Influence du plasmodium sur la glycémie et les

Année académique 2019-2020

9e Promotion

REPUBLIQUE DU BENIN

*************

MINISTERE DE l’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE

SCIENTIFIQUE

*************

DIRECTION GENERALE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR

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ECOLE SUPERIEURE LE FAUCON

************ Domaine : Sciences et Technologie Mention : Génie Biologique

Spécialité : Analyses Biologiques et Biochimiques Grade : Licence Professionnelle

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU

DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE EN ANALYSES BIOLOGIQUES

ET BIOCHIMIQUES

THEME

Présenté et soutenu par :

AZANKPAN Charluberth B. K.

Sous la direction de :

Tutrice Superviseur

Mme Pélagie ZODOME Dr Casimir D. AKPOVI

Responsable du laboratoire Maître de conférences (CAMES)

de l’hôpital de zone Allada

Président du jury

Pr Pascal ATCHADE

Examinateur

Dr K. Paulin YOVO

Rapporteur

Pr Casimir AKPOVI

Influence du plasmodium sur la glycémie et les triglycérides au cours du paludisme chez les sujets de

15 ans et moins à l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè

Année académique 2019-2020

9e Promotion

REPUBLIQUE DU BENIN

*************


SCIENTIFIQUE

*************


*************


************ Domaine : Sciences et Technologie Mention : Génie Biologique


RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU

DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE EN ANALYSES BIOLOGIQUES

ET BIOCHIMIQUES

THEME

Présenté et soutenu par :

AZANKPAN Charluberth B. K.

Sous la direction de :

Tutrice Superviseur

Mme Pélagie ZODOME Dr Casimir D. AKPOVI

Responsable du laboratoire Maître de conférences (CAMES)

de l’hôpital de zone Allada

Président du jury

Pr ATCHADE Pascal

Examinateur

Dr K. Paulin YOVO

Rapporteur

Pr Casimir AKPOVI

Influence du plasmodium sur la glycémie et les triglycérides au cours du paludisme chez les sujets de

15 ans et moins à l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè

REPUBLIQUE DU BENIN

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SCIENTIFIQUE

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Domaine : Sciences et Technologie Mention : Génie Biologique


POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE

PROFESSIONNELLE

Directeur :

Mr Michel SOARES

Directeur Académique :

Pr AHISSOU Hyacinthe

Chef de Département

Dr YOVO Kokou Paulin

Année académique : 2019-2020

Influence du paludisme sur la glycémie et les triglycérides sanguins chez les sujets de 15 ans et moins

i

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE BIOLOGIQUE

OPTION : ANALYSES BIOLOGIQUES ET BIOCHIMIQUES

N0 Noms et prénoms Matières enseignées

1. LAFIA Edgard Immunologie générale, Management des

services de santé

2. ADJISSE Simplice Analyse et algèbre

3. AISSI Vahid Biochimie structurale

4. AHISSOU Hyacinthe

(directeur académique)

Biochimie métabolique

5. AHOUIGNAN Gilbert Hématologie

6. AKPOVI D. Casimir Biochimie clinique

7. ANAGO Eugénie Enzymologie

8. ISSAKA Bintou Soins infirmiers

9. ATCHADE Pascal Parasitologie générale et médicale,

mycologie

10. ATREVI Nicolas Anatomie Générale

11. BANKOLE Honoré

Sourou

Virologie, bactériologie appliquée

12. DEGBEY Cyriaque

Comlan

Hygiène et santé publique, microbiologie

médicale

13. DESSOUASSI Noel Biophysiques

14. DJEDATIN Gustave Génétique

15. DOUGNON Victorien Microbiologie générale et Méthodologie

de la recherche

16. AGUESSY Pamphile Physiologie des grandes fonctions,

Hémostase

17. GLELE Moise Transfusion Sanguine

18. KANFON Aurélien Immuno-hématologie, Sérologie, Hygiène

Sécurité Qualité et Environnement,

contrôle Qualité

19. KLOTOE Jean-Robert Technologie de Laboratoire, Equipement

Biomédicaux


ii

20. Père MASLOKONON

Vincent

Histologie générale et Histopathologie

21. HOUSSOU Mariette Technique d’expression écrite et oral

22. QUENUM Chantal Education Physique et Sportive

23. QUIRINO Clet Initiation à l’informatique, Informatique

médicale

24. SEGBO Julien Biologie moléculaire

25. SOARES R. Armel Droits de travail, Gestion des ressources

humaines, management des services

26. TCHOBO P. Fidèle Chimie organique

27. TOBOSSI Boniface Biostatistiques

28. TOPANNOU Nikita Chimie générale

29. YADOULETON Anges Entomologie médicale

30. YEHOUENOU PAZOU

Elisabeth

Biologie cellulaire

31. YOKOSSI Daniel Anglais générale et scientifique

32. YOVO Kokou Paulin

(chef département)

Pharmacologie, Toxicologie, Physiologie

générale

33. YOVOGAN Julien Sciences physiques


iii

Dédicace

A mes parents

AZANKPAN D. Justin

&

ADJOFOGUE Marie-Louise


iv

REMERCIEMENTS

Ce travail est la synthèse de deux mois de travaux entièrement réalisés à l’Hôpital de zone

d’Allada Toffo Zè entre Mars et Mai 2019. Mes sincères remerciements à :

Docteur Paulin Kokou YOVO, Chef Département de Génie de Biologie Humaine, mes

sincères remerciements pour votre contribution à la réussite de notre stage de fin de

formation. Recevez ici l’expression de notre profonde gratitude ;

Docteur Casimir AKPOVI, vous qui avez accepté diriger ce rapport de stage malgré

vos multiples occupations et m’avez offert les meilleures conditions de travail. Nous

témoignons notre vive reconnaissance pour la pertinence et la qualité du travail;

A Madame Pélagie ZODOME, chef service du laboratoire pour votre aide et votre

disponibilité durant notre stage ;

A Monsieur Aziz YESSOUFOU, je vous remercie pour vos apports, votre encadrement

et votre dévouement ;

Tout le personnel du laboratoire de l’hôpital de Zone Allada-Toffo-Zè pour vos conseils.

Votre aide et votre soutient nous a été utile durant le stage ;

Tout le personnel de la pédiatrie de l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè pour leur

contribution et disponibilité ;

A tous mes oncles, tantes, cousins et cousines, je vous remercie pour votre soutient ;

A mes frères et sœurs, les mots ne suffisent guère pour exprimer l’attachement, l’amour

et l’affection que je porte pour vous. Que ce travail vous serve d’exemple et soit pour

vous une source d’inspiration ;

A mes camarades de la 9ème Promotion de Licence Professionnelle ; en souvenir des

moments de joie et de peine vécus ensemble ; courage et persévérance ;

A tous mes amis(e) qui de proche ou de loin m’ont toujours soutenue.


v

HOMMAGES

A son Excellence Monsieur le Président du Jury,

Vous nous faites un grand honneur en acceptant de présider le jury chargé d’apprécier

notre travail. Cher Président du Jury, par vos observations, nous espérons améliorer la

qualité de ce travail. Veuillez recevoir, Monsieur le Président, l’expression de nos

sentiments respectueux et de notre profonde gratitude.

Aux Honorables Membres du Jury,

Nous sommes touchés par l’honneur que vous nous faites en acceptant de siéger dans notre

Jury de soutenance de rapport de stage de fin de formation pour apprécier la qualité de ce

modeste travail par vos remarquables critiques et apports. Veuillez trouver ici, l’expression

de notre profonde gratitude et de nos sincères considérations.


vi

Liste des singles et abréviation

AKOP : Amibes Kystes OEuf Parasites

ASLO : Anti-Streptolysine O

ATB : Antibiogramme

CCMH : Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine

CRP : Protéine C-Réactive

ECBU : Examen Cytobacteriologie des Urines

GE-DP : Goutte Epaisse-Densité Parasitaire

LCR : Liquide Céphalo-Rachidien

NFS : Numération Formule Sanguine

PU : Prélèvement Urétral

PV : Prélèvement Vaginal

SDW : Sérodiagnostic de Widal et Félix

TCMH : Teneur Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine

TE : Test d’Emmel

TPHA : Treponema Pallidum Hemaglutination Assay

VDRL : Veneral Disease Research Laboratory

VGM : Valeur Globulaire Moyen

VS : Vitesse de Sédimentation

μl : Micro litre


vii

Liste des tableaux

Tableau I: Mode opératoire de dosage du glucose

Tableau II : Mode opératoire de dosage du triglycéride

Tableau III : Mécanismes de baisse du glucose par l’insuline

Tableau IV: Fréquences suivant le sexe


viii

Liste des figures

Figure 1: Variation de la glycémie et des triglycérides en fonction de la GE

Figure 2: Variation de la glycémie et des triglycérides en fonction de la densité parasitaire

Figure 3 : Nuages de points des corrélations glycémie et DP, triglycérides et DP, glycémie

et triglycérides


ix

Résumé

L’infection palustre est une parasitose qui s’accompagne assez fréquemment de

perturbations hématologiques et biochimiques. Quoique non spécifiques, ces signes biologiques

peuvent être évocateurs du paludisme. Durant deux mois de stage de fin de formation en milieu

professionnel à l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè, une étude visant à évaluer l’influence du

plasmodium sur la glycémie et les triglycérides au cours du paludisme chez les sujets de 15ans et

moins a été faite dans le but de déterminer l’importance du dosage des triglycérides et du glucose

dans la prise en charge du paludisme chez ces derniers. A cet effet, 65 patients ont été inclus

dans cette étude dont 32 atteints du paludisme. La glycémie et les triglycérides ont été dosés sur

le sérum des patients. L’issue de cette étude ne révèle aucun lien direct entre glycémie et DP (r =

0.15) de même entre triglycérides et DP (r = 0.13) malgré une augmentation non négligeable des

triglycérides et quelques cas hypoglycémie (10 sujets avec une glycémie <0.6) observé en

présence du paludisme. Par ailleurs, il existe une corrélation bien que peu significative entre la

glycémie et le taux des triglycérides. Le taux élevé des triglycérides serait le résultat d'une

activité réduite de la lipoprotéine lipase au niveau du foie. Cependant ces résultats ne permettent

pas vraiment de se prononcer efficacement sur la maladie.

Mots clés : Corrélation, glycémie, triglicémie, hôpital de zone Allada-Toffo-Zè, paludisme


x

Abstract

Malaria infection is a parasitosis which is quite frequently accompanied by

haematological and biochemical disturbances. Although not specific, these biological signs can be

suggestive of malaria. During three months of final training in a professional environment at the

Allada-Toffo-Zè hospital, a study was carried out to assess the influence of plasmodium on blood

sugar and triglycerides during malaria in subjects aged 15 and under in order to determine the

importance of the dosage of triglycerides and glucose in the management of malaria. To this end, 65

patients were included in this study, including 32 suffering from malaria. The blood sugar and

triglycerides were measured on the patient's serum. The outcome of this study does not reveal any

direct link between glycemia and DP (r = 0.15), the same between triglycerides and DP (r = 0.13)

despite a significant increase in triglycerides and some cases of hypoglycemia (10 subjects with blood

sugar <0.6 ) observed in the presence of malaria. Furthermore, there is a correlation, although not

very significant, between blood sugar and the triglyceride level. The high triglyceride level is said to

be the result of a reduced activity of lipoprotein lipase in the liver. However, these results do not

really allow an effective opinion on the disease.

Key words: Correlation, glycemia, triglicemia, Allada-Toffo-Zè area hospital, malaria


xi

Sommaire

INTRODUCTION ...................................................................................................................... 1

PREMIERE PARTIE : PRESENTATION DU CADRE INSTITUTIONNEL ......................... 4

DEUXIEME PARTIE : DEROULEMENT DU STAGE .......................................................... 8

TROISIEME PARTIE : ETUDE DU THEME ........................................................................ 20

CONCLUSION ........................................................................................................................ 29

TABLE DES MATIERES ……………………………………………………………… 33


1

Introduction

« L’éducation est l’arme la plus puissante qu’on puisse utiliser pour changer le

monde » disait Nelson MENDELA. Impacter le monde à travers l’innovation et le savoir-

faire inculquer à ses apprenants sur plusieurs années de formation est la mission première

de l’Ecole Supérieur le FAUCON (ESF). Une vision qui passe par une bonne insertion de

ses finissants dans le milieu professionnel et de la recherche scientifique. C’est dans cette

optique que l’ESF se met en collaboration avec les centres hospitaliers du Bénin et autres

structures pour organiser des stages pratiques à tous ses étudiants en fin de formation. Le

Département d’Analyses Biologiques et Biochimiques nous a ainsi envoyé à l’hôpital de

zone Allada-Toffo-Zè pour notre stage du 02 mars 2020 au 09 mai 2020.

Le monde n’est plus sans savoir que le paludisme constitue l’une des endémies

les plus fréquentes et les plus graves dans les pays tropicaux [1]. L’hypoglycémie est une

urgence clinique chez les sujets en bas âge dont les manifestations sont le plus souvent

neurologiques. En l’absence d’un diagnostic précoce et d’une prise en charge adéquate,

elle peut entrainer des décès ou des séquelles neurologiques graves [2]. En milieu

hospitalier béninois, l’hypoglycémie n’est pas systématiquement recherchée dans les

troubles neurologiques de l’enfant. Ces troubles neurologiques ne sont pas rares dans

certaines pathologies comme le paludisme et la malnutrition [3]. En biologie clinique,

l'évaluation des troubles lipidiques [4] est basée sur le dosage du cholestérol (CT), des

triglycérides (TG), du cholestérol HDL (HDL-C et du cholestérol LDL (LDL-C). Les

lipides sont des modulateurs importants de la stabilité membranaire de l'érythrocyte

normal, lui-même inapte à les synthétiser [5]. Les stades érythrocytaires du Plasmodium

falciparum (P. falciparum) n'ont pas de lipides en réserve et sont incapables de synthétiser

eux-mêmes les acides gras ou cholestérol de novo. Ils sont obligés d'incorporer des lipides

de leur environnement chez l'hôte pour satisfaire aux besoins de lipoprotéines de la

schizogonie [6;7;8]. Les variations dans la teneur en lipides de l'érythrocyte parasité ont

comme conséquence des modifications dans la rigidité et la perméabilité de la membrane

érythrocytaire [9;10].

C’est à cet ordre d’idée que le présent travail intitulé « Influence du paludisme sur la

glycémie et les triglycérides chez les sujets de 15ans et moins à l’hôpital de zone Allada-

Toffo-Zè » est initié.


2

L’objectif général de ce travail est de déterminer les variations du taux sanguin des

triglycérides et du glucose chez les enfants de 15 ans et moins atteints du paludisme suivis

au service de pédiatrie de l’hôpital de Zone Allada-Toffo-Zè

Plus spécifiquement il s’agira de :

- Doser les taux de glucose et de triglycérides chez les enfants de 15 ans et moins pendant

les crises de paludisme

- Evaluer la corrélation entre le paludisme et ces deux paramètres en vue d’une meilleure

prise en charge des enfants

Outre l’introduction, la conclusion et les recommandations, ce rapport de stage est rédigé

en trois parties:

- La première partie est consacrée à la présentation du cadre institutionnel ;

- La seconde partie a traité du déroulement du stage ;

- La troisième partie a présenté le thème de recherche.


3

PREMIERE PARTIE : PRESENTATION DU CADRE INSTITUTIONNEL


4

PREMIERE PARTIE : PRESENTATION DU CADRE INSTITUTIONNEL

I -PRESENTATION DU CADRE D’ETUDE

Le cadre d’étude a regroupé, le cadre institutionnel où nous avons reçu les enseignements pour le

compte de la licence professionnelle et le cadre technique où les stages ce sont déroulés.

1.1- Cadre de la formation académique

L’Ecole Supérieure le FAUCON (ESF) est une université privée située dans la Commune

d’Abomey-Calavi au Bénin. Elle doit son existence à l’Arrêté n° 497 /MESRS /CAD /DC /DGM

/DPP /DGES /SP du 16 novembre 2007, portant autorisation d’ouverture. Dirigée par monsieur

Michel SOARES, elle a été créée pour offrir au monde, des cadres compétents et motivés en

matières technologiques et managériales. Elle répond aux exigences du système LMD et s’est

entourée d’enseignants et de praticiens émérites qui ne ménagent aucun effort pour apporter aux

étudiants des connaissances de pointe et toujours actualisées.

Dans l’objectif de permettre à ses étudiants d’acquérir des connaissances pratiques des

cours théoriques reçus, de former des cadres compétents, dynamiques et actifs sur le terrain, le

département de Génie de Biologie Humaine (GBH) envoie ses étudiants à la fin de chaque année

académique dans divers centres hospitaliers selon le choix de chacun pour effectuer des stages

pratiques de formation leur permettant d’avoir la main afin de bien exercer leur futur métier.

C’est ainsi que du 02 Mars au 02 Mai 2020, s’est déroulé le nôtre à l’hôpital de Zone Allada-

Toffo-Zè plus précisément au laboratoire d’Analyses Biomédicales. Compte tenu des

observations faites et des informations recueillies durant deux mois de stage continu, nous vous

présenterons notre rapport qui comportera en détail les grandes lignes du plan.

1.2- Cadre Technique

L’hôpital de zone Allada est un établissement sanitaire public à caractère social. Il

est compétent pour assurer la prise en charge des urgences médicales, pédiatriques,

obstétricales et chirurgicales dans la zone sanitaire Allada-Toffo-Zè. La zone sanitaire est

située dans le département de l’Atlantique et couvre une superficie de 1526 Km2 dont

Allada 381 Km2, Toffo 492 Km2, et Zè 663 Km2. L’hôpital regroupe en son sein plusieurs

services dont la médecine, la gynécologie, la chirurgie, la maternité, l’ophtalmologie, la

pédiatrie, la néonatologie, la réanimation, imagerie médicale, la pharmacie, l’urgence et

enfin le laboratoire où s’est déroulé notre stage. Situé dans l’enceinte du bâtiment B

derrière le service des urgences. Il dispose de dix (10) biologistes médicaux, trois aides-


5

soignants et un agent d’entretien qui assurent le fonctionnement. Il est dirigé par Madame

Pélagie ZODOME.

Salle de prélèvement

Tout examen du laboratoire nécessite généralement un prélèvement de liquides

biologiques (sang, LCR, urines, crachats, …) ou autres matières comme les selles. Pour

une bonne traçabilité et un travail soigneux, un cahier de prélèvement est dûment rempli

par le technicien de laboratoire avant le prélèvement, comme suit : numéro d’ordre, nom et

prénoms, âge, sexe, service demandeur, examens à faire. Sur les tubes qui servent au

prélèvement, sont aussi inscrits: nom, prénoms, âge et numéro d’ordre. Le choix des tubes

adéquats est très indispensable pour le technicien selon les examens à effectuer.

En ce qui concerne les prélèvements des selles et des urines, les tubes sont remis aux

patients la veille, suivis des instructions à l’appui afin que les prélèvements soient faits

dans de bonnes conditions. Quant au prélèvement de LCR, il se fait par les médecins dans

des tubes stériles et aussitôt acheminés au laboratoire. Celui-ci est étiqueté de la même

manière que les prélèvements du sang.

Hématologie

C’est sur cette paillasse que les examens suivants sont réalisés : la numération formule

sanguine, le test d’Emmel, la numération des leucocytes, la vitesse de sédimentation, le

temps de saignement ; le temps de coagulation.

Parasitologie

Les examens suivants y sont effectués : la recherche d’amibes, kyste, œufs et parasites ; la goutte

épaisse et densité parasitaire.

Bactériologie

Dans cette section sont réalisés le contrôle et la surveillance des maladies à potentiel

épidémique. En outre, les examens de routine suivants y sont réalisés : examen

cytobactériologique des urines ; le spermogramme ; examen cytobactériologique du

liquide céphalo-rachidien.

Sérologie

Comme dans la section de bactériologie, sont réalisés le contrôle et la surveillance des

maladies à potentiel épidémique ainsi que les examens de routine à savoir : sérodiagnostic


6

de Widal et Félix ; sérodiagnostic de la syphilis : sérodiagnostic de la chlamydiose ;

sérologie du toxoplasme ; sérodiagnostic de la rubéole ; recherche de l’antigène du virus

de l’hépatite B, le groupage sanguin ABO et la recherche du facteur rhésus.

Banque de sang

Dans cette section les poches de sang sont stockées dans le réfrigérateur et cédées en cas

de besoin.

Biochimie

Les examens suivants y sont réalisés : la glycémie à jeun, les triglycérides, l’ionogramme

(Na+, Cl-, K+), la magnésémie, la protidémie, le cholestérol total, l’HDL-cholestérol,

l’LDL-cholestérol, l’amylasémie, les transaminases, la créatininémie, l’urémie, la

calcémie, la Phosphatase Alcaline (PAL), le gamma Glutamyl Transférase (ɣGT), la CPK

(Créatinine Phosphokinase). C’est dans cette section que nous avons effectué nos

manipulations.


7

DEUXIEME PARTIE : DEROULEMENT DU STAGE


8

DEUXIEME PARTIE : DEROULEMENT DU STAGE

2.1- Objectif du stage

2.1.1- Objectif général

Maitriser les analyses courantes qui se font au laboratoire et l’utilisation de tous les

appareils de diagnostic biologique.

2.1.2- Objectif spécifiques

-Participer aux différentes étapes de réalisation des examens de Biologie Médicale en vue

du diagnostic courant ;

-Identifier les difficultés liées au processus du diagnostic et à l’environnement du travail

-Analyser les difficultés identifiées ;

-Proposer des solutions techniques administratives et / ou de gestions appropriées.

2.2- Travaux effectués par section

Nous avons eu à faire le tour des sections de biochimie, sérologie, hématologie,

parasitologie, bactériologie, la banque de sang, à raison de deux semaines par section sous

la supervision d’un biotechnologiste. Pour chaque section nous avions eu à décrire deux

analyses.

2.2.1. Prélèvement

Les prélèvements se font dans la salle de prélèvement à partir de 08h et prennent

fin à 10h. Ce sont des prélèvements sanguins (veineux ou capillaires). Le matériel

nécessaire pour le prélèvement est constitué de : aiguilles, différents tubes, corps

vacutener, garrot, tampons de coton, alcool, portoir, stylos, registre, boîtes de sécurités.

Pour effectuer le prélèvement, il faut :

Accueillir le patient, l’installer et lui prendre ses bulletins ;

Attribuer le numéro d’ordre du registre aux bulletins ;

Enregistrer les nom et prénoms du patient ainsi que les analyses demandées dans le

registre ;

Etiqueter (nom, prénom, numéro d’ordre) le ou les tubes correspondants aux analyses

demandées ;

Placer le garrot au patient et demander à ce qu’il fasse le poing ;


9

A l’aide de l’index, repérer la veine à piquer ;

Désinfecter la zone à piquer à l’aide d’un tampon alcoolisé ;

Changer de tampon s’il est sale ;

Fixer la veine et la pénétrer avec l’aiguille ;

Recueillir la quantité de sang suffisante aux analyses dans les tubes ;

Détacher le garrot et faire ouvrir le poing au patient ;

Retirer l’aiguille et le jeter dans la boîte de sécurité ;

Homogénéiser les échantillons des tubes à anticoagulant ;

Faire le pansement.

2.2.2. Différentes analyses effectuées

Section de Biochimie

Les examens effectués dans cette section sont entre autres : la glycémie, la créatininémie,

les transaminases (TGO ou TGP), l’urémie, les cholestérols (total, HDL, LDL), les triglycérides,

l’uricémie, la calcémie, la magnésémie, les bilirubines (totale et directe), la protidémie,

phosphatase alcaline, glucorachie, protéine de 24h et l’ionogramme sanguin. Les prélèvements

sanguins se font sur tubes secs, citratés, héparinés ou fluorés. Il est utilisé surtout le sérum ou

parfois le plasma après avoir centrifugé les tubes. Les analyses se font au spectrophotomètre.

Protocoles de réalisation de quelques examens biochimiques :

Glycémie

Le dosage du glucose sanguin consiste à doser le taux de glucose dans le sang d’un sujet.

La glycémie varie chez un individu selon l’alimentation mais un taux élevé de glucose

sanguin est un signe de Diabète. Elle se fait généralement à jeun.

Principe :

Dans la réaction de Trinder, le glucose est oxydé en D-gluconate par le glucose oxydase

(GOD) avec la formation de peroxyde d'hydrogène. En présence de la peroxydase (POD),

un mélange de phénol et de 4-aminoantipyrine (4-AA) est oxydé par le peroxyde

d'hydrogène, pour former une coloration rouge de quinonéimine proportionnelle à la

concentration de glucose dans l'échantillon.


10

Equation de la réaction

Glucose oxydase

Glucose + O2 Acide gluconique + H2O2

Peroxydase

2H2O2 + Phénol + 4-AAP Quinonéimine + 4 H2O

4-AAP : Amino-4-Antipyrine

Mode opératoire

Tableau I: Mode opératoire de dosage du glucose

Tubes Blanc Standard Echantillon

Réactif 1ml 1ml 1ml

Standard - 10µl -

Echantillon - - 10µl

Eau distillée 10µl - -

Homogénéiser et laisser les tubes pendant 10 minutes à la température du laboratoire ou

pendant 5minutes à 37°C. Lire l'absorbance (A) des échantillons et du standard à 500nm

contre le blanc réactif. La valeur normale de la glycémie à jeun est comprise entre 0,70-

1,10 g /l

Triglycérides

Principe

Les triglycérides sont hydrolysés enzymatiquement en glycérol et acides gras. En présence

de l’ATP, le glycérol donne le Glycérol-3-phosphate et l’ADP sous l’action du glycérol

kinase suivants les réactions ci-dessous

LDL

Triglycérides + H2O Glycérol + acides gras

GK

Glycérol + ATP Glycérol 3 Phosphate + ADP


11

GPO

Glycérol 3 Phosphate + O2 Dihydroxy acetoneP + H2O2

POD

H2O2 + 4 AAP + p. chlorophénol quinone imine + H2O

Mode opératoire

Composition du réactif: tampon, lipase, peroxydase (POD), glycérol-3-phosphate oxydase

(GPO), glycérol kinase (GK), 4-amino-antipyrine (PAP), ATP

Pour la préparation du réactif, dissoudre le contenu du flacon R2 avec la quantité adéquate

de tampon R1. Homogénéiser et attendre 05 min avant l’utilisation

Tableau II : Mode opératoire de dosage du triglycéride

Tubes Blanc Standard Echantillon

Réactif 1ml 1ml 1ml

Standard - 10µl -

Echantillon - - 10µl

Eau Distillée 10µl - -

Bien mélanger. Incuber 5 minutes à 37°C ou 10 minutes à température ambiante. Faire le

zéro avec le blanc. Lire la DO de l’étalon et de l’échantillon. La lecture se fait à 505 nm.

Valeurs normales : 0,5 à 1,5 g/l

Section de la sérologie

Les examens fréquemment réalisés en sérologie sont : le groupage sanguin et facteur

rhésus (GS-Rh), le sérodiagnostic de Widal et Félix (SDW), le TPHA et VDRL, la

recherche de l’antigène HBs pour l’hépatite B et HVC pour l’hépatite C, l’ASLO et la

CRP.


12

Groupage sanguin

Principe

Le groupage sanguin du système ABO consiste à rechercher les antigènes érythrocytaires

et les anticorps anti-érythrocytaire à l'aide de sérums tests et d'hématies test en vue d'obtenir la

réaction antigène-anticorps se traduisant par la présence ou l'absence d’agglutination. Le facteur

Rhésus est limité à la recherche des antigènes de ce système à se fixer sur la surface des

hématies.

Mode opératoire

Phase pré-analytique

- Réunir le matériel

- Sortir les réactifs et les hématies tests du réfrigérateur et les laisser sur la paillasse pour

les ramener à la température ambiante du laboratoire.

- Laver soigneusement une plaque d'opaline et la faire sécher avec une serviette bien

propre; la dégraisser au besoin avec de l'alcool à 90°C

- Apprêter deux béchers: l'un contenant un peu d'eau physiologique et rien dans le second

- Apprêter une Pipette Pasteur munie de tétine (à garder dans le bécher d'eau

physiologique)

Phase analytique

Dépôt des gouttes d'hématies et de sérum du patient, des sérum-tests et des hématies-

tests: technique de BETH VINCENT (à gauche), de SIMONIN (à droite) et groupage

Rhésus à l'extrême droit.

- Disposer la plaque d'opaline de préférence en paysage

- Disposer horizontalement sur la moitié droite de la plaque et à quatre endroits, deux

grosses gouttes de sérum du patient (technique de SIMONIN et témoin auto); veiller à

laisser une petite place à l'extrême droit de la plaque (à suivre)


13

- Disposer horizontalement sur la moitié gauche de la plaque et à trois endroits, une trace

de culot globulaire du patient prélevé au fond du tube de prélèvement (technique du

Beth-Vincent) et une trace dans la dernière goutte de sérum (à droite); déposer une

dernière trace d'hématies à droite de la plaque

- Ajouter respectivement à chaque goutte de culot globulaire, une goutte de sérum-test

Anti A, Anti B et Anti AB

- Ajouter respectivement aux trois premières gouttes de sérum, une goutte d'hématies tests

B, A, O (Rappel: la dernière goutte a déjà reçu une trace des hématies du même

prélèvement)

- Ajouter une goutte de sérum-test Anti D sur la dernière goutte de sang (à l'extrême droit

de la plaque)

- Utiliser le fond d'un tube à hémolyse vide pour mélanger doucement et sur une

circonférence d'environ 3 cm, chacun des 7 mélanges effectués sur la plaque.

- Faire chalouper doucement la plaque pour favoriser les agglutinations Lire les résultats

après 3 minutes environ

L'apparition de l’agglutination ou non permet de déduire le groupe sanguin ainsi que le

facteur

Rhésus du patient. Si le test Rhésus ne donne pas d’agglutination, on dit que l'individu est

de groupe (résultat de l'épreuve globulaire) sous réserve de Du.

Recherche de Du (antigène D faible) :

- Mettre une goutte du culot globulaire de l’échantillon à tester dans le tube échantillon

- Faire trois lavages avec de l’eau physiologique en centrifugeant à 3000 tours pendant

5mn.

- Faire la suspension globulaire à 5% après lavage.

- Ajouter à la suspension globulaire à 5% une goutte d’anti D et deux gouttes de solution

de LISS puis incuber au bain-marie à 37°C pendant 15mn

- Faire trois lavages avec de l’eau physiologique en centrifugeant à 3000tours pendant

5mn.


14

- Ajouter de l’anti globuline humain (AgH) et centrifuger à 1000 tours pendant 1mn.

- Faire la lecture en secouant doucement et en inclinant légèrement le tube

Présence d’agglutination = résultat positif

Absence d’agglutination = résultat négatif

CRP

Principe

La technique CRP-Latex est une technique d’agglutination qui permet de détecter de

manière semi quantitative, la CRP dans le sérum humain. Les particules de Latex

recouverts d’anticorps anti-CRP humaine sont agglutinées par les molécules de CRP

présentes dans l’échantillon prélevé sur le patient.

Technique de réalisation

- Bien nettoyer la plaque de CRP

- Déposer 50 μL de l’échantillon à tester ainsi qu’une goutte de chaque substance contrôle positif

et négatif, sur les différents cercles de la porte préalablement nettoyée.

- Mélanger le réactif CRP-Latex rigoureusement et déposer une goutte (50μL) à côté de chaque

goutte précédente.

- Mélanger les gouttes au moyen d’une baguette, en essayant d’étendre le mélange sur toute la

superficie intérieure du cercle. Utilisez des baguettes différentes pour chaque échantillon.

- Faire chalouper doucement la plaque pour favoriser les agglutinations pendant 2minutes.

Lecture et interprétation

- L’absence d’agglutination signifie que la CRP est négative

- La présence d’agglutination indique une concentration en CRP égale ou supérieure à 6mg/L.

Section de la Microbiologie

Elle comprend les disciplines tel que la Bactériologie, la Parasitologie et autres …


15

Section de Parasitologie

Cette section s’occupe des analyses telles que: l’examen qui permet de rechercher les

amibes, les kystes, les œufs et les parasites dans les selles (AKOP), la goutte épaisse –

densité parasitaire (GE-DP).

Réalisation de la Goutte épaisse-Densité parasitaire (GE-DP)

Principe

La goutte épaisse est une technique de concentration des hématies en vue de la

recherche de trophozoïtes dans le sang.

Mode opératoire

- Prélever une grosse goutte de sang capillaire ou de sang prélevé sur un tube EDTA ;

Déposer une goutte du sang prélevé sur la lame à l’aide d’une pipette ;

- Etaler la goutte sur 1 cm de diamètre à l'aide du coin de la lamelle, en tournant le coin de

la lamelle pendant quelques secondes ; Laisser sécher avec soin, ne jamais fixer. Temps

de séchage : 2 heures à température ambiante.

- Recouvrir la goutte épaisse de Giemsa dilué au 1 /10 pendant 10minutes puis rincer à

l’eau de robinet ;

- La goutte épaisse doit être transparente ;

- Laisser sécher la goutte épaisse puis passer à l’observation au microscope à l’objectif

x100 avec l’huile à immersion.

Résultats:

L’observation de la goutte au microscope à l’objectif x 100 permet de déclarer la lame

positive ou négative. La lame négative exprime l’absence de trophozoïtes sur la goutte

épaisse, après avoir parcouru toute la goutte ou après avoir compté 500 leucocytes

tandis que la lame positive signe la présence d’un plasmodium, ce qui nous amène à

calculer la Densité Parasitaire (DP).

Pour ce fait, on compte dans chaque champs le nombre de leucocytes et de parasites

jusqu’à atteindre 500 leucocytes si la lame est faiblement positive et 200 leucocytes si

la lame est fortement positive.


16

Enfin, on fait le calcul de la DP en multipliant le nombre de parasites comptés par le nombre

de leucocytes par mm3 de sang de l’individu divisé par le nombre de leucocytes comptés

dans la goutte épaisse. Le résultat s’exprime par le nombre de parasites par µL de sang.

NPr x 6000

NGB comptés

DP = Parasites/μl de sang

NPr = Nombre de Parasites

NGB = Nombre de Globules Blancs

AKOP

Cet examen consiste à rechercher les amibes, kystes, œufs, parasites dans les selles des

patients.

Il est réalisé en deux étapes à savoir l’étape de l’examen macroscopique et celle de

l’examen microscopique.

Examen macroscopique :

Cette étape consiste à observer la consistance des selles, la couleur et la présence ou non

d’éléments surajoutés.

Examen microscopique

Procédure :

- Déposer 1 à 2 gouttes d’eau physiologique ;

- Prélever à l’aide d’un pic, l’échantillon en piquant dans la selle à différents endroits puis

exprimer ce pic dans l’eau physiologique ;

- Faire de même en remplaçant l’eau physiologique par le Lugol ;

- Recouvrir les préparations d’une lamelle chacune puis passer à l’observation à l’objectif

10x du microscope.

Des kystes, des levures, des larves peuvent être observés au microscope.

Section de la Bactériologie

Cette section s’occupe des analyses telles que: ECBU (Examen Cytobactériologique

des Urines), prélèvement vaginal (PV), prélèvement urétral (PU), Liquide Céphalo-

Rachidien.


17

ECBU

▪ Technique de réalisation

Pour ce qui concerne l’ECBU, l’examen macroscopique consiste à apprécier à l’oeil

nu l’aspect des Pour l’examen microscopique, on réalise l’état frais et l’état coloré.

L’état frais permet d’observer des cellules, des cristaux et de les quantifier.

L’état coloré permet de faire la coloration de Gram et de classer les bactéries en deux (02)

groupes : Gram+ et Gram-

La coloration de Gram consiste à :

-fixer l’étalement et laisser refroidir ; déposer la lame sur le support au-dessus du bac de

coloration ;

-couvrir la lame de violet de gentiane pendant 1 minute puis rincer à l’eau courante,

enlever le surplus d’eau ;

-couvrir la lame de la coloration de lugol pendant 1 minute et rincer soigneusement à l’eau

courante, enlever le surplus d’eau ;

-couvrir la lame avec de l’alcool pendant 20 secondes, rincer abondamment à l’eau

courante et enlever le surplus d’eau ;

-couvrir la lame de fuschine et laisser agir pendant 30 à 40 secondes, rincer à l’eau

courante et bien égoutter ;

-laisser sécher sur un râtelier ;

-passer à l’observation à l’objectif d’immersion du microscope.

-faire l’identification de l’espèce bactérienne présente suivant les tests adéquats

-faire l’antibiogramme

Section Hématologie

L’hématologie est cette discipline qui s’occupe de la numération des cellules sanguines et

du dosage des éléments constitutifs du sang. Divers examens y sont réalisés tels que :

Numération Formule Sanguine (NFS), Temps de Prothrombine (TP/INR), Temps de

Saignement, Temps de Coagulation, la Vitesse de Sédimentation, le Test d’Emmel, le

Test de Diagnostic Rapide du paludisme, l’Electrophorèse de l’Hémoglobine, le taux

d’hémoglobine, le nombre de blanc. Nous avons appris entre autres à confectionner

des frottis, à faire la goutte épaisse, à faire la coloration au Giemsa diluée au 1/10, à

calculer la densité parasitaire et à utiliser l’automate d’hématologie.


18

Réalisation de quelques examens hématologiques

Numération Formule sanguine (NFS)

Principe

La numération consiste à compter les cellules du sang grâce à un automate. Cet automate

est constitué de 2 électrodes de platine entre lesquelles on fait passer un courant électrique:

c'est la méthode Coulter. A chaque passage de cellule, une différence de potentiel se crée.

Chaque variation est comptée et le nombre de variations correspond au nombre de cellules.

De plus, l’intensité de la variation est proportionnelle à la taille de la cellule, c’est-à-dire

plus la variation est importante plus la cellule est grosse. La formule est établie grâce à une

différentiation chimique qui entre autre séparera les constituants basophile et acidophile.

La machine établie également le dosage de l'hémoglobine, le Taux d’Hématocrite et

détermine la Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine, la Teneur

Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine et le Volume Globulaire Moyen.

Technique de réalisation

- Bien homogénéiser l’échantillon

- Faire passer l’échantillon à travers l’aspirateur

- Veiller à ce que la quantité de sang nécessaire est aspirée

- Retirer l’échantillon

- Attendre que l’automate sorte les valeurs des constantes globulaires et de la formule

leucocytaire

2.3. CHOIX DU SUJET

A l’issue de notre stage, nous avons choisi de réfléchir sur la fréquence des cas de

paludisme à l’hôpital de zone Allada en occurrence en pédiatrie et les examens demandés

pour le bilan paludique chez ces enfants. Ceci nous a amené à évaluer les taux de glucose

et de triglycérides chez les enfants souffrant du paludisme à l’hôpital de zone Allada-

Toffo-Zè pour une meilleure prise en charge des enfants. Notre réflexion se fera autour du

thème : Variation des taux sanguins du glucose et des triglycérides chez les enfants de 15

ans et moins, souffrant du paludisme.


19

TROISIEME PARTIE : ETUDE DU THEME


20

TROISIEME PARTIE : ETUDE DU THEME

3.1. Objectif de l’étude

Le paludisme grave est défini, selon l’Organisation Mondiale de la santé (OMS), comme une

parasitémie positive à Plasmodium falciparum associée à au moins une des manifestations ou

signes de gravité que sont : les convulsions, le coma, l’anémie avec un taux d’hémoglobine <6

g/dl , l’hypoglycémie <0,40 g/l , la détresse respiratoire, les urines « porto ou coca cola »,

l’oligurie ou l’insuffisance rénale, les troubles hémorragiques, le collapsus cardio-vasculaire,

l’ictère ou l’acidose [11]. Le paludisme demeure un problème de santé publique dans le monde

[12]. Une des raisons premières du but visé par cette étude est de contribuer à une bonne prise en

charge des enfants pendant le paludisme.

Objectif général

Explorer l’impact du paludisme sur les taux sanguins de glucose et des triglycérides chez les

enfants de 15 ans et moins.

Objectifs spécifiques

Il s’agira de déterminer :

- la présence ou non du paludisme chez les enfants de 15ans et moins

- les taux de glucose et de triglycérides chez les enfants de 15 ans et moins pendant les crises de

paludisme

- la corrélation entre ces deux paramètres et la densité parasitaire

3.2- Synthèse Bibliographique

3.2.1. La glycémie

3.2.1.1. Origine du glucose

Origine exogène: L'alimentation humaine comporte un apport en glucides qui

représente environ 50 % de la ration énergétique, soit un apport moyen de 200 à 300

g/jour.

Origine endogène: À partir des glucides:

a. glycogène: Par dégradation de celui-ci: la glycogénolyse se déroulant au niveau du

foie et du muscle.

b. les autres hexoses: Bien qu’apportés par l’alimentation, il est rare qu’ils soient utilisés

comme tels et tendent à être transformés en glucose au niveau du foie.


21

À partir d’autres substrats: Il s’agit de la néoglucogenèse à partir du glycérol et des acides

aminés glucoformateurs. Sans oublier la néoglucogenèse à partir du pyruvate et du lactate. 90%

de la néoglucogenèse est assuré par le foie, 10% par les reins.

3.2.1.2. Régulation de la glycémie

Afin de prévenir toute accumulation du glucose après les repas, ou tout effondrement de

son taux au cours de l’effort musculaire et du jeûne, l’organisme est doté d’un ensemble de

systèmes permettant l’homéostasie glucidique.

Régulation métabolique:

Tient compte des besoins de la cellule:

Besoin d’énergie glycolyse

Besoin en NADPH,H+ VPP

Excès de glucose glycogénolyse

(Image regulation)

Régulation hormonale

L’équilibre entre les voies consommatrices et les voies génératrices du glucose sanguin

est assuré grâce à 2 systèmes endocriniens antagonistes:

-un système hypoglycémiant représenté par une seule hormone;

-un système hyperglycémiant représenté par un groupe d’hormones.

a. Système hypoglycémiant: c’est l’insuline.

Glycoprotéine de 51 acides aminés.

2 chaines peptidiques A et B de 21 et 30 acides aminés unies par 2 pont S-S.

Synthétisée sous forme de précurseur de 84 acides aminés: pro insuline.

Stockée sous cette forme dans l’appareil de Golgi.

Après stimulation des cellules β de Langerhans, la pro insuline est hydrolysée en insuline

+ peptide C.

Insuline et peptide C sont sécrétés en quantité équimolaire, ½ vie de l’insuline: 5 à 10 mn,

½ vie du peptide C: 20 à 30 mn


22

Tableau III : Effets de l’insuline sur la glycémie

Augmente Diminue

Captation cellulaire de glucose Néoglucogenèse (NGG)

Synthèse de glycogène Glycogénolyse

Synthèse des proteins Protéolyse

Synthèse des Acides gras et de

triglycérides

Lipolyse

Cétogenèse

Le peptide C n’a pas d’activité biologique.

L’insuline est dégradée par le foie, le peptide C éliminé par le rein.

b.Système hyperglycémiant:

Glucagon:

Principale hormone hyperglycémiante;

Polypeptide de 29 aa; Sécrété par les cellules α des ilots de Langerhans;

Favorise la glycogénolyse et la néoglucogenèse hépatique;

Augmente la cétogenèse et la lipolyse.

Cortisol:

Stéroïde: sécrété par le cortex surrénalien;

Augmente la néoglucogenèse au dépend des protéines.

Adrénaline:

Mécanisme d’urgence (baisse rapide);

Favorise la glycogénolyse et la lipolyse;

Inhibe l’entrée du glucose dans les tissus périphériques.

Hormone de croissance GH:

Diminue la pénétration du glucose dans les cellules.

Les hormones thyroïdiennes:

Augmente l’entrée du glucose intestinal dans la circulation.

Possède une action hyperglycémainte limitée.


23

3.2.2. Les triglycérides

Double origine des triglycérides :

origine exogène (huiles, graisses animales, produits laitiers)

origine endogène (synthèse hépatique à partir du glucose en excès)

Les triglycérides sont véhiculés dans le plasma par les lipoprotéines :

• Les chylomicrons fournisssent les triglycérides d'origine alimentaire aux adipocytes, aux

cellules musculaires striées squelettiques, aux cellules musculaires cardiaques

• Les VLDL fournissent les triglycérides d'origine endogène aux adipocytes, aux cellules

musculaires striées squelettiques, aux cellules musculaires cardiaques

• La très grande majorité des triacylglycérols retrouvés dans les graisses présente un acide gras

insaturé en position C2

Fonctions biologiques

• Réserve énergétique dans les adipocytes permettant une mobilisation des acides gras libres en

cas de jeûne prolongé

• β-oxydation des acides gras libres

- cellules musculaires striées squelettiques et cellules musculaires cardiaques : production d'ATP

- cellules hépatiques : production d'ATP dans le cadre de la néoglucogenèse hépatique

3.2.3- Paludisme et métabolisme

En Afrique subsaharienne, le paludisme représente l’une des premières causes de

morbidité et de mortalité chez l’enfant [13]. Toutefois l’infection palustre elle-même est le

plus souvent asymptomatique. En zone d’holo et d’hyperendémie palustre, lors d’enquêtes

transversales pour déterminer l’indice plasmodique dans une région, plus de 50% des

enfants d’âge scolaire présentent des gouttes épaisses positives sans aucune

symptomatologie associée [14, 15]; les densités parasitaires sont alors le plus souvent

basses.

La pathogénicité des Plasmodium est liée à leur capacité à se développer dans les

érythrocytes. Néanmoins, le paludisme constitue beaucoup plus qu'une érythrocytopathie

et un déséquilibre de l'homéostasie du milieu intérieur s'installe fréquemment au cours du

développement parasitaire [16]. Beaucoup d'anomalies du milieu intérieur de l'hôte

s'associent au développement plasmodial. .Dans quelques cas de paludisme pernicieux à P.

falciparum, une hypoglycémie inférieure à 0,4 g/1 a été rapportée [17]. Chez ces patients,

le taux de mortalité a été plus élevé que dans les cas pernicieux non hypoglycémiques.


24

Les triglycérides servent de réserve énergétique. Ils ont une double origine :

exogène (aliments) et endogène (synthèse hépatique) [18]. L’accumulation de

triglycérides sous forme de gouttelettes lipidiques au sein des hépatocytes correspond

dans le temps à l’excès de triglycérides hépatiques, mis en évidence par Maurois et al.

[19] pendant l’infection palustre. Selon ces auteurs, on peut admettre que cette

accumulation résulterait de l’augmentation du taux d’acides gras libres circulants qui,

captés par le foie, y seraient transformés en triglycérides.

3.3. Matériel et méthode

3.3.1. Matériel et Méthodologie

Matériel

Matériel biologique: Sérum obtenu sur tubes secs après centrifugation à 3000 tours par

minute pendant 5 minutes.

Matériels technique :

Les principaux matériels techniques utilisés sont :

- une centrifugeuse de marque KOKUSAN H-19α, un spectrophotomètre de marque

SECOMAM pour le dosage de la glycémie et des triglycérides puis ;

- le matériel de base du laboratoire tels que les micropipettes, les cônes, les compresses, les

tubes secs (sérum), tubes en verres et le matériel de prélèvement.

Le sérum de contrôle Bovin multiparamétrique 071818A-1 BIOLABO Exatrol-N a été

utilisé pour la validation des analyses.

METHODE D’ETUDE

Il s’agit d’une étude prospective, descriptive à viser analytique qui s’est déroulée sur huit

semaines et a porté sur les enfants de 15ans et moins présentant des signes cliniques du

paludisme qui ont bénéficié systématiquement du dosage du glucose sérique et des

triglycérides.

POPULATION D’ÉTUDE

La présente étude a portée sur les enfants de 15 ans et moins présentant des signe clinique

du paludisme qui sont admis soit en consultation ou en hospitalisation au service

pédiatrique de l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè.

COLLECTE DES DONNEES

Nous avons soumis les parents des sujets à un questionnaire pour recueillir des données

d’identification. Ces données comprenaient le nom, le prénom, l’âge et le sexe.


25

Glycémie TG

Gly

cém

ie, t

rigl

ycér

idém

ie (

g/l)

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0GE (-)GE (+)

PROCÉDURE DE DOSAGE

Pour chaque patient identifié, on a dosé la glycémie et les triglycérides.

Manipulation (voir 2.2.2 section biochimie)

Analyse des données

Au total, 65 patients ont été inclus dans la présente étude, les résultats issus de la

manipulation de ces échantillons ont été traités par les logiciels EpiInfo et SigmaPlot

Statistical Analysys.

3.4. Résultats

Notre étude a porté sur un échantillon de 65 individus constitué de 32 hommes (soit

49.23%) et 33femmes (soit 50.77%) tous d’une tranche d’âge de 15ans et moins (tableau IV). Le

taux moyen de glycémie observé au cours de cette étude est de 0.80g/L. La valeur maximale de

ce taux (2.79g/L) ainsi que celle minimale (0.1g/L) sont observées respectivement chez un sujet

de sexe féminin âgé de 1an et un sujet de sexe masculin de 2ans. Par ailleurs, le taux moyen des

triglycérides évalué chez les patients est de 1.47 g/L. La valeur maximal de ce taux (7.4 g/L)

ainsi que celle minimale (0.123 g/L) sont observés chez des sujets de sexe féminin

respectivement âgé de 2 ans et 3ans. Les tranches d’âge les plus fréquentes de notre étude sont

de 3ans (15.38%), 8ans (10.77%) et 10ans (7.69%).

Tableau IV: Fréquences suivant le sexe

SEXE Frequency Percent

F 33 50,77%

M 32 49,23%

Total 65 100,00%

Figure 1: Variation de la glycémie et des

triglycérides en fonction de la présence ou non du

paludisme (+++p <0,0001)

La figure1 présente la variation de la glycémie et des triglycérides en fonction de la

présence ou non du paludisme; elle nous montre une augmentation significative du taux des

triglycérides chez les sujets ayant une GE + tandis que la glycémie ne varie presque pas en


26

2D Graph 5

GE(-) DP1 DP2 DP3 DP4 DP5

Gly

cém

ie,

trig

lycé

ride

s (g

/l)

0

1

2

3

4

5 Glycémie (g/l)

TG (g/l)

fonction de la présence ou non du paludisme chez les sujets.

Figure 2: Variation de la glycémie et des triglycérides en fonction de l’évolution

de la densité parasitaire

GE(-): Goutte épaisse négative; DP1 : Densité parasitaire inférieure à 1.000 ; DP2 : Densité

parasitaire comprise entre 1.000 et 10.000 ; DP3 : Densité parasitaire comprise entre 1.000 et

20.000 ; DP4 : Densité parasitaire comprise entre 20.000 et 100.000 ; DP5 : Densité parasitaire

supérieure à 100.000 DP : (exprimée en nombre de parasites / mm3 de sang).

La figure 2 montre la variation de la glycémie et des triglycérides en fonction de

l’évolution de la densité parasitaire. Les taux regroupés par intervalle croissant de densité

parasitaire (DP) laissent constater que la glycémie ne change pas en fonction de la DP. Par

contre, on remarque une augmentation des triglycérides dès la présence du paludisme et au fur et

à mesure que la DP augmente. Néanmoins, à des valeurs extrêmes de la DP (404800, 716000) on

note une tendance à la baisse des triglycérides.


27

Densité parasitaire (parasite/mm3)

0 2e+5 4e+5 6e+5 8e+5

Gly

cém

ie (

g/l

)

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5y = 5,189.10-7 + 0,797

r = 0.155n = 32

Densité parasitaire (parasite/mm3)

0 2e+5 4e+5 6e+5 8e+5

Tri

gly

céri

des

(g/l

)

0

2

4

6

8y = -1,476.10-6 + 2,385

r = 0.130n = 32

Glycémie (g/l)

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0

Tri

glyc

érid

es (

g/l)

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0y = 0,254 + 0,502

r = 0.330n = 32

Figure3 : Corrélations entre glycémie et DP, triglycérides et DP et glycémie et triglycérides

La figure 3 présente les nuages de points des corrélations glycémie et DP, triglycérides et

DP, glycémie et triglycérides. On constate qu’il n’y a pas de corrélation significative entre la

glycémie et DP (r=0.15), entre triglycérides et DP (r= 0.13) avec des coefficients de corrélation

plus proche de 00. Par contre, on remarque une corrélation de faible qualité entre glycémie et

triglycéridémie (r=0.33).

3.5. Commentaires

Cette étude nous a permis d'explorer la glycémie et les triglycérides chez les enfants de

15 ans et moins atteints de paludisme. Une principale limitation de l'étude était sa courte durée

(02mois); au cours duquel le monde entier faisait également face à la pandémie du Coronavirus

(COVID-19) où la peur et les mesures préventives contre la COVID-19 a laissé place à une rare

fréquentation des hôpitaux par la population. Cependant, au cours des deux mois de l'étude, nous

avons pu inclure un total de 65 sujets dont 32 présentant une GE positive.

Nos résultats ont montré que le paludisme touche beaucoup plus les enfants moins de 10

ans avec une plus grande fréquence dans notre série des enfants de 3 ans (15.38%), 8 ans

(10.77%) et 10 ans (7.69%). Notre étude a montré que le paludisme ne provoque pas une


28

variation significative dans les taux de glycémie (figure 1). Au total, 10 enfants avec une GE+

sont en hypoglycémie (<0.6g/L). White et al ont montré que l’existence d’une hypoglycémie,

complication fréquente du paludisme grave, est associée à un mauvais pronostic [20]. Cela est

également justifié dans notre étude par le coefficient de colinéarité r=0.15 (proche de 0) au test

de corrélation de Pearson entre glycémie et DP. La pathogénèse de l’hypoglycémie a suscité de

nombreuses hypothèses [21,22].

En ce qui concerne les triglycérides, une augmentation significative du taux des

triglycérides chez les sujets est remarqué en présence du paludisme ; bien que, à des valeurs

extrêmes de la DP (404800, 716000) on note une tendance à la baisse des triglycérides. Baptista

et al. ont aussi remarqué que, quel que soit le degré de gravité de la maladie, il y a une

augmentation nette des TG [14]. Das et al. en 1993 ont rapporté une corrélation entre TG,

densité parasitaire et gravité du paludisme [23]. Nos résultats corroborent les travaux de Das et

al. en ce qui concerne le lien entre les triglycérides et la DP.


29

CONCLUSION

En somme, notre séjour à l’hôpital de zone Allada-Toffo-Zè a permis d’approfondir nos

connaissances, de nous familiariser avec la pratique de la plupart des activités qui se déroulent

dans un laboratoire d’analyses biomédicales. L’étude menée sur l’influence du plasmodium sur

la glycémie et les triglycérides au cours du paludisme chez les sujets de 15 ans et moins n’a

révélé un lien direct entre la glycémie et la DP. Par contre, nous avons noté une corrélation entre

les taux de triglycérides et la DP. Même si ces résultats permettent de tirer certaines conclusions,

les données à notre disposition ne permettent pas de s’exprimer sur l’impact du paludisme sur les

métabolismes du glucose et des triglycérides chez les enfants pendant le paludisme compte tenu

du nombre limite des échantillons de notre série.


30

SUGGESTIONS

A l’issue de notre stage académique, un certain nombre de suggestions méritent d’être formulés

d’une part à l’endroit de l’école supérieure le Faucon (ESF) et à l’endroit de notre laboratoire

d’accueil d’autre part.

A l’endroit de l’ESF :

Augmenter la durée des stages

A l’endroit du laboratoire

Tenir compte du dosage du glucose et des triglycérides dans le bilan du diagnostic

biologique du paludisme chez les enfants

Encourager la conduite des travaux de recherche similaires à la présente étude afin de

mieux élucider le lien entre le paludisme et le métabolisme des composés organiques.


31

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUE

1- J. Koko, D. Dufillot, A.M. Zima-Ebeyard, T. H. Duong, D. Gahouma, M. Kombila,

aspects cliniques et approche epidemiologique du paludisme de l’enfant a libreville,

Gabon,Médecine d'Afrique Noire : 1999, 46 (1)

2- Rev. Afr. Anesth. Med urgence tome 21 n°2-2016

3- Black RE, Cousens S, Johnson HL et al. Global, regional, and national causes of child

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33

Table des matières

Dédicace .................................................................................................................................................. iii

REMERCIEMENTS .................................................................................................................................... iv

HOMMAGES ............................................................................................................................................. v

Liste des singles et abréviation ............................................................................................................... vi

Liste des tableaux ................................................................................................................................... vii

Liste des figures ..................................................................................................................................... viii

Résumé .................................................................................................................................................... ix

Abstract .................................................................................................................................................... x

Sommaire ................................................................................................................................................ xi

Introduction ............................................................................................................................................. 1

PREMIERE PARTIE : PRESENTATION DU CADRE INSTITUTIONNEL .......................................................... 4

I -PRESENTATION DU CADRE D’ETUDE ................................................................................. 4

1.1- Cadre de la formation académique ........................................................................................... 4

1.2- Cadre Technique ......................................................................................................................... 4

DEUXIEME PARTIE : DEROULEMENT DU STAGE ...................................................................................... 8

2.1- Objectif du stage......................................................................................................................... 8

2.1.1- Objectif général ........................................................................................................................ 8

2.1.2- Objectif spécifiques .................................................................................................................. 8

2.2- Travaux effectués par section ................................................................................................... 8

2.2.1. Prélèvement ............................................................................................................................... 8

2.2.2. Différentes analyses effectuées ................................................................................................ 9

2.3. CHOIX DU SUJET .................................................................................................................. 18

TROISIEME PARTIE : ETUDE DU THEME ................................................................................................ 20

3.1. Objectif de l’étude .................................................................................................................... 20

3.2- Synthèse Bibliographique ........................................................................................................ 20

3.2.1. La glycémie ............................................................................................................................. 20

3.2.1.1. Origine du glucose ............................................................................................................... 20

3.2.1.2. Régulation de la glycémie ................................................................................................... 21

3.2.2. Les triglycérides ..................................................................................................................... 23

3.2.3- Paludisme et métabolisme ..................................................................................................... 23

3.3. Matériel et méthode .................................................................................................................. 24

3.3.1. Matériel et Méthodologie ....................................................................................................... 24

3.5. Commentaires ........................................................................................................................... 27

CONCLUSION ......................................................................................................................................... 29


34

SUGGESTIONS ........................................................................................................................................ 30

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUE ........................................................................................................... 31

Table des matières ............................................................................................................................... 33

Documents

Influence du plasmodium sur la glycémie et les