Laboratoire National de Contrôle des Produits PharmaceutiquesCentre collaborateur de l’OMS pour la conformité du

médicament

SERVICE DE BIOEQUIVALENCESERVICE DE BIOEQUIVALENCE

Résultats d’une étude pilote de métformine

Aspects réglementaires et méthodologique

Effi i é d édi é é iEfficacité�du�médicament�générique

Essais de bioéquivalence

Démontrer l’équivalence thérapeutique entre :

médicament générique

et

médicament de référencef

Service de bioéquivalence

Secrétariat technique

Assurance qualité

Unité

technique qualité

Conduite des essais et analyse

des données

UnitéLaboratoire

Affaires réglementaires

et gestion Coordination

cliniqueTraitement des

données Essais bioanalytiques

Essais physicoc-himiques g

pharmaceutiqueclinique bioanalytiques et cinétiques

de dissolution

«On entend par produits pharmaceutiquesbioéquivalents les équivalents pharmaceutiquesbioéquivalents,les équivalents pharmaceutiques(médicaments génériques) ou les produitspharmaceutiques de substitution dont la vitesseet le taux d’absorption ne révèlent pas deet le taux d absorption ne révèlent pas dedifférence importante lorsqu’ils sontadministrés à la même dose molaire de lafraction thérapeutique dans des conditionsfraction thérapeutique dans des conditionsexpérimentales analogues, que ce soit paradministration unique ou par administrations

lti lmultiples » .FDA

Essaii pilotee 0022 Essai pilote 002 :Etudes de bioéquivalence entre deux formulations q

de chlorhydrate de metformine cps à 850mg

TMet002 versus RMet002

Objectifs de l’étude

� Démontrer la bioéquivalence des deux formulations T Met002 et R Met002

� Optimiser les moyens disponibles en Algérie

� Développer l’axe des essais de bioéquivalence :Démarches administratives et réglementairesMéthodologie et réalisation pratique de l’étudeMéthodologie et réalisation pratique de l étudeApplicabilité des procédures opératoires mises en place

Approbation des autorités et CE

Réglementaire AssuranceTracé des courbes :C=f(tps)

Clinique Statistique

Paramètres pharmacocinétiques :AUCCmaxCmaxT max

A l iPh i éti

Elaboration du protocole

Recrutement et sélection des l i iAnalytiquePharmacocinétique volontaires sains

Administration des produits Test paramétriques et non paramétriques

Intervalle de confiance 90% (80-125%)

Prélèvements à différents temps

Intervalle de confiance 90% (80 125%)Dosage dans le milieu

biologique

Préparationn dee l’étudee Préparation de l étude

Etapes préliminaires

Administrative et réglementaire

Clinique

Bioanalytique

pharmacocinétique et statistique

Protocole de l’étudeProtocole de l’étude

Conception du protocole et réalisation de l’essai

Réglementation algérienne

Recommandations internationales

g g

� Déclaration d’Helsinki (Seoul 2008)

� Bonnes pratiques cliniques ICH (E6)

� Directives européennes(2001/20/CE)

Approbation par l’investigateur clinicienclinicien

Etapes administrative et réglementaireEtapes administrative et réglementaire

Approbation du comité d’éthiquepp q

Autorisation du Ministère Santé

Contraction d’une assurance

Sélection des volontaires Nombre des sujets

Informations et consentement de participationInformations et consentement de participation

Caractéristiques démographiques Age –sexe –IMC-phénotype génétique

Critères d’inclusion et de non inclusion

Examens médicaux de pré inclusionExamens médicaux de pré inclusionAntécédents médicaux Examen clinique Analyses médicales de laboratoire

17/01/2011

18/01/2011

Identification des volontaires

RandomisationRandomisation

Retrait Critères de retraitTypes de retraitRemplacement des participants retirés

AASS AgeAgeSexeSexe

2323-35 ans (27 08 ±2 87)9 F – 4 H (27.08 ±2.87)

IMCIMC

18.5 et 26.7 kg/m2

30.5)g

(22.75 ± 30.5)

PoidsPoids tailletaille

45 85 Kg45-85 Kg(62.58±10.13)

153153-185 Cm (165.83±10.27)

CaractéristiquesCaractéristiques démographiques

Critères d’inclusionCritères d’inclusion

•Age entre 18-45 ans

•IMC� + /- 15% du rapport idéal�

•Absence d’allergie au médicament étudié

•Disponibilité

•Consentement de participation éclairé signéConsentement de participation éclairé signé

•Examen clinique sans déviations significatives

é é•Analyses médicales sans déviations significatives

Examen clinique avec déviations significatives Prise de médicament à effet inducteur ou

inhibiteur enzymatique trois (3) mois avant

Analyses médicales de laboratoire avec déviations significatives

A té éd t d’ ll i ( ) édi t

l’étude.

Prise de vitamines �2 j avant l’étude �Antécédents d’allergie au(x) médicament

(s)et/ou aliment(s) soumis à l’étude .

Antécédents de maladies cliniques pouvant

Consommation excessive de thé –café et/ou de

boissons à base de caféine �+3tasses/jour�

Critères de non inclusion

Antécédents de maladies cliniques pouvant influencer le devenir du médicament

Antécédents d’abus de drogues ou d’alcool.

� /j �

Participation à une étude de bioéquivalence ou

à une étude clinique 2 mois avant la période 1.g

Grands fumeurs� +10 cigarettes/jour �

à une étude clinique 2 mois avant la période 1.

Une hospitalisation prévue au cours des 3 mois

suivant l’administration du médicamentConsommation de jus ou d’aliments contenant

du pamplemousse sept (7) j précédant l’étude

suivant l administration du médicament

Femmes enceintes et allaitantes.

Régime alimentaire spécial (végétarien)Refus de signer le consentement de participation

S j t t êt t té d’Prise de médicament quelconque avec ou sans prescription deux (2) semaines .

Sujets ne pouvant être contacté en cas d’urgence

consentement de participation

« Acceptation libre et formellement expriméed’une personne afin de participer à un essai donné

c’est un consentement libre éclairé et exprès »( Chapitre 3- Arrêté N°387 - loi N°85-05 )

c’est un consentement libre, éclairé et exprès »

Investigateurs et sites d’investigationet sites d’investigation

Promoteur /Investigateur principal

LNCPP P M i MBLNCPP

I ti t li i iSit d’i ti ti

Pr Mansouri.MB

Investigateur clinicienSite d’investigation

Service�de�Bioéquivalence�(LNCPP)

Pr. Guermaz.R

Unité pharmacocinétique

Dr Mansouri.k

Sélection médicale des volontairesUnité�pharmacocinétique��Unité�investigation�cliniqueUnité�bio�analyseUnité Analyse des données

Sélection médicale des volontaires Clinique�Arezki��Lakhel Médecine�interne.EPH�El�Biar .�Alger��Laboratoire�de�biologie�clinique.�Unité�Analyse�des�données

Unité�équivalence�pharmaceutiqueUnité��assurance�qualité�

g qHôpital�Birtraria

Conduite de l’étude

Protocole de l’étude

Étude randomisée croisée sans bénéfice individuelle directeÉtude randomisée croisée sans bénéfice individuelle directe2 traitements ,2 séquences et 2 périodes

Pé i d IIPé i d I Wash out

7 jours

Période IIPériode I

Produit test : 8 sujets Produit de référence : 8 sujets (TR)

Seq (1)

(RT)

Seq(2)Produit de référence : 8 sujets Produit test : 8 sujets

Seq(2)

Produit de référence produit test

Site d’investigation clinique

� Salle de séjours

� Poste des urgences médicales

� bureau pour les cliniciens et despostes de prélèvements.

� Poste pour la récupération desprélèvements.

Admission des volontaires

Un responsable decoordination clinique

Un médecin

Un infirmier

Répartition des volontaires

GROUPE A GROUPE B GROUPE C GROUPE DGROUPE A GROUPE B GROUPE C GROUPE D

VBDI 08 VSIM 09 VBLS 16

VMIH 05 VSAK 14 VBKN 15

VBDA 02 VTTY 03 VDIS 04

VAIN 01 VAIA 11 VAIK 12

VBBH 07

Admission des volontaires

Distribution des badgesExamen clinique Renseignements du CRF

Identification des volontaires

Code d’identification

Badge d’identification

0101Essai Pilote de bioéquivalence

T Met 002 VS R Met002 Essai Pilote de bioéquivalence

comprimé 850mg

Code de l’étude: 002

Code du sujet:

T Met 002 VS R Met002

comprimé 850mg

Nom :

Initiales du sujet:

Date de Naissance :

Date(s) de l’étude:

Prénom :

Qualité :

- 1er période : 03/03/2011

-2eme période : 10/03/2011

Fonction :

Badge des volontaires Badge des participants

Cahier d’observation

« Document destiné à recueillir au fur et à mesure de l’essai,pour chaque sujet, les informations définies par

l l L i f i ê illile protocole .Les informations peuvent être recueillies par toutmoyen garantissant l’édition et la conservation,

et permettant le contrôle de qualité ».(Arrête N°387)

�Numérotation des pages�Identification de l’étude �Code d’Identification du sujet �Identification du centre

Première partie pré inclusion

�Données démographiques

�Antécédents médicaux

� Contrôle de pré administration

� Administration du produit

Deuxième partie

�Fiche de fin d’essai (après la première administration )

�Fiche de fin d’essai((après la deuxième administration) �Examen clinique

�Bilan biologiq e de sélection

Administration du produit

�Recueil des prélèvements

�C t ôl d i itpériode 1

T i iè ti

�Commentaires éventuels�Bilan biologique de sélection

�Traitement antérieur et en cours

�Contrôle des signes vitaux

�Evaluation de l’état général pendant l’étude

Troisième partie période 2

�Compte rendu de l’évaluation médicale

�Critères d’inclusion et de non inclusiondé

�Détails de consommation

�Traitement concomitant

Quatrième partie fin de l’essai

dé�Consentement de participation signé

�Formulaire d’admission

�Compte rendu des effets indésirables

Pose du cathéter

Période I Période IIHeure du Heure 7h30 7h30h

recueil du 1er

prélèvementP0

prévue

Heureréelle

7h33-7h49 7h30-7h44

Pose du cathéter Recueil du 1er prélèvement dans un tube hépariné

F t d thét R li d thétFermeture du cathéter Remplissage du cathéter avec une solution héparinée

Administration des produits

Choix du comparateur

Produits d’investigation

p

Étiquetage et conditionnementLNCPP

Conservation

Dispensation

Étude n° :

Sujet n° :

Période n° :Dispensation

Inventaire en post-étudeTMet002 (RMet002)

comprimé 850mg

n° :

A�utiliser�seulement�pour�étude�

de bioéquivalencede�bioéquivalence

Administration des produits

Chaque volontaire a reçu un étui contenant un comprimé du produittest ou de référence selon la table de randomisation

8h00 � 8h06

Sé (RT) Sé (TR)Séquence (RT) Séquence (TR)

VSAK 14 VSIM 09VSAK 14

VMIH 05

VBKN 15

VSIM 09

VDIS 04

VAIK 12VBKN 15

VTTY 03

VAIA 11

VAIK 12

VBDA 02

VBBH 07VAIA 11 VBBH 07

VAIN 01

VBDI 08VBDI 08

Administration des produits

Conditions d’activité et de posture physique

Conditions alimentaires

Administration des médicaments

Médicaments associés

Prélèvements

Nature des prélèvements

Profil des prélèvements Modalités des prélèvements

• Volume :5 ml ,< 400 ml

D é 12 h

• Volume :5 ml ,< 400 ml

D é 12 h

Étiquetage des prélèvements

É• Durée : 12 h

• Nombre: 18 pvts

• Durée : 12 h

• Nombre: 18 pvtsÉtude N°: ------

Code d’ID: ------

Pé i d (1 2)• Temps(h): 0.33; 0.66; 1.00; 1.33;1.66 ; 2 ; 2.33 ; 2.66; 3; 3.33;3.66; 4.00; 5.00; 6.00;

• Temps(h): 0.33; 0.66; 1.00; 1.33;1.66 ; 2 ; 2.33 ; 2.66; 3; 3.33;3.66; 4.00; 5.00; 6.00;

Période: (1 ou 2)

Prélèvement N°: ----

8.00;10.00;12.008.00;10.00;12.00

Traitement des Prélèvements

Vérifications des tubes

Centrifugation, séparationCentrifugation, séparation et aliquotage

Congélation à (-70°C)

Suivi de l’essai

Consommation d’aliments et de l’eau

déj t d d- déjeuner: un repas standarda été servi 4h aprèsl’administration (12hoo)

- Gouter: un gouter standard aété i 8h èété servi 8h aprèsl’administration(16h00).

- Consommation d’Eau: unvolume standard de 200ml aumoment de l’administrationmoment de l administration

- Consommation de 100 mlConsommation de 100 mld’eau glucosée 10% à 10h00et 11h00.

Tolérance

Surveillance clinique des volontaires

Tolérance

Effet indésirable (EI)/Effet indésirable grave(EIG)Effet indésirable (EI)/Effet indésirable grave(EIG)

Recueil des effets indésirables

Conduite à tenir devant un événement indésirable

QualificationQuantification

Intensité- gravité- duréegLien de causalité

Règles générales de suiviRègles générales de suivi

Documentation et enregistrements des effets indésirables

Surveillance clinique des volontaires

Code du Période Type d’EI

volontaire

VAIN01 1 Tachycardie

VTTY 03 1 Malaise vagal

VSIM 09 1 Céphalée

VAIK12 1 Malaise vagal jugulé

VBKN1 2 Malaise

Retrait

Sélection 16 volontaires

Empêchements personnels

Début de l‛essai13 volontaires

VMBL 10VZHH 0613 volontaires VZHH 06VLLH 13

Sortie volontaire

F d l‛Fin de l‛essai13 volontaires

Méthode Bio analytiqueMéthode Bio analytique

Dosage de la metformine:Dosage de la metformine:Au niveau plasmatiquePar: LC-MS/MSPar: LC MS/MSEtalonnage interneComplexité matrice : extraction (dé ï i i )(déproteïnisation)

11 Mai 2011 37

L’apport de la LCL’apport de la LC--MS/MSMS/MS

Méthode bio analytiqueMéthode bio analytique

Développement et validation

Critères:

Développement et validation

linéaritésensibilitéSpécificité Eff t t iEffet matriceFidélité /exactitudeRendement d’extractionRendement d’extraction StabilitéIntégrité de la dilutionIntégrité de la dilution

Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique

III- Déroulement du dosage des prélèvements :

Dates:Dates:Début : 16 Mars 2011Fin : 28 Mars 2011

Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique

Durée d’analyse : 6minutesNombre total d’echantillons : 114Nombre total d echantillons : 114 Durée totale essai /jour: 13 heures

Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique

RésultatsXIC o f +MR M (5 pa ir s): 2 60 .20 0 /11 6 .3 0 0 D a ID: P ro p ra no lo l1 fro m S am ple 1 0 (S TD0 7 30 0 0n g /m l) o f 02 0 22 0 11 _ S electiv ite.w iff (Tu rb o S... M ax. 3 .0e 5 c ps.

2.8 e5

3.0 e54 .64

2.2 e5

2.4 e5

2.6 e5

Propranolo l (SI)

1 4 e5

1.6 e5

1.8 e5

2.0 e5

8.0 e4

1.0 e5

1.2 e5

1.4 e5

M etfo rm ine

2.0 e4

4.0 e4

6.0 e4 3 .60M etfo rm ine

0 .5 1 .0 1 .5 2.0 2.5 3.0 3 .5 4 .0 4 .5 5 .0 5 .5Tim e, min

0.0

Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique

Résultats

Gamme d’étalonnage

Résultats:

1 Critères d’acceptation de l’essai:1-Critères d acceptation de l essai: *Gamme d’étalonnage :EQUATION : Y=ax+b

r � 98%

Résultats:

2 Critères d’acceptation:2-Critères d’acceptation:Déviations :

�+/-20% :std 1(LIQ)�+/-20% :std 1(LIQ)�+/-15%: autres stds

75% dans les normes

Résultats:

*Contrôle de qualité :déviations:

+/ 15% t CQ� +/-15%: autres CQ

4/6 des CQ dans les normes4/6 des CQ dans les normes

Analyse des donnéesAnalyse des données

Cp=f(tCp f(t)

AnalyseAnalysepharmacocinétiqupharmacocinétiqu AnalyseAnalyse

statistiquestatistiqueee statistiquestatistique

Logicielcertifié

RMet002

TMet002

Courbes des moyennes arithmétiques des concentrations Courbes des moyennes arithmétiques des concentrations plasmatiques en fonction du temps après prise de plasmatiques en fonction du temps après prise de TMet002 (testTMet002 (test), ), comprimé à 850 mg et comprimé à 850 mg et RMet002 RMet002 (référence), comprimé à 850 mg (référence), comprimé à 850 mg

éé(sur échelle (sur échelle normale et semi logarithmique)normale et semi logarithmique)

2400

Analyse pharmacocinétique

1800

L)

treatment = Rtreatment = T

600

1200

C(n

g/m

L

10000

treatment = R

0 3 6 9 12

0

600

1000ng/m

L)

treatment = Rtreatment = T

T(h)1000

C(n

0 3 6 9 12T(h)

100

SSC0�� = SSC0�t + Ke /CLAST

Ke : pente de droite de régression log linéaire de la phase d’élimination

Analyse pharmacocinétique

10000DtName: VSAK14 (II) R

Ke : pente de droite de régression log-linéaire de la phase d élimination

DtName: VSAK14 (II) Rfitting

1000

C(n

g/m

L) �inf

R>90%

0 3 6 9 12

100

�supR>90%

0 3 6 9 12T(h)

T1/2=ln2/Ke %SSC résiduelle < 20%

RMet002TMet00

2

Analyse statistique

ANOVA : Evaluation des effets1 Formulation1. Formulation2. Sujet

Pé i d3. Période4. Séquence

Détermination de l’IC à 90% T/R de Cmax , SSC

Intervalle de confianceIntervalle de confianceBioéquivalence (�=5%)

90% CI

Bioéquivalence (�=5%)

�� �

90% CI

1-� CI Bioinéquivalence (�)

1-� CIBioinéquivalence (�)

Intervalle d’équivalenceIntervalle d équivalence

Ratios et intervalles de confiance

Intervalle de confiance %

Ré lt t

Paramètre Ratio(moy.géo)

Ratio %Intervalle de confiance %

Conclusion Puissance du test (%)Limite inf. Limite sup.

Résultats Ln C max 1,0078 100,78 94,58 119,58 Bioéquivalent 86,131

Ln SSC 0�t 1,0032 100,32 91,62 115,66 Bioéquivalent 93,064

86,131

93,064Ln SSC 0�� 1,0034 100,34 92,07 115,53 Bioéquivalent 92,783

CRatio

92,783

> 80%

SSC 0�t

SSC 0��

C max

�� ��

0�t

�� ��Intervalle d’équivalence

C l iC l iConclusionConclusion

� Bioéquivalence (T/R)

� Validation de la méthodologie

� Etude programmé en présence des d l’OMS (Q lifi i dexperts de l’OMS (Qualification du

service

MERCIMERCI