GUIDE DE PRELEVEMENT · ) pour la plupart des analyses réalisées dans les domaines de la biochimie, de l’hématologie, de l’immuno-analyse et de la microbiologie. Le laboratoire

Type Réf. Modèle Réf. Documentaire Version Date d’application

MODE OPERATOIRE 002 MO-LBM 032 10 04/04/2019

GUIDE DE PRELEVEMENT

EMETTEUR : LABORATOIRE DE BIOLOGIE CLINIQUE Annexe(s) : 0

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Synthèse des intervenants :

Rédaction Vérification Approbation

Nom(s) et fonction(s)

Emilie BRUNEAU (Biologie Clinique_Encadrement)

Marion DAVID (Biologie Clinique_Biologiste)

Anne PERDRIX (Biologie Clinique_Biologiste)

Date 03/04/2019 03/04/2019 04/04/2019

Destinataires :

IDE chirurgie, IDE ORL, IDE USI, Biologie Clinique_Biologiste, IDE HJH, IDE SSPI, cadre soins infirmiers, cadre USI, cadre soins infirmiers hématologie, cadre du département d'oncologie, IDE, cadre infirmier hopitaux de jour, IDE préleveuse de biologie clinique, cadre de la chirurgie ORL, IDE BLOC, Biologie Clinique_Ensemble du personnel, cadre du département de radiothérapie, cadre médico-technique, IDE oncologie, Cadres du département de chirurgie, cadre du département d'hématologie, IDE hématologie, cadre hygiéniste, IDE chirurgie conventionnelle niveau 3

SOMMAIRE

1. OBJET ....................................................................................................................................................... 4

2. DOMAINE D'APPLICATION ............................................................................................................................. 4

3. RÉFÉRENCES ............................................................................................................................................. 4

4. GLOSSAIRE ................................................................................................................................................ 5

5. RESPONSABILITÉS ...................................................................................................................................... 5

6. DÉVELOPPEMENT DE CE MODE OPÉRATOIRE ............................................................................................... 5

6.1. Le laboratoire de biologie clinique ...................................................................................................... 5

6.1.1. Les horaires d'ouverture .............................................................................................................. 5

6.1.1.1. Ouverture au public. ......................................................................................................................... 5

6.1.1.2. Pour les examens ............................................................................................................................ 5

6.1.2. Gardes et urgences ..................................................................................................................... 6

6.2. De la prescription au prélèvement ..................................................................................................... 6

6.3. Matériel de prélèvement et de transport ............................................................................................. 7

6.3.1. Prélèvements sanguins ............................................................................................................... 7

6.3.2. Prélèvements urinaires ............................................................................................................... 8

6.3.2.1. ECBU : ............................................................................................................................................. 8

6.3.2.2. Urines de 24 h : ................................................................................................................................ 8

6.3.3. Prélèvements bactériologiques ................................................................................................... 8






6.4. Les précautions standard pour les actes de prélèvement .................................................................. 8

6.5. Identification des prélèvements biologiques ....................................................................................... 9

6.6. Renseignement du bon d’examen ................................................................................................... 10

6.7. Prélèvement de sang ....................................................................................................................... 11

6.7.1. En périphérie avec le système sous vide .................................................................................. 11

6.7.2. Sur cathéter central ou sur site implantable............................................................................... 12

6.8. Spécificité des prélèvements ........................................................................................................... 12

6.8.1. Hémoculture .............................................................................................................................. 12

6.8.1.1. Préparation du bon d’examen : ...................................................................................................... 12

6.8.1.2. Préparation des flacons : ............................................................................................................... 12

6.8.1.3. Préparation du malade : ................................................................................................................. 12

6.8.1.4. Inoculation des flacons: .................................................................................................................. 12

6.8.2. Groupe sanguin / phénotype rhésus D ...................................................................................... 13

6.8.3. CD34, gaz du sang ................................................................................................................... 13

6.8.4. Cryoglobuline ............................................................................................................................ 13

6.8.5. Coagulation, dosage d’hormones thyroïdiennes, de médicaments ............................................ 14

6.9. Transmission des prélèvements ...................................................................................................... 14

6.10. Table de préconisation pour les principales analyses réalisées au CHB, au CHU et a l’EFS-Normandie .............................................................................................................................................. 15

6.11. Nature des tubes et ordre de prélèvement ..................................................................................... 18

6.12. Bilans standards et tubes nécessaires. .......................................................................................... 19

6.13. Recueil d’urines ............................................................................................................................. 19

6.13.1. Préparation du bon d’examen. ............................................................................................. 19

6.13.2. ECBU (examen de cyto-bactériologie urinaire) .................................................................... 19

6.13.3. Viruries ................................................................................................................................ 20

6.13.4. Recueil d’urines de 24 heures ............................................................................................. 20

6.13.5. Dosage chimie urinaire ........................................................................................................ 20

6.13.6. Recherche de protéine monoclonale (« BENCE JONES ») ................................................. 20

6.14. Prélèvement de selles pour coproculture ....................................................................................... 21

6.14.1. Préparation du bon d’examen : ............................................................................................ 21

6.14.2. Prélèvement ........................................................................................................................ 21

6.15. Prélèvement vaginal ...................................................................................................................... 21

6.15.1. Préparation du bon d’examen .............................................................................................. 21

6.15.2. Avec pose d’un speculum .................................................................................................... 21

6.15.3. Recueil d’un liquide d’écoulement spontané ........................................................................ 21






6.16. Recueil /prélèvement de crachats .................................................................................................. 22

6.16.1. Préparation du bon d’examen : ............................................................................................ 22

6.16.2. Les techniques .................................................................................................................... 22

6.16.3. Conservation des crachats .................................................................................................. 22

6.16.4. Cas particulier des prélèvements de salive pour le protocole mds-04 : ................................ 22

6.17. Prélèvement de gorge .................................................................................................................... 23


6.18. Prélèvement au niveau des fosses nasales ................................................................................... 23


6.18.2. Prélèvements de lésions et de suppurations cutanées ........................................................ 23

6.19. Prélèvement sur ponction .............................................................................................................. 24

6.19.1. Prélèvement de LCR ........................................................................................................... 24

6.19.2. Prélèvement d’une ponction ................................................................................................ 24

6.19.3. Prélèvement d’une TGs sur ponction. .................................................................................. 24

6.20. Stockage des échantillons après analyse ...................................................................................... 24

6.21. En cas de panne machine ............................................................................................................. 25

7. ANNEXE(S) ............................................................................................................................................... 25






1. OBJET

La procédure décrit les modalités de prélèvements préconisées par les biologistes du Laboratoire de Biologie Médicale afin de garantir l’intégrité des échantillons recueillis.

2. DOMAINE D'APPLICATION

Ce mode opératoire s’applique : à toutes les personnes assurant des prélèvements pour le Laboratoire de Biologie Clinique du centre Henri Becquerel.

Ce mode opératoire s’adresse : à toutes les personnes assurant des prélèvements pour le Laboratoire de Biologie Clinique du centre Henri Becquerel.

3. REFERENCES

Documents de référence :

MQ-LAB 001 : Manuel Assurance Qualité

DE-LAB 018 : La norme NF EN ISO 15189

DE-LBM 374 : REMIC

DE-LBM 393 : Ordonnance n° 2010-49 du 13 janvier 2010

Documents associés :

PG-LBM 004 : Gestion des échantillons

PG- LAB 007 : Transmission labos extérieurs

PG-LAB 014 : Procédure en cas de crise

PG-LBM 015 : Traitement des demandes

PG- LAB 018 : Non-conformités, réclamations et dérogations

PG-LBM 019 : Accueil

PG-LAB 035 : Pré analytique

PG-QUA 011 : Identito-vigilance du CHB

MO-LBM 018 : Cryoglobuline

FT-SOI 046 : Synacthène

MO-LAB 031 : Glims

MO-LBM 033 : Sensibilisation des ides du centre

MO-LAB 037 : Prestation de conseil

DD-LBM 083 : Gestion d’une demande EFS

DD-LBM 029 à DD-LBM 042 : bilans

DD-LBM 109 : bilans CANTO

DD-LBM 115 : Bilan Allo F (Fichie complément)

DD-LBM 119 : bilan cytaphérèse

FT-CLI 038 : Quand prélever une hémoculture ?

LI-LAB 003 : Listes détaillée des examens du département de biopathologie

Li-LBM 041 : Liste des examens urgents






4. GLOSSAIRE

Abréviations :

ECBU : Examen CytoBactériologique des Urines

AEV : Accident d’Exposition Virale

SGL : Système de Gestion du Laboratoire

5. RESPONSABILITES

L’ensemble du personnel réalisant des prélèvements est responsable de l’application de la présente procédure ainsi que de ses des documents rattachés.

6. DEVELOPPEMENT DE CE MODE OPERATOIRE

6.1. Le laboratoire de biologie clinique

Il s’agit d’un laboratoire polyvalent existant depuis l’ouverture du Centre, dont l’activité s’oriente selon plusieurs axes :

Etre au plus près des patients du Centre en réalisant les prélèvements (près de 24100 en 2015) et les actes de biologie polyvalente dans les délais les plus brefs,

Jouer un rôle de référent en matière de marqueurs tumoraux,

Assurer, grâce au secteur de microbiologie, une activité de contrôle d’atmosphères et de surfaces dans l’ensemble de l’établissement.

Depuis 1998, enfin, le laboratoire s’est engagé dans une démarche volontariste d’amélioration de la qualité, qui lui a valu l’obtention en 2003 de l’accréditation Cofrac (portée disponible sur le site www.cofrac.fr) pour la plupart des analyses réalisées dans les domaines de la biochimie, de l’hématologie, de l’immuno-analyse et de la microbiologie. Le laboratoire est accrédité selon la norme 15189, devenue obligatoire en France, depuis 2012 (N° accréditation 8-1409) pour près de 95% de analyses réalisées.

6.1.1. Les horaires d'ouverture

6.1.1.1. Ouverture au public.

Du lundi au vendredi de 8 h à 17 h 30

Les prélèvements destinés aux laboratoires d’Anatomie et de cytologie pathologiques et de Génétique oncologique sont pris en charge par le service transport du Centre.

6.1.1.2. Pour les examens

Du lundi au vendredi de 8 h à 17 h 30 et le Samedi de 8 h 30 à 12 h 30






TELEPHONE – FAX 02 32 08 22 73 OU 02 32 08 22 74 FAX : 02 32 08 25 90 e-mail : [email protected]

6.1.2. Gardes et urgences

La liste des examens urgents est répertoriée dans la Li-LBM 041. Les délais moyens de rendu de résultats sont précisés dans notre liste détaillée des examens du département de biopathologie Li-LAB 003.

En dehors des heures d'ouverture du Laboratoire du Centre, les urgences sont assurées 24 h / 24 h et 7 jours sur 7 par les laboratoires du CHU et de l’EFS.

6.2. De la prescription au prélèvement

Chaque prescription doit être analysée avant la réalisation du prélèvement de manière à ne prélever que les tubes nécessaires, mais tous les tubes nécessaires. Contrôler la non péremption du matériel de prélèvement avant de réaliser la ponction. Les échantillons prélevés doivent être accompagnés des bons d’examens indispensables. Ces bons sont différents selon le laboratoire appelé à réaliser les examens. Les examens demandés doivent être systématiquement renseignés chaque fois que cela permet une aide à la validation et à l’interprétation des résultats. Cela concerne :

Le contexte thérapeutique o Pour l’hémostase : prise ou non prise d’anticoagulants / nature o Pour les dosages de médicaments : préciser la posologie et l’heure de la dernière prise o Pour la microbiologie : préciser les antibiothérapies, la température ainsi que le contexte

clinique

o Pour les bilans thyroïdiens : supplémentation, test au Thyrogen®

La pathologie suspectée pour les demandes de myélogramme et les typages

Les données biologiques externes (ex : patient connu avec une IgG monoclonale kappa),

Le contexte clinique (ex : suivi ou évaluation du risque cardiaque lors d’un dosage de troponine).

Les feuilles de demandes d’examens réalisés au CHB sont disponible sur Ennov, CHB’Net ou crossway:

Imprimé « rose » Biochimie / Hématologie / Immunologie référencé IM-LBM 108,

Imprimé « jaune » Génétique et Biologie moléculaire référencé IM-GEN 022,

Imprimé « blanc » Cytogénétique référencé IM-GEN 023,

Imprime « hygiène hospitalière » IM-LBM 320

Pour les examens spécialisés non réalisés au CHB, et pour les examens urgents demandés en dehors des heures d’ouverture des laboratoires du Centre, les bons à utiliser sont :

CHU

Feuille IBCore : Biochimie / hématologie / hémostase de routine sur formulaire






Hématologie spécialisée

Biochimie spécialisée

Parasitologie et Mycologie

Virologie

Bactériologie, BK

Sérologies infectieuses

Immunologie

Pharmacologie et Toxicologie

EFS

Immuno-hématologie (feuille blanche)

Histocompatibilité (HLA) (feuille verte) ATTENTION : consentement écrit du patient obligatoire au verso

La liste des examens proposée par le laboratoire est disponible sur Ennov sous la référence LI-LAB 003. Celle-ci précise, par analyse, la nature et quantité de tubes à prélever, le bon d’examen à remplir, le laboratoire qui réalise l’examen, le délai de stabilité pré analytique avant centrifugation de chaque paramètre ainsi que le délai de rendus de résultat des examens urgents.

Le préleveur est tenu d’informer le patient lorsqu’au moins un des examens, pour lequel il est prélevé, est réalisé par un sous-traitant du laboratoire. Dans ce cas, le préleveur informe le patient que des informations cliniques pourront être transmises au laboratoire sous-traitant si celles-ci sont jugées pertinentes pour la bonne réalisation ou l’interprétation de l’examen.

6.3. Matériel de prélèvement et de transport

Tout prélèvement destiné aux laboratoires doit être inséré dans une pochette plastique de sécurité scellée et accompagnée de la demande d’examen qui sera placée dans la partie avant de la pochette. Les pochettes de couleur jaune sont destinées aux examens réalisés par les laboratoires de Becquerel. Les pochettes de couleur rouge sont destinées aux examens urgents, réalisés aux laboratoires de Becquerel. Pour les examens non urgents envoyés au CHU, utiliser les pochettes de couleur blanche. Les examens urgents destinés au CHU sont à transporter dans des pochettes blanches avec ruban rouge (ou étiquette Rouge « URGENT » collée sur une pochette blanche). Pour les examens envoyés à l’EFS, utiliser les pochettes identfiées au nom de « EFS ». Les pochettes sont disponibles à l’accueil du laboratoire.

6.3.1. Prélèvements sanguins

L’ordre de prélèvement des tubes est décrit dans le chapitre NATURE DES TUBES ET ORDRE DE PRELEVEMENT

Autres matériels :






Gel pour friction hydroalcoolique pour le lavage des mains,

Aiguille de prélèvement, corps de pompe,

Garrot, gants à usage unique,

Solution alcoolique pour application cutanée (alcool modifié, Bétadine, Biseptine, Chlorhexidine alcoolique),

Pansement

6.3.2. Prélèvements urinaires

6.3.2.1. ECBU :

1 tube BACTERIOLOGIE 5mL bouchon kaki

1 tube CYTOLOGIE 10mL bouchon jaune/rouge

6.3.2.2. Urines de 24 h :

Flacon pour urines de 24h / pour HLS

1 tube CYTOLOGIE 10 mL bouchon jaune/rouge

6.3.3. Prélèvements bactériologiques

Flacon stérile de 100 ml avec étiquette d’inviolabilité (selles, crachats,….),

Tube stérile de 12 ml, conique à jupe, bouchon rouge (LCR).

Flacons à hémocultures,

Ecouvillons avec conservateur Les prélèvements de microbiologie ne peuvent être acheminés au laboratoire par le pneumatique.

6.4. Les précautions standard pour les actes de prélèvement (À appliquer pour tous les patients, pour tous les produits biologiques, et pour tous les matériels souillés de sang)

Les actes de prélèvements ne peuvent être réalisés que par du personnel habilité (fonction, diplôme ou certificat).

Procéder à un lavage hydro-alcoolique des mains avant et après chaque soin ou chaque acte technique,

Panser et couvrir toutes les plaies (surtout aux mains),

Le port des gants est fortement recommandé,

Etiqueter les tubes, au lit du patient ou dans la cabine de prélèvement, APRES la réalisation du prélèvement

Ne jamais recapuchonner une aiguille,

Ne pas désadapter les aiguilles du corps de pompe : jeter l’ensemble dans le conteneur adapté.

Au moment du dépiquage, activer la sécurité des épicrâniennes,

Déposer immédiatement après usage les objets piquants ou tranchants dans des conteneurs adaptés. Le matériel souillé lors du prélèvement est à éliminer dans les conteneurs DASRI.






Jeter les tubes non utilisés s’il en existe. Les emballages sont assimilés aux déchets ménagers.

Ne pas remplir les conteneurs à déchets au-delà de leur capacité,

Grouper tous les tubes correspondant à un même patient dans une pochette plastique réservée à cet effet,

Toujours séparer les feuilles d'examens des prélèvements (pochette plastique),

Eliminer les déchets contaminés dans le strict respect de la procédure,

En cas de piqûre ou de coupure accidentelle, appliquer immédiatement la Procédure DD-MTR 001 « en cas d’accident exposant au sang» ainsi que la PG-MTR 002 prise en charge d’un accident d’exposition au risque viral (AEV) dans la journée et en semaine le soir ou le week-end) définie par le Médecin du travail,

Dans le cas d’un AEV, la déclaration d’accident du travail est à faire rapidement, mais la priorité est de traiter la plaie et consulter le médecin du travail ou son médecin suppléant.

Pour les patientes opérées de façon unilatérale, il est souhaitable que le prélèvement soit réalisé du côté opposé au curage axillaire. Pour les patientes opérées de façon bilatérale, le prélèvement peut être réalisé du côté où le risque de lymphœdème est le plus faible, à savoir sans radiothérapie associée, du côté d’un éventuel ganglion sentinelle, ou, à défaut le côté qui n’est pas le bras dominant de la patiente. En cas de risque infectieux ou de nécessité du maintien d’un garrot prolongé, il est préférable de prélever sur le pied.

Les imprimés de demandes d’examens sont à remplir systématiquement et exhaustivement : identité du patient (avec étiquette code-barres) date et heure de prélèvement, identifiant du préleveur et du prescripteur (médecin ou services de soins), traitement et posologie en lien avec les examens demandés. En dehors des heures d’ouverture (y compris le Samedi matin), déposer une étiquette CAB du service afin de récupérer les résultats dans LaboCollector.

6.5. Identification des prélèvements biologiques

La concordance d’identité entre la prescription écrite et le patient à prélever doit être vérifiée (nom marital et nom de jeune fille, prénom, n° de dossier et date de naissance).

La Procédure générale PG-QUA 011 « Identito-vigilance au CHB » rappelle que :

« Pour vérifier correctement l’identité d’un patient, il faut lui demander de décliner ses noms, nom de jeune fille le cas échéant, prénoms et sa date de naissance.

Cette vérification doit normalement être assurée à toutes les étapes diagnostiques et thérapeutiques de la prise en charge du patient. Certaines de ces vérifications doivent être tracées dans le dossier. »

Les prélèvements sont identifiés d’une étiquette patient, ou étiquette du SGL du laboratoire, contenant ces informations. Dans ce dernier cas, l’identification des tubes à destination de l’EFS doit obligatoirement comprendre le Nom de jeune fille.

Celle-ci sera apposée de manière à ne pas gêner l’appréciation de la qualité et de la quantité du prélèvement.






6.6. Renseignement du bon d’examen

Apposer sur la ou (les) feuille(s) de demande l’étiquette identifiant le patient. Indiquer les examens à pratiquer. NOTER IMPERATIVEMENT LES DATE ET HEURE DE PRELEVEMENT. Identifier le préleveur (identifiant CHB à 6 lettres : en général, 3 premières lettres du prénom, 3 premières lettres du nom – en lettres majuscules) sur toutes les feuilles d’examens nécessaires à la prise en charge des analyses. L’absence de ces renseignements fera l’objet d’une non-conformité dans le dossier du patient.

ATTENTION : En cas de changement de nom d’usage (mariage ou divorce), l’identifiant du préleveur reste inchangé (même identifiant que le login Crossway).

Les prélèvements réalisés par les élèves infirmiers se font sous la responsabilité de leur tuteur (identification de l’IDE).

Noter également tout renseignement thérapeutique ou indication clinique pouvant aider à l’interprétation des résultats. En microbiologie, les informations cliniques et thérapeutiques sont souhaitables mais ne font pas l'objet d'une non-conformité en cas d’absence.

Préciser si le patient bénéficie d’un apport par perfusion (glucose, potassium…) pouvant entrainer une variation dans le dosage des analytes de biochimie. Dans ce cas de figure, privilégier le bras opposé pour réaliser la ponction ou, à défaut, une zone plus basse que le point d’introduction de la perfusion.

Influence du statut digestif sur les résultats d’examens :

Les examens suivants peuvent être impactés par la prise d’un repas : Acide urique ; Albumine; Calcium; Créatinine; Electrophorèse des protéines ; Enzymes ; Fer sérique ; Glycémie ; Phosphore ; Triglycérides ; Urée, B12, folates, cholestérol total et LDL.

L’HDL-cholesterol doit être dosé de préférence chez un patient a jeun de plus de 12 heures.

Parmi les examens cités, les électrophorèses des protéines et les triglycérides varient particulièrement.

Influence de la biotine sur les résultats d’examens :

Des interférences donnent lieu à l’obtention de résultats erronés chez les patients ayant de fortes concentrations sanguines en biotine. Merci de signaler sur l’ordonnance tout traitement par « QIZENDAY »

NB : sur l’imprimé EFS immuno-hématologie, le préleveur doit obligatoirement s’identifier (nom en clair), mentionner date et heure et apposer sa signature afin que la demande d’examen ne soit pas rejetée par l’EFS. Le service ainsi que le nom du médecin prescripteur doivent être clairement identifiés.

Si la demande d’examen EFS est urgente, ne pas oublier de cocher la case réservée à cet effet.

L’identité du préleveur ainsi que les date et heure de prélèvement sont à noter impérativement sur les feuilles HLA pour que l’examen soit réalisé.

Attention : pour les bilans Allo D, le lieu de naissance du receveur et du donneur sont à renseigner sur les feuilles du kit à prélever.

En dehors des heures d’ouverture du laboratoire (Samedi matin y compris car retour des résultats pendant la période de fermeture du laboratoire), toute demande d’examens envoyée au CHU doit comporter une étiquette code à barre identifiant le service demandeur.






Rappel pour toute demande d’examen de microbiologie :

La feuille de demande, doit préciser l’identifiant du préleveur, les dates, heure de prélèvement, la cause de la demande, le site de prélèvement et l’antibiothérapie en cours.

6.7. Prélèvement de sang

6.7.1. En périphérie avec le système sous vide

1. Préparer les bons d’examens correspondant à l’ordonnance selon les modalités citées dans le paragraphe « Renseignements du bon d’examen ».

2. Préparer le matériel de prélèvement et les tubes de recueil en fonction des analyses demandées, de la table de préconisation du laboratoire et des conditions de prélèvement figurant sur les bons de demande.

3. Vérifier la concordance entre les examens prescrits, les tubes prélevés et les bons de demande. Chaque échantillon doit toujours être accompagné d’au moins un bon de demande d’examens.

4. Toute demande de sérologie virale est réputée avoir fait l’objet d’une information du patient par le prescripteur.

5. Solidariser le porte tube et l’aiguille (ou l’épicrânienne).

6. Repérer les veines du patient par palpation pour choisir le meilleur point de ponction.

7. Placer le bras du patient en position basse et lui faire serrer le poing. Poser le garrot au-dessus du point de prélèvement choisi et le maintenir serré modérément.

8. Procéder à l’antisepsie du site à piquer (ne plus y porter les doigts).

9. Piquer si possible tangentiellement à la veine, en évitant de l'aborder latéralement.

10. Dès que l'aiguille est en place, enfoncer le tube au fond du corps porte tube de façon à percer le bouchon.

11. Le sang afflue dans le tube. Le garrot est desserré dès que possible (le faire obligatoirement au-delà de 3 min).

12. Faire desserrer le poing. Attendre l'arrêt de l'écoulement du sang pour changer de tube. Pendant que le tube suivant se remplit, homogénéiser le tube précédent par des retournements lents.

13. A la fin du prélèvement, retirer le garrot si ce n’est pas encore fait, enlever l'aiguille en actionnant son système de sécurité, et l’éliminer immédiatement dans le container prévu à cet effet.

14. Appliquer une compresse de gaze.

15. Maintenir une pression ferme pendant 1 min ou plus suivant le cas (patient sous anticoagulant ou souffrant d’une thrombopénie).

16. Eliminer le matériel de ponction selon la procédure d’élimination des déchets contaminants.

17. Identifier les tubes de prélèvement (Nom, Prénom, Nom de jeune fille, sexe, n° de dossier), avec les étiquettes pré-imprimées CHB et/ou du SGL. Les tubes sont identifiés devant le patient avant ou après le prélèvement ; l’identification après l’acte évite le retrait de l’étiquette sur un tube qui n’a pas recueilli de sang,

18. Placer les tubes dans une pochette hermétique et les transmettre le plus rapidement possible. Les feuilles de demande doivent accompagner les pochettes,






6.7.2. Sur cathéter central ou sur site implantable

Ce sont des actes infirmiers : se référer aux procédures de bonnes pratiques infirmières. Ces prélèvements ne sont pas réalisés au laboratoire.

6.8. Spécificité des prélèvements

6.8.1. Hémoculture

Les prélèvements sont effectués à l’aide du système à prélèvement sous vide.

Il faut opérer dans des conditions rigoureuses d'asepsie : -hygiène des mains, port de gants -port de masque obligatoire pour prélever sur VVC, recommandé dans les autres cas -antisepsie de l’opercule + antisepsie en 2 temps du point de ponction : antiseptique alcoolique-séchage spontané-antiseptique alcoolique-séchage spontané. Afin de respecter les exigences respiratoires des germes recherchés, il est indispensable d’inoculer pour chaque prélèvement deux flacons : le premier en aérobiose (bouchon bleu), le second en anaérobiose (bouchon violet). Volume à inoculer recommandé : 8 à 10ml/flacon. Lorsqu’il est demandé en plus un bilan sanguin, prélever les tubes après le prélèvement d’hémocultures. Les flacons d’hémocultures sont stables 48 heures à température ambiante et ne doivent pas être envoyés au C.H.U.

6.8.1.1. Préparation du bon d’examen :

Cf. chapitre 6.6 « Renseignement du bon d’examen ». Préciser de manière systématique le site de prélèvement et la température du patient.

6.8.1.2. Préparation des flacons :

Les capuchons sont enlevés, l'opercule de caoutchouc est désinfecté avec une compresse stérile imbibée de l’antiseptique alcoolique (bétadine ou chlorhexidine).

6.8.1.3. Préparation du malade :

cf. chp 6 à 9

Respecter le temps d’application de l’antiseptique avant la ponction.

6.8.1.4. Inoculation des flacons:

1. Maintenir les flacons verticaux, Commencer par le flacon aérobie. Il faut enfoncer l'aiguille perce-bouchon au travers de l'opercule,

2. Arrêter l'écoulement après avoir déversé 8 à 10 ml de sang (cf graduations de 5 ml sur le flacon). 3. Agiter doucement le flacon, 4. Pour le flacon anaérobie, procéder de la même manière jusqu'au remplissage du flacon,






5. A la fin du prélèvement, retirer le garrot si ce n’est pas encore fait. Retirer l'aiguille de la veine en actionnant son système de sécurité et l’éliminer immédiatement dans le container prévu à cet effet,

6. Appliquer une compresse de gaze stérile, 7. Maintenir une pression ferme pendant 1 min ou plus suivant le cas (patient sous anticoagulant ou

thrombopénique), 8. Eliminer le matériel de ponction selon la procédure d’élimination des déchets contaminants, 9. Identifier les flacons avec l’étiquette propre au patient portant éventuellement (notamment dans le cas

d’hémocultures différentielles) l’identification du site (périphérique, chambre, cathéter, PICC). Cette étiquette ne doit pas être apposée sur celle du code-barres du flacon. La feuille de demande doit porter l’identifiant du préleveur, les dates, heure de prélèvement, la cause de la demande, la température du patient, le site de prélèvement et l’antibiothérapie en cours,

10. Transmettre les flacons au laboratoire. En dehors des heures ouvrables, ils sont conservés (jusqu’à 48 h) à température ambiante dans le service clinique.

Cf. la FT-CLI 038 « Quand prélever des hémocultures ? » pour la fréquence des prélèvements à réaliser.

6.8.2. Groupe sanguin / phénotype rhésus D

Pour toute demande de groupage ABO-RH, le phénotype RH-KEL est réalisé. La carte de Groupe ne peut être établie par l’E.F.S. que s’il existe deux déterminations de groupage ABO / Rhésus D, effectuées sur deux prélèvements différents identifiés correctement, en deux sites de ponction veineuse différents, à des moments différents et par deux préleveurs différents. Une première détermination est prélevée le jour de la consultation d’anesthésiste. La seconde est réalisée le jour de l’hospitalisation. Dans le cas où les deux déterminations sont effectuées le jour d’hospitalisation, la première détermination est réalisée au laboratoire, et la seconde dans le service de soins.

6.8.3. CD34, gaz du sang

Les prélèvements pour CD34 sont réalisés sur tube EDTA et doivent être transmis dans l’heure suivant le prélèvement. Cette heure sera indiquée sur la pochette d’hémato C.H.U. Le patient est obligatoirement prélevé sur le dos de la main, pour laisser sur chaque bras, une veine de bonne qualité facilement accessible pour le prélèvement probable ultérieur des cellules souches par l’EFS le même jour.

Les gaz du sang, prélevés sur seringue spéciale évitant les échanges gazeux, doivent être transmis dans l’heure qui suit le prélèvement. L’heure de prélèvement, la température du patient et le numéro de poste téléphonique du service demandeur seront notés sur le formulaire adéquat du C.H.U.

6.8.4. Cryoglobuline

Contacter le laboratoire pour convenir d’un rendez-vous. L’infirmier / préleveur se déplacera dans le service clinique pour prélever le malade (matériel thermostaté).






6.8.5. Coagulation, dosage d’hormones thyroïdiennes, de médicaments

Ne pas omettre de noter la posologie médicamenteuse, les dates et heures d’administration du médicament et de la prise de sang. Pour les tests d’hémostase, le tube citraté doit impérativement être rempli jusqu’au trait de jauge du tube. Préciser impérativement si le patient prend ou non un traitement anticoagulant.

6.9. Transmission des prélèvements

Les prélèvements doivent être acheminés le plus rapidement possible vers le laboratoire, a minima dans un délai approprié à la nature de l’analyse (temps exprimés selon une conservation à 15-25°C) :

Hémostase : 4 heures

Hémostase dont le patient est sous Héparine Non Fragmentée (héparine sodique, calciparine) : 1h30

Numération Formule : 4 heures

Numération plaquette SUR CITRATE : 2 heures

Glucose, Potassium, bilirubine, réserve alcaline, bicarbonates, B12, folates : 2 Heures

Biochimie : 6 heures

Chimie urinaire : 2 heures

Microbiologie (DD-LBM 110) :






En cas de nécessité particulière, les conditions de transmission des échantillons sont précisées sur les imprimés de demande. Un examen urgent est à remettre en main propre à un membre du personnel du laboratoire pour assurer une prise en charge rapide. Il est transporté dans une pochette rouge pour distinguer le bilan urgent qui serait acheminé avec le reste des bilans du service. L’usage du pneumatique n’est pas autorisé pour les examens urgents. De même, l’usage du pneumatique n’est pas autorisé pour le transport de prélèvement de microbiologie. Cas particulier des patients se présentant au laboratoire et qui passent un scanner avec injection le même jour : l’infirmière du laboratoire pose un cathéter pour éviter deux prélèvements successifs. A noter cependant qu’en cas de forte affluence au laboratoire, et pour éviter un retard dans le planning du scanner, les patients sont adressés en Imagerie avec les tubes nécessaires. En cas d’absence de l’infirmière du laboratoire, les patients sont systématiquement adressés en Imagerie. Dans ce cas, les renseignements cliniques ainsi que le statut digestif du patient seront demandés lors de leur accueil au laboratoire. Toutefois, après 15h30, et pour éviter un retard de prise en charge des bilans, les patients sont prélevés au laboratoire puis dirigés vers le service d’imagerie. Cas particulier des patients se présentant au laboratoire et qui passe un Pet Scan le même jour : dans ce cas le patient est prélevé en urgence (sous réserve que le laboratoire ait connaissance de l’examen Pet Scan suffisamment tôt à l’avance). Utilisation de plateau violet pour les distinguer. Gestion des redondances de prescription par le laboratoire CHB : les textes réglementaires récents (ordonnance portant réforme de la biologie janvier 2010) insistent sur la maitrise par le biologiste des examens prescrits fréquemment. En accord avec les médecins du CHB, le laboratoire peut être amené à annuler la réalisation de certains examens en fonction de leur antériorité (Cf. PG-LBM 015).

6.10. Table de préconisation pour les principales analyses réalisées au CHB, au CHU et a l’EFS-Normandie

Cette liste correspond aux principaux examens réalisés pour les patients du CHB. Elle indique les conditions particulières de prélèvement. En cas de problème particulier, ou pour des examens non réalisés au CHB, n’hésitez pas à nous contacter aux postes 2273, 2274 ou 2991. L’ensemble des examens réalisé au laboratoire est répertorié dans la Li-LAB 003 « Liste détaillée des examens du département de biopathologie ».

Tube citraté

Tube neutre sans gel






TP / TCA / Fibri

Monomères de fibrine

D-Dimères

Plaquettes sur citrate

Facteurs de coagulation

Thyroïde T3 libre T4 libre

TSH Thyroglob. Ac anti Tg

Fertilité FSH / LH Oestradiol Prolactine

Testostérone

Marqueur tumoral PSA NSE SCC

Anémie

Vit B12/ FOLATES

Hormones** Vancomycine

Sérologie AgHBs

HIV EBV, CMV

Herpès V. Zona

Aspergillose Candidose Rubéole

Toxoplasmose Tous les Anticorps






Tube neutre

avec gel

Tube hépariné avec gel

séparateur

Tube EDTA

Tube VS

Tube EDTA

6mL

Electrophorèse Prot. sériques

Immunofixation IgG, A, M

Chaines légères

Biochimie hors électro. Méthotrexate

CRP, PCT Ferritine, Mg, Pb Troponine, PCT

Alcoolémie, HDL-cholestérol

Marqueurs tumoraux

2 microglob. Cyfra, Calcitonine

numération/Formule Réticulocytes Groupe, RAI

ACE, CA 15.3, CA125,

CA19.9, AFP, HCG

EPO (CHU)* Insuline (CHU)* Cpeptide(CHU)*

Ammoniémie(CHU)**** Ciclosporine

Coombs plaquettaire CD34***

VS Charge virale

PCR

* à transmettre au laboratoire dans une pochette réfrigérée

** Les valeurs de références des hormones présentant un rythme nycthéméral (ex : cortisol), elles varient en fonction de l’heure de prélèvement

*** A transmettre dans l’heure qui suit le prélèvement

**** A transmettre au laboratoire dans les 15 minutes suivant le prélèvement






6.11. Nature des tubes et ordre de prélèvement

L’ordre de prélèvement des tubes respecte les recommandations du fournisseur :

Tube sec BEIGE avec étiquette

jaune de 10mL pour PURGER le

système avant prélèvement sur

chambre ou cathéter puis jeter le tube

Tube citrate BLEU : HÉMOSTASE Tube impérativement rempli jusqu’au trait

de jauge

Tube avec activateur de

coagulation (silice) : SEROLOGIE

Tube avec gel séparateur de

sérum : PROTEINE SPECIFIQUE

Tube héparine avec gel séparateur

VERT :

BIOCHIMIE, MARQUEURS TUMORAUX

Tube EDTA MAUVE :

CYTO-HEMATOLOGIE & IMMUNO-

HEMATOLOGIE

Tube en verre citrate noir : VS






6.12. Bilans standards et tubes nécessaires.

cf. DD-LBM 029 à DD-LBM 042 et DD-LBM 112.

DD-LBM 109 : Bilans CANTO

DD-LBM 112 : Allo F (Allo Fichier Complément)

DD-LBM 115 : Cytaphérèse

6.13. Recueil d’urines

6.13.1. Préparation du bon d’examen.

Cf. chapitre 6.6 « Renseignement du bon d’examen »

6.13.2. ECBU (examen de cyto-bactériologie urinaire)

L'urine, normalement stérile, peut être contaminée lors de la miction par la flore commensale qui colonise l'urètre et les organes génitaux externes. Un bon recueil limite cette contamination par une toilette soigneuse et s’effectue au milieu de la miction après élimination du premier jet ; sauf urgence, il est fait sur les premières urines du matin (après au moins 4 heures sans miction). La technique du prélèvement doit être soigneusement expliquée au malade. Elle comporte :

une toilette des organes génitaux externes détaillée dans la procédure de soins infirmiers,

le recueil, effectué par la méthode de « milieu de la miction » dans un flacon stérile muni d’une canule intégrée ;

Dès l’émission, remplir, un tube de CYTOLOGIE (tube conique bouchon jaune/rouge) et un tube BACTERIOLOGIE (bouchon kaki). Homogénéiser les tubes par retournements. Les identifier avec une étiquette CHB.

Jeter le flacon

Les tubes contiennent des agents permettant une stabilité du prélèvement de 48h à température ambiante.

Dans un contexte infectieux nécessitant un examen rapide pendant le week-end, le prélèvement est à transmettre au Laboratoire de Bactériologie du CHU.

Le recueil itératif par sondage évacuateur est à éviter dans la mesure du possible car il constitue un risque d'infection. Il doit respecter le protocole défini par le CLIN : il ne faut en particulier jamais renouveler une tentative infructueuse avec la même sonde.






Chez un patient porteur d'une sonde à demeure, effectuer une ponction directe sur le site de prélèvement de la sonde selon les règles du protocole défini par le CLIN ; en particulier, ne jamais prélever dans le sac collecteur.

6.13.3. Viruries

Les échantillons d’urines sont recueillis en pot stérile et transmis dans l’heure suivant le prélèvement au Laboratoire de Virologie qui les refuse après 16 heures.

6.13.4. Recueil d’urines de 24 heures

Le matin au réveil (à 7 h par exemple), uriner et jeter dans les WC les urines,

Garder ensuite toutes les urines émises dans la journée et celles de la nuit suivante dans un flacon gradué muni d’une canule intégrée,

Uriner une dernière fois le lendemain matin à la même heure que la veille (7 h) et joindre cette dernière miction aux précédentes,

Identifier le flacon avec une étiquette CHB,

Apporter au laboratoire le plus rapidement possible la totalité des urines ou un échantillon représentatif. Dans ce cas, homogénéiser les urines avant prélèvement de l’échantillon (3 tubes à bouchon beige), et noter impérativement le volume des urines de 24 h sur le bon d’examen.

6.13.5. Dosage chimie urinaire

Recueillir les urines dans un flacon stérile muni d’une canule intégrée;

Remplir 1 à 3 tubes CHIMIE selon les examens demandés (tube sans additif à bouchon beige) Cf. IM-LBM 108 feuille de demande pour le nombre de tube nécessaire.

Homogénéiser le tube par retournements.

Les identifier avec une étiquette CHB.

Jeter le flacon

6.13.6. Recherche de protéine monoclonale (« BENCE JONES »)

Examen réalisé à partir d’urines recueillies sur 24 heures (Cf. plus haut pour la marche à suivre)

Remplir 3 tubes CHIMIE (tube sans additif à bouchon beige)

Homogénéiser les tubes par retournements.

Les identifier avec une étiquette CHB.

NOTER LE VOLUME d’urine émis

Jeter le flacon






6.14. Prélèvement de selles pour coproculture

6.14.1. Préparation du bon d’examen :


6.14.2. Prélèvement

Il suffit de peu de selles. A partir de matières fécales émises dans un récipient propre, la valeur de quelques grammes de selles est prélevée à l'aide d'une spatule dans le flacon stérile. Un fragment purulent muqueux ou sanglant est choisi lorsqu'il en existe. Pour une demande d’examen de parasitologie, prévoir un second flacon (flacon MIF à demander au laboratoire) et remplir le bon CHU adéquat. Identifier les flacons avec les étiquettes du patient. Le bon de demande doit comporter quelques indications cliniques telles que la fièvre, la prise éventuelle d'antibiotiques ou la notion de retour d'un pays infesté.

6.15. Prélèvement vaginal

6.15.1. Préparation du bon d’examen


6.15.2. Avec pose d’un speculum

En toute rigueur, il nécessite la pose d’un spéculum sans lubrifiant ni antiseptique.

Selon les indications, prélever à un ou plusieurs des niveaux suivants : culs de sac vaginaux, endocol, exocol (parfois urètre).

Pour les culs de sac vaginaux et exocol : utiliser 3 écouvillons stériles avec conservateur. Pour l’endocol : utiliser 2 écouvillons stériles avec conservateur.

Identifier les prélèvements avec les étiquettes de la patiente.

Pour les recherches de mycoplasmes, chlamydiae, HSV, il est nécessaire de se procurer auprès du laboratoire des flacons spéciaux (milieu de transport) et d’ajouter mycoplasme, chlamydiae et/ou HSV sur la feuille de demande.

6.15.3. Recueil d’un liquide d’écoulement spontané

On utilise les 3 écouvillons de la même manière.






6.16. Recueil /prélèvement de crachats

6.16.1. Préparation du bon d’examen :


6.16.2. Les techniques

On évitera, dans la mesure du possible la contamination par la salive ou les sécrétions des voies respiratoires supérieures. Le recueil se fait dans un flacon stérile avec étiquette d’inviolabilité, identifié avec une étiquette-patient.

Expectoration spontanée : le recueil des crachats doit être fait si possible, le matin au réveil du malade, après brossage des dents, rinçage de la bouche et gargarisme avec un liquide aseptique.

Au cours d'une bronchoscopie (acte médical) : aspiration bronchique à l'aide d'un cathéter protégé.

Ponction transtrachéale (acte médical) : ce mode de prélèvement est effectué comme le précédent en milieu hospitalier sous anesthésie locale. Assez traumatisant pour le malade, son emploi reste limité aux pneumopathies graves.

Tubage (acte infirmier) : le tubage gastrique doit se faire en respectant les règles décrites dans la procédure de soins infirmiers.

6.16.3. Conservation des crachats

Les recherches de BK sont transmises au laboratoire de bactériologie du CHU. Un flacon spécifique est nécessaire, accompagné du formulaire de demande d’examen de ce laboratoire.

6.16.4. Cas particulier des prélèvements de salive pour le protocole mds-04 :

Utiliser 2 écouvillons spéciaux « Epicentre : catch-all sample collection swab » par patient. Ces écouvillons sont conservés dans la pièce « chimie divers » du laboratoire.

Les écouvillons doivent être frottés à plusieurs reprises à l’intérieur de la joue et replacés dans leur étui identifié. Ils sont à conserver à température ambiante si l’envoi est réalisé dans la journée, sinon congeler.

Prévenir l’unité de recherche clinique au 2496 pour la récupération et l’envoi des échantillons.






6.17. Prélèvement de gorge



Prélèvement à faire à distance des repas.

Matériel : 1 écouvillon stérile avec conservateur à identifier pour la recherche microbiologique,

Patient assis ou allongé, détendu. Il doit être informé de l’acte.

Ouverture de l’écouvillon en prenant soin de ne rien toucher avec l’extrémité.

Écouvillonnage des amygdales ou, en leur absence, des piliers du voile du palais Ecouvillonnage des ulcérations, exsudats, fausses membranes, si présents.

Remettre l’écouvillon dans son étui en prenant soin de ne pas toucher le bord du tube.

Identifier l’écouvillon avec une étiquette-patient.

Descendre rapidement au laboratoire.

6.18. Prélèvement au niveau des fosses nasales



Matériel : 1 écouvillon stérile avec conservateur à identifier.

Patient assis ou allongé, détendu. Il doit être informé de l’acte.

Ouverture de l’écouvillon en prenant soin de ne rien toucher avec l’extrémité.

Demander au patient de respirer très calmement.

Introduire avec délicatesse l’écouvillon dans la narine, assez profondément pour atteindre les choanes.

Remettre l’écouvillon dans son étui en prenant soin de ne pas toucher le bord du tube.

Identifier l’écouvillon avec une étiquette-patient

Descendre rapidement au laboratoire.

6.18.2. Prélèvements de lésions et de suppurations cutanées

Au préalable, une détersion au sérum physiologique de la zone à prélever et éventuellement une désinfection des zones proximales sont nécessaires.

Selon les cas, réaliser une biopsie de la lésion ou cureter le bord actif de la lésion et placer le prélèvement dans un flacon stérile. Possibilité d’ajouter quelques gouttes de sérum phy dans le flacon SAUF si demande de PCR: ne rien ajouter.

Eventuellement, aspirer à l’aiguille fine le liquide inflammatoire produit pas la lésion.

L’écouvillonnage n’est pas une procédure adéquate et doit être évité autant que possible.






6.19. Prélèvement sur ponction

6.19.1. Prélèvement de LCR


Le prélèvement est effectué par le clinicien qui transfère environ 0.5 ml de liquide dans au minimum 2 tubes stériles de 12 ml, coniques à jupe, bouchon rouge.

Les flacons identifiés avec l’étiquette-patient, accompagnés de la demande d’examen de bactériologie et/ou de biochimie et/ou d’anatomo-pathologie, sont insérés dans les pochettes étanches en plastique et acheminés immédiatement vers les laboratoires concernés. Les recherches de BK sont transmises au laboratoire de bactériologie du CHU. Un flacon spécifique est nécessaire, accompagné de la pochette de demande d’examen de ce laboratoire.

6.19.2. Prélèvement d’une ponction

Le prélèvement d’une ponction est un acte médical réalisé par un praticien expérimenté.

6.19.3. Prélèvement d’une TGs sur ponction.

Le prélèvement sur liquide de ponction est un acte médical réalisé par un praticien expérimenté à la ponction cervicale sous échographie.

Pour se faire, effectuer une ponction à l’aiguille fine (25-27 Gauge), echo-guidée.

Rincer l’aiguille de ponction dans 1 micro tube de 1mL de PBS+albumine 10%, préalablement préparé au laboratoire et stocké à +4-8°C 7 jours maximum, en salle d’échographie.

Acheminer le prélèvement sous 2h au laboratoire à température ambiante.

6.20. Stockage des échantillons après analyse

Une fois analysés, les prélèvements sont stockés soit pour un éventuel complément d’analyse (Cf. avec le biologiste responsable pour les délais ainsi que pour la nature du complément), soit pour revérifier l’identité d’un prélèvement en cas de doute. Les prélèvements sont conservés pour :

Biochimie (Chimie fine et COBAS) : 1 semaine, en chambre froide.

Hématologie : 3 jours, en chambre froide.

Hémostase : 3 jours, en chambre froide.

LCR congelés à -20 degrés une semaine

Immuno-analyse : Pour les prélèvements décantés, 1mois (4 semaines pleines et celle en cours), en chambre

froide.






Les tubes primaires de marqueurs et les tubes primaires décantés provenant de l’extérieur, sont gardés 1 semaine à + 4°C dans la chambre froide

Microbiologie : Les prélèvements sont conservés 72 h en chambre froide, les LBA sont congelés à -20°C. Les milieux de cultures solides (tubes et boîtes) sont conservés à température ambiante, 7

jours après la mise en évidence de souche, Les milieux de cultures liquides, s’ils sont positifs, sont conservés 7 jours à température

ambiante. Les souches correspondant aux hémocultures positives sont conservées en chambre

froide selon la procédure décrite dans le MO-LBM 008.

6.21. En cas de panne machine

Se référer à la PG-LAB 014 Procédure en cas de crise.

7. ANNEXE(S)

NEANT