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Le prélèvement biologique :
un échantillon « vivant »
dans un contenant.
B CHAUVINIFSI JANVIER 2014
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on analyser ou détecter dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on analyser ou détecter dans ces
échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Pourquoi prélever des échantillons biologiques ?
ou l’intérêt des analyses….
Art.L. 6211-1.-Un examen de biologie médicale est un acte médical qui concourt à la prévention, au dépistage, au diagnostic ou à l'évaluation du risque de survenue d'états pathologiques, à la décision et à la prise en charge thérapeutiques, à la détermination ou au suivi de l'état physiologique ou physiopathologique de l'être humain.
Ordonnance 2010-49 13/01/2010 ratifiée par la loi 2013-442 du 30 mai 2013 portant reforme de la biologie médicale
Pourquoi prélever des échantillons biologiques ?
ou l’intérêt des analyses….(2).
Prévention de tout risque encouru avant intervention chirurgicale (hémostase….) ou avant mise sous traitement
Dépistage (Hépatite, VIH…..) Diagnostic prénatal (recherche d’une trisomie,…)
Aide au diagnostic devant un syndrome (hémorragique, fébrile……)
Pourquoi prélever des échantillons biologiques ?
ou l’intérêt des analyses….(3).
Simulation des métabolismes dans les tests dynamiques (hyperglycémie provoquée)
Suivi des traitements (AVK, hormones, médicaments, vitamines…..)
Suivi immunitaire d’une patiente (sérologie pour toxoplasmose….)
Aide et proposition au médecin d’un traitement efficace pour un agent pathogène détecté ( identification et antibiogramme,….)
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (1)?
Différents échantillons: Du sang ou ses composants (plasma, sérum et cellules
sanguines, hémocultures)
Des liquides profonds (LCR, LBA….)
Des sécrétions (urines, selles, sueur, ascite…..)
Des fragments de tissus, des biopsies ou des pièces opératoires plus importantes
Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (2)?
Différents analytes: des ions (Ca, K, P….) des glycoprotéines, des lipides (Fibrinogène, albumine….) des hormones (TSH…), des enzymes (cardiaques, hépatiques…)
Différents constituants: des cellules (sanguines, épithéliales…..) des chromosomes, des gènes
Des agents pathogènes: des bactéries (les pneumocoques ou les BK…) des virus (le virus de l’hépatite B , le CMV……..) des parasites (le tænia, la douve du foie……) des champignons…..)
Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (3)?
Des modifications : de notre patrimoine génétique (caryotype, étude
génomique, translocation…….) de nos tissus (présence de cellules tumorales,…….) la présence anormale de cellules d’un liquide dans un autre
(cellules de la moelle osseuse en grande quantité dans le sang,……)
Etc……
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (1)
Les laboratoires représentent plusieurs disciplines:
La BIOCHIMIE avec ses différentes composantes. L’HEMATOLOGIE avec ses deux composantes. L’IMMUNO-ALLERGOLOGIE La PHARMACO-TOXICOLOGIE Le département des INFECTIEUX Le département de PATHOLOGIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE LA GENETIQUE
Chacun d’entre eux étudie tout à la fois le physiologique et le pathologique
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (2) La BIOCHIMIE avec ses différentes
composantes:
La Biochimie de base avec le dosage des ions et molécules, enzymes,
L’Hormonologie avec le dosage des hormones produites par les différentes glandes, et leurs interactions Le Métabolique avec l’étude des différents métabolismes (glucides, lipides ou acides aminés).
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (2)
L’HEMATOLOGIE avec ses deux composantes :
La cytologie : l’étude et le comptage des constituants cellulaires du sang mais aussi de la moelle osseuse,
L’hémostase avec l’étude de la cascade enzymatique permettant le fragile
équilibre entre saignement et thrombose.
Chaque discipline de ce département peut-être amenée à effectuer des recherches en biologie moléculaire pour des pathologies particulières.
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (3)
L’IMMUNO-ALLERGOLOGIE est un laboratoire qui regroupe deux entités:
Le laboratoire d’ Immunologie participe à l’exploration des facteurs liés à l’immunité et au dépistage des pathologies associées.
Le laboratoire d’ ’allergologie permet un dépistage et un suivi
des réactions allergiques.
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (4)
La PHARMACO-TOXICOLOGIE regroupe aussi deux domaines :
La PHARMACOLOGIE qui permet le dosage des médicaments et le suivi des traitements.
La TOXICOLOGIE qui permet le dépistage et l’identification des
toxiques.
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (5)
Le département des INFECTIEUX regroupe trois disciplines
que sont:
La BACTERIOLOGIE
La VIROLOGIE
La PARASITOLOGIE - MYCOLOGIEChaque discipline de ce département peut-être amenée à effectuer
des identifications d’agents pathogènes en biologie moléculaire.
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (6) Le département de PATHOLOGIE CELLULAIRE
ET TISSULAIRE regroupe plusieurs entités que sont :
Le laboratoire d’’histo-cytopathologie Le laboratoire de foetopathologie Le laboratoire de neurobiologie – neuropathologie Le laboratoire de pathologie osseuse Le laboratoire de la biologie de la
reproduction
Quel laboratoire, Quelle discipline
Quelle particularité (7)
Le laboratoire de GENETIQUE :
Utilise différentes techniques pour établir la carte chromosomique ou génomique d’un individu né ou en devenir.
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Quelle réglementation aujourd’hui ?(1)
Les principaux textes:
Loi HPST 2009-879 du 21/07/2009 Art. L. 6221-1. Modifiée par LOI n°2013-442 du 30 mai 2013 - art. 4
«Un laboratoire de biologie médicale ne peut réaliser d’examen de biologie médicale sans accréditation ».
Ordonnance 2010-49 du 13/01/2010 modifiée par la LOI n° 2013-442 du 30 mai 2013 - art. 8
« Aucun laboratoire de biologie non accrédité …… ne peut fonctionner après le 1er novembre 2020 » Il doit être accrédité pour 50% de son activité à compter du
1 novembre 2016 et 100% à compter du 1er novembre 2020
Quelle règlementation aujourd’hui ?(2)
Accréditation par l’Instance nationale d’accréditation = COFRAC (Art. 6221-2.-I)
« Dans un CHU le pôle constitue un laboratoire unique dont le biologiste responsable est le chef de pôle » (Art. L. 6213-8)
Arrêté du 5 août 2010 fixant les références des normes d'accréditation applicables aux LBM
Les normes d’accréditation en vigueur applicables aux laboratoires de biologie médicale prévues à l’article L. 6221-2 sont :
La norme NF EN ISO 15 189 (La norme NF EN ISO 17 025) La norme NF EN ISO 22 870 pour la biologie
délocalisée
Quelle règlementation aujourd’hui ?(3)
Que veut dire accréditation?
« L’accréditation est une attestation délivrée par une tierce partie constituant une reconnaissance formelle de la compétence d’une entité à réaliser des activités spécifiques »
Accréditation ≠ Certification
Que veut dire, pour un laboratoire être accrédité?
Le laboratoire doit prouver que du prélèvement au résultat de l’analyse tout est conforme et réalisé par du personnel informé et compétent.
Quelle réglementation aujourd’hui ?(3)
Un examen de biologie médicale se déroule en trois phases :
1° La phase pré-analytique, qui comprend le prélèvement d'un échantillon biologique sur un être humain, le recueil des éléments cliniques pertinents, la préparation, le transport et la conservation de l'échantillon biologique jusqu'à l'endroit où il est analysé ;
2° La phase analytique, qui est le processus technique permettant l'obtention d'un résultat d'analyse biologique ;
3° La phase post-analytique, qui comprend la validation, l'interprétation contextuelle du résultat ainsi que la communication appropriée du résultat au prescripteur et, dans les conditions fixées à l'article L. 1111-2, au patient, dans un délai compatible avec l'état de l'art.
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (1)
Le respect de la personne prélevée :
IDENTITOVIGILANCE
Un patient =Un nom (et/ou nom de
naissance)+ Un prénom+ Une date de naissance
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (2)
Un prélèvement, c’est un moment approprié
Par exemple : Deux heures après l’injection ou avant la prise d’un médicament
C’est une position du patient appropriée: Par exemple : rénine en position coucher ou debout
C’est un statut physiologique Par exemple: à jeun, enceinte
C’est un site de prélèvement approprié Par exemple: dans le bras opposé à la perfusion ou après purge de l’héparine
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (3)
Un prélèvement, c’est un contenant spécifique
Pot stérile ou non (recueil de LCR, de selles)
Tube avec conservateur ou non (recueil d’urines)
Recueil en atmosphère aérobie ou anaérobie (hémoculture )
Tube contenant un activateur de la coagulation (avec gel ou non)
Tube contenant un anticoagulant spécifique
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (4)
Les différents anticoagulants obtention de plasma après centrifugation
Le K2EDTA ou K3EDTA préserve l’intégrité des populations cellulaires tout en complexant le calcium et donc en l’inhibant.
Le citrate de sodium à 3.8% (rapport citrate/sang 1 volume pour 9 volumes) est utilisé pour les tests d’hémostase et son pouvoir de
complexer le calcium. L’héparinate de lithium favorise l’inhibition du facteur Xa
par l’antithrombine II. Le fluorure de sodium mono iodoacétate est indiqué
dans le dosage de la glycémie car il contient un inhibiteur de la glycolyse.
Le K2EDTA sans élément trace est préconisé pour les dosages en pharmacologie notamment des métaux.
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (5)
Les tubes avec activateurs de la coagulation obtention de sérum après centrifugation
Avec gel
Sans gel
Attention SERUM ≠ PLASMA
SERUM = PLASMA – PROTEINES DE LA COAGULATION
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (6)
Un impératif : L’ordre des tubes de prélèvement
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (7)
Le transport des échantillons : des conditions à respecter
À l’abri de la lumière (vitamines)
A 37°C (cryoglobulines)
Dans la glace (ammoniaque, lactate….)
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques ? (8)
Du bon étiquetage, les règles:
Une étiquette =
un flacon particulier
Attention aux erreurs d’étiquetage
Attention aux erreurs d’étiquetage
Plan de l’exposé
Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons?
Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité?
Quelle réglementation aujourd’hui?
Quelle attention porter aux prélèvements biologiques?
Exemples et non conformités
Exemples et non conformités (1)Le bilan d’hémostase
Bilan d’hémostase pour un patientdont le prélèvement a été fait auNiveau d’une perfusion d’héparine
TP 90%TCA 60/28
ratio 2.14
Temps de thrombine >120/17
Bilan d’hémostase pour un patient correctement prélevé
TP 90%TCA 29/28
ratio 1.03
Temps de thrombine 17/17
Exemples et non conformités (2)La numération
Résultats de cytologie pour un patient dont le prélèvement a été fait au bras de la perfusion
Globules Rouges 1.58 106
Volume Globulaire Moyen 119Hémoglobine 5.1
Résultats de cytologie pour le même patient dont le prélèvement a été correctement réalisé
Globules Rouges 2.71 106
Volume Globulaire Moyen 95Hémoglobine 8.7
Exemples et non conformités (3)Le bilan de biochimie
Madame L. Marie est hospitalisée en médecine interne. L’infirmière a précisésur le bon qu’elle était très difficile à piquer. Son ionogramme donne :
0.66 mmoles/LCalcium
87 µmoles/LCréatinine
20 mmoles/LBicarbonates
106 mmoles/LCl
9.5 mmoles/LK
138 mmoles/LNa
46 g/LProtides
7.2 mmoles/LUrée
5mmoles/LGlucose• Que pouvez-vous dire de ce ionogramme?• - K+ : , Ca
• Quelle explication pouvez-vous évoquer?• -prélèvement sur tube EDTA , ou plutôt
ajout du contenu du tube EDTA dans le tube hépariné (l’EDTA est de l’EDTA dipotassique)
• Que devez-vous faire?• - Discontinuer tout le bilan et
téléphoner pour reprélever
NormalesGlucose4,1-6,1 mmol/L
Urée3,5-7,2 mmol/L
Protides65-80 g/L
Na135-145 mmol/L
K3,5-5 mmol/L
Cl95-105 mmol/L
Bicarbonate23-29 mmol/L
Créatinine50-90 µmol/L
Calcium2,25-2,60 mmol/L
Exemples et non conformités (4)
C’est …..
Un patientUn contenant et
un acheminement appropriés
pour une aide au diagnostic, au traitement…..
Un prélèvementpour une analyse
Merci pour votre écoute
