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Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le pathologiste Julie Hinsinger Plateforme d’Histologie _ IRIC Les colorations histologiques: colorations de routine et colorations spéciales

Les colorations histologiques · 2015-01-23 · Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le pathologiste Julie Hinsinger Plateforme d’Histologie _ IRIC

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Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le pathologiste

Julie HinsingerPlateforme d’Histologie _ IRIC

Les colorations histologiques: colorations de routine et colorations spéciales

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LES ETAPES depuis le prélèvement jusqu’au bloc

Le plus souvent, le matériel histologique est fixé,inclus, coupé et coloré afin de pouvoir l’observerau microscope. Le matériel peut être prélevé parbiopsie ou provenir d’une pièce opératoire oud’une autopsie.

La fixation a pour buts la conservation desstructures et le durcissement des tissus.Elle doit se faire immédiatement après leprélèvement, par immersion du matériel dans dufixateur (généralement le formaldéhyde = formol).

L’inclusion a pour but la réalisation de coupeshistologiques. Le milieu d’inclusion le plus utiliséest la paraffine.Comme la paraffine est hydrophobe, leprélèvement doit d’abord subir une déshydratation(par immersion dans des bains d’alcool), puis estimmergé dans des bains de toluène puis est infiltrépar la paraffine fondue par chauffage (circulation)avant d’être coulé dans un moule contenant de laparaffine fondue (inclusion).Après refroidissement, on obtient d’un bloc deparaffine, dur, à l’intérieur duquel la pièce prélevéeest incluse.

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LES ETAPES depuis le prélèvement jusqu’au bloc

Circulation du tissu imprégnation à la paraffine

Étapes Réactifs Durée (min) Température (ºC)1 Fixateur 200 < 402 Éthanol 50% 20 453 Éthanol 30 454 Éthanol 40 455 Éthanol 40 456 Éthanol 50 457 Éthanol 100% 50 458 Toluène 45 459 Toluène 45 4510 Toluène 45 4511 Paraffine 60 6012 Paraffine 60 6013 Paraffine 60 60

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LES ETAPES depuis le bloc jusqu’à la lame colorée

Les coupes du bloc de paraffine sont réalisées avec un microtomepermettant d’obtenir des sections (coupes histologiques) de 3 à 5microns d’épaisseur.Les coupes sont recueillies sur des lames de verre et mises à sécher (surla nuit à 40-45°C ou 1H max 60°C).

- La plupart des tissus sont transparents Les colorations réalisées sur lames, accentuent les contrastes pourpouvoir reconnaître différents éléments du tissu.

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LES ETAPES DE LA COLORATION

- Déparaffinage (toluène / xylène - éthanol)

- Hydratation

- Coloration à proprement dit (routine ou spéciale)

- Déshydratation (éthanol)

- Éclaircissement (toluène / xylène)

La paraffine est insoluble dans l’eau et l’alcool, maissoluble dans les hydrocarbures tels que le toluène,xylène.

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Le pathologiste et le choix des colorations

Dans l’hôpital, le pathologiste joue un rôle importantcar c’est à partir de son diagnostic que le traitementsera institué.

La coloration de routine permet au pathologiste dese faire une idée de la pathologie présente et d’avoirune vision globale de la morphologie des tissus(noyau, cytoplasme et collagène).

Il peut ensuite demander à revoir le même tissu maiscette fois avec un élément tissulaire particulier quiaura été mis en évidence de façon spécifique.On parle dans ce cas de colorations spéciales.

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Départements de Pathologie

Ayez les bons outils de travail !!!

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Seule une bonne utilisation de contrôles adéquats permet d’obtenir des résultats explicables et reproductibles en histologie.

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Facteurs influant la distribution des colorants dans les tissus et la qualité de la lame en général

Fixateur (pH, VOLUME, TEMPS), colorants (concentration, pureté(ACS_American Chemical Society), filtration, changement régulierdes bains), l’épaisseur de coupe du tissu (trimming adéquat).Chaque étape (en amont ) est importante pour l’obtention dumatériel d’analyse.

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Les colorations de routine (topographiques)H&E

Les solutions d’hématoxyline contiennent de l’hématéïneet un mordant métallique (sels d'aluminium ou de fer).Ce mordant est responsable de la coloration. L’éosinecolore les cytoplasmes en rose et les fibres dans unegamme de roses plus ou moins vifs selon l’acidophilie desdifférents éléments.

collagène ................................................... rose pâlemuscle ..................................................... rose foncécytoplasme acidophile ..................................... rougebasophiles .................................................... pourprenoyaux ............................................................... bleuérythrocytes .......................................... rouge cerise

Rein

Poumon

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Les colorations de routine (topographiques)H&E

-La chromatine devrait être bleue pourpre et biendistincte.

-Les Nucleoles devraient être violacés.

Microscopic Quality Control of Hematoxylin and Eosinhttp://www.dako.com/08066_12may10_webchapter15.pdf

Polymorphonucléaire

Plasmocytes

Muqueuse colique

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Les colorations de routine (topographiques)HPS

Hématoxyline Phloxine Safran (milieu francophone)

collagène ............................................ Jaune orangémuscle ............................................................... rosecytoplasme……………...................................... rosenoyaux ............................................................... bleuérythrocytes.................................................... Rouge

JGH, HMR, Sacré Cœur bien que francophonesdemandent le HE.

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Colorant / Solvant

Temps

Xylène 5’00’’Xylène 5’00’’ABS ETOH 2’00’’ABS ETOH 2’00’’ABS ETOH 2’00’’Lavage 0’20’’Lavage 1’00’’Hématoxyline 0’55’’Lavage 0’20’’Lavage 0’20’’Bicarbonate Sodium 0.5%

0’20’’

Lavage 0’15’’Lavage 3’30’’Éosine 0’45’’ETOH 95% 0’30’’ABS ETOH 0’40’’ABS ETHO 2’40’’Xylène 2’00’’Xylène 2’00’’Xylène 2’00’’

Colorant / Solvant

Temps

Xylène 3’00’’Xylène 3’00’’ABS ETOH 2’00’’ABS ETOH 2’00’’ABS ETOH 2’00’’Lavage 0’10’’Lavage 0’40’’Hématoxyline 0’50’’Lavage 0’25’’Bicarbonate Sodium 0.5%

0’12’’

Lavage 0’15’’Lavage 3’00’’Phloxine 0’15’’Lavage 0’18’’ETOH 95% 0’30’’ABS ETOH 0’30’’ABS ETHO 0’45’’Safran 5’00’’ABS ETOH 0’45’’ABS ETHO 0’45’’ABS ETOH 0’45’’Xylène 0’45’’Xylène 0’45’’Xylène 1’00’’

Hématoxyline – Phloxine – Safran

Hématoxyline – Éosine

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Les colorations spéciales

Les colorations spéciales sont réalisées pour préciser desstructures ou substances suspectées par le pathologistelors de son analyse initiale sur les coupes de techniquestandard.

Les techniques histochimiques sont basées sur desréactions biochimiques qui permettent de mettre enévidence in situ (= dans les tissus), différents constituants(lipides, glucides, protéines, acides nucléiques, métaux,etc).

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Les fibres conjonctives comprennent les fibres decollagène, de réticuline et les fibres élastiques.

Les fibres de collagène sont les plus abondantes des 3.On en trouve partout dans l’organisme sauf dans lesystème nerveux central.

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Trichrome de MassonCette coloration met en évidence les fibres de collagènes. Cette méthode est très populaire. Utile dans l’étude de la pathologie du cœur (infarctus), foie (cirrhose ) , rein (fibrose glomérulaire)

La plupart des recettes colore en rouge la kératine et les fibres musculaires, en bleu ou vert le collagène et l’os, en rouge-clair ou rose les cytoplasmes, et en noir les noyaux de cellules.

Résultats:Noyaux, chromatine et nucléole…..…..….bleu foncé à noirCytoplasme……………………………………………………………rougeGlobules rouges……………………………………………………..rougeCollagène…………………………………………………………………Bleu

Artère

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Trichrome de MassonCette coloration met en évidence les fibres de collagènes. Cette méthode est très populaire. Utile dans l’étude de la pathologie du cœur (infarctus), foie (cirrhose ) , rein (fibrose glomérulaire)

La plupart des recettes colore en rouge la kératine et les fibres musculaires, en bleu ou vert le collagène et l’os, en rouge-clair ou rose les cytoplasmes, et en noir les noyaux de cellules.

Résultats:Noyaux, chromatine et nucléole……….….bleu foncé à noirCytoplasme……………………………………………………………rougeGlobules rouges……………………………………………………..rougeCollagène…………………………………………………………………Bleu

Déparaffiner et réhydraterMordancer au Bouin 1H 56°CRefroidir et laver 20mnHematox. Weigert filtrée LaverBiebrich scarlet fuchsine acide 2mnLaverAc. Phosphomolibdique-phosphotungstique 10mnBleu aniline 30-40 secRincerAcide acétique 1%Déshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Cette coloration met en évidence les fibres de collagènes. Elle est parfois demandée en pathologie cardiovasculaire.

MOVATT

Noyaux ………………………………………………………….bleu à noirCytoplasme ……………………………………………………………rouge Muscle…………………………………………………………………...rougeCollagène et fibres réticulaires-………………..jaune verdatreFibrine ………………………………………………………rouge intenseMucine et substance de fond……….…………….bleu limette

Os

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Cette coloration met en évidence les fibres de collagènes. Elle est parfois demandée en pathologie cardiovasculaire.

MOVATT

Noyaux ………………………………………………………….bleu à noirCytoplasme ……………………………………………………………rouge Muscle…………………………………………………………………...rougeCollagène et fibres réticulaires.………………..jaune verdâtreFibrine ………………………………………………………rouge intenseMucine et substance de fond……….…………….bleu limette

Déparaffiner et réhydraterBleu Alcian 15mnLaver 5mnAlcool alcalin 1HLaver 15mn et rincerHématoxyline 12-15 mnRincer et différencier dans chlorure de fer 2% 30sThiosulfate sodium 1mnLaverCrocéine scarlet – ac. Fuchsine 2mnRincer à l’eau distillée pls foisRincer Acide acétique 0.5%5% Ac. Phosphotungstique aqueux 2X 5mnRincer Acide acétique 0.5%Rincer ds 3 bains ETOH abs.Safran 10mnDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Coloration de VerhoeffElle met en évidence le réseau de fibres élastiques.Cette coloration est utile dans le cadre des diagnostics de lésions dégénératives congénitales ou acquises (vergetures, élastose solaire), de vasculite (peut être demandée pour mettre en évidence la limitante élastique des vaisseaux), d’artérite temporale. Cette méthode est basée sur la coloration des fibres élastiques par l’hématéine combinée à l’iode et au chlorure ferrique.

Résultats:Noyaux………………………………………………………...….gris à noirFibres élastiques……………………………………………………..noirCytoplasme……………………………..…selon contre-colorationGlobules rouges………………………… selon contre-colorationCollagène……………………………………selon contre-coloration

Peau

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

Coloration de VerhoeffElle met en évidence le réseau de fibres élastiques.Cette coloration est utile dans le cadre des diagnostics de lésions dégénératives congénitales ou acquises (vergetures, élastose solaire), de vasculite (peut être demandée pour mettre en évidence la limitante élastique des vaisseaux), d’artérite temporale. Cette méthode est basée sur la coloration des fibres élastiques par l’hématéine combinée à l’iode et au chlorure ferrique.

Résultats:Noyaux………………………………………………………...….gris à noirFibres élastiques………..……………………………………………..noirCytoplasme……………………………..…selon contre-colorationGlobules rouges………………………… selon contre-colorationCollagène……………………………………selon contre-coloration

Déparaffiner et réhydraterHématéine Verhoeff 30mn coupes noirRincer à l’eau distillée pls foisDifférencier au chlorure ferrique 2%Laver rapidementETOH 95%RincerColorer au Van Gieson ou ÉosineDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

La RéticulineCette coloration marque les fibres réticuliniques dustroma et permet de préciser l'architecture des tumeurs(exemple : architecture folliculaire).Elle est très utile dans les cas où la tumeur est nécrosée.C'est une coloration clé dans l’étude des lésions quitouchent les organes dont la trame est riche en réticulinecomme le foie (fibrose, montre le collagène plus jeune),la rate et les ganglions lymphatiques (trame réticuliniqueconstituant le squelette), la moelle osseuse(myélofibrose).

Résultats:Fibres de réticuline…………………………………………………...noir

Poumon

vaisseau

Plèvre

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des fibres conjonctives

La RéticulineCette coloration marque les fibres réticuliniques dustroma et permet de préciser l'architecture des tumeurs(exemple : architecture folliculaire).Elle est très utile dans les cas où la tumeur est nécrosée.C'est une coloration clé dans l’étude des lésions quitouchent les organes dont la trame est riche en réticulinecomme le foie (fibrose, montre le collagène plus jeune),la rate et les ganglions lymphatiques (trame réticuliniqueconstituant le squelette), la moelle osseuse(myélofibrose).

Résultats:Fibres de réticuline…………………………………………………...noir

Déparaffiner et réhydraterRincer à l’eau distilléeAc. Périodique 0.25% mordancer 15mnEau distillée Solution Hortega 10-15mn 40°CEau distillée + Ammoniaque 1% agiterFormol 1%RincerChlorure or 0.2%RincerThiosulfate de sodium 5% 1mnLaverContre-colorer rouge nucléaire ou phloxine(0.1% alum sulfate) 5mnDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des glucides

Le PASLa coloration PAS (pour Periodic Acid Shiff) met enévidence les mucines (épith. à bordures en brosse), lesmembranes basales, le glycogène ainsi que les filamentset spores mycéliens.La réaction à l’acide périodique de Schiff correspond àl’oxydation de certains polysaccharides par l’acidepériodique, révélée par une coloration rouge.

Le PAS est couramment associé à la diastase (PAS-diastase) qui digère le glycogène mais laisse persister lacoloration rosée des mucines intra ou extracellulaires.

Dans les tumeurs indifférenciées, cette coloration est utilepour orienter le diagnostic vers une origine glandulaire(adénocarcinome). Elle est demandée dans le diagnosticde pathologies du foie et rein.

Rein

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des glucides

Le PASLa coloration PAS (pour Periodic Acid Shiff) met enévidence les mucines (épith. à bordures en brosse), lesmembranes basales, le glycogène ainsi que les filamentset spores mycéliens.La réaction à l’acide périodique de Schiff correspond àl’oxydation de certains polysaccharides par l’acidepériodique, révélée par une coloration rouge (fixation dela leucofuchsine de Schiff).

Le PAS est couramment associé à la diastase (PAS-diastase) qui digère le glycogène mais laisse persister lacoloration rosée des mucines intra ou extracellulaires.

Dans les tumeurs indifférenciées, cette coloration est utilepour orienter le diagnostic vers une origine glandulaire(adénocarcinome). Elle est demandée dans le diagnosticde pathologies du foie et rein.

Déparaffiner et réhydraterLaverAc. Périodique 1% 10mnEau distillée Réactif de Schiff 30mnLaverHématox. Harris + Ac. Acétique 30secLaver0.5% HCl / ETOH 70% 15 secLaver0.5% Carbonate de Sodium 1mnLaver 10mnDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des glucides

Le Bleu AlcianCette coloration est souvent demandée en complémentau PAS, PAS-diastase car il révèle les mucines acides.

Résultats: les mucosubstances acides deviennent bleuessur fond rosé

Le PASM Le PASM (Methanamine Argent) met en évidence les membranes basales (glycolipides), en particulier celles des glomérules et tubules rénaux.

Glandes à mucus

Rein

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des glucides

Le Bleu AlcianCette coloration est souvent demandée en complémentau PAS, PAS-diastase car il révèle les mucines acides.

Résultats: les mucosubstances acides deviennent bleuessur fond rosé

Le PASMLe PASM (Methanamine Argent) met en évidence les membranes basales (glycolipides), en particulier celles des glomérules et tubules rénaux.

Déparaffiner et réhydraterAc. Acétique 3% 5mnBleu alcian pH 2.8 30mnRincer Ac. Acétique 3%Eau distilléeCarbonate de sodium 0.3% 30mnLaverAc. Périodique 0.5% 5mnEau distilléeColeman 15mnLaver 10mnHématox. Harris 1mnDifférencier alcool acide 1% 3secLaverDéshydrater, monter

Mucopolysaccharides faiblement acides: bleuNoyaux: BleuGlycogène : rose intense

Déparaffiner et réhydraterAc. Périodique 15mnRincerMéthanamine-nitrate argent 2H 55°CRincerChlorure or 0.2% 2mnLaverThiosulfate de sodium 3% 2mnLaverNuclear Fast Red 5mnDéshydrater, monter

Glomérules : noirFond : rose

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des lipides

L’huile rouge ou Oil RedOSe fait sur les coupes à congélation.Montage aqueux.Elle est surtout demandée pour les pathologies de la glande parathyroïde renfermant des acini et des vacuoles graisseuses. Ou encore pour visualiser les adénomes ou le stroma graisseux tend à réduire donc est ORO -

RésultatsLipides liquides et semi-liquides………………………………rougeNoyaux………………………………………………………………………Bleu

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des lipides

L’huile rouge ou Oil RedOSe fait sur les coupes à congélation.Montage aqueux.Elle est surtout demandée pour les pathologies de la glande parathyroïde renfermant des acini et des vacuoles graisseuses. Ou encore pour visualiser les adénomes ou le stroma graisseux tend à réduire donc est ORO -

RésultatsLipides liquides et semi-liquides………………………………rougeNoyaux………………………………………………………………………Bleu

Fixer Formaline Tamp 10%Eau distilléePropylène Glycol 2X 5mnORO 7mn (agiter)85% propylène Glycol 3mnEau distilléeHématoxyline 1mnLaverBicarb. SodiumRincerMontage aqueux

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des dépôts de calcium

Von Kossa Les sels de calcium sont transformés en sels d’argent réduit ensuite en forme métallique, indiquant les sites de calcification. Pe calcifications du sein (dystrophiques)

Rouge alizarinMet en évidence le calcium tissulaire. Le calcium est impliqué dans la formation d’une laque.

Corps vtbx embryon souris

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des dépôts de calcium

Von Kossa Les sels de calcium sont transformés en sels d’argent réduit ensuite en forme métallique, indiquant les sites de calcification. Pe calcifications du sein (dystrophiques)

Rouge alizarinMet en évidence le calcium tissulaire. Le calcium est impliqué dans la formation d’une laque.

Déparaffiner et réhydraterNitrate d’argent 60mn (papier aluminium sous lampe à 8po de la solution)LaverThiosulfate de sodium 2mnEau distilléeContre-colorer Hématox ou rouge nucléaireRincerDéshydrater, monter

Sels calcium: noirNoyaux: rouge ou bleu

Déparaffiner et réhydraterRouge alizarin 2% pH 4.1 2mnRincerContre-colorer Fast GreenDéshydrater, monter

Sels calcium: orange-rougeFond: vert

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Les colorations spéciales

Mise en évidence de l’amyloide

Le Rouge Congo

Cette coloration marque en rouge les dépôtsd'amylose. Il présente une biréfringence rouge-verteen lumière polarisée.Ces dépôts sont souvent présents dans les carcinomesmédullaires de la thyroïde et parfois dans lesplasmocytomes et myélomes.

Les tissus le plus souvent touchés par l’amyloidose sontle cœur (défaut de contractibilité), la paroi desvaisseaux, les reins, la rate, le foie et les surrénales.(accumulation extracellulaire)

RésultatSAmyloide………………………………..rose à rougeNoyaux……………………………………………Bleu

Coeur

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Les colorations spéciales

Mise en évidence de l’amyloide

Le Rouge Congo

Cette coloration marque en rouge les dépôtsd'amylose. Il présente une biréfringence rouge-verteen lumière polarisée.Ces dépôts sont souvent présents dans les carcinomesmédullaires de la thyroïde et parfois dans lesplasmocytomes et myélomes.

Les tissus le plus souvent touchés par l’amyloidose sontle cœur (défaut de contractibilité), la paroi desvaisseaux, les reins, la rate, le foie et les surrénales.(accumulation extracellulaire)

RésultatSAmyloide………………………………..rose à rougeNoyaux……………………………………………Bleu

Déparaffiner et réhydraterRouge congo 45-60mnRincer 2-3XDifférencier à l’alcool alcalin 3secRincerContrecolorer Hématoxyline 3mnLaverDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des micro-organismes

La coloration de ZiehlCette coloration est utilisée pour la recherche de Bacilles Acido-Alcoolo-Résistants . Elle est requise en cas de suspicion clinique ou histologique de tuberculose, d’infections par mycobactéries atypiques chez des sujets atteints de SIDA (bacilles incurvés et perlés).

RésultatsBacilles acido-alcoolo-résistants……………..rougeGl. Rouges……………………………………jauneFond……………………………………....Bleu pâle

Déparaffiner et réhydraterCarbol fuchsine sur lame 30mnLaverDécolorer à ac. Sulfurique roseLaver 8mnContrecolorer bleu de méthyl 30secLaverDéshydrater, monter

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des micro-organismes

Le GrocottCette coloration met en évidence les micro-organismessoit les levures ou champignons (C. Albicans) etparasites. Les glucides de la paroi des champignons sonttransformés en aldéhydes par oxydation.

GramTrès utilisée en bactériologie médicale; elle permet decolorer les bactéries et de les distinguer par leur aptitudeà fixer le violet de gentiane Gram + ou la fuchsine Gram -.

La coloration de Gram est fondée sur l'action successive d'uncolorant d'aniline, le cristal violet, d'iode puis d'un mélanged'alcool et d'acétone. Dans un premier temps, le colorantpénètre dans la paroi et le cytoplasme. Dans un second temps,l'iode réagit avec le colorant et le rend insoluble. La perméabilitéplus grande des bactéries à Gram négatif à l'alcool permet ladécoloration. Les bactéries à Gram positif restent colorées enviolet ou mauve. Une contre-coloration (par exemple en rose)permet de visualiser à nouveau, les corps cellulaires desbactéries à Gram négatif.

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des micro-organismes

Le GrocottCette coloration met en évidence les micro-organismessoit les levures ou champignons (C. Albicans) etparasites. Les glucides de la paroi des champignons sonttransformés en aldéhydes par oxydation.

GramTrès utilisée en bactériologie médicale; elle permet decolorer les bactéries et de les distinguer par leur aptitudeà fixer le violet de gentiane Gram + ou la fuchsine Gram -.

La coloration de Gram est fondée sur l'action successive d'uncolorant d'aniline, le cristal violet, d'iode puis d'un mélanged'alcool et d'acétone. Dans un premier temps, le colorantpénètre dans la paroi et le cytoplasme. Dans un second temps,l'iode réagit avec le colorant et le rend insoluble. La perméabilitéplus grande des bactéries à Gram négatif à l'alcool permet ladécoloration. Les bactéries à Gram positif restent colorées enviolet ou mauve. Une contre-coloration (par exemple en rose)permet de visualiser à nouveau, les corps cellulaires desbactéries à Gram négatif.

Déparaffiner et réhydraterAc. Chromique 1HLaverBisulfite de sodium 1% 1mnLaverEau distillée 3XMéthanamine nitrate argent 60°C 1HEau distilléeChlorure or 2-5mnRincerThio. Sodium 2% 2-5mnLaver 3mnVert lumière 0.03% 30secDéshydrater, monter

Champignons: noirMycélium : vieux roseMucine : grisFond: vert

Déparaffiner et réhydraterRincerViolet de gentiane 1mnRincerGram Iodine 1mnRincer et sécherDécolorer Éthyle éther acétoneFuchsine 1mnLaver et sécherTremper dans Acétone, puis acétone picrique jaune roséRincer à l’acétone puis acétone-xylèneDéshydrater, monter

Gram + : bleuGram - : rouge

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Les colorations spéciales

Mise en évidence des pigments et précipités

La coloration de PerlsElle étudie le métabolisme du fer. Met en évidence lescomplexes insolubles contenant du fer: hémosidérine,mitochondries surchargées en fer.Elle est utile dans certaines hématopathologies(myélodysplasie) ou les pathologies hépatiques.Caractérise d’anciennes cicatrices.

Le bleu de Prusse ou le bleu de Turnbull peuventégalement mettre en évidence le fer.

RésultatsSels ferriques (Hémosidérine)……………..……………………BleuNoyaux et cytoplasme……………………………..………………Rosé

Foie

Déparaffiner et réhydrater2% potassium ferrocyanide +2% HCl (même volume)LaverNuclear Fast Red 3mnEau distilléeDéshydrater, monter

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Seule une bonne utilisation de contrôles adéquats permet d’obtenir des résultats explicables et reproductibles en histologie.

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http://www.humpath.com/Acute-inflammation

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http://www.qualite-pathologie.com/fr/accueil/accueil.html

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http://www.bristol.ac.uk/vetpath/cpl/histmeth.htm#Top

Warthin–Starry stain(spirochetes)

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http://library.med.utah.edu/WebPath/webpath.html#MENU

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http://webapps.fundp.ac.be/umdb/histohuma/histohuma/color/index.php

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http://www.hoslink.com/histo/histo_recipes_index.htm

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http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-biology/hematology-and-histology/learning-center/stain-expert.html

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http://www.histo.iric.ca

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Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le pathologiste

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