Colloque franco-belge de M.E., mai 1988

ETUDE DES MODIFICATIONS ULTRASTRUCTURALES ASSOCIEES A LA TRANSFORMATION IN VITRO DI~S FIBROBLASTES HUMAINS PAR SV 40. P. FRITSCH, F. HOFFSCHIR, J.L. PONCY~ M. LEPASE, M. RICOUL, B. DUTRILLAUX et R. MASSE. Laboratoire de Canc~rologie E~p~rimentale, CEA/IPSN/SPE, BP ~, 92265 Fontenay au~ Roses, France.

La transformation n~oplasique est associ~e ~ des modifications complexes du ph~notype ~/ou du g~notype de la cellule. Parmi ces modifications figurent des alterations au niveau du m~tabolisme l i~ ~ la consammat~on de l'oxyq~ne ou contribuant ~ la protection contre certains peroxides. L'infection virale peut constituer un module experimental a~in d'~tudier ces alterations m~taboliques. Ainsi, apr~s transformation de fibroblastes humains par SV 40, on constate une diminution d'un fscteur 3 de l ' ac t i v i t~ catalase et de plus d'un facteur 5 de la supero~idedismutase (SOD) mitochondriale Mn d~pendante; par contre, le tau~ de SOD cytoplasmique demeure inchang~ (activit~s e~prim~es en U/mg de procaines). Le but du present travail r~alis~ sur des fibroblaste~ humains t~moins ou transform~s par SV 40, consiste ~ corr~ler des modifications ultrastructurales avec certaines modifications du 9~notype visualis~es par une ~tude cytog~n~tique. Ce type d'~tude ne montre que peu de modifications du nombre de chromosomes associ~es ~ la transformation virale mais, la plupart des lign~es infect~es poss~dent des anomalies au niveau du chromosome a porteur entre autre du 9~ne codant pour la SOD Mn d~pendante. L'~tude ultrastructurale pr~liminaire de 3 lign~es infect~es et de 2 souches de fibroblastes t~moins montre des modifications ~videntes: la transformation cellulaire est associ~e ~ une diminution du volume de l'erqastoplasme et ~ une augmentation du volume mitochondrial, les mitochondries pr~sentant de nombreuses alterations. Nous nous proposons de quantifier ces modifications en ~tudiant 4 souches t~moins et 7 lign~es trans~orm~es par SV 40. Parmi ces lign~es transform~es certaines ne sont pas porteuses d'anomalies au niveau du chromosome ~. Des ~tudes sont en cours afin de corr~ler certaines anomalies chromosomiques et l ' ac t i v i t~ de dif~rer~tes enzymes.

CRYOPRESERVATION D'EMSRYONS SOMATIQUES DE CAROTTE. Claude SCHLIENGER (i),

Chantal PROBST (1) et Bruno FLORIN (2). (I) Gen~re de Recherche Nestld, NESTEG S.A.,

Versochez.les-Blanc, 1000 Lausanne 26 (Suisse), (2) Service de G~n%Cique v~Ed~ale, FRANGERECO S.A.,

BP 0166, 37001 Tours Gedex (France).

La conserva t ion b long t e r s e de c e l l u l e s , de t i s sus ou d 'organes v~gdtaux dans de l ' a z o t e l iquids e s t

ac tue l lement , e t pour de nombreuses r a i sons , l a technique l a plus ~tudi~e (AUGEREAU, 1985).

D'autre pa r t , l a microsoopie permet d ' o b t e n i r des informat ions importantes concernant la l oca l l s a t i on ,

la na ture e t l ' ampleur des l~sions c e l l u l a i r e s ou t i s s u l a i r e s pouvant survenir pr incipalement lo t s des

processus de cong~lat ion e t de d6cong~lat ion.

Une 6tude p r~ l imina i r e , en microscopie ~ lec t ron ique b balayage, a ~t~ ef fec tuSe au tours des d i f f6-

ren tes phase s -o i l s de la c ryopr~se rva t ion d'embryons somatiques de c a r o t t e (Daucus caro ta L.) . En

p a r t i c u l i e r , l ' e f f e t du saccharose employ6 & d i f f S r e n t e s concen t ra t ions comma agent c ryopro tec teur a

~t~ examine. Lea r ~ s u l t a t s de c e t t e dtude devra ien t permet t re de mieux m a i t r i s e r l'utilisation de la

c ryopr~serva t ion pour des embryons d ' o r i g i n e v6g~tale.

AUGEREAU J.M., Thbse, Facultd de Pharmaole, Tours, France, 1985.

CONTRIBUTION OF THE CRYO-SEM TO THE CHEESE TECHNOLOGY. DEVELOPMENT OF THE STRUCTURE OF SAINT-PAULIN CHEESE DURING RIPENING. Micheline ROUSSEAU (I), Mi- chel DESMAZFAUD (I), Dehli GUILLAUMIN (2), (2)

• (1) Station de Recherches laiti~res, INRA, Centre de Recherch'es de Jouy-en-Josas , 78350 Jouy-en-Josas (France) , and (2) Microscopie ~ balayage, CNRS, Unive r s i t~ P.M.Curie, 105 Boulevard Raspail , 75005 Par i s (France)

Specimens of Sa in t -Pau l in cheese were sampled a t d i f f e r e n t s teps of chee- se r ipen ing and prepared by two methods: convent ional SEM and co ld - s t age SEN. The f i r s t one, c r i t i c a l - p o i n t d ry ing , allowed us to c o n t r o l case in a l t e r a t i o n s But the use of so lvan t s during the dehydra t ion s tep of t h i s technique prevents observa t ion of f a t globules t h a t a re d issolved• The second one, using frozen specimens, supplied a d d i t i v e informat ions about: 1) the r e p a r t i t i o n of the whey which i s more and more mixed with the casein des t royed by the p r o t e o l y t i c processus . 2) the adhes iveness of the f a t g lobule membrane to the case in 3) the i n t e r n a l s t r u c t u r e of f r e e z e - f r a c t u r e d f a t g lobules .

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