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ACQUITY UPLC H-Class Bio システムガイド リビジョン A Copyright © Waters Corporation 2010 All rights reserved

ACQUITY UPLC H-Class Bio - Waters Corporation...ACQUITY UPLC® H-Class Bioシステムを操作する際は、標準の品質管理(QC) 手順とこ のセクションのガイドラインに従ってください。適用される記号

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ACQUITY UPLC H-Class Bio

システムガイド

リビジョン A

Copyright © Waters Corporation 2010All rights reserved

著作権表示

© 2010 WATERS CORPORATION. 米国およびアイルランド にて印刷。著作権保有。発行

者の文書による許諾がない限り、いかなる形でも本書の全部または一部を複製するこ とはできません。

本書の内容は予告なしに変更される場合があり 、また弊社の責任を示すものではあり ません。本書に万一誤り があった場合、Waters Corporation は責任を負いかねますのでご了承く だ

さい。本資料は、発行時点においては完全で正確なものと確信しており ます。本書の使用に関連して、または本書の使用結果と して発生する偶発的または結果的な損害に対して、弊社は責任を負いません。

商標

ACQUITY、 ACQUITY UPLC、 UPLC、および Waters は Waters Corporation の登録商標

です。 Auto•Blend Plus、 eCord、 Empower、 i2Valve、 LAC/E、 MassLynx、および「 THE SCIENCE OF WHAT’S POSSIBLE.」 は Waters Corporation の商標です。

MP35N は Hamilton Precision Metals の登録商標です。

PEEK は、 Victrex Corporation の商標です。

TRITON は、 Union Carbide Corporation の商標です。

TWEEN は、 ICI Americas, Inc. の商標です。

他のすべての登録商標または商標は、 商標所有の各社に所有権があ り ます。

ii

お客様のご意見について

本マニュアルの誤りや、 本マニュアルの改善に関するその他のご意見は、 Waters テクニ

カルコ ミ ュニケーシ ョ ン部にお知らせください。お客様の本書に対するご要望をよ り良く理解し、今後も本書の正確さ と使いやすさを向上してゆく こ とができるよ うに、ご協力をお願いいたします。

お客様よ り頂いたご意見は、 慎重に検討させていただきます。 担当窓口は[email protected] です。

ウォーターズへの問い合わせ

Waters®製品へのご要望、 または使用、輸送、取り外し、および廃棄に関する技術的なご

質問は、 Waters までお問い合わせください。 インターネッ ト、 電話、 または郵便でお問

い合わせいただけます。

Waters の連絡先情報:

問い合わせ方法 情報

インターネッ ト 世界各国の Waters の連絡先情報については、 Watersの Web サイ ト www.waters.com をご覧ください。

電話およびファ ッ クス 電話 : フ リーダイヤル 0120-800-299ファ ッ クス : 東京 03-3471-7118、 大阪 06-6300-1734

住所 日本ウォーターズ株式会社

〒 140-0001東京都品川区北品川 1 丁目 3 番 12 号

第 5 小池ビル

iii

安全に関する注意事項

Waters の装置と デバイスで使用する試薬およびサンプルの中には、化学的、生物学的、お

よび放射線学的な危険性を引き起こすものもあ り ます。ご使用になられるすべての物質に対して、潜在的な危険有害性を把握しておく必要があ り ます。必ず優良試験所基準 (GLP)に従い、 組織の安全担当者から適切なガイダンスを受けてください。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムに固有の注意事項

高電圧による危険

安全に関する勧告

総合的な警告および注意の一覧については、 付録 A を参照して ください。

警告:

• 感電防止の観点から、 質量分析計の保護パネルは外さないでく ださい。 保護パネルで覆われている構成部品をユーザーがメンテナンスするこ とはできません。

• 感電( 致命的ではない) を防ぐため、装置が運転のと きには、高電圧警告記号で示されている部分には触れないでく ださい。このよう な部分に触れる場合は、あらかじめ装置をスタンバイモードにして ください。

iv

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの操作

ACQUITY UPLC® H-Class Bio システムを操作する際は、 標準の品質管理 (QC) 手順と こ

のセクシ ョ ンのガイ ド ラ インに従ってください。

適用される記号

対象読者および目的 このガイド は、 ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置を設置、操作、およびメ ンテナンスする

ユーザーを対象と しています。 このガイ ドでは、システムのテク ノ ロジーと操作の概要を説明しています。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの用途 Waters の ACQUITY UPLC H-Class Bioシステムは研究専用であり 、診断アプリ ケーショ

ン用ではあ り ません。

記号 意味

製造者

EC (欧州共同体) の認定代理人

製造された製品が、 該当するすべての欧州共同体指令に準拠しているこ とが確認されています。

オース ト ラ リ アの C-Tick EMC 規格

製造された製品が、 該当するすべての米国およびカナダの安全要求事項に準拠しているこ とが確認されています。

説明書をお読みください

v

キャリブレーション LC システムのキャ リブレーシ ョ ンを行うには、少なく と も 5 つの標準試料を使用して条

件に合った校正メ ソ ッ ドに従い、 検量線を作成します。 標準試料の濃度範囲は、 QC サン

プル、 低濃度サンプル、 および高濃度サンプルの全範囲を含むよ うに設定して ください。

質量分析計をキャ リブレーシ ョ ンする際には、 キャ リブレーシ ョ ンする装置のオペレーターズガイ ドのキャ リブレーシ ョ ンのセクシ ョ ンを参照して ください。 装置にオペレーターズガイ ドではな く、 概要およびメ ンテナンスガイ ドが付属している場合、 キャ リブレーシ ョ ンの手順については、 装置のオンラインヘルプシステムをご覧ください。

品質管理 化合物の濃度が通常の値よ り も低いレベル、通常濃度、および通常よ り も高いレベルの 3つの品質管理 (QC) サンプルを定期的に分析してください。 QC サンプル結果が許容範囲

内であるこ とを確認し、 毎日、 分析のたびに精度を評価して ください。 QC サンプルが範

囲外のと きに収集されたデータは、無効となる場合があ り ます。装置が適切に実行されるこ とが確認されるまで、 これらのデータをレポート しないでください。

ISM 分類

ISM 分類:ISM グループ 1 クラス Bこの分類は、CISPR 11、工業・ 科学・ 医療用 (ISM) 機器の要件に従って指定されています。

グループ 1 の製品分類は、その機器の動作に必要な伝導的に結合された無線周波数エネル

ギーを生成するか、 使用する製品に適用されます。 ク ラス B の製品は、 商業用および家庭

用の両方に適しており 、 低電圧の電源供給ネッ ト ワークに直接接続するこ と ができます。

vi

EC の認定代理人

Waters Corporation (Micromass UK Ltd.)Floats RoadWythenshaweManchester M23 9LZUnited Kingdom

電話番号 : +44-161-946-2400ファ ッ クス番号 : +44-161-946-2480連絡窓口 : 品質管理マネージャ (Quality manager)

vii

viii

目次

著作権表示 ............................................................................................................................... ii

商標 .......................................................................................................................................... ii

お客様のご意見について ....................................................................................................... iii

ウォーターズへの問い合わせ ................................................................................................ iii

安全に関する注意事項 ............................................................................................................ iv ACQUITY UPLC H-Class Bio システムに固有の注意事項 ........................................... iv 安全に関する勧告 ............................................................................................................ iv

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの操作 .................................................................. v 適用される記号 ................................................................................................................. v 対象読者および目的 ......................................................................................................... v ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの用途 .............................................................. v キャリブレーション ........................................................................................................ vi 品質管理 .......................................................................................................................... vi

ISM 分類 ................................................................................................................................ vi ISM 分類:ISM グループ 1 クラス B ............................................................................. vi

EC の認定代理人 ................................................................................................................... vii

1 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム .......................................................................... 1-1

UltraPerformance 液体クロマトグラフィ ...................................................................... 1-2

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの特徴 .............................................................. 1-4 フロースルーニードルインジェクタ ............................................................................. 1-5 洗浄溶媒 ........................................................................................................................ 1-5 パージ溶媒 ..................................................................................................................... 1-5 アクティブ溶媒コンディショニング ............................................................................. 1-6 ソフトウェアの拡張 ...................................................................................................... 1-6

システム構成部品 ................................................................................................................ 1-8 カラムテクノロジー .................................................................................................... 1-10 追加情報 ...................................................................................................................... 1-11

目次 ix

2 パフォーマンスの 適化 ...................................................................................................... 2-1

一般的なガイドライン ......................................................................................................... 2-2

ACQUITY UPLC カラムカリキュレータ ......................................................................... 2-4

拡散 ...................................................................................................................................... 2-4

キャリーオーバー ................................................................................................................ 2-5

精度および正確度 ................................................................................................................ 2-5

サイクル時間(注入間) ....................................................................................................... 2-5

リーク防止 ........................................................................................................................... 2-6

サンプルの調製 .................................................................................................................... 2-6 微粒子 ............................................................................................................................ 2-6 サンプル希釈液の適合性 ............................................................................................... 2-6

3 システムの準備 ..................................................................................................................... 3-1

システムハードウェアの準備 .............................................................................................. 3-2 システムの電源を入れる ............................................................................................... 3-2 スタートアップテストのモニター ................................................................................. 3-2 システムモジュールの LED のモニター ....................................................................... 3-3 電源 LED ....................................................................................................................... 3-3 ステータス LED ............................................................................................................ 3-3 リークセンサーの有効化 ............................................................................................... 3-5 システムの起動 .............................................................................................................. 3-5

クロマトグラフィデータソフトウェアの設定 ..................................................................... 3-7

ACQUITY コントロールパネル ......................................................................................... 3-8 bioQSM コントロールパネル ........................................................................................ 3-8 bioSM-FTN のコントロールパネル ............................................................................ 3-10 TUV 検出器のコントロールパネル ............................................................................. 3-12

ACQUITY UPLC コンソールの起動 ............................................................................... 3-13

A 安全に関する勧告 ............................................................................................................... A-1

警告記号 ............................................................................................................................. A-2 作業中の危険警告 .......................................................................................................... A-2 具体的な警告 ................................................................................................................. A-3

x 目次

注意記号 ............................................................................................................................. A-5

Waters のすべての装置に適用される警告 ........................................................................ A-5

電気および取り扱いに関する記号 ...................................................................................... A-6 電気記号 ........................................................................................................................ A-6 取り扱いに関する記号 ................................................................................................... A-7

B 外部接続 .............................................................................................................................. B-1

システムのチューブの接続 ................................................................................................. B-1

装置の外部配線 ................................................................................................................... B-3 ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置の外部配線 ........................................................... B-3 Ethernet 接続 ................................................................................................................ B-4 カラムヒーターの接続 ................................................................................................... B-4

カラムマネージャの流路の接続 ......................................................................................... B-5

シグナル接続 ...................................................................................................................... B-7 シグナル接続 ................................................................................................................. B-7

電源への接続 .................................................................................................................... B-11

C 溶媒の取り扱い時の注意 ..................................................................................................... C-1

はじめに ............................................................................................................................. C-2 汚染防止 ........................................................................................................................ C-2 清浄な溶媒 ..................................................................................................................... C-2 溶媒の品質 ..................................................................................................................... C-2 溶媒の調製 ..................................................................................................................... C-2 水 ................................................................................................................................... C-2

溶媒に関する推奨事項 ........................................................................................................ C-3 一般的な溶媒のガイドライン ........................................................................................ C-4 使用できない溶媒 .......................................................................................................... C-6 ACQUITY UPLC H-Class Bio システムに関する推奨事項 ......................................... C-6 bioQSM の推奨事項 ...................................................................................................... C-7 bioSM-FTN の推奨事項 ................................................................................................ C-8 検出器に関する推奨事項 ............................................................................................... C-8

一般的な溶媒の特性 ........................................................................................................... C-8

溶媒の混和性 .................................................................................................................... C-10 混和性番号(M-番号)の使用 ..................................................................................... C-11

目次 xi

溶媒の安定剤 .................................................................................................................... C-11

溶媒の粘性 ........................................................................................................................ C-11

波長の選択 ........................................................................................................................ C-12 一般の溶媒に対する UV カットオフ ........................................................................... C-12 移動相混合液 ............................................................................................................... C-13 移動相の吸光度 ............................................................................................................ C-14

索引 ...................................................................................................................................... 索引-1

xii 目次

1 ACQUITY UPLC H-Class Bioシステム

目次:

トピック ページ

UltraPerformance 液体クロマトグラフィ 1-2ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの特徴 1-4システム構成部品 1-8

1-1

UltraPerformance 液体クロマトグラフィ

2004 年、Waters® は、装置とカラムの設計を大きく進歩させ、分離科学の分野に UPLC®

技術を導入しました。この技術を採用することによって、Waters の ACQUITY UPLC® シ

ステムは、従来のシステムと比較して、液体クロマトグラフィの分解能、速度、および感度の面で著しい改善を達成しました。

UltraPerformance 液体クロマトグラフィは、直径 1.7 μm の球形粒子を充填したカラム

を使用して、 大 103,421 kPa(1034 bar、15,000 psi)の圧力で動作します。線速度とカ

ラム効率の関係を説明する実験式である van Deemter の式は、粒子径を 1 つの変数とみ

なします。したがって、式は、粒子径の範囲全体での理論的パフォーマンスのキャラクタライズに使用できます。

液体クロマトグラフィの粒子径の歴史:

上記の図から、1.7 μm の粒子を使用すると、流量を増加させることで高効率(低 HETP(理

論段高)は高効率を示す)が達成されることは明白です。プロットのこの範囲で動作する場合、ピーク容量と分離の速度に、従来のHPLC 技術を優に超える限界を設定できます。Watersは、この性能の新しいレベルを UltraPerformance クロマトグラフィと定義しました。

1-2 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

5.0 μm と 1.7 μm の粒子を使用したクロマトグラフィ分離の比較:

各分離は 2.1 × 50 mmカラムで行われました。粒子径に基づいて流速を 適化した以外は、

各分離のクロマトグラフィ条件は同一です。

UltraPerformance 液体クロマトグラフィ 1-3

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの特徴

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムは、ライフサイエンスおよび生物薬剤調査用に設

計されています。ペプチド、タンパク質、オリゴヌクレオチド、および炭水化物などの分析用に 適化されています。コアシステムは、バイオサンプルマネージャ - FTN (bioSM-FTN)とバイオクォータナリソルベントマネージャ (bioQSM) で構成されています。Auto•BlendPlus™ ソフトウェアの機能によって、拡張メソッドを開発できます。

システムの流路の接液面に含まれる生体適合性材料は

• タンパク質のような生体分子とほとんど相互作用しないか、吸着しないか、変性させません。

• 推奨されるクロマトグラフィ溶離液にイオンを浸出させません(付録 C を参照)。

• 下記を含めて、付録 C に記載されている移動相によってあまり冒されないか、損傷

されません。

– リン酸バッファ (20 ~ 100 mM) 中に HCl (6 mM) および NaCl( 大 1 M)の

ような、酸性でハロゲン化物を含む移動相。

– pH が 2 ~ 12 で 1M NaCl が存在するリン酸バッファ。

流路の接液面に含まれる物質は、主にチタン合金および MP35N®合金であり、非磁性ニッ

ケル - コバルト - クロミウム - モリブデン合金です。

システムは、数種類のカラムコンパートメントモジュールに対応します。すべてのカラムコンパートメントモジュールのアクティブプレヒーターの流路の接液面は生体適合性材料で構成されています。カラムコンパートメントモジュールには、アクティブプレヒーター付きカラムヒーター、アクティブプレヒーターおよびカラム切り替え機能付きカラムマネージャ、アクティブプレヒーター付き補助カラムマネージャ、30 cm カラムヒーター /クーラー、およびアクティブプレヒーター付き 30 cm カラムヒーターを含めることができ

ます。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムは、UPLC の速度と性能を、HPLC 分離の分析機

能と組み合わせたシステムです。

この組み合わせから、以下のような多くの利点が得られます。

• 高圧で小さいサイズの充てん剤を使用したクロマトグラフィは、従来の HPLC と

比較して高速、高分解能の分析が可能。

• 溶媒消費量が少ない(従来の HPLC よりかなり低い)。

• bioQSM の使用による溶媒混合の柔軟性。

• HPLC メソッドの UPLC への移管を容易にする bioSM-FTN。

• bioQSM と bioSM-FTN の設計は、拡散を 小化して、サイクル時間を短縮するよ

うに機能強化されている。

1-4 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

フロースルーニードルインジェクタ

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの bioSM-FTN は、ACQUITY UPLC システム

が使用するループベースのインジェクタとは根本的に異なる、フロースルーニードルメカニズムを使用します。フロースルーニードルメカニズムは、サンプルを吸引して、カラムへのサンプルの注入のための準備の間サンプルニードル内に保持します。サンプルをカラムに押し出す際、ニードルは注入流路の機能を果たします。

このシステムは、フロースルーニードルメカニズムを使用し、多くの従来の HPLC シス

テムと同様に動作するため、HPLC メソッドの移管を容易にします。低容量注入において

も、サイクル時間を短縮し、正確に注入できます。サンプルは移動相により完全にカラムにロードされます。

洗浄溶媒

洗浄システムは単一溶媒を使用してサンプルニードルの外側をクリーニングし、洗浄システムをプライムします。溶媒は、注入流路に入りません。

制限事項:洗浄溶媒にバッファの使用は避けてください。

パージ溶媒

パージ溶媒の主要機能は、注入流路に沿ってサンプルを移動させることです。また、パージ溶媒は、サンプルシリンジと注入路もプライムします。希釈溶媒として使用される場合のみカラムに注入されます。

注意:

• バッファをシステムに入れたまま放置しないでください。

• システムをシャットダウンする前に、ニードル洗浄を含むすべての流路を、大量の溶媒(バッファを含まない)でフラッシュ洗浄してください。

• 長期間(24 時間以上)シャットダウンする場合、10% ~ 20% のメタノール水溶

液を使用します。

• バッファ洗浄溶媒を使用した場合、30 秒以上プライムしてください。

• バッファを使用するとニードルや洗浄ポートに塩が堆積する場合があるので、定期的なクリーニングが必要です。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの特徴 1-5

アクティブ溶媒コンディショニング

HPLC および UPLC アプリケーションは、プレカラムの追加や移動相の加熱によって、

クロマトグラフィ分離を向上させます。ACQUITY UPLC H-Class Bio カラムヒーターは

アクティブプレヒーターを使用して、カラムに入る溶媒を調整します。プレヒーターは、移動相(および注入されたサンプル)の温度をカラムコンパートメントと同じ設定温度に上昇させます。

ヒント:アクティブプレヒーターは、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの既定の設

定です。

ソフトウェアの拡張

Auto•Blend Plus

Auto•Blend Plus を使用して、溶媒の pH および塩濃度に基づくグラジェントを作成しま

す。Auto•Blend Plus で使用する溶媒は、通常は以下のように溶媒リザーバに用意します。

• 溶媒 A は酸性。

• 溶媒 B は塩基性。

• 溶媒 C は塩溶媒(バッファ)。

• 溶媒 D は水溶液。bioQSM に溶媒選択バルブ(オプション)がある場合、6 つの溶

媒 (D1 ~ D6) のいずれかを選択できます。

カタログから、pH の計算に使用する pKa 値または pH 検量線を指定または選択します。

編集可能なカタログには、既知の pH 溶液、塩溶媒、pKa 値、および pH 検量線が含まれます。

各注入の塩に対する pH の比率は一定です。グラジェントセグメントの pH 濃度、pH 曲

線、塩濃度、塩曲線、流量、および以下のパラメータのいずれかを指定します。

• 時間 • カラム容量 • 総容量

クォンタム シンクロナイゼーション

注入中に高圧流路に低圧サンプルを送液すると、クロマトグラフィの結果に影響する圧力変動が生じます。クォンタム シンクロナイゼーション機能は、この圧力変動の影響を減

少させます。bioSM-FTN と bioQSM は自動的に注入シーケンスと連携しており、

bioSM-FTN が低圧サンプルを注入する位置にインジェクタバルブを切り替えると同時に、

bioQSM が追加で加圧します。

1-6 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

グラジェントのスマートスタート

各サンプル注入の前に、bioSM-FTN は、通常洗浄シーケンスを実行して、適切な容量の

サンプルを吸引します。これらの操作が終了すると、bioQSM は注入バルブにグラジェン

トを流し始めます。システムのデュエル (Dwell) ボリュームは、このグラジェントがカラ

ムに到達する総時間に影響を与える、全体的なサイクル時間の重要な要素です。

グラジェントのスマートスタート機能は、注入前処理を整合して、サイクル時間に対するbioQSM のデュエル (Dwell)ボリュームの影響を減少させます。グラジェントは、bioSM-FTNの注入前の処理前または処理中に開始するため、大幅な時間の節約につながります。

プランジャ洗浄

bioQSM のポンププランジャに堆積する沈殿物により、高圧シールが損傷される可能性が

あります。プランジャ洗浄機能は、溶媒でシールを洗浄して、沈殿物を取り除きます。必要に応じて、プランジャ洗浄機能を使用するか、ゼロフロー停止機能の一部として実行できます。

ゼロフロー停止

ゼロフロー停止機能は、指定された時間間隔の間、bioQSM がアイドルに保持された後に、

プランジャ洗浄機能を実行します。この機能により、システムがアイドル状態のときに、bioQSM プランジャへの沈殿物の堆積を防ぎます。

自動プライム

bioQSM のこの機能を有効にした場合、新たに溶媒を選択すると、システムはラインをプラ

イムします。

例: 初の注入にライン D1、2 番目の注入にライン D2 を使用する場合、ソルベントマネー

ジャは、 初の注入と 2 番目の注入の間に、ライン D2 をプライムします。

ランプ流量(増加率)

この機能により、bioQSM が流量を増加または減少させる速度を指定できます。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの特徴 1-7

システム構成部品

装置モジュール:

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムは、オプションの 6 ポート溶媒選択バルブを備え

た bioQSM、bioSM-FTN、カラムコンパートメントモジュール、検出器(チューナブル UV、フォトダイオードアレイ、または質量分析計)および ACQUITY UPLC カラムで構成され

ています。サンプルと接触するすべての部分は生体適合性材料です。

Waters Empower™ クロマトグラフィソフトウェアまたは MassLynx™ 質量分析ソフト

ウェアによって、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムが制御されます。

正面 背面

ボトルトレイ

検出器

カラムヒーター

bioQSM

bioSM-FTN

1-8 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

bioQSM

bioQSM は、低圧混合の高圧ポンプです。103,421 kPa(1034 bar、15,000 psi)では 高

1 mL/分、62,053 kPa(621 bar、9000 psi)まで減圧すれば 高 2 mL/分の流量で、安定

した(脈流のない)分析用流量溶媒送液を行います。bioQSM は、指定された組成を動的

に生成するためにグラジェントプロポーショニングバルブ (GPV) を使って、4 種類の脱気

済み溶媒を同時に送液できます。

bioSM-FTN

bioSM-FTN は、直接注入メカニズムを使用して、プレートおよびバイアルから吸引したサ

ンプルをクロマトグラフィカラムに注入します。オプションの拡張ループ(サンプルニードルと注入バルブの間に取り付ける)により、拡張ループの容量まで注入量を設定できます。bioSM-FTNは、自動希釈オプションを使用して、サンプルを希釈することもできます。

カラムヒーター

カラム温度の変動は、ピーク保持時間のシフトおよびピーク形状の変化につながり、正確な結果を得ることが一層困難になります。カラムコンパートメントにより、カラム温度が調整されることにより、正確で再現性のある分離を可能にします。

カラムコンパートメントは、20 °C(または周囲温度より 5 °C 以上高い温度) ~ 90 °C の

任意の温度に加熱できます。アクティブプレヒーター装置は、カラムに入る溶媒を直前で加熱します。カラムヒーターは、内径 4.6 mm まで、長さ 150 mm までのカラムに対応し

ます。

ヒント:アクティブプレヒーターは、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの既定の設

定です。

ローカルコンソールコントローラ(オプション)

ACQUITY UPLC ローカルコンソールコントローラ (LCC) は、クロマトグラフィデータ

システム (CDS) ソフトウェアを補完して、システムをローカルで制御できるようにしま

す。LCC は単純なキーパッド操作が可能で、スタンドアロンコントローラとしての 低

限の機能を備えています。しかし、CDS コントロールにとってかわるほどの機能は備え

ていません。LCC を使用して、システムモジュールの前準備、初期条件の定義とシステ

ムの診断テストを実行できます。これらの基本機能は、システムがソフトウェアコント

ロールおよび取り込みワークステーションまたは LAC/E™32モジュールによるリモート

モードの場合、またはネットワークコントロールが使用できない場合でも迅速に実行されます。

システム構成部品 1-9

FlexCart

オプションの FlexCart は、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムを移動可能にします。

PC やモニターと同様にシステムを保持し、廃液ライン、電力供給用のコンセントも実装

しています。質量分析計とともに使用する場合、カートの高さが調整可能なため、カラムアウトレットをプローブインレットの近くに置き、システムのデッドボリュームを 小に抑えることができます。

カラムテクノロジー

ACQUITY UPLC カラムは、1.7 μm の BEH 粒子、または 1.8 μm HSS 粒子が充填されて

おり、高圧条件下でも機械的に耐性があります。カラムのハードウェアおよびフィッティングは 103,421 kPa(1034 bar、15,000 psi)までの圧力に耐えられます。カラムサイズは

適な MS 対応の流量を可能にし、フィッティングはカラム容量の増加の影響を 小限に

抑えます。

このシステムは任意の HPLC 分析用カラムも使用可能ですが、特別に設計された ACQUITYUPLC カラムを使用すると高圧機能を 大限に活用できます。従来の HPLC カラムと比

較すると、ACQUITY UPLC カラムは同じ分析時間でより優れた分離能と感度、または

同等の分離能でより高感度で迅速な分析を可能にします。

eCord テクノロジー

ACQUITY UPLC カラムにはカラムの使用履歴を追跡する eCord™ カラムチップが取り付

けられています。eCord カラムチップはシステムソフトウェアと連携し、カラムで分析さ

れたサンプルキューの情報を 50 まで記録します。規制された環境下で、eCord カラムチッ

プは分析法バリデーションで使用されるカラムの資料を提供します。

各種カラム使用履歴に加えて、eCord カラムチップは次の固定カラムの製造データも記録

しています。

• カラムの個体識別情報。

• 分析証明書。

• QC テストデータ。

カラムコンパートメントの取り付け位置に eCord カラムチップを取り付けるだけで、チッ

プは自動的に分析情報を記録して、保存します。

1-10 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

検出器

UPLC システムのクロマトグラフィで使用されている小さい粒子の化学的性質により、非

常に幅の狭いピークが生成されます。UPLC TUV、PDA、ELS および FLR 検出器、なら

びに SQ および TQ 質量分析計は、高速でデータを収集して、ピーク測定の感度または正

確度に影響を及ぼさずに、これらのピークを特定します。これらの特別に対応させた検出器は、バンドの広がりを制御して幅の狭いピークを維持するために、低いフローセル容量、 小限のチューブ容量、および専用フィッティングを使用します。

UPLC TUV および PDA 検出器では、チタンなどの生体適合性材料で構成されたフロー

セルが使用可能です。

追加情報

システムドキュメント CD には ACQUITY H-Class Bio システムに関する下記追加情報

があります。

• クォータナリソルベントマネージャの操作概要およびメンテナンス情報

• サンプルマネージャ - フロースルーニードル操作概要およびメンテナンス情報

• カラムコンパートメント操作概要およびメンテナンス情報

• システムの仕様

詳細情報は waters.com をご覧ください。ACQUITY UPLC オンラインコミュニティに参

加すると、次のことができます。

• ACQUITY UPLC の専門家や科学者と情報の共有、質問ができます。

• 世界中からACQUITY UPLCの出版物およびユーザーの経験にアクセスできます。

• 専用の FAQ、ヒントと秘訣、およびチュートリアルをレビューできます。

• 新の ACQUITY UPLC のアプリケーションおよび情報を検索できます。

システム構成部品 1-11

1-12 ACQUITY UPLC H-Class Bio システム

2 パフォーマンスの 適化

ACQUITY システムのパフォーマンスを 適化するために、この章の次のアドバイ

スとガイドラインに従ってください。

目次:

トピック ページ

一般的なガイドライン 2-2ACQUITY UPLC カラムカリキュレータ 2-4拡散 2-4キャリーオーバー 2-5精度および正確度 2-5サイクル時間(注入間) 2-5リーク防止 2-6サンプルの調製 2-6

2-1

一般的なガイドライン

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムのガイドラインは、主にシステムにある小さな(2 μmより小さい)粒子のクロマトグラフィの制約により、通常の HPLC の作業手順と異なりま

す。UPLC システムのクロマトグラフィは、HPLC を使用した場合より、より小スケール

で高分解能分離です。さらに、UPLC では分析時間が短く、溶媒およびサンプルの消費量

は大幅に減少します。

より小さいカラムを使用するとサンプル拡散の影響を受けやすくなるため、ACQUITYUPLC H-Class Bio クロマトグラフにはバイオサンプルマネージャ (bioSM-FTN) の最適な

パフォーマンスが必要です。クロマトグラフィ分析時間が短縮されるため、サイクル時間の効率的管理が不可欠です。

高速 UPLC 分析を実施する場合、目的のピークが 0.5 秒未満になる可能性があります。ピー

ク全体にわたり 25 ~ 50 ポイントのサンプリングレートを推奨いたします。これにより、良

好な定量とピーク表示が得られます。1 秒当たり 20 ポイントより高速なサンプリングレー

トの場合、より高いベースラインノイズが発生するため、それに応じてフィルタ時定数を調整する必要があります。この ACQUITY UPLC の最適な流量は通常の HPLC カラムの

最適な流量とは異なります。以下の表は、アイソクラティック条件およびグラジェント条件における ACQUITY UPLC カラムの操作ガイドラインを示しています。これらの値は目

安であり、実際に使用する分子や分離に対する最適なパフォーマンスは異なる流量や圧力で得られる可能性があります。

分子量の範囲に対する最適な流量:

カラムのサイズ 分子量 流量

2.1 × 50 mm <500 600 µL/分2.1 × 50 mm 1000 300 µL/分2.1 × 50 mm 1500 150 µL/分2.1 × 50 mm 2000 100 µL/分

注意:

• バッファをシステムに入れたまま放置しないでください。

• システムをシャットダウンする前に、ニードル洗浄を含むすべての流路を、大量の溶媒(バッファを含まない)でフラッシュ洗浄してください。

• 長期間(24 時間以上)シャットダウンする場合、10% ~ 20% のメタノール水溶

液を使用します。

• バッファ洗浄溶媒を使用した場合、30 秒以上プライムしてください。

• バッファを使用するとニードルや洗浄ポートに塩が堆積する場合があるので、定期的なクリーニングが必要です。

2-2 パフォーマンスの最適化

UPLC 分析を実行する場合、以下の全般的な推奨事項に従ってください:

• 高品質の溶媒、バッファ、および添加剤(HPLC または MS グレード)を使用します。

• 高品質の水(HPLC または MS グレード)を使用します。

• 溶媒ボトルのチューブラインには、必ず溶媒フィルタを使用してください。

• バッファは 0.2 μm メンブレンフィルタでろ過します。

• 濃い標準試料を用意しておきましょう。

• 細菌の繁殖を促進させるので、バッファを一杯にしないでください。

• デガッサベントラインを塞がないでください。必要に応じてチューブを切り揃えます。

• 廃液またはデガッサベントラインは液体につからないようにしてください。(チューブの接続方法の詳細は、『ACQUITY UPLC H-Class クォータナリソルベン

トマネージャ操作概要およびメンテナンス情報』を参照してください。)

• すべての溶媒ラインをプライムして使用します。

• 長期間(24 時間以上)システムをアイドル状態に保つ場合、バッファを使用したラ

インは水でフラッシュ洗浄します。保存には、水に 10 ~ 20% の有機溶媒を添加した

溶媒を使用します。bioSM-FTN をパージ溶媒で 10 回以上プライムします。

• ニードル洗浄溶媒でバッファを使用すると塩が堆積する場合があるので、定期的なクリーニングが必要です。洗浄溶媒を 30 秒以上プライムし、パージ溶媒を 10 回以

上プライムしてください。

• シール洗浄ラインをプライムして使用します。

• 1M 以上の塩濃度で連続的に実行すると、スケジュールされている PM より頻繁な

ポンプシールの交換が必要になる場合があります。シールの寿命を長持ちさせ、ポンプシールに塩の結晶が堆積するのを防ぐために、ポンプ、高濃度の塩ライン、およびリザーバを定期的に洗浄してください。塩の濃度、流量、およびその他の要因により、洗浄手順の頻度に影響することがあります。用途によっては、毎週洗浄する必要がある場合もあります。

• システムの起動中に、溶媒ラインをプライムします。

• 高い位置にならないように、廃液のレベルに注意します。

• 0% の有機溶媒比率からグラジェントを開始するよりは、0.1%などの低比率から開

始した方が安定した分析が可能です。

• 短いサイクル時間を希望する場合は、先行ロードのオプションを使用します。

• キャリーオーバーの問題を解決する場合は、先行ロードまたはループオフラインのオプションは使用しないでください。

• カラムの取り付けまたは取り外しの際には、必ずアクティブプレヒーターの再利用可能締め付け用フィッティングを所定の位置に保持します。カラムまたはオプションのインラインフィルタは回転させて、取り付けまたは取り外しします。

一般的なガイドライン 2-3

ACQUITY UPLC カラムカリキュレータ

ACQUITY UPLC カラムカリキュレータは、HPLC システムから UPLC システム、または

UPLC システムから HPLC システムへのメソッドの移管を簡単にするソフトウェアツール

です。カリキュレータは、バイナリおよびクォータナリポンプを備えたシステムを識別します。

現在の分離からパラメータ値を入力する場合、同程度の分離能力 (L/dp) を持つ対象カラム

を選択します。(L/dp 値は自動的に計算され、表示されます)。現在のシステムおよび対象

システムのデュエル (Dwell) ボリュームを指定します(カリキュレータが、対象システム

に対するクロマトグラフィ条件を推奨します)。個別の要件を基にして、これらの条件をさらに 適化できます。

関連項目:詳細情報や方法論については、ACQUITY UPLC カラムカリキュレータのマニュ

アルおよび ACQUITY コンソールのオンラインヘルプを参照してください。

ヒント:カリキュレータは、ACQUITY UPLC システムのドライバ CD またはメソッドア

シスタンスキット CD からインストールできます。インストール後に、ACQUITY UPLCカラムカリキュレータのアイコンがコンピュータのデスクトップに表示されます。

拡散

UPLC システムとオートサンプラーは低拡散を実現します。これはどのくらいピークがブ

ロードになるかを見ることで解る固定した装置の特徴であり、システム設計に起因します。

小さい粒子のクロマトグラフィは、小型の高性能カラムを使用します。典型的な 2.1 × 50 mmの UPLC カラムは、典型的な 4.6 × 150 mm の HPLC カラムの 2.5 mL に対して、約 174 µLの容量を有しています。小さいカラムと粒子サイズには、バンドの広がりを減少させ、高性能カラムにより生じるピークの形状、高さ、および感度を維持する拡散の少ないシステムが必要です。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムは、一般的に 20 µL(値はシステム構成に依存)の

バンドの広がりを示します。UPLC ピーク濃度は、HPLC 濃度より高くなります。溶解度

の影響は高圧を使用する低拡散システムでより明白に表れるため、注入量の適切な調整が不可欠です。

2-4 パフォーマンスの 適化

キャリーオーバー

前に注入した検体が後続のサンプルのクロマトグラムでピークとして検出される場合は、クロマトグラフィシステムでキャリーオーバーを観察します。キャリーオーバーは、サンプルを注入した後に、少量の検体がシステム内に残った場合に生じる傾向があります。分析サンプルの直後にブランクのサンプルを分析して表示る検体のピークを観察することにより、キャリーオーバーを測定できます。

関連項目:ACQUITY UPLC H-Class Bio システムのキャリーオーバーについては

ACQUITY UPLC H-Class システム仕様を参照してください。

キャリーオーバーの一般的な原因は、システムの不適切な洗浄です。適切な洗浄溶媒を選択することにより、特定の分析でのキャリーオーバーを 小限に抑えることができます。洗浄溶媒は残留サンプルを溶解できるほど十分に強くなければならず、また、洗浄時間はシステムから残留物を除去できるほど十分に長い必要があります。

メソッド条件もキャリーオーバーに影響を及ぼします。グラジェントの 終条件におけるホールド時間が短すぎると、特にグラジェントが急勾配の場合、システムからすべての検体を除去できません。次の分析に進む前に、システムを完全に洗浄して、カラムを再平衡化することが重要です。先行ロードとループオフラインのオプションを選択する場合は注意してください。グラジェントの有機溶媒比率が高い部分がニードルに到達する前に、これらのオプションを開始すると、システムに残留サンプルが残ります。時間を節約すると、システムの洗浄が不十分になる可能性があります。

キャリーオーバーを 小化するには、サンプルの疎水性や溶解度、調整時の汚染などを考慮する必要があります。

精度および正確度

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムを使用する場合の注入量の精度は、注入量 0.2 ~10.0 μL に対して 1% RSD 未満です。システムの注入量の正確度は 100 ± 2% です。(詳

細は ACQUITY UPLC H-Class システム仕様を参照)。

サイクル時間(注入間)

UPLC の高速分離度には、分析間の時間を効果的に利用することが必要です。

bioSM-FTN には、サイクル時間の短縮に役立つ先行ロードのオプションがあります。こ

のオプションにより、bioSM-FTN は現在のサンプル分析中に次のサンプルを吸引するよ

うに命令されます。

bioSM-FTN のループオフラインのオプションは、グラジェントが注入バルブに達する前

およびサンプルが注入ポートに送液された後に、ニードルと拡張ループをオフラインにすることによって、サイクル時間に対する遅延容量の影響を減少させます。

キャリーオーバー 2-5

シリンジ吸引レートを適切に設定することによってサイクル時間を短縮することもできます。デフォルトでは、システムは圧力トランスデューサからのフィードバック情報を使用して、 大のスループットとパフォーマンスを得られるようにシリンジ吸引速度を 適化します。

リーク防止

リーク防止により、システムが分析中に適切な圧力とサンプルの完全性を維持できるようになります。

リークは、チューブの接続部、ガスケット、またはシールで発生する可能性がありますが、チューブの接続部が も一般的です。低圧によるリーク(bioQSM のポンプの吸引側)は、

吸引サイクル中の溶媒損失および空気混入につながります。高圧フィッティングにおける

リーク(i2Valve™ の下流)は、溶媒をリークさせますが、空気混入しません。

リークを防ぐために、システムのフィッティングの適切な締め付けに関する Waters の推

奨事項に従ってください。フィッティングを再度締め付ける場合と設置する場合に異なる技術を適用する場合は、特に注意してください。

サンプルの調製

UPLC 分析により、サンプルの調製に付加的な制限事項があります。

微粒子

小さいカラムのフリットサイズ (0.2 μm) は、大きい HPLC カラムのフリット (2.0 μm) より簡単にブロックされます。そのため、パーティクルフリーの移動相溶媒およびサンプル溶液が UPLC 分析に不可欠です。溶媒の選択と取り扱いの推奨事項については、「一般的

なガイドライン」( 2-2 ページ ) を参照してください。

サンプル希釈液の適合性

bioSM-FTN で自動希釈オプションを使用する場合、パージ溶媒はサンプル希釈液の機能

を果たします。サンプル溶液が、選択したパージ溶媒中で可溶性および混和性があることを確認します。

2-6 パフォーマンスの 適化

3 システムの準備

目次:

トピック ページ

システムハードウェアの準備 3-2クロマトグラフィデータソフトウェアの設定 3-7ACQUITY コントロールパネル 3-8ACQUITY UPLC コンソールの起動 3-13

3-1

システムハードウェアの準備

システムの電源を入れる

システムに電源を入れるには、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムワークステーショ

ン、システム装置、およびクロマトグラフィソフトウェアの起動が必要です。各デバイスまたは装置でビープ音が 3 回鳴り、一連のスタートアップテストが実行されます。

ヒント:システムにカラムコンパートメントモジュールが付属している場合、bioSM-FTNの電源を入れると、自動的に電源が入ります。

システムの電源を入れるには、次の操作を行います。

1. 各デバイスのドアの左手側の上にある電源スイッチを押して、bioQSM と bioSM-FTNの電源を入れます。

関連項目:デバイスや装置の送液の状態やユニットの電源が入っているかどうかに関する LED モードの表示についての情報は、「ステータス LED」(3-3 ページ)およ

び「電源 LED」(3-3 ページ)を参照してください。

2. bioQSM と bioSM-FTN の電源 LED が緑色に点灯してから、検出器(複数台あれば

すべて)の左手側の上にある電源スイッチを押します。

ヒント:初期化のエラーを回避するには、フローセルに溶液が満たされている状態でだけ、検出器(複数台あればすべて)の電源を入れます。

3. クロマトグラフィソフトウェアを起動します。

ヒント:メッセージや LED 表示を ACQUITY UPLC コンソールでモニターするこ

とができます。

スタートアップテストのモニター

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムワークステーションに電源を入れると、以下のス

タートアップテストが実行されます。

• CPU ボード

• メモリ(RAM と ROM)

• 外部通信システム (Ethernet)• 時計

スタートアップテストで誤動作が指摘された場合には、コンソールのオンラインヘルプを参照してください。

3-2 システムの準備

システムモジュールの LED のモニター

各システムモジュールの発光ダイオード (LED) により、装置の動作状態が示されます。

LED は各装置に固有のものなので、それぞれの色やモードの意味は装置によって異なる可

能性があります。

電源 LED電源 LED は、デバイスや装置の前面パネル左手側に配置されており、装置の状態が電源

オンか電源オフかを示します。この LED は、電源がオンの場合は緑色に点灯し、電源がオ

フの場合は消灯します。

ヒント:十分な換気を行うため、bioSM-FTN のファンは電源がオフのときでも、常に動

作しています。これらのファンは、装置の背面から電源ケーブルが取り外された場合のみ、スイッチがオフになります。

ステータス LED

送液 LED (bioQSM)bioQSM の前面パネルにある電源 LED の右側の送液 LED は、送液の状態を示します。緑

色に点灯している送液 LED は、クォータナリソルベントマネージャが送液していること

を示します。

分析 LED (bioSM-FTN)bioSM-FTN の前面パネルにある電源 LED の右側にある分析 LED は、分析の状態を示し

ます。緑色に点灯している分析 LED は、注入が行われていることを示します。

システムハードウェアの準備 3-3

ランプ LED(検出器)

検出器の前面パネルにある電源 LED の右側にあるランプ LED は、ランプの状態を示し

ます。緑色に点灯しているランプ LED は、ランプが点灯していることを示します。

ステータス LED の表示:

LED のモードと色 説明

消灯 • bioQSM および bioSM-FTN – デバイスが現在アイ

ドル状態であることを示します。

• 検出器 – 検出器ランプが消灯していることを示します。

緑色で連続点灯 • bioQSM – 溶媒が流れていることを示します。

• bioSM-FTN – bioSM-FTN が正常に稼働中であり、

未完了のサンプルや診断機能リクエストの処理中であることを示します。サンプル処理と診断機能要求が完了すると、LED は消灯モードに戻ります。

• 検出器 – 検出器ランプが点灯していることを示します。

緑の点滅 • bioQSM および bioSM-FTN – デバイスが初期化中

であることを示します。

• 検出器 – 検出器が初期化またはキャリブレーション

を実施していることを示します。

赤の点滅 エラーによって装置またはデバイスが停止したことを示しています。コンソールでエラー情報を確認してください。

赤色で連続点灯 装置またはデバイスの不具合が次の動作を妨げていることを示しています。ユニットの電源を一旦オフにして、再度オンにします。LED がまだ赤色に点灯し続ける場合

は、Waters のサービスにお問い合わせください。

3-4 システムの準備

リークセンサーの有効化

規則:リークセンサーを有効にしたことがない場合、システムの電源を入れた時点で、リークセンサーはデフォルトで無効になっています。

リークセンサーを有効にするには、以下の手順を実行します。

1. コンソールで、[コントロール] > [リークセンサー ]を選択します。

[リークセンサー ]ダイアログボックス:

2. 各装置のリークセンサーを有効にするには、装置説明の左側にあるステータスをクリックします。

ヒント:[すべて有効]をクリックすると、すべてのリークセンサーが有効になります。

システムの起動

移動相の変更後、サンプルニードルの交換後、またはシステムの長期のアイドル時間(一晩など)が経過した後、システムの起動機能を使用して bioQSM をプライムします。この手

順を開始するにあたって、システムが正しく設定されていることを確認してください。

推奨事項:システムに準備されているものとは組成の異なる溶媒に変更している場合、bioQSM を 5 分間以上プライムしてください。

クリックして、各装置のリークセンサーを有効/無効にする

クリックして、すべての装置のリークセンサーを有効/無効にする

システムハードウェアの準備 3-5

システムを起動するには:

1. コンソールで、[コントロール] > [システムの起動]をクリックします。

2. [システム起動]ダイアログボックスの[プライム溶媒]タブで、A/B/C/D 溶媒(移動

相)の設定を確認します。

ヒント:

• [A/B/C/D 溶媒] エリアで、いずれかの溶媒、またはすべての溶媒を選択または

選択解除できます:A、B、C、D。

• [プライム時間] フィールドに異なる数値を入力して、溶媒 A ~ D をプライムす

る時間の長さを変更できます。選択したすべての溶媒は、同じ時間だけプライムされます。

• 任意のタブで設定を元の値に戻す場合は、[デフォルト設定] をクリックします。

既定値:すべての溶媒を、それぞれ 2.0 分プライム。(範囲:0.1 ~ 60.0 分。) 推奨事項:溶媒の変更後、3 分または 7 分の間、プライムします。

3. シール洗浄、洗浄溶媒、およびパージ溶媒のプライムを選択または選択解除します。必要に応じて、シール洗浄と洗浄溶媒のプライムに指定された時間、パージ溶媒のプライムに指定された回数を変更します。

既定値:シール洗浄を 2.0 分、洗浄溶媒を 15 秒、パージ溶媒を 5 回プライムします。

注意:

• バッファをシステムに入れたまま放置しないでください。

• システムをシャットダウンする前に、ニードル洗浄を含むすべての流路を、大量の溶媒(バッファを含まない)でフラッシュ洗浄してください。

• 長期間(24 時間以上)シャットダウンする場合、10% ~ 20% のメタノール水溶

液を使用します。

• バッファ洗浄溶媒を使用した場合、30 秒以上プライムしてください。

• バッファを使用するとニードルや洗浄ポートに塩が堆積する場合があるので、定期的なクリーニングが必要です。

3-6 システムの準備

4. [平衡化メソッド]タブを選択し、流量、移動相、組成、温度、および平衡化におけ

るランプの状態の設定を確認します。

5. [開始] をクリックします。

結果:光学検出器のランプが点灯し、システムでカラム温度およびサンプル温度が設定され、すべてのプライムが開始されます。プライムが終了すると、選択されている場合は、サンプルマネージャがニードルとシールのキャラクタライズを実行し、その結果がデータベースにログとして記録されます。 後に、平衡化メソッドに設定した溶媒条件が適用されます。

クロマトグラフィデータソフトウェアの設定

ACQUITY と一緒に使用するようにクロマトグラフィデータシステムソフトウェアを設定

します。

• クロマトグラフィデータシステムソフトウェアを起動して、ログインします。

• システム装置を選択して、システムに名前を付けます(詳細は Empower または

MassLynx のヘルプを参照してください)。

• ACQUITY コンソールとコントロールパネルを開きます。

[平衡化メソッド]タブの値:

システム始動パラメータ デフォルト 入力可能な数値

メソッド初期流量 0.500 mL/分 0.1 ~ 2.0mL/分A、B、C、および D の組

成(合計は 100%)

A:100%B、C、D:0%

A: 0 ~ 100%B: 0 ~ 100%C: 0 ~ 100%D: 0 ~ 100%

カラム温度 オフ カラムコンパートメントモジュールのタイプによって異なります。

サンプル温度 オフ オフ、または 4.0 ~ 40.0 °C ランプ オン オンまたはオフ

注:光誘導型フローセルの場合、セルに溶媒が流れていない場合や、セルが乾燥している場合には、検出器のランプの電源を入れたり、操作、点灯しないでください。

クロマトグラフィデータソフトウェアの設定 3-7

ACQUITY コントロールパネル

クロマトグラフィデータシステムで、bioQSM、bioSM-FTN、および検出器のコントロー

ルパネルをモニターできます。

コントロールパネル:

Empower ソフトウェアによりシステムを制御している場合には、コントロールパネルが

[サンプルの分析] 画面の下部に表示されます。MassLynx ソフトウェアによりシステムを制

御している場合には、コントロールパネルが [Inlet Editor] 画面の [ACQUITY AdditionalStatus]タブに表示されます。

bioQSM コントロールパネル

bioQSM のコントロールパネルには、送液ステータス、システム圧力、合計流量、および

溶媒組成パラメータが表示されます。

規則:システムがアイドル状態のときに、下線表示されている値をクリックして、これらのパラメータを編集することができます。システムがサンプルを分析している間は、クォータナリソルベントマネージャのパラメータは編集できません。

bioQSM コントロールパネル:

bioQSM のコントロールパネルの項目:

コントロールパネルの項目 説明

送液 LED bioQSM との通信が失われない限り、bioQSM の前

面パネルにある実際の送液 LED が表示されます。

ステータス 現在の動作の状態を表示します。

ステータス

送液 LED

システム圧力 流量

送液停止溶媒組成

3-8 システムの準備

bioQSM のコントロールパネル上を右クリックすると、その他の機能にアクセスできます。

システム圧力 システム圧力を kPa、bar、または psi の単位で表

示します。圧力単位は、コンソールからカスタマイズできます。

流量 bioQSM のすべてのラインを流れる溶媒の流量を

表示します。流量の値の範囲は、正常動作時には0.000 mL/分 ~ 2.000 mL/分、プライム時には 0.000 mL/分 ~ 4.000 mL/分になります。

溶媒組成 溶媒ライン (A ~ D) から流れる溶媒のパーセントを

表示します。組成の値は、0.0 ~ 100.0% の範囲内

です。

(送液停止) bioQSM からのすべての送液を直ちに停止します。

bioQSM のコントロールパネルのその他の機能:

コントロールパネル機能 説明

システム起動 アイドル時間が長引いた後、または異なる溶媒に切り替えるときに、システムを動作状態にします。

クォータナリソルベントマネージャ操作概要およびメンテナンス情報の「システム起動」を参照してください。

プライム溶媒 [プライム溶媒]ダイアログボックスを表示します。

クォータナリソルベントマネージャ操作概要およびメンテナンス情報の「クォータナリソルベントマネージャのプライム」を参照してください。

プライムシール洗浄 シール洗浄のプライムを開始します。

クォータナリソルベントマネージャ操作概要およびメンテナンス情報の「シール洗浄システムのプライム」を参照してください。

プランジャ洗浄 高速/大容量シール洗浄を実行しながら、プライマ

リチャンバーとアキュムレータチャンバーを(現在の溶媒組成で)一杯にして、次にゆっくり空ける、プランジャ洗浄シーケンスを開始します。この操作により、沈殿物がポンププランジャに堆積するのを防止し、高圧シールを損傷する可能性を減らします。

bioQSM のコントロールパネルの項目:(続き)

コントロールパネルの項目 説明

ACQUITY コントロールパネル 3-9

bioSM-FTN のコントロールパネル

bioSM-FTN のコントロールパネルには、サンプルコンパートメントおよびカラムコンパー

トメントモジュールの現在の温度と、設定温度が表示されます。システムがアイドル状態のときに、下線表示されている値をクリックして、これらの値を編集することができます。システムがサンプルを分析している間は、サンプルマネージャの設定温度は編集できません。

ヒント:

• サンプルコンパートメントを一定温度に保つために、ドアを開ける回数を必要 小限にしてください。

• サンプルコンパートメントのドアを開くと、bioSM-FTN のファンは空気の循環を

止めます。

bioSM-FTN のコントロールパネル:

ACQUITY UPLC コンソールの

起動

コンソールを起動します。

QSM のリセット エラー状態の後、bioQSM をリセットします。

ヘルプ コンソールのオンラインヘルプを表示します。

bioQSM のコントロールパネルのその他の機能:(続き)

コントロールパネル機能 説明

分析 LED

現在のカラムヒーター温度

ACQUITY UPLCコンソールを表示カラムヒーター

の設定温度

ステータス

現在のサンプルコンパートメント温度

サンプルコンパートメントの設定温度

3-10 システムの準備

bioSM-FTN のコントロールパネル上の任意の場所を右クリックして、その他の機能にア

クセスできます。

bioSM-FTN のコントロールパネルの項目:

コントロールパネルの項目 説明

分析 LED 通信が失われない限り、前面パネルにある実際の分析 LED が表示されます。

ステータス 現在の動作の状態を表示します。

現在のサンプルコンパートメント温度

アクティブ温度コントロールを使用できない場合も、0.1 °C 単位で現在のサンプルコンパートメン

ト温度を表示します。

サンプルコンパートメントの設定温度

0.1 °C 単位で現在のサンプルコンパートメントの

設定温度を表示します。アクティブな温度コントロールが使用できない場合には、このフィールドに「オフ」と表示されます。

現在のカラムヒーター温度 アクティブ温度コントロールを使用できない場合も、0.1 °C 単位で現在のカラムヒーター温度を表

示します。

カラムヒーターの設定温度 0.1 °C 単位で現在のカラムヒーターの設定温度を

表示します。アクティブな温度コントロールが使用できない場合には、このフィールドに「オフ」と表示されます。

(コンソール画面の表示) ACQUITY UPLC コンソールを表示します。

bioSM-FTN のコントロールパネルのその他の機能:

コントロールパネル機能 説明

プライム [プライム]ダイアログボックスを表示します。

サンプルマネージャ - フロースルーニードル操作概

要およびメンテナンス情報の「SM-FTNのプライ

ム」を参照してください。

ニードル洗浄 [ニードル洗浄]ダイアログボックスを表示します。

サンプルマネージャ - フロースルーニードル操作概

要およびメンテナンス情報の「SM-FTNニードル

の洗浄」を参照してください。

SM のリセット エラー状態の時にサンプルマネージャをリセットします。

ヘルプ コンソールのオンラインヘルプを表示します。

ACQUITY コントロールパネル 3-11

TUV 検出器のコントロールパネル

TUV 検出器のコントロールパネルは、吸光度および波長の値を表示します。システムが

アイドル状態のときに、下線表示されている値をクリックすれば編集できます。ただし、システムがサンプルを分析している間は、検出器のパラメータは編集できません。

他の検出器のコントロールパネルも同様に機能します。システムに PDA 検出器が含まれ

ている場合、『ACQUITY UPLC フォトダイオードアレイ検出器入門ガイド』を参照して

ください。

TUV 検出器のコントロールパネル:

次の表では、TUV 検出器のコントロールパネルのコントロールおよびインジケータにつ

いて説明します。

TUV 検出器のコントロールパネルの項目:

コントロールパネルの項目 説明

ランプオン/オフ LED 検出器との通信が失われない限り、検出器の前面パネルに実際のランプオン/オフ LED が表示されます。

ステータス 現在の動作の状態を表示します。

AU 吸光度単位を表示します。

nm 波長 A の値を nm 単位で表示します。検出器が

デュアル波長モードの場合、波長 B の値も表示さ

れます。

(ランプオン) 検出器のランプを点灯させます。

(ランプオフ) 検出器のランプを消灯させます。

ランプオン/オフ LED

検出器のランプのオン/オフの切り替え

ステータス

吸光度

波長 A の値

3-12 システムの準備

検出器のコントロールパネル上の任意の場所を右クリックすると、次の表で説明するその他の機能にアクセスできます。

ACQUITY UPLC コンソールの起動

ACQUITY UPLC コンソールは、設定、パフォーマンスのモニター、診断テストの実行、

およびシステムとそのモジュールのメンテナンスを簡単に行うためのソフトウェアアプリケーションです。このソフトウェアは、従来、システム装置の前面に配置されていたキーパッドと小型の画面表示に置き換わるものです。ACQUITY UPLC コンソールは、

データアプリケーションとは独立して機能し、データアプリケーションの認識や制御は行いません。

ACQUITY UPLC コンソールのインターフェースから、モジュールやそのコンポーネント

のビジュアル表示に迅速に切り替えることができます。また、相互接続を表示したり、トラブルシューティング用の診断ツールを提供したりする、対話式の図も表示できます。

Empower ソフトウェアから ACQUITY UPLC コンソールを起動するには、次の操作を行います。

[サンプルの分析] 画面で、bioSM-FTN のコントロールパネルにある[コンソールの表示]

をクリックします。

検出器のコントロールパネルのその他の機能:

コントロールパネル機能 説明

オートゼロ 吸光度の値をゼロにリセットします。

TUV のリセット エラー状態の時、現状の検出器をリセットします。

ヘルプ コンソールのオンラインヘルプを表示します。

ACQUITY UPLC コンソールの起動 3-13

ACQUITY UPLC コンソール画面:

MassLynx ソフトウェアから ACQUITY UPLC コンソールを起動するには:

1. [MassLynx] 画面で、[Inlet Method] をクリックします。

2. [Inlet Method] 画面で、[ACQUITY Additional Status] タブをクリックします。

3. [コンソールの表示] をクリックします 。

3-14 システムの準備

A 安全に関する勧告

Waters の装置には、装置の操作とメンテナンスにかかわる隠れた危険性を警告する

ための危険記号が表示されています。装置の各ユーザーガイドにも危険記号が表記されており、危険の説明と回避方法が記載されています。本付録では、Waters の製

品全体に適用されるすべての安全記号とその内容について説明します。

目次:

トピック ページ

警告記号 A-2注意記号 A-5Waters のすべての装置に適用される警告 A-5電気および取り扱いに関する記号 A-6

A-1

警告記号

警告記号は、装置の使用または誤使用に伴う死亡、傷害、または非常に有害な生理的反応の危険性を警告します。Waters 装置の設置、修理、および操作を行うときには、すべての警

告に注意してください。Waters では、装置の設置、修理、または操作を行う作業者が安全

注意事項に従わなかったために生じる障害について、一切責任を負わないものとします。

作業中の危険警告

以下の警告記号は、装置または装置構成部品の操作・メンテナンスで生じる可能性がある危険を知らせます。このような危険には、火傷、感電、紫外線被曝などが含まれます。

以下の記号が、マニュアルの説明または手順で現われた場合、それに付随する記述が、その固有の危険性を特定し、防止方法について説明します。

警告:(一般的な危険性。この記号が装置に示されているときは、該当する使用説明書で安全に関する重要な情報について調べてから装置を使用してください)。

警告:(高温表面への接触による火傷の危険性があります。)

警告:(感電する危険性があります。)

警告:(出火の危険性があります。)

警告:(尖端が鋭利なため刺し傷の危険性があります。)

警告:(手が挟まれ負傷する危険性があります。)

警告:(紫外線照射の危険性があります。)

警告:(腐食性物質に接触する危険性があります。)

警告:(有毒物質にさらされる危険性があります。)

警告:(レーザー光線照射の危険性があります。)

警告:(健康に深刻な悪影響を与える可能性がある生物因子にさらされる危険性があります。)

警告:(倒れる危険性があります。)

A-2 安全に関する勧告

具体的な警告

以下の警告は、特定装置のユーザーマニュアルに記載されていたり、装置やその構成部品に貼付されたラベルに表示されている場合があります。

爆発の警告

この警告は、非金属チューブを装備する Waters の装置に適用されます。

質量分析計の可燃性溶媒に関する警告

この警告は、可燃性溶媒を使用する装置に適用されます。

警告:(爆発の危険性があります。)

警告:(眼を負傷する危険性があります。)

警告:圧力が加えられた非金属(ポリマー)チューブは、破裂する可能性があります。このようなチューブの周囲で作業する場合は、以下の注意事項に留意してください。

• 防護メガネを着用してください。

• 近くにある火を消してください。

• 応力を受けたり折れ曲がっている、あるいは以前そのような状態にあったチューブは使用しないでください。

• 非金属チューブには、テトラヒドロフラン (THF)、硝酸、硫酸など、チューブを

損傷する化合物を付着させないでください。

• 塩化メチレンやジメチルスルホキシドなど一部の化合物は非金属チューブを膨張させることがあり、その場合チューブは極めて低い圧力で破裂することに注意してください。

警告:大量の可燃性溶媒を使用する場合は、密閉された空間での発火の危険性を防ぐため、イオンソースに連続して窒素を流し込む必要があります。

加熱性溶媒を使用する分析では、窒素供給圧が 690 kPa(6.9 bar、100 psi)を絶対

に下回らないようにしてください。また、窒素を供給できなかった場合に LC 溶媒

送液が停止するように、LC システムへのガス障害接続が行われていることも確認

してください。

警告記号 A-3

質量分析計による感電の危険性

この警告は、Waters のすべての質量分析計に適用されます。

この警告は、運転モード状態にある特定の装置に適用されます。

生物学的有害物質に関する警告

この警告は、以下のような生物学的有害物質が含まれる物質を処理する際に使用するWaters装置に適用されます。生物学的有害物質が含まれる物質とは、人体に絵悪影響を及ぼす可能性のある生物因子を含む物質のことを指します。

化学的有害物質に関する警告

この警告は、腐食性、有毒性、可燃性、その他のタイプの有害物質を処理できる Waters の装置に適用されます。

警告:感電防止の観点から、質量分析計の保護パネルは外さないでください。保護パネルで覆われている構成部品をユーザーがメンテナンスすることはできません。

警告:装置が運転モードのときには、質量分析計の特定の外面が高電圧になることがあります。非致命的な感電防止のために、この高電圧警告記号の付いた領域に触れる場合は、その前に装置が待機モードであることをまず確認してください。

警告:Waters 装置およびソフトウェアを使用して、感染のおそれのある人体からの生成物、不活性微生物、およびその他の生物学的物質を分析または処理できます。これらの因子からの感染を防止するために、すべての生体液に感染性があることを想定し、優良試験所基準 (GLP) に定められている正しい手順に従い、組織の生物学的有害物質の安全担当者に適切な使用法と取り扱いを相談してください。(米国)国立衛生研究所(NIH)発行、Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories(BMBL) の 新版に具体的な予防措置が掲載されています。

警告:Waters 装置を使用して、危険性のある物質を分析または処理できます。これらの物質による事故を防止するために、物質とその危険性をよく理解し、優良試験所基準 (GLP) に従い、組織の安全担当者に適切な使用法と取り扱いを相談してください。米国学術研究会議発行、Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Disposal of Chemicals の 新版にガイドラインが掲載されています。

A-4 安全に関する勧告

注意記号

注意記号は、装置の使用または誤使用により装置を損傷したりサンプルの完全性が損なわれたりすることを示します。次の記号とその内容説明は、装置またはサンプルが損傷するおそれがあることを示す警告の例です。

Waters のすべての装置に適用される警告

本装置を操作する際は、標準の品質管理手順とこのセクションの装置に関するガイドラインに従ってください。

注意: 損傷を防ぐために、装置のケースのクリーニングに研磨剤や溶媒を使用しないでください。

注意:規制機関から明確な承認を受けずに本装置の変更や改造を行うと、本装置のユーザーとしての承認が無効になる可能性があります。

警告:圧力のかかったポリマーチューブを扱うときは、注意してください。

• 加圧されたポリマーチューブの付近では、必ず保護メガネを着用してください。

• 近くにある火を消してください。

• 著しく変形した、または折れ曲がったチューブは使用しないでください。

• 非金属チューブには、テトラヒドロフラン(THF)や高濃度の硝酸または硫酸などを流さ

ないでください。

• 塩化メチレンやジメチルスルホキシドは、非金属チューブの膨張を引き起こす場合があり、その場合、チューブは極めて低い圧力で破裂します。

警告:ユーザーは、製造元により指定されていない方法で機器を使用すると、機器が提供している保護が損なわれる場合があるということを承知しているものとします。

注意記号 A-5

電気および取り扱いに関する記号

電気記号

これらの記号は、装置のユーザーマニュアルおよび装置の前面または背面パネルに表示されていることがあります。

電源オン

電源オフ

待機

直流

交流

接地端子

フレーム、またはシャシー、アース

ヒューズ

リサイクル記号:一般廃棄物として処理しないでください。

A-6 安全に関する勧告

取り扱いに関する記号

これらの取り扱い関連の記号および関連テキストは、Waters 装置および構成部品の出荷

時の外装に添付されたラベルに表示されることがあります。

天地無用

湿気厳禁

ワレモノ注意

吊り下げ禁止

電気および取り扱いに関する記号 A-7

A-8 安全に関する勧告

B 外部接続

このセクションでは、ACQUITY UPLC® H-Class Bio システムの外部接続について

説明します。

ヒント:ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置の開梱と設置は、Waters テクニカル

サービスの担当者が行います。

システムのチューブの接続

次の図は、システムの溶媒送液と廃液用の外部チューブを示したものです。

警告:腰を痛めることがないよう、装置の持ち上げは 1 人では行わないでください。

注意:

• ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置を移動する前に、Waters テクニカル

サービスまでご連絡ください。

• 装置を輸送する必要がある場合、または装置のサービスを停止する場合は、Waters テクニカルサービスに連絡して、推奨されるクリーニング、洗

浄、および梱包手順を確認してください。

目次:

トピック ページ

システムのチューブの接続 B-1装置の外部配線 B-3カラムマネージャの流路の接続 B-5シグナル接続 B-7電源への接続 B-11

システムのチューブの接続 B-1

溶媒送液と廃液:

ボトルトレイ

検出器

カラムヒーター

bioSM-FTN

bioQSM

システムの送液

システムの廃液

リークセンサー

背圧レギュレータの位置

PTFE 波型チューブ

外径 1/8 インチ PTFEチューブ(溶媒 A、B、C、D 用 4 ラインおよびシール洗浄用1 ライン)

外径 1/8 インチPTFE チューブ(パージライン用)

フローセルの位置

アクティブプレヒーターアセンブリの位置

bioQSM からbioSM-FTN へのMP35N チューブ

bioQSM からの PEEK bioSM-FTN チューブ

(パージライン用)

PTFE 透明チューブ(廃液バルブへ)、PEEKチューブ(廃液へ)

bioSM-FTN 外径 1/8インチ PTFE チューブ、ニードル洗浄用

廃液

B-2 外部接続

装置の外部配線

ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置の外部配線

ACQUITY UPLC H-Class Bio 装置の背面パネルの接続を以下に示します。

�������

Ethernet スイッチ

外部電源および通信ケーブル

Ethernet ケーブル

電源コード

PC へのEthernetケーブル

溶媒トレイ

検出器

カラムヒーター

bioSM-FTN

bioQSM

装置の外部配線 B-3

Ethernet 接続

bioSM-FTN は、PC(ワークステーション)および 大 6 台の ACQUITY UPLC H-Class Bioモジュールに対応する Ethernet スイッチを内蔵しています。各モジュールから bioSM-FTNの背面パネルにある電子接続にシールド Ethernet ケーブルを接続します。bioSM-FTN は

内部で Ethernet スイッチに接続されます。

システムにオプションのカラムマネージャ (CM-A) が付いている場合には、CM-A に 大

2 つまでのオプションの補助カラムマネージャ (CM-Aux) を接続します。

カラムヒーターの接続

bioSM-FTN はカラムヒーターに電力を供給し、カラムヒーターと通信します。外部通信

ケーブルは、カラムヒーターと bioSM-FTN の背面に接続する必要があります。

カラムヒーターの接続を行うには、次の操作を行います。

1. bioSM-FTN とカラムヒーターの電源が切断されていることを確認します。

2. 外部通信ケーブルをカラムヒーターの背面にある高密度 (HD) ポートに接続します。

3. 外部通信ケーブルのもう一方の端子を、SM-FTN の背面にある QSPI ポートに接

続します。

注意:電気部品の損傷を防止するために、装置の電源がオンになっている間は、アセンブリへの電力供給を切らないでください。装置への電力供給を切断するには、電源スイッチをオフにしてから、AC 電源から電源コードを外します。アセンブリを取り外す場合は、電源切断後 10 秒以上待機してください。

B-4 外部接続

カラムマネージャの流路の接続

3 つのシステム構成におけるカラムコンパートメントモジュール:

bioQSM

bioSM-FTN

CM-A

検出器

トレイ

4 つのカラムのCM-A および下部CM-Aux

2 つの長いカラムまたは 4つの短いカラム

bioQSM

bioSM-FTN

CM-A

検出器

トレイ

CM-Aux

2 つの長いカラムまたは 4 つの短いカラムの CM-A

6 つのカラムの上部 CM-Aux、CM-A、および下部 CM-Aux

bioQSM

bioSM-FTNCM-A

検出器

トレイ

CM-Aux

CM-Aux

カラムマネージャの流路の接続 B-5

右側にアクティブプレヒーターを取り付けたカラムマネージャ:

左側にアクティブプレヒーターを取り付けた補助カラムマネージャ:

B-6 外部接続

シグナル接続

シグナル接続

各装置の背面パネルに貼付されたシルクスクリーンラベルで、シグナル接続の場所を確認します。

必要な器材

• 9/32 インチのナットドライバ

• マイナスドライバ

• コネクタ

• シグナルケーブル

シグナル接続を行うには:

1. コネクタを装置背面のコネクタポートに差し込みます。

コネクタ

コネクタポート

シグナル接続 B-7

2. マイナスドライバを使用して、信号ケーブルのプラスおよびマイナスのリード線を、コネクタに接続します。

3. 接地ケーブルのフォーク端子を、背面パネルの接地端子に配置し、ロッキングナットで固定します。

ヒント:9/32 インチのナットドライバを使用して、フォーク端子が動かなくなるま

でロッキングナットを締めます。

シグナルケーブル

コネクタ

ねじ

フォーク端子

ロッキングナット

接地端子

B-8 外部接続

bioQSM I/O シグナルコネクタ

bioQSM の背面パネルには、I/O シグナルケーブル用のねじの端子を固定する取り外し可

能なコネクタが付いています。このコネクタはシグナルケーブルが一方向にしか挿入されないようになっています。

bioQSM I/O シグナル接続:

電気的仕様については、ACQUITY UPLC H-Class システム仕様を参照してください。

bioQSM イベント入力接続:

シグナル接続 説明

Gradient Start(グラジェント開始)

コンタクトクロージャー入力または 0 ボルト入力により、

ポンプに対してグラジェントの開始を指示します。

Stop Flow(送液停止) コンタクトクロージャ入力または 0 ボルト入力(エラー

状態、または他の装置でのハードウェアの問題など)を受け取ると、クォータナリソルベントマネージャからの送液を停止できます。

グラジェント開始

+グラジェント開始

-接地用端子

接地用端子

送液停止

+送液停止

-

1 2 3 4 5 6

シグナル接続 B-9

bioSM-FTN I/O シグナルコネクタ

bioSM-FTN の背面パネルには、I/O シグナルケーブル用のねじの端子を固定する取り外し

可能なコネクタが付いています。このコネクタはシグナルケーブルが一方向にしか挿入されないようになっています。

必要条件:質量分析計、ACQUITY 2996 PDA 検出器、または MassLynx ソフトウェア

の制御下で実行される ACQUITY ELS 検出器を起動するには、bioSM-FTN からのコン

タクトクロージャ出力接続(注入開始出力)を設定する必要があります。

bioSM-FTN I/O シグナルコネクタ:

電気的仕様については、ACQUITY UPLC H-Class システム仕様を参照してください。

TUV 検出器のシグナルコネクタ

TUV 検出器を使用している場合、シグナルコネクタの情報については、『ACQUITY UPLCチューナブル UV 検出器入門ガイド』を参照してください。

PDA 検出器のシグナルコネクタ

PDA 検出器を使用している場合、シグナルコネクタの情報については、『ACQUITY UPLCフォトダイオードアレイ検出器入門ガイド』を参照してください。

bioSM-FTN のイベント出力 / イベント入力接続:

シグナル接続 説明

Inject Start(注入開始) 注入が開始されたことを示します(コンタクトクロージャ出力あり)。

Inject Hold(注入待機) bioSM-FTN がコンタクトクロージャ入力(例、他のシステ

ム装置から)を受け取ると、次の注入を遅延させます。

注入開始出力

+注入開始出力

-接地用端子

接地用端子

注入待機入力

+注入待機入力

-

1 2 3 4 5 6

B-10 外部接続

ELS 検出器のシグナルコネクタ

ELS 検出器を使用している場合、シグナルコネクタの情報については、『ACQUITY UPLCエバポレイティブ光散乱検出器入門ガイド』を参照してください。

FLR 検出器のシグナルコネクタ

FLR 検出器を使用している場合、シグナルコネクタの情報については、『ACQUITY UPLC蛍光検出器入門ガイド』を参照してください。

電源への接続

システムの装置にはそれぞれアース付き電源が必要です。これら電源コンセントのアースはすべて共通で、しかもシステムに物理的に近い場所にある必要があります。

警告:感電を防止するため、以下の注意事項を厳守してください。

• 米国では SVT 型の電源コードを使用し、ヨーロッパでは HAR 型の電源コード

(あるいはそれよりも優良なもの)を使用してください。その他の国での必要条件については、各国の Waters の営業所にお問い合わせください。

• 装置のメンテナンスを行う前に、システム装置の電源を切り、プラグを抜いてください。

• システム装置を共通のアースに接続してください。

電源への接続 B-11

電源に接続するには:

推奨事項: 適な長期入力電圧を維持するために、ラインコンディショナと無停電電源装置 (UPS) を使用します。

1. 電源コードのメス型の端を装置の背面パネルにある差し込み口に接続します。

2. オス型の電源コードの端を適切な壁のコンセントに接続します。

代替手段:システムが FlexCart を使用している場合は、Flexcart の電源ケーブル(ス

タートアップキットに含まれています)のメス型の端を各装置の背面パネルの取り付け口に接続します。Flexcart の電源ケーブルのフードの付いたオス型の端をカー

ト後ろのテーブルタップに接続します。 後に、テーブルタップをそれぞれ別のコンセントに接続してそれぞれ個別の回線を使用するようにします。

FlexCart の電源接続

回路 A へ

回路 B へ

1 m

2 m

1 m

1 m

1 m

1 m

2 m

ユニバーサル IEC カプラー

AC ライン

AC ライン

ネットワークスイッチ

検出器

bioSM-FTN

bioQSM

サンプルオーガナイザ

LCD/モニター

CPU

FlexCart の電源タップ

B-12 外部接続

C 溶媒の取り扱い時の注意

本付録の内容は、下記の装置にのみ適用されます。

• ACQUITY UPLC® H-Class Bio システムモジュール

• ACQUITY UPLC PDA 検出器

• ACQUITY UPLC PDA eλ 検出器

• ACQUITY UPLC TUV 検出器

警告:薬品による事故を防止するため、システムの操作、溶媒の取り扱い、または配管類の交換にあたっては、必ず優良試験所基準 (GLP) を遵守してください。製品安全データシート (MSDS) で、使用している溶媒について確認してください。

目次:

トピック ページ

はじめに C-2溶媒に関する推奨事項 C-3一般的な溶媒の特性 C-8溶媒の混和性 C-10溶媒の安定剤 C-11溶媒の粘性 C-11波長の選択 C-12

C-1

はじめに

汚染防止

汚染防止に関する情報については、Waters の Web サイトの『Controlling Contaminationin Ultra Performance LC/MS and HPLC/MS Systems』(品番 715001307)を参照してく

ださい。www.waters.com をご覧ください。

清浄な溶媒

清浄な溶媒を使うことで、再現性のある分析結果が得られ、装置のメンテナンスを 小限に抑えられます。

不純物を含む溶媒はベースラインノイズやドリフト、溶媒ボトルのフィルタ、インレットフィルタおよびキャピラリチューブの詰まりの原因となる可能性があります。

溶媒の品質

良の結果を得るには MS グレードの溶媒を使用してください。少なくとも HPLC グレー

ド以上の溶媒を使用する必要があります。適切なメンブレンフィルタで溶媒をろ過してください。

推奨事項:メンブレンフィルタの製造元および供給会社の推奨する溶媒を選択するようにしてください。

溶媒の調製

事前のろ過処理など、溶媒の調製を正しく行っておくことは、各種の送液関連のトラブル防止につながります。

推奨事項:細菌の繁殖を抑制するために、褐色着色ガラス容器を使用してください。

水については、高品質の浄水システムを通したもののみを使用してください。ろ過されていない水しか用意できない場合は、使用前に 0.2 µm メンブレンフィルタを使用してその

水をろ過してください。

注意:100% 水を使用すると、細菌が繁殖する恐れがあります。100% 水の溶液は毎日交換することをお勧めします。少量の有機溶媒 (~10%) を添加することで、細菌の繁殖を防げます。

C-2 溶媒の取り扱い時の注意

バッファ(緩衝液)の使用

水溶性バッファの pH を調整します。バッファをろ過して不溶物を除去し、次に適切な有

機溶媒と混合します。バッファの使用後は、システム容量の 低 5 倍量の HPLC グレー

ドの蒸留水または脱イオン水を用いてウェットプライムを実施し、ポンプからバッファを洗い流してください。

システムを 1 日以上シャットダウンしておく場合は、細菌の繁殖防止用に、20% メタノー

ル/水溶液を用いてポンプを洗浄してください。

ヒント:塩の析出を防止するため、不揮発性バッファの濃度は 100 mM を超えないように

してください。

バッファ溶媒

バッファを用いる場合は、高品質の試薬を選択し、0.2 µm メンブレンフィルタで試薬をろ

過してください。

推奨事項:細菌の繁殖を抑えるためには、100% 水溶性移動相を毎日交換します。

関連項目:汚染防止に関する情報については、Waters の Web サイトの『Controlling Contamination in Ultra Performance LC/MS and HPLC/MS Systems』(品番

715001307)を参照してください。www.waters.com をご覧ください。

溶媒に関する推奨事項

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムは逆相クロマトグラフ用に設計されており、

ACQUITY UPLC BEH はカラム用に設計されています。Waters は、システムの信頼性を

従来の逆相溶媒を使用して評価しました。

このセクションでは、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムに推奨する溶媒を一覧で示

します。一覧表に無い溶媒が装置やシステムに悪影響を与えることなく使用できるかどうかについては、Waters カスタマサービスにお問い合わせください。

注意:バッファによっては、MS 検出器で使用できないものもあります。使用できるバッファについては、装置に付属しているマニュアルを参照してください。

溶媒に関する推奨事項 C-3

一般的な溶媒のガイドライン

下記の一般的な溶媒のガイドラインを必ず遵守してください。

• 細菌の繁殖を抑制するために、必ず高品質の褐色着色ガラス容器を使用してください。

• 溶媒をろ過してください。微細な粒子により、システムのキャピラリチューブに回復不能な詰まりが発生する恐れがあります。溶媒をろ過することで、チェックバルブの性能も向上します。

推奨溶媒

• アセトニトリル

• アセトニトリル/水混合液

• イソプロパノール

• メタノール

• メタノール/水混合液

• 水

その他の溶媒

下記の溶媒を使用できます。ただし、これらの溶媒は装置の寿命を縮める恐れがありますので注意してください。一覧にある溶媒を定期的に使用する場合、Waters はヘキサン/THF適合キットを設置することを推奨いたします。

• テトラヒドロフラン (THF) • ヘキサン

• アセトン

• 酢酸エチル

• ヘキサフルオロイソプロパノール (HFIP)注:

– オリゴヌクレオチドアプリケーション用の 1 ~ 4%HFIP 水溶液です。

– 洗浄溶媒で HFIP は使用してはいけません。

詳細情報については、C-6 ページを参照してください。

一般的な逆相溶媒を交換するときは、溶媒の極性に注意してください。THF またはヘキ

サンなどの非極性溶媒を送液する前に、イソプロパノールなどの中極性溶媒を用いてシステムを洗浄してください。

C-4 溶媒の取り扱い時の注意

ヘキサン/THF 適合キット

ACQUITY UPLC システムのヘキサン/THF 適合キット(品番については Waters までお

問い合わせください)は、廃棄物管理を閉じた状態で、ACQUITY UPLC システムに設置

できます。これは、高濃度および高圧でヘキサンまたは THF を使用してシステムを実行

する必要のあるユーザー用に設計されており、高濃度の移動相で THF が使用されている

多くの ELS 検出器ベースのアプリケーションにお勧めします。

添加剤/調整剤

• 0.1% エチレンジアミン四酢酸 (EDTA)• 0.1% ヘプタフルオロ酪酸

• 0.1% トリエチルアミン (TEA)• 0.1% トリフルオロ酢酸 (TFA)• 0.2% ギ酸

• 0.3% 酢酸

• 10 mM 重炭酸アンモニウム

• 10 mM リン酸バッファ

• 50 mM 酢酸アンモニウム

• 50 mM 水酸化アンモニウム

サンプル希釈液

• アセトニトリル

• アセトニトリル/水混合液

• クロロホルム

• ジメチルホルムアミド (DMF)• ジメチルスルホキシド (DMSO)• イソオクタン

• イソプロパノール

• メタノール

• メタノール/水混合液

• 塩化メチレン

• 水

推奨事項:ニードル洗浄溶媒としてバッファの使用は避けてください。

溶媒に関する推奨事項 C-5

洗浄試薬

推奨事項:Waters の Web サイトの『Controlling Contamination in Ultra Performance LC/MS and HPLC/MS Systems』(品番 715001307)の洗浄手順を参照してください。

www.waters.com をご覧ください。

• リン酸 (≤30%)• 水酸化ナトリウム (≤1M)• ギ酸 (≤10%)

使用できない溶媒

下記の溶媒は使用しないでください。

• トルエン、塩化メチル、トリクロロベンゼン

• フッ素、塩素、臭素および/またはヨウ素の ハロゲンを含む溶媒。

• 強酸(試薬洗浄として使用する場合を除き、<5% の低濃度のみで使用します。

pH <1.0 の場合は移動相として酸は使用しないでください)。

• UV グレードのエーテル、安定剤を含まない THF、ジオキサン、ジイソプロピル

エーテルなどの過酸化物(過酸化物を使用しなければならない場合は、乾燥酸化アルミニウムでろ過し、形成された過酸化物を吸着させてください)。

• エチレンジアミン四酢酸 (EDTA) のような錯化剤を高濃度に含む溶媒。

ACQUITY UPLC H-Class Bio システムに関する推奨事項推奨されるシステムのクリーニングおよび洗浄手順については、Waters にお問い合わせ

ください。

長期間(24 時間以上)システムをアイドル状態に保つ場合、バッファを使用したラインは

水でフラッシュ洗浄します。保存には、水に 10 ~ 20% の有機溶媒を添加した溶媒を使用し

ます。サンプルマネージャフロースルーニードルを 30 秒以上、洗浄溶媒でプライムし、パー

ジ溶媒を 10 回以上プライムします。

関連項目:Waters の Web サイトの『Controlling Contamination in Ultra Performance LC/MS and HPLC/MS Systems』(品番 715001307)。www.waters.com をご覧ください。

警告:爆発の危険性:THF 内の過酸化物は、THF を一部または完全に揮発させると、自然発生的に破壊的な爆発をすることがあります。

警告:健康被害:ヘキサンは神経毒であり、THF は目、肌、粘膜を刺激して有害な神経学的影響を与えることがあります。これらの揮発性溶媒の一方または両方を使用する場合、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムをドラフト内またはウォークインチャンバーの内側に設置して、有害な溶媒蒸気にできるだけ触れないようにしてください。

C-6 溶媒の取り扱い時の注意

• THF、ヘキサン、酢酸エチル、およびアセトンは、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムで移動相として使用できます。ただし、多くの非水溶媒と同様に、一般的な逆相溶媒を使用する装置と比べて、これらの溶媒を使用した場合はシステムや装置の寿命が縮まる可能性があります。THF、ヘキサン、酢酸エチルまたはアセトンを

定期的に使用する場合、Waters はヘキサン/THF 適合キットを設置することを推奨

いたします。

• 安定剤を含まない THF を用いる場合は、新しい溶媒であることを確認してください。

以前に開封されたことのある容器には、汚染物質として過酸化物が含まれるため、ベースラインドリフトの原因となります。

• 一般的に、クロロホルム、塩化メチレン、ハロゲン系溶媒、およびトルエンをACQUITY UPLC H-Class Bio システムで使用することはお勧めできません。しか

し、これらの溶剤を薄く希釈 (<10%) した場合は、添加剤、サンプル希釈液、または

調整剤として使用できます。

• ある特定の方法が ACQUITY UPLC H-Class Bio システムの装置やコンポーネント

に使用できるか否かを判定するには、Waters の担当営業またはテクニカルサポート

部門にお問い合わせください。

• THF またはヘキサンを使用するときはステンレスチューブで配管し、PEEK™ コン

ポーネントの使用を 小限に抑えます。

• シャットダウンしたシステム内に水を含む溶媒を残してはいけません。微生物コロニーが発生します。微生物はシステムのフィルタやキャピラリチューブを詰まらせることがあります。微生物の増殖を防ぐには、アセトニトリルまたはメタノールなどの有機溶媒を少量 (~10%) 添加します。

• メタンスルホン酸は、ACQUITY UPLC H-Class Bio システムでの使用をお勧めし

ません。

bioQSM の推奨事項

• 特に、極性移動相を使用する分離の場合には、プランジャシール洗浄システムが乾燥しないようにしてください。

• イソプロピルアルコールまたはメタノールと水の混合液(たとえば、20% メタノー

ル/水)は、THF 溶媒混合液に対して有効なシール洗浄溶媒です。

• 逆相系の分析には、少量の有機溶媒を含む(たとえば、1:9 メタノール/水)水系洗浄

溶液を使用してください。

• 100% 有機溶媒をシール洗浄溶媒として使用しないでください。

溶媒に関する推奨事項 C-7

bioSM-FTN の推奨事項

• 10% を超える高濃度の THF またはヘキサンをパージ溶媒として使用しないでくだ

さい。

• ジメチルスルホキシド (DMSO) やジメチルホルムアミド (DMF) は、ご使用になれ

ます。

検出器に関する推奨事項

5 °C 未満の温度でフローセルを移送するには、フローセルをアルコールで満たしてください。

一般的な溶媒の特性

以下の表には、一般的なクロマトグラフィ溶媒の特性が示されています。

注意:

• バッファをシステムに入れたまま放置しないでください。

• システムをシャットダウンする前に、ニードル洗浄を含むすべての流路を、大量の溶媒(バッファを含まない)でフラッシュ洗浄してください。

• 長期間(24 時間以上)シャットダウンする場合、10% ~ 20% のメタノール水溶

液を使用します。

• バッファ洗浄溶媒を使用した場合、30 秒以上プライムしてください。

• バッファを使用するとニードルや洗浄ポートに塩が堆積する場合があるので、定期的なクリーニングが必要です。

一般的な溶媒の特性:

溶媒 蒸気圧 mm Hg (Torr) 沸点 (°C) 引火点 (°C)

アセトン 184.5 (20 °C) 56.29 -20アセトニトリル 88.8 (25 °C) 81.6 6n-ブチルアセテート 7.8 (20 °C) 126.11 22

n-ブチルアルコール 4.4 (20 °C) 117.5 37

n-塩化ブチル 80.1 (20 °C) 78.44 -9

クロロベンゼン 8.8 (20 °C) 131.69 28クロロホルム 158.4 (20 °C) 61.15シクロヘキサン 77.5 (20 °C) 80.72 -20シクロペンタン 400 (20 °C) 49.26 -7o-ジクロロベンゼン 1.2 (20 °C) 180.48 66

C-8 溶媒の取り扱い時の注意

ジクロロメタン 350 (20 °C) 39.75ジメチルアセトアミド 1.3 (25 °C) 166.1 70N,N-ジメチルホルムアミド 2.7 (20 °C) 153.0 58

ジメチルスルホキシド 0.6 (25 °C) 189.0 881,4-ジオキサン 29 (20 °C) 101.32 12

酢酸エチル 73 (20 °C) 77.11 -4エチルアルコール 43.9 (20 °C) 78.32 15エチルエーテル 442 (20 °C) 34.55 -45二塩化エチレン 83.35 (20 °C) 83.48 13ヘプタン 35.5 (20 °C) 98.43 -4ヘキサン 124 (20 °C) 68.7 -22イソオクタン 41 (20 °C) 99.24 -12イソブチルアルコール 8.8 (20 °C) 107.7 28イソプロピルアルコール 32.4 (20 °C) 82.26 12ミリスチン酸イソプロピル <1 (20 °C) 192.6 164メタノール 97 (20 °C) 64.7 11メチル t-ブチルエーテル 240 (20 °C) 55.2 -28

メチルエチルケトン 74 (20 °C) 79.64 -9メチルイソブチルケトン 16 (20 °C) 117.4 18N-メチルピロリドン 0.33 (25 °C) 202.0 86

ペンタン 420 (20 °C) 36.07 -49n-プロピルアルコール 15 (20 °C) 97.2 23

プロピレンカーボネート 241.7 135ピリジン 18 (25 °C) 115.25 20テトラヒドロフラン 142 (20 °C) 66.0 -14トルエン 28.5 (20 °C) 110.62 41,2,4-トリクロロベンゼン 1 (20 °C) 213.5 106

トリエチルアミン 57 (25 °C) 89.5 -9トリフルオロ酢酸 97.5 (20 °C) 71.8 -3水 17.54 (20 °C) 100.0o-キシレン 6 (20 °C) 144.41 17

一般的な溶媒の特性:(続き)

溶媒 蒸気圧 mm Hg (Torr) 沸点 (°C) 引火点 (°C)

一般的な溶媒の特性 C-9

溶媒の混和性

溶媒を交換する際には、事前に下記の表を参照して、溶媒の混和性について確認しておいてください。下記の影響について注意してください。

• 変更する 2 つの溶媒間に混和性がある場合は、そのまま変更できます。混和性のな

い 2 つの溶媒間で変更する場合(たとえばクロロホルムから水への変更)は、中間

溶媒(n-プロパノールなど)が必要です。

• 溶媒の混和性には、温度も関係します。分析を高温で実施する場合は、高温が溶媒の溶解性に与える影響を考慮してください。

• 水に溶解しているバッファは、有機溶媒と混合した際に沈殿することがあります。

強バッファを有機溶媒に交換する場合は、蒸留水を用いてシステムを完全に洗浄してから、有機溶媒を追加するようにしてください。

溶媒の混和性:

極性インデックス

溶媒粘度 cP、20 °C (@1 atm)

沸点 °C (@1 atm)

混和性番号(M)

λ カットオフ(nm)

0.0 N- ヘキサン 0.313 68.7 29 — 1.8 トリエチルアミン 0.38 89.5 26 — 4.2 テトラヒドロフラン (THF) 0.55 66.0 17 220 4.3 1-プロパノール 2.30 97.2 15 210 4.3 2-プロパノール 2.35 117.7 15 — 5.2 エタノール 1.20 78.3 14 210 5.4 アセトン 0.32 56.3 15, 17 330 5.5 ベンジルアルコール 5.80 205.5 13 — 5.7 メトキシエタノール 1.72 124.6 13 — 6.2 アセトニトリル 0.37 81.6 11, 17 190 6.2 酢酸 1.26 117.9 14 — 6.4 ジメチルホルムアミド 0.90 153.0 12 — 6.5 ジメチルスルホキシド 2.24 189.0 9 — 6.6 メタノール 0.60 64.7 12 210 9.0 水 1.00 100.0 — —

C-10 溶媒の取り扱い時の注意

混和性番号(M-番号)の使用

混和性番号(M 番号)は、液体の標準溶媒に対する混和性を予測する際に使用します。

2 つの液体の混和性を推測するには、大きい方の M 数の値から小さい方の M 数の値を引

き算します。

• M 番号の差が 15 以下である 2 つの液体は、15 °C の条件下において、任意の比率

で混和できます。

• 差が 16 の場合は、25 ~ 75 °C が臨界共溶温度、50 °C が 適温度となります。

• 差が 17 以上の場合、2 つの液体は混和しないか、または 75 °C 以上で混和できます。

溶媒の中には、親油性の度合いが両極端にある溶媒に対して、非混和性を示すものもあります。こうした溶媒には、2 通りの M 数が与えられています。

• 1 番目の番号は常に 16 より小さい値であり、これは高親油性溶媒との混和性を示し

ます。

• 2 番目の番号は、逆端に対する値です。この両者の値の差が大きい液体は、非常に限

られた混和性しか持ちません。

たとえば、フルオロカーボン(フッ化炭素)類の中には、すべての標準溶媒と非混和性を示すものがあり、この M 数は 0 および 32 です。また 2 つの M 番号をもつ液体同士は、

通常相互に混和し合います。

M 数の体系では、一連の標準溶媒に対する混和性をテストすることで個々の液体を分類し

ています。その後、混和性のカットオフポイントに対して、15 単位を補正項として加算ま

たは減算しています。

溶媒の安定剤

ブチル化ヒドロキシトルエン (BHT) を添加した THF のような安定剤を含む溶媒を、シス

テムの流路内に乾燥するまで放置しないでください。これらが乾燥すると、残留した安定剤が析出して検出器のフローセルを含む流路を汚染してしまい、流路を汚染前の状態に戻すためには大がかりなクリーニングが必要となります。

溶媒の粘性

一般に粘性は、単一溶媒または低圧力条件で分析する限り、考慮する必要はありません。ただしグラジェント分析を行う場合、溶媒同士が異なる比率で混合してゆく過程で生じる粘性の変化により、分析中の圧力が変化する場合があります。たとえば水とメタノールを 1:1で混合すると、水やメタノールを単独で使用する場合に対して、生じる圧力は 2 倍になり

ます。

圧力変化が分析に及ぼす影響の程度が不明な場合は、分析中の圧力をモニターするようにしてください。

溶媒の安定剤 C-11

波長の選択

ここでは下記のアイテムに対する UV カットオフ値を、一覧表に示しています。

• 一般的な溶媒

• 一般的な混合移動相

一般の溶媒に対する UV カットオフ

下記の表は、一部の一般的なクロマトグラム用溶媒の UV カットオフ値(溶媒の吸光度が

1 AU と等しくなる波長)をまとめたものです。カットオフの近傍値またはカットオフ値よ

り低い波長で計測を行うと、溶媒の吸光度に起因してベースラインノイズが増加します。

一般的なクロマトグラフィ溶媒における UV カットオフの波長:

溶媒 UV カットオフ (nm)

アセトン 330アセトニトリル 190ジエチルアミン 275エタノール 210イソプロパノール 205イソプロピルエーテル 220メタノール 205n-プロパノール 210

テトラヒドロフラン (THF) 230

C-12 溶媒の取り扱い時の注意

移動相混合液

下記のテーブルは、その他の溶媒、バッファ、界面活性剤、移動相について、そのカットオフ波長の近似値を一覧にしたものです。溶媒の濃度については、 もよく使用される値を掲載しています。他の濃度の吸光度を使用する場合は、吸光度は濃度に比例するため、ベールの法則を用いて近似値を算定してください。

異なる移動相のカットオフ波長:

移動相

UVカットオフ(nm)

移動相

UVカットオフ(nm)

酢酸、1% 230 塩化ナトリウム、1 M 207

酢酸アンモニウム、10 mM 205 クエン酸ナトリウム、10 mM 225

重炭酸アンモニウム、10 mM 190 ドデシル硫酸ナトリウム 190

ポリオキシエチレン (35) ラウリ

ルエーテル (BRIJ 35)、0.1%190 ギ酸ナトリウム、10 mM 200

3-[(3-コールアミドプロピル)-ジメチル-アンモニオ]-1-プロパ

ンスルホネ-ト) (CHAPS) 0.1%

215 トリエチルアミン、1% 235

リン酸二アンモニウム、50 mM 205 トリフルオロ酢酸、0.1% 190

(エチレンジアミン)四酢酸二ナトリウム(ジソジウム EDTA)、1 mM

190 TRIS HCl、20 mM、pH 7.0、pH 8.0

202, 212

4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジン-エタンスルホン酸

(HEPES)、10 mM, pH 7.6

225 TritonX™-100、0.1% 240

塩化水素(塩酸)、0.1% 190 Waters PIC® 試薬 A、

1 バイアル/リットル

200

モノホリノエタンスルホン酸(MES)、10 mM, pH 6.0

215 Waters PIC 試薬 B-6、1 バイアル/リットル

225

リン酸カリウム:一塩基、10 mM二塩基、10 mM

190190

Waters PIC 試薬 B-6、低 UV、

1 バイアル/リットル

190

酢酸ナトリウム、10 mM 205 Waters PIC 試薬 D-4、1 バイアル/リットル

190

波長の選択 C-13

25

5

01

移動相の吸光度

ここでは、よく使用される移動相について、各種の波長に対する吸光度を一覧で示します。ベースラインノイズを抑制するには、十分考慮した上で移動相を選択する必要があります。

適な移動相とは、測定に用いる波長に対して透明であるものです。そのような移動相を使用すると、すべての吸光度はサンプルの物性のみに起因したものとなります。また移動相の吸光度の影響としては、「オートゼロ」機能で排除される吸光度の分だけ、検出器のダイナミックレンジの直線性が損なわれる点が挙げられます。吸光度には、移動相の波長、pH、および濃度が関与します。下記の表は、各種の移動相の値を例示したものです。

下表の吸光度は、10 mm の光路長に基づいています。

空気および水に対して測定した移動相の吸光度:

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

溶媒

アセトニトリル 0.05 0.03 0.02 0.01 0.01 <0.01 — — — —メタノール(未脱気) 2.06 1.00 0.53 0.37 0.24 0.11 0.05 0.02 <0.01 —メタノール(脱気済み) 1.91 0.76 0.35 0.21 0.15 0.06 0.02 <0.01 — —イソプロパノール 1.80 0.68 0.34 0.24 0.19 0.08 0.04 0.03 0.02 0.0安定剤不含のテトラヒドロフラン(THF、新品)

2.44 2.57 2.31 1.80 1.54 0.94 0.42 0.21 0.09 0.0

安定剤不含のテトラヒドロフラン(THF、開封済)

>2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 2.5 1.4

酸および塩基

酢酸、1% 2.61 2.63 2.61 2.43 2.17 0.87 0.14 0.01 <0.01 —

塩酸、0.1% 0.11 0.02 <0.01 — — — — — — —

リン酸、0.1% <0.01 — — — — — — — — —

トリフルオロ酢酸 1.20 0.78 0.54 0.34 0.22 0.06 <0.02 <0.01 — —リン酸二アンモニウム、50 mM

1.85 0.67 0.15 0.02 <0.01 — — — — —

トリエチルアミン、1% 2.33 2.42 2.50 2.45 2.37 1.96 0.50 0.12 0.04 <0.

C-14 溶媒の取り扱い時の注意

2

1

01

バッファおよび塩

酢酸アンモニウム、10 mM

1.88 0.94 0.53 0.29 0.15 0.02 <0.01 — — —

重炭酸アンモニウム、10 mM

0.41 0.10 0.01 <0.01 — — — — — —

エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム(ジソジウム EDTA)、1 mM

0.11 0.07 0.06 0.04 0.03 0.03 0.02 0.02 0.02 0.0

4-(2-ヒドロキシエチ

ル)-1-ピペラジニルエ

タンスルホン酸(HEPES)、10 mM、pH 7.6

2.45 2.50 2.37 2.08 1.50 0.29 0.03 <0.01 — —

モノホリノエタンスルホン酸 (MES)、10 mM、pH 6.0

2.42 2.38 1.89 0.90 0.45 0.06 <0.01 — — —

リン酸二水素カリウム、一塩基 (KH2PO4)、10 mM

0.03 <0.01 — — — — — — — —

リン酸水素二カリウム、二塩基、(K2HPO4)、10 mM

0.53 0.16 0.05 0.01 <0.01 — — — — —

酢酸ナトリウム、10 mM

1.85 0.96 0.52 0.30 0.15 0.03 <0.01 — — —

塩化ナトリウム、1 M 2.00 1.67 0.40 0.10 <0.01 — — — — —

クエン酸ナトリウム、10 mM

2.48 2.84 2.31 2.02 1.49 0.54 0.12 0.03 0.02 0.0

ギ酸ナトリウム、10 mM

1.00 0.73 0.53 0.33 0.20 0.03 <0.01 — — —

リン酸ナトリウム、100 mM、pH 6.8

1.99 0.75 0.19 0.06 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 <0.

トリス HCl、20 mM、pH 7.0

1.40 0.77 0.28 0.10 0.04 <0.01 — — — —

空気および水に対して測定した移動相の吸光度:(続き)

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

波長の選択 C-15

01

1

1

2

3

トリス HCl、20 mM、pH 8.0

1.80 1.90 1.11 0.43 0.13 <0.01 — — — —

Waters PIC® 試薬

PIC A、1 バイアル/L 0.67 0.29 0.13 0.05 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 <0.

PIC B6、1バイアル/L 2.46 2.50 2.42 2.25 1.83 0.63 0.07 <0.01 — —

PIC B6、低UV、

1バイアル/L0.01 <0.01 — — — — — — — —

PIC D4、1バイアル/L 0.03 0.03 0.03 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.0

界面活性剤

BRI J 35、1% 0.06 0.03 0.02 0.02 0.02 0.01 <0.01 — — —

3-[(3-コールアミドプ

ロピル)-ジメチルアン

モニオ]-1-プロパンス

ルホネ-ト(CHAPS)、0.1%

2.40 2.32 1.48 0.80 0.40 0.08 0.04 0.02 0.02 0.0

ドデシル硫酸ナトリウム (SDS)、0.1%

0.02 0.01 <0.01 — — — — — — —

4 -オクチルフェノー

ルポリエトキシレート(Triton™X-100)、0.1%

2.48 2.50 2.43 2.42 2.37 2.37 0.50 0.25 0.67 1.4

ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート (Tween™ 20)、0.1%

0.21 0.14 0.11 0.10 0.09 0.06 0.05 0.04 0.04 0.0

空気および水に対して測定した移動相の吸光度:(続き)

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

C-16 溶媒の取り扱い時の注意

索引

記号% 溶媒組成 3-9

AACQUITY UPLC システム

起動 3-5, 3-6, 3-9カラムカリキュレータ 2-4

EeCord カラムチップ

概要 1-10EC の認定代理人 viiELS 検出器

I/O シグナルコネクタ B-11シグナルコネクタ B-11

Empower ソフトウェアからのコンソールの起動 3-13

Ethernet 接続、実行 B-4

FFlexCart

電源の接続 B-12FLR 検出器

I/O シグナルコネクタ B-11シグナルコネクタ B-11

HHFIP C-4

II/O シグナルコネクタ

ELS 検出器 B-11FLR 検出器 B-11PDA 検出器 B-10TUV 検出器 B-10クォータナリソルベントマネージャ B-9サンプルマネージャ B-10

ISM 分類 vi

LLED

TUV 検出器、ランプ 3-4, 3-12クォータナリソルベントマネージャ、

流れ 3-3, 3-8サンプルマネージャ、分析 3-3, 3-11電源 3-3モニター 3-3

MMS グレードの溶媒 C-2M 番号 C-11

PPDA 検出器

I/O シグナルコネクタ B-10コントロールパネル、使用 3-12シグナルコネクタ B-10

PIC 試薬 C-16

TTHF C-4, C-6, C-7, C-10, C-11, C-12, C-14

適合キット C-5TUV 検出器

I/O シグナルコネクタ B-10コントロールパネル、使用 3-12シグナルコネクタ B-10ランプ LED 3-4, 3-12ランプ、オン/オフコントロール 3-12

UUV カットオフ値 C-12, C-13

WWaters PIC 試薬 C-16

あ圧力、システム 3-9安全に関する勧告 A-1安定剤、溶媒 C-11

索引-1

い移動相

粘性に関して考慮すべき事項 C-11波長 C-14

移動相混合液、UV カットオフ C-13引火点、溶媒 C-8

え塩基、吸光度 C-14

おオートゼロコントロール 3-13汚染、防止 C-2温度

カラムヒーター 3-10

か界面活性剤、吸光度 C-16概要

eCord カラムチップ 1-10溶媒取り扱い時の注意 C-2

化学的有害物質に関する警告 A-4カットオフ波長、溶媒 C-10可燃性溶媒 A-3カラム

概要 1-10互換性 1-10情報、eCord カラムチップを参照カリキュレータ 2-4

カラムヒーター現在温度 3-10設定温度 3-10

カリキュレータ、カラム 2-4

き記号

警告 A-2注意 A-5電気 A-6取り扱い A-7

希釈液、サンプル C-5起動 3-6起動、ACQUITY UPLC システム 3-6, 3-9

起動制御 3-9吸光度

塩基 C-14界面活性剤 C-16酸 C-14

吸光度値、表示 3-12極性インデックス、溶媒 C-10

くクォータナリソルベントマネージャ

コントロールパネル、使用 3-8送液 LED 3-3, 3-8溶媒に関する推奨事項 C-7I/O シグナルコネクタ B-9シグナルコネクタ B-9

け警告

感電 B-11警告記号 A-2, A-5ケミストリーテクノロジー 1-10検出器

オートゼロコントロール 3-13波長 3-12溶媒に関する推奨事項 C-8

こ合計流量 3-9コンソール

Empower ソフトウェアからの起動 3-13コンソールの起動

Empower ソフトウェアから 3-13コントロールパネル 3-8

PDA 検出器 3-12TUV 検出器 3-12クォータナリソルベントマネージャ 3-8サンプルマネージャ 3-10

混和性番号 C-11溶媒 C-10

混和性番号、溶媒 C-10

索引-2

さ酸、吸光度 C-14サンプル希釈液 C-5サンプルマネージャ

コントロールパネル、使用 3-10サンプルコンパートメント、現在の温

度 3-10サンプルコンパートメント、設定温度

3-10分析 LED 3-3, 3-11溶媒に関する推奨事項 C-8I/O シグナルコネクタ B-10シグナルコネクタ B-10ステータス 3-10リセット 3-11

しシグナル接続、実行 B-7システム

クリーニングの推奨事項 C-6電源を入れる 3-2

システム圧力 3-9システム機能の起動 3-5質量分析計による感電の危険性 A-4試薬 C-16蒸気圧、溶媒 C-8

す推奨事項、システムのクリーニング C-6スタートアップテスト 3-2

せ生物学的有害物質に関する警告 A-4接続

Ethernet、実行 B-4シグナル、実行 B-7電源 B-12

設定Empower ソフトウェア 3-7

設定温度カラムヒーター 3-10

洗浄試薬 C-6

I

そ送液 LED 3-8送液停止 3-9装置に関するガイドライン v, A-5組成、溶媒 3-9

た対象読者および目的 v

ち注意記号 A-5調整剤 C-5

て適合キット

テトラヒドロフラン (THF) C-5ヘキサン C-5

テスト、スタートアップ 3-2テトラヒドロフラン C-4, C-6, C-7, C-10,

C-11, C-12, C-14適合キット C-5

添加剤 C-5電気記号 A-6電源、接続 B-12電源 LED 3-3電源コード B-11電源の接続

FlexCart B-12電源を入れる 3-2

と取り扱いに関する記号 A-7

にニードル洗浄コントロール 3-11

ね粘度、溶媒 C-10粘性に関して考慮すべき事項 C-11

索引-3

は爆発の警告 A-3波長

移動相の吸光度 C-14カットオフ C-13選択 C-12ディスプレイ 3-12

バッファ溶媒 C-3

ふ沸点、溶媒 C-8, C-10プライム

シール洗浄コントロール 3-9溶媒コントロール 3-9サンプルマネージャのコントロール

3-11フローセル

推奨事項 C-8分析 LED 3-11

へヘキサフルオロイソプロパノール C-4ヘキサン/THF適合キット C-4ヘキサン適合キット C-5

み水、溶媒として C-2

も目的および対象読者 vモニター、システム装置 LED 3-3

よ用途 v溶媒

THF C-4, C-6, C-7, C-10, C-11, C-12, C-14

UV カットオフ C-12安定剤 C-11一般特性 C-8混和性 C-10混和性数 C-11清浄 C-2

使用できない C-6推奨 C-3推奨事項

クォータナリソルベントマネージャ C-7

検出器 C-8サンプルマネージャ C-8

組成 3-9調製 C-2テトラヒドロフラン C-4, C-6, C-7,

C-10, C-11, C-12, C-14粘性に関して考慮すべき事項 C-11バッファ C-3品質についてのガイドライン C-2ヘキサン/THFキットでの使用 C-4水 C-2汚れ C-2ろ過 C-2

溶媒のろ過 C-2

らランプ

オン/オフコントロール 3-12ランプ LED 3-12

りリセットコントロール

TUV 検出器 3-13サンプルマネージャ 3-11ソルベントマネージャ 3-10

流量合計 3-9

索引-4