membranenucléaire, le nucléole est marqué. Le CD5 et le CD43ne sont que très rarement exprimés. La cycline D1 estnégative ;

• Par rapport à la forme blastoïde pléïomorphe : lediagnostic différentiel repose essentiellement surl’immunohistochimie anticycline D1.

Anomalies génétiques

Comme dans la forme classique de lymphome à cellules dumanteau, la variante blastoïde est associée à une trans-location (11 ;14) (q13 ;q32) qui entraîne une juxtapositiondu gène codant pour la chaîne lourde des immunoglobu-lines et du gène CCND1 codant pour la cycline D1, avecpour conséquence une surexpression de la cycline D1, pro-téine impliquée dans le déclenchement de la phase S ducycle cellulaire. Des cas de lymphomes à cellules du man-teau sans surexpression de la cycline D1 ont été rapportésdans lesquels il a pu être mis en évidence une surex-pression d’autres cyclines D (cycline D2 et cycline D3)[4,6].

Par rapport aux formes classiques, les formes blas-toïdes ont volontiers un caryotype complexe aneuploïde,une amplification du gène CCND1 et un plus grand nombred’anomalies chromosomiques impliquant notamment lesoncogènes p53 et p16 [1—3].

Évolution et pronostic

Les formes blastoïdes sont plus agressives que les formesclassiques et leur pronostic est sombre, justifiant leur indi-vidualisation. Elles se caractérisent, par rapport aux formesclassiques, par une rechute plus rapide après traitement etune survie significativement plus courte [3].

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POINTS IMPORTANTS À RETENIR

• Sur tissu fixé inclus en paraffine, certains bas niveauxd’expression d’antigènes peuvent ne pas être misen évidence par immunohistochimie conventionnelle(niveau d’expression de l’antigène situé sous le seuilde détection de la technique). L’étude du profild’expression en cytométrie de flux (technique plussensible, car utilisant des cellules non fixées) estalors d’un grand apport.

• Le profil d’expression de la forme blastoïde delymphome du manteau est identique à celui dela forme classique : CD5+, CD43+, CD10−, CD23−,cycline D1+. L’index de prolifération Ki67-MIB-1 estvolontiers plus élevé.

• Le lymphome lymphoblastique constitue le principaldiagnostic différentiel : le contexte clinique estdifférent, importance de l’immunohistochimieanticycline D1.

• Le pronostic de la forme blastoïde est nettement plus

péjoratif que celui de la forme classique.

Références

[1] Jaffe ES, Harris NL, Stein H, Vardiman JW. Tumours of haema-topoietic and lymphoid tissues. WHO classification of tumours.Lyon: IARC Press; 2001.

[2] Ioachim HL, Ratech H. Ioachim’s lymph node pathology. ThirdEdition Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins; 2002.

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