Le titrage de l’AgHBs: un témoin du statut du patient et de la réponse au traitement

Denis Ouzan Institut Arnault Tzanck, Saint-Laurent-du-Var

Objectifs pédagogiques

Connaitre les problèmes pratiques posés par la prescription des tests quantitatifs de l’antigène HBs

Connaitre l’apport de ce test à la définition

du porteur du virus de l’hépatite B

Connaitre la valeur prédictive de l’évolution du taux de l’antigène HBs dans la réponse au traitement,

la durée de ce traitement et la perte de l’antigène HBs

Liens d’intérêt

BMS Gilead Janssen MSD Roche

Capside : Ag HBc

Génome : ADN partiellement double brin

Enveloppe contenant les protéines de surface : Ag HBs

Particules de Dane Sphérules et tubules

Les particules virales

1 000 à 100 000 fois plus nombreuses

2 tests quantitatifs dans l’hépatite B chronique :

Titre de l’AgHBs

Génome

Enveloppe portant l’Ag HBs

Charge virale

Reflet de l’activité du cccDNA

Reflet de la réplication virale

Détection de l’Antigène HBs Tests qualitatifs disponibles

Architect – Abbott Elecsys – Roche ADVIA Centaur – Bayer Hepanostika – Biomerieux Monolisa – Biorad Diasorin – Murex

Tests quantitatif disponibles

Architect –Abbott Elecsys II – Roche Diasorin – Murex

Degushi et al., J Virol Meth 2004, Brotherton et al, AACCAM 2006

Coût : AG HBS PAR EIA » = B55 (14,85 euros)

AgHBs

Signal

Echantillon

+

Conjugué Réactif + Activation

Tests quantitatifs de l’AgHBs 3 tests quantitatifs commercialisés :

Abbott « Architect HBsAg Qualitative 2 » Roche « Elecsys HBsAg II Quant » DiaSorin « Liaison XL Murex HBsAg Quant »

Principe : immunoenzymatique Résultats: UI/mL

Quantification de l’AgHBs : des limites

Seuils et limites de linéarité des techniques :

Abbott : 0,05 UI/mL à 250 UI/mL (log10 : 2,40)

Roche : 0,05 UI/mL à 52 UI/mL (log10 : 2,11)

DiaSorin : 0,03 UI/mL à 250 UI/mL (log10 : 2,40)

Variabilité des titres :

611 échantillons

43–1950. Multicenter Evaluation of the Elecsys Hepatitis B Surface Antigen Quantitative Assay. B. J. Zacher et al.

Recours à une dilution devenue

depuis peu automatique

Test utilisé en complément de la charge virale

Dans l’hépatite B chronique :

Histoire naturelle Suivi des traitements :

interféron analogues nucléos(t)idiques

Utilisation en pratique clinique

Titrage de l’AgHBs et histoire naturelle

Ag HBs

Ag HBe IgM anti HBc

Contamination Immuno-tolérance

ALAT > N

Ac Anti-HBe

DNA HBV variable

Clairance Mutant pré-C

IgM anti HBc

Immuno-tolérance Clairance

Ag HBe

Ag HBs

ALAT N

Ac Anti-HBe

DNA HBV < 2000 UI/mL

Portage inactif

Titrage de l’AgHBs et histoire naturelle

Ag HBs

Ag HBe IgM anti HBc

Contamination Immuno-tolérance

ALAT > N

Ac Anti-HBe

DNA HBV variable

Clairance Mutant pré-C

Immuno-tolérance Clairance

Ag HBe

Ag HBs

ALAT N

Ac Anti-HBe

DNA HBV < 2000 UI/mL

Portage inactif

Nguyen T et al; Jaroszewicz J et al, J Hepatol 2010

Brunetto M et al. Gastroenterology, 2010;139(2):483-90).

Le titrage de l’AgHBs permet de distinguer les porteurs inactifs du VHB chez des malades de genotype D

Prédiction du Portage inactif

Taux de l’AgHBs Taux de HBV-DNA

<1000 UI/mL <2000 IUI/mL

Population 209

Sensibilité 91%

Spécificité 95%

VPP 88%

VPN

97%

Portage inactif : Titre AgHBs < 1000 UI/mL et ADN du VHB < 2000 UI/mL

Le titrage de l’AgHBs permet de distinguer les porteurs inactifs du VHB

Le titrage de l’AgHBs permet de prédire la perte de l’AgHBs

Tseng et al. Gastroenterology 2011;141:1240-48

1 3 5 7 9 11 13 15 ans

0 20

40

60

80

% Incidence de la perte spontanée de l’AgHBs

AgHBs < 100 UI/ml AgHBs 100-999 UI/ml AgHBs > 1000 UI/ml

Décroissance de l’AgHBs sous traitement

Reijnders et al. J Hepatol 2011;54,449-54

0

-2

-1

0 12 24 36 48 0 12 24 36 48

Semaines Semaines

Del

ta A

gHBs

(log

UI/m

l)

ETV (n=70) Peg-IFN (n=130)

AgHBe (+) AgHBe (-)

< 1500 1500-20.000 > 20.000

58%

0%

42%

*AgH

Be s

éroc

onve

rsio

n 6m

ois

post

trai

tem

ent

Patients AgHBe positif Interféron pégylé alfa-2a : 48 semaines

AgHBs à S12

54%

35%

0%

< 1500 1500-20.000 > 20.000 UI/ml

AgHBs à S24

Intérêt de la décroissance du titre de l’AgHBs sous PEG-IFN pour prédire la seroconversion HBe 6 mois après le traitement

Soonneveld et al .Hepatology 2013; 58: 872 -80

Liaw et al .Hepatology 2011;54:91-100

Prédiction précoce de la non réponse chez les malades AgHBe(-)

Diminution Non (53%) Oui (47%)

AgHBs

Diminution < 2 log (20%) > 2 log (33%) < 2 log (20%) > 2 log (27%)

ADN VHB

Chance de RVS * 0% 24% 25% 39%

Rijckborst et al. Hepatology 2010;52 ; 454--61

102 patients AgHBe-

ADN VHB < 10.000 copies/mL et ALAT normales 6 mois post-traitement

La décroissance du titre de l’AgHBs sous Peg-IFN chez les malades AgHBe negatifs

Perte de l’AgHBs à 5 ans (%)

23%

11%

Continue

Tardive

17%

0%

Précoce

Pas de déclin

51%

16%

5%

28%

Proportion de patients

Décroissance du taux d’AgHBs ≥10 % J0 à S24 S24 à 48

Brunetto MR., AASLD 2009, Abstract 452

oui

non

oui

non

oui

oui

non

non

120 patients AgHBe- traités par PEG-IFNα-2a pendant 48 sem

Lampertico et al. Gut. 2012; 62(2): 290-8.

Résultats 12 mois après l’arrêt du PEG-IFNα-2a

ADN-VHB < 2 000 UI/ml

AgHBs clairance

AgHBs < 10 UI/ml

0

10

20

30

48 semaines 96 semaines

12

29

p = 0,03

Mal

ades

(%)

0

6 0

10

p = 0,06

6/51 15/52 0/51 3/52 0/51 5/52

Hépatite B AgHBe négatif : PEG-IFNα-2a, 96 mieux que 48 semaines ?

Evolution du titre de l’AgHBs (UI/ml) pendant le traitement par PEG IFN chez 4 malades VHB+VHD

OUZAN D et al. J Hepatol .2013;58 :1258–59.

Titra

ge d

e l’A

gHBs

(UI/m

l)

1 an 2 ans 3 ans 4 ans 7 mois 5 ans

Déc

rois

sanc

e m

oyen

ne

de l’

AgH

Bs (

log 1

0 IU

/mL)

Patients traités par ETV ou TDF ayant obtenu une réponse virologique (VR)

Zoutendijk et al. JID 2011;204(3):415-8

Temps de perte de l’AgHBs sous analogues

ALAT basses

projection AgHBe- AgHBe+ AgHBe+ ALAT élevées

Temps jusqu’à perte de l’AgHBs (années) 38.9 36.4 19.5

-2

-1

0

1

Baseline VR VR+1 VR+2

ALAT élevées = activité immunitaire

ALAT basses

Probabilité de rechute après arrêt des analogues selon le titre de l’Ag HBs en fin de traitement

et la charge virale à S12 Probabilité de rechute virologique

HBsAg ≤ 100 IU/ml à la fin du traitement

HBsAg >1000 IU/ml à la fin du traitement

HBsAg 100 -1000 IU/ml à la fin du traitement

Liang Y. AP&T 2011: 34:344

Un taux d’HBsAg ≤ 100 IU/ml à l’arret des analogues est predictif de réponse soutenue

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

0 6 12 18 24

62%

Marcellin P et al Hepatol Int .2013 ;7:88-97

23%

17%

12%

7%

0%

5%

10%

15%

20%

25%

ADN VHB < 2000UI/ml

ADN VHB < 400 cp/mL

Perte AgHBs

Séroconversion HBs

% d

e pa

tient

s à

5 an

s IFN 48 semaines chez les malades AgHBe négatifs : réponse à 5 ans

Add-on of peg interferon to a stable nucleoside regimen led to loss of HBs Ag

in chronic hepatitis HBe Ag negative patients

Denis Ouzan (1), Guillaume Pénaranda (2), Hélène Joly (1), Hacène Khiri (2), Philippe Halfon (2).

(1) Liver unit, Institut Arnault-Tzanck, Saint-Laurent du Var; (2) Alphabio Laboratory, Marseille, FRANCE

•10 patients, AgHBe- ,tous traités par analogues depuis 3 à 8 ans, ADN du VHB indétectable depuis au moins 3 ans

•Rajout du PEG-IFNα-2a 180 µg/sem pendant 96 semaines

Ouzan D et al. J of Clin Virol . 2013.58:713–17

Metavir

Durée du TT par analogues avant IFN J0 S48 S96 S120

A2F2 ADV (6 ans) 50 0 0 0

A2F3 LAM (8 ans ) 123 0 0 0

A3F3 ADV (7 ans) 248 0 0 0

A1F1 ADV (6 ans) 789 0 0 0

A3F3 ADV+ETV (8 ans) 110 87 20 0

A2F3 ETV (3 ans) 7900 120 0 0

A2F4 ETV+ADV (6 ans) 530 380 120 130

A1F2 ADV+ETV (7 ans ) 974 40 115 115

A1F1 LAM+TFV (3 ans) 1320 345 120 100

A2F4 LAM+ADV (8 ans) 1754 1380 1100 1000

Evolution du titre de l’AgHBs (UI/ml) pendant l’ajout du PEG IFN et 6 à 18 mois plus tard

Perte de l’AgHBs chez 4 patients : Séroconversion HBs chez 2 patients

Evolution du titre de l’AgHBs chez les 4 patients ayant perdu l’AgHBs entre 24 et 48 semaines

Baseline 0

100

200

300

400

500

600

700

800

S48 S 120

900 UI/ml

Analogue s + PEG-IFN

Stop PegIFN

Nucleosi(ti)de analogues + PEG-IFN

Evolution du taux de l’AgHBs chez les 6 patients restants qui ont reçu (sauf un) 96 semaines de PegIFN

Ouzan D. et al. J of Clin Virol . 2013; 58: 713 -17

IFNα chez les malades contrôlés par analogues

12 malades VHB+ (Ag HBe - : 9/12) ADN VHB indétectable chez tous les malades traités par analogues

Kittner J M. et al. J of Clin Virol .2012 ; 54: 93-5.

0,01

0,1

1

10

100

1 000

10 000

100 000

J0 S4 S8 S12 S16 S20 S24 S28 S32 S36 S40 S44 S48 FU S4

Titre de l’AgHBs (UI/mL)

Apparition Anti-HBs

Apparition Anti-HBs

- 4,17 log

- 2,90 log

→ 2/12 malades ont eu une perte de l’AgHBs

Evolution du taux d’AgHBs chez 9 malades AgHBe-

Lampertico P, EASL 2012, Abs. 523

Diminution médiane du taux d’AgHBs chez 5 malades AgHBe- traités plus de 6 mois

0 -100

1 2 3 4 5 6

-80 -60 -40 -20

0 20 40 60

Mois

0 %

-30 % -50 %

200

600

1000

1400

0 3 6 9 12 Mois

HBs

Ag le

vels

(UI/m

l)

HBs

Ag le

vels

(%)

Etude rétrospective de 9 malades AgHBe- avec ADN du VHB indétectable depuis au moins 6 mois, traités par interféron pégylé

Interféron pégylé chez les malades traités par analogues

Analogues

Pegasys 180 µg 48 semaines

Analogues 144 semaines

Analogues 48 semaines

≥ 1 an *ADN VHB indétectable

Évaluer l’impact de PegIFN chez des malades AgHBe- controlés par analogues depuis au moins 1 an

Analogues 96 semaines

Evaluer la perte AgHBs

30 centres

Randomisation

L’Ag HBs est connu depuis plus de 40 ans, mais la possibilité de le quantifier est récente

Il faut bien libeller cette prescription: dosage quantitatif de l’ AgHBs

C’est un outil supplémentaire du suivi de l’hépatite B en association avec la charge virale

Conclusions

Conclusions

Ce test quantitatif permet de mieux caractériser le statut du porteur inactif du virus Il permet de prédire la réponse au traitement par IFN, sa durée optimale et la perte éventuelle de l’antigène HBs. Il contribue à l’évaluation de nouvelles stratégies de traitements utilisant une combinaison analogue/interféron

Points Forts 1) La quantification de l’Ag HBs est un nouveau test de suivi de l’hépatite B

complémentaire de la charge virale.

2) Ce test mesure le taux d’enveloppes qui entourent le virus et celui plus

important de la fraction libre

3) Il permet de mieux caractériser le statut du porteur inactif du virus

4) Il permet de prédire la réponse au traitement par interféron, sa durée

optimale et la perte éventuelle de l’antigène HBs.

5) Il contribue à l’évaluation de nouvelles stratégies de traitements

utilisant une combinaison analogues /interféron