Lesmarqueurslymphatiques:éléments-clésdelarésistancedes

médulloblastomesauxtraitements?

SoniaMARTIAL(IRCAN,NICE)

BiennaledeCancérologie deMONACO

1er février 2018

1

Adapté deGajjar etal,2015,J.Clin.Oncol.33:2986

M- -

M+

M+

M+++

Hétérogénéité génétiquedesmédulloblastomes

2

Traitementdumédulloblastome

• Chirurgie+radiothérapie+chimiothérapie• 30%derésistanceautraitement récidive

3

Médulloblastomeinvasif

VaisseauxsanguinsAngiogenèse

VaisseauxlymphatiquesLymphangiogenèse

VEGFC

P<0.05

P<0.01

4

Groupe 3(56) Groupe 4(91) SHH(59)

Expression

géniqu

e(unitéarbitraire)

LeVEGFC :marqueurdiagnostiquedel’agressivité

M- -

M+

M+

M+++

L’expressionduVEGFC,l’acteurmajeurdudéveloppementdesvaisseauxlymphatiques,semble

corréléeàl’agressivitédumédulloblastome.

Marquage lymphatique*dans lestumeurs(collab.F.Burel-Vandenbos)

**

*

*

*

PatientSHH Patientmétastatique Patientmétastatique

*

Danslesmédulloblastomeslesplusagressifs,desvaisseaux

lymphatiquessemblentêtreenmesuredesedévelopper.

*Marquage à lapodoplanine (PDPN)

6

SHH Gp3Gp4

Pronostic : Intermédiaire Intermédiaire Mauvais

CorrélationLyve-1/surviedupatientcollab.S.Clifford(Newcastle)

Survieto

talecu

mulée

Survieto

talecu

mulée

Survieto

talecu

mulée

Années AnnéesAnnées

N=56p=0.002 N=86p=0.066N=53p=0.017

051015051015 05101520

0.00.20.40.60.81.0

0.00.20.40.60.81.0

0.00.20.40.60.81.0

faible

faible

faible

élevéélevé

élevé

SurvieenfonctiondeLyve-1(SHH) SurvieenfonctiondeLyve-1(Grp4) SurvieenfonctiondeLyve-1(Grp3)

Seul,unmarqueurlymphatiquenepeutpasêtreutilisécommemarqueurpronostiquedel’évolutiond’unetumeur.

Modèlesd’étudeinvitro

7Daoy

HD-MB03

Daoy

0 2 4 6 8 100

200

400

600

800

1000

Jours après ensemencement

Nom

bre

de c

ellu

les

(vs

jour

1)

Daoy

* * *

*

*

***HD-MB03

Daoy

HD-MB03

0

1000

2000

3000

VEG

FC (p

g/m

l/106

cellu

les/

48 h

eure

s)

p<0.05

Daoy

HD-MB03

0

20

40

60

80

100

AR

Nm

VEG

FC (u

nité

arb

itrai

re)

p<0.001

8

PhénotypedescellulesDaoy et HD-MB03

HD-MB03

Daoy

Daoy

HD-MB03

L’expressiondeVEGFCestcorréléeauxcapacitésproliférativeset

migratoiresdescellules.

ProliférationdescellulesDaoy VEGFCKO

Daoy

HD-MB03

0 2 4 6 8 100

100

200

300

400

Jours après ensemencement

Nom

bre

de c

ellu

les

(vs

jour

1)

Proliferation of Daoy-Luc VEGF-CKO clones

Ctl

*

*

***

*

*

*

K23

K27

*

10

MigrationdescellulesDaoy VEGFCKO

Contrôle K23 K27

Ctl K23 K270

20

40

60

80

Mig

ratio

n ce

llula

ire

(uni

té a

rbitr

aire

) p<0.01

p<0.0001

Daoy

L’éliminationduVEGFCmodifielesphénotypesprolifératifetmigratoire

descellulesdeMB.

Ctl

CbPt Eto

CbPt + E

to0

2

4

6

8

VE

GFC

(vs

Ctl)

**

********

Effetdestraitementsderéférence Daoy

0 Gy 32 Gy0

1

2

3

4

5

VEG

FC (v

s 0

Gy)

***

Irradiationphotons Traitementschimiothérapeutiques

LestraitementsinduisentlaproductiondeVEGFCparlescellulesdeMB.

Daoy

Conclusions

Chez le patient :Ø Corrélation entre l’expression du VEGFC, l’acteur majeur du

développement des vaisseaux lymphatiques, et l’agressivité dumédulloblastome.

Ø Développement de vaisseaux lymphatiques dans lesmédulloblastomes agressifs.

Ø Rôles opposés des vaisseaux lymphatiques selon le contexte

In vitro :Ø Corrélation entre l’expression de VEGFC et l’agressivité des

cellules de MB.Ø Induction de la production de VEGFC par les traitements de

référence.

13

EquipeAngiogenèseNormaleetPathologique : GillesPAGES

Roser BUSCAAudreyCLARENYannick COMOGLIOLorenza DIIANNIJérôme DOYENMaeva DUFIESAnaïs HAGEGERitaHANNA

Imène KROSSAPhilippeLENORMANDSoniaMARTIALWillian MEIRAPapaDiogop N’DIAYECercina ONESTOJulien PAROLAJacquesPOUYSSEGUR

Roser BUSCAAudreyCLARENYannick COMOGLIOLorenza DIIANNIJérôme DOYENMaeva DUFIESAnaïs HAGEGERitaHANNA

Imène KROSSAPhilippeLENORMANDSoniaMARTIALWillian MEIRAPapaDiogop N’DIAYECercina ONESTOJulien PAROLAJacquesPOUYSSEGUR

ProliférationdecellulesHD-MB03multi-irradiées

Cell

prol

ifera

tion

(fold

vs

day

1)

16

Daoy

HD-MB03

Milieuclassique Milieuconditionné

InductionoftubeformationinMBcelllines Daoy

HD-MB03

Hétérogénéité génétique desmédulloblastomes

17

Adapté deGajjar etal,2015,J.Clin.Oncol.33:2986

M- -

M+

M+

M+++

18

ProductiondeVEGFCparlescellulesdeMBrésistantes

DAOY

DAOY Res

HD-MB03

HD-MB03

Res

0

1000

2000

3000

4000

5000VE

GFC

(pg/

ml/1

06 cel

lule

s/48

heu

res)

p < 0.001

19

Group3(56)

Group4(91)

SHH(59)

Gen

eam

ount(a.u.)

Lymphangiogenesisgenesandtumorgroup

VEGFCP<0.05

P<0.01

PROX1

LYVE1 VEGFR3

P<0.001

P<0.001

P<0.05

P<0.001

P<0.001

P<0.001

P<0.001