Biopsie osseuse et histomorphométrie osseuse Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Document du Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Mise en forme web par Guy

Biopsie osseuse Biopsie osseuse

et et

histomorphométrie histomorphométrie osseuseosseuse

Document du Docteur Marie Hélène PROUST-Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGELAFAGE

Mise en forme web par Guy Louis MOREL

Copyright ©Copyright © 2003-20042003-2004 DrDr Marie Hélène PROUST-LAFAGEMarie Hélène PROUST-LAFAGE

Le prélèvementLe prélèvement

Fixation déshydratationFixation déshydratation


Inclusion dans un plastique

(méthylmétacrylate)

Section: microtome à lame

en carbure de tungstèneCopyright ©Copyright © 2003-20042003-2004 DrDr Marie Hélène PROUST-LAFAGEMarie Hélène PROUST-LAFAGE

ColorationsColorationsGoldnerBleu de toluidineSolochrome cyanine RTRAP: ostéoclastesAlumninonCoupes blanches: UV


Lecture avec un analyseur semi-automatique


Souris: PASouris: PA

Erreur

Autre champ

Confirmer et fin de mesure

Mesure


Souris: PHSouris: PH

Erreur

Autre champ

Confirmer et

fin de mesure

Nouvelle lameet

mesure


Distances, d: click-click bouton jaune (on lève le doigt en A et en B)

A B

d

Longueurs, l: PA: Click début doigt appuyé on lève le doigt en fin de mesure

A Bl

PH: programme humain, PA: programme animalPH: programme humain, PA: programme animal

PH: Click début doigt appuyé on lève le doigt en fin de mesure et on appuie sur le bouton vert

A Bl

La biopsie est parcourue dans sa totalité, par champs jointifsLa biopsie est parcourue dans sa totalité, par champs jointifs

Paramètres de masseParamètres de masse

Paramètres de masseBV/TV: Volume trabéculaire osseux, %Pourcentage de la surface de tissu osseux / surface de tissu

BS/BV: longueur des périmètres osseux/ volume osseux

Microarchitecture:Paramètres calculés à partir du BV/TV et du BS/BV

Tb N : nombre de travées /mm.Tb Th: épaisseur moyenne des travées.Tb Sp: séparation moyenne des travées.


FormulesFormules:: T Ar: Tissue Area: aire tissulaire totale , mm2B Ar: Bone Area, Aire de tissu osseux, mm2B Pm: périmètres trabéculaires totaux, mm

BV/TV= B Ar/ T Area= / , %

BS/ BV= B Pm/ B Ar x 1.199

Tb Th= 2000/ (BS/BV) (Trab thickness, µm)Tb N= (BV/TV x 10)/ Tb Th (Trab number, / mm)Tb Sp= Tb Th x [ ( 100/BV/TV) -1] (Trab separation)

Tb Th= MTPT, Tb N= MTPD, Tb Sp= MTPS


Epaisseur des corticales (PH): X 1,6, distancesmoyenne ds mesures pour une corticale (en µm)

Corticale interneCorticale externe


BV/TVmesuré au Biocom

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ColorationTrichrome de Goldner

Volume ostéoide (PH) : un oculaire à 100 pts est placé devant l ’image. On clique chaque fois que l ’intersection « tombe » dans le tissu ostéoide, mesuré champ par champ.

Volume ostéoideOV/BV, %

Nbre de /100


Mesure des surfaces: suivez le point vert = pt lumineux projeté


Mesure des surfaces de résorption




+ + = BS

/BS = RS/BS

Surfaces de résorption

BS = OS/BS/Surfaces ostéoides

Longueurs (click souris appuyé), données en %, mesurées champ par champ, RS et OS sont divisées à chaque champ par la densité de surface par champ (X 10)


Epaisseur ostéoïde: distances (click click) en µm (x 25)Ne se mesure pas champ par champ: moyenne de n mesures sur L’ensemble des lames pour un individu

/ n S

Epaisseur ostéoide: O Th


Oc SBS

Paramètres ostéoclastiques, longueurs (click appuyé), se mesure champ par champ, (X 10)

-Surfaces ostéoclastiques: Oc S/BS, %- / BS

-Nombre d ’ostéoclastesNbre de / par 3 dénominateurs possibles:

B Ar: Bone Area, mm2

T Ar: Tissue Area, mm2B Pm; Bone perimeter, mm

Mean Wall thickness: distance, en µmNe se mesure pas champ par champ (X 10)


Nbre de j à rentrer dans l ’ordinateur

-Vitesse de minéralisation Corticale (Ct) et trabéculaire (Tb)MAR, µm / jour:(X 25)moyenne de --Surfaces simple-ment marquées:sLS / BS, %

/-Surfaces doublement marquées:dLS /BS, %

/

Paramètres de Formation osseuseParamètres de Formation osseuse

Paramètres de Formation osseuse statiques:

O Th, µm: épaisseur moyenne des liserés ostéoidesOS/BS, % : Surfaces ostéoidesObS/BS, %: Surfaces ostéoblastiquesOV/BV, %: Volume ostéoideMWth: mean wall thickness épaisseur moyenne du mur ostéonique

Paramètres de Formation osseuse dynamiques:

MAR: Mineral apposition rate, µm/j vitesse de minéralisationse mesure en trabéculaire et en cortical Surfaces minéralisantes, MS/BS, %

1/2 sLS/BS+ dLS/BSSimplement marquées: % sLS/BSDoublement marquées: % dLS/BS

BFR/BS: Bone formation rate = MAR* MS/BS : Taux de Formation Osseuse (surface référent) µm3/µm2/j

Paramètres de Formation osseuse dynamiques

Aj AR, %/ µm/j = MAR*MS/OSvitesse de minéralisation ajustée

O Th/ Aj. AR = Mineralisation lag timedélai de minéralisation normalement < 28 jours chez l ’homme

Paramètres de formation osseuse calculés

-Période d ’un cycle de remodelage (TP total period)Période de formation (FP) + période de résorption (PR)+ Période de quiescence = inervalle de temps entre le début de l ’activation d ’une unité de remodelage et le début de l ’activation de l ’unité suivante en un point donné de la travée

-1/TP= Activation frequency (Fréquence d ’activation)probabilité de l ’activation d ’une nouvelle unité de remodelage en un point donné d ’une surface osseuseCopyright ©Copyright © 2003-20042003-2004 DrDr Marie Hélène PROUST-LAFAGEMarie Hélène PROUST-LAFAGE


Paramètres de résorptionParamètres de résorption

ES/BS:%, Surfaces érodées (avec ou sans ostéoclastes)

OcS/BS, %: surfaces ostéoclastiquesOc N/ B Pm (bone perimeter, /mm) ou Oc N/ BAR (Bone area/ mm2)

Profondeur moyenne ou maximum des lacunes de résorption (µm)


Importance de la mesure du Mineralisation Lag Time pour le diagnostic des formes atypiques et focales d’ostéomalacies

OstéomalaciOstéomalaciee


Corticale d ’HPT IICorticale d ’HPT II Corticale normaleCorticale normale


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