Le modèle luxembourgeois en Santé

Environnementale

Dr Sc. Jean-Marc MichelsPrésident de la Luxembourg Environmental Health

Academy a.s.b.l.

jean-marc.michels@cst.lu

Les acteurs (1) À la base: les patients. Se regroupent en une association

AKUT a.s.b.l. Jean Huss, député, milite pour une reconnaissance

scientifique et politique de la problématique des maladies chroniques environnementales

Ministère de la Santé:- Division de la Santé

* Service de Médecine de l’Environnement- Laboratoire National de Santé:

* Laboratoire d’Hygiène du Milieu et de Surveillance Biologique (accrédité ISO 17025)

Les acteurs (2) Les Médecins spécialement formés dans le

domaine Laboratoire clinique: Laboratoire de Cytométrie

de Flux de la Clinique Ste Thérèse Laboratoire privé: Laboratoires Réunis, Junglinster Les Centres de Recherche:

- CRP Gabriel Lippmann- CRP Henri Tudor- CRP Santé- Laboratoire National de Santé

Université de Luxembourg

Historique (1)

Existence d’une structure historiquement bien définie:

- 1991: AKUT a.s.b.l association de patients- 1994: création du Service de Médecine de

l’Environnement (Ministre de la Santé Johny Lahure †)

- 1995-96: mise au point & début des analyses matricielles au Laboratoire d’Hygiène du Milieu & de Surveillance Biologique au LNS, existence depuis quelques années de travaux importants menés sur les amalgames

Historique (2)- 2000-2002: des médecins sensibilisés suivent

une formation spécialisée de “Médecine de l’Environnement” en Allemagne et se regroupent dans l’ALMEN a.s.b.l.

- 2002-2003: mise au point & développement du test LAT (Lymphocyte Activation Test) au Laboratoire de Cytométrie de Flux de la Clinique Ste Thérèse. En même temps: approche multi-analytique au Laboratoires Réunis de Junglinster (intolérances alimentaires, polymorphismes génétiques,…)

Historique (3)

- 2004: sous l’impulsion de “Stop Poisons Santé” colloque international de Habay (B) Les maladies de l'environnement : un défi pour les professionnels de la santé où les acteurs luxembourgeois, ensemble avec les collègues internationaux, présentent leur démarche. Premiers jalons concrets de collaboration transfrontalière

Historique (4)

- 2005:conférence Environment & Health à Luxembourg dans le cadre de la présidence européenne : recherche d’harmonisation des procédures d’échantillonage (ambulances vertes), la structure & l’organisation luxembourgeoises y sont concrètement présentées, conclusions du gouvernement luxembourgeois à l’attention des instances européennes

Historique (5)- 2005: création de la LEHA (Luxembourg

Environmental Health Academy a.s.b.l.), plateforme regroupant les professionnels du domaine (“Baubiologen”, laboratoires, médecins, chercheurs,…)Entretemps: participation des acteurs à des projets transfrontaliers (AIME), projets visant à valider les différentes approches (analytiques, médicales,…)

Workflow (1) Information

- Ministère de la Santé

Direction de la Santé, Laboratoire National de Santé

- ONGALMEN (médecins), AKUT (patiemts), LEHA

(professionnels)

- Réunions d’information- Nouveaux médias- Bouche à oreille- Presse internationale

Workflow (2) Anamnèse (Médecins) Visite à domicile/échantillonage (Service

de Médecine de l’Environnement) Analytique (Service de Médecine de

l’Environnement, Laboratoire d’Hygiène du Milieu & de Surveillance Biologique, Laboratoires cliniques, Laboratoires privés)

Recherche (CRP, Université, collaborations internationales)

Workflow (3) Interprétation, recommandations

(Service de Médecine de l’Environnement)

Feedback (tous les acteurs) Base de données (Service de

Médecine de l’Environnement)

En chiffres (1)

Service de Médecine de l’Environnement: # visites à domicile

2001 420

2002 530

2003 450

2004 500

2005 580

Composition du service: 2 personnes

Demandes effectives en 2005: >600

En chiffres (2)Laboratoire D’Hygiène du Milieu & de Surveillance Biologique:

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

2001 2002 2003 2004 *2005

# échantillons environnem.2001-*2005 (*estimation)

2005: ≈40.000 parameters

En chiffres (3)

Laboratoire de Cytométrie de Flux de la Clinique Ste Thérèse:

Evolution des demandes/analyses

0

1000

2000

3000

Année

Dem

ande

s

0

10000

20000

30000

40000

50000

Ana

lyse

s

Demandes

Analyses

Demandes 25 401 181 675 1361 2216 2548

Analyses 704 4968 5578 11133 30108 41517 36503

1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005

Mesure des effets biologiques: le test LAT Mise en présence des cellules

sanguines (globules blancs) avec divers « activateurs »

Mesure par cytométrie de flux de l’activation des lymphocytes et de leur production de cytokines (IL-2, IL-6, IFN-γ,…)

Substances ignifuges Molécules biocides Composants Amalgames

Tributylphosphate (TBP) DDT Mercure (II)

Tris-(2-chloroéthyl)-phosphate (TCEP)

EULAN Etain (II)

Tris-(3-chloropropyl)-phosphate (TCPP)

Lindane Argent

Tris-(2-butoxyéthyl)-phosphate (TBEP)

Pentachlorphénol (PCP) Cuivre (II)

Tris-(2-éthylhexyl)-phosphate (TEHP)

Perméthrine Nickel (II)

Métaux lourds Acrylates Molécules diverses

Aluminium Méthylacrylate (MA) 1,3-butadiène diépoxide

Cadmium Propylméthylacrylate (PMA)

Formaldéhyde

Cobalt (II) Phénylacétate de mercure

Chrome (III) Resorcinol

Molybdène Styrène

Or (II) Thiomersal

Palladium (II) Uréthane

Platine 4-vinylpyridine

Plomb

Titane (IV)

Vanadium

Zinc

Zirconium

Liste des activateurs:

Présentation des résultats

Patients avec problèmes dentaires Patients avec problèmes liés à

l’exposition de polluants présents à leur domicile (« indoor-pollution »)

Problèmes dentaires267465 (F)

44913 (F) 222085 (M)

Indoor-pollution (1)

166960 (F) PCP, TBP: IL-2, IFN-g; Th0 & Th1

PCP 1,1 mg

TBP 5,4 mg

TCPP

1,8 mg

Indoor-pollution (2)

36107 (F) TBP, TPP: production seuil IFN-g TCEP, Permétrhine: IFN-g

TBP 94 mg mousse canapé

TPP 21 mg mousse canapé

TCEP 1473 mg mousse canapé

Permétrhine

12 mg canapé 64 mg mousse

79141 (F)

Analyses matricielles: environnement saturé en EULAN et Perméthrine

EULAN, PCP: IL-2 par CD4 mémoires (Th0)

Perméthrine: IL-2 & IFN-g par CD4 mémoires (Th0 & Th1)

15930m (F)

0,002,004,006,008,00

10,00

Cl n

ick

Cl c

hro

Cl c

ob

cl. d

'or

Pla

tine

cl. p

alla

d

cl. t

itane

5650

0

Activation Lymphocytaire

0,000,200,400,600,801,001,20

Cl

nic

k

Cl

chro

Cl

cob

cl.

d'o

r

Pla

tin

e

cl.

pal

lad

cl.

tita

ne

40

 10

5 1

47

40

 10

5 1

65

40

 10

5 1

66

40

 10

5 1

68

40

 10

5 1

69

40

 10

5 1

70

40

 10

5 1

71

res IL-2

res IL-10

res IL-6

res Ifn

Expression des cytokines totales

Porteuse prothèse de genou

Malaise depuis l’implantation de la prothèse

Sensible Ni, Cr; faiblement sensible Co, Au

Réponse immunitaire de type Th0 prédominante

Répartition naïve/mémoire IL-2 est la principale cytokine

exprimée Réponse Th0 Cellules mémoires exposition constante du

système immunitaire aux métaux lourds analysés

Retrait de la prothèse a considérablement amélioré l’état de santé de la patiente (marche actuellement normalement)

0,000,200,400,600,801,001,20

Cl n

ick

Cl c

hro

Cl c

ob

cl.

d'o

r

Pla

tine

cl.

palla

d

cl.

titane

40 1

05 1

47

40 1

05 1

65

40 1

05 1

66

40 1

05 1

68

40 1

05 1

69

40 1

05 1

70

40 1

05 1

71

IL-2m

IL-2n

Interleukine-2

(1) Lymphocytes activés & production de cytokines: nickel

Activateur: Nickel

0,00

0,50

1,00

1,50

Patients

%IF

N-g

0

5

10

15

20

% L

y act IFN-g

Ly act

Activateur: Nickel

0,00

0,50

1,00

1,50

Patients

% IL

-2

0

5

10

15

20

% L

y ac

t IL-2

Ly act

(2) Lymphocytes activés & production de cytokines: or

IL-2 par activation avec l'or

0,00

0,50

1,00

1,50

2,00

2,50

Patients

IL-2

0

2

4

6

8

10

12

14

16

Ly ac

t IL-2

Or

IFN-g par activation avec l'or

0,00

0,50

1,00

1,50

2,00

2,50

Patients

IFN-g

0

2

4

6

8

10

12

14

16

Ly ac

t IFN-g

Or

(3) Lymphocytes activés & production de cytokines: mercure

Activateur: Mercure

0,00

2,00

4,00

6,00

8,00

10,00

Patients%

IFN-

g0

10

20

30

40

50

% L

y ac

t IFN-g

Ly act

Activateur: Mercure

0,00

2,00

4,00

6,00

8,00

10,00

Patients

% IL

-2

0

10

20

30

40

50

% L

y ac

t IL-2

Ly act

Le mercure: un cas particulier

Activation par le mercure

0

5

1 0

1 5

2 0

2 5

3 0

3 5

4 0

Nickel

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Activation par la Perméthrine

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Or

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Lymphocytes activés par les métaux lourds

Analyse multiparamétrique pour >150 patients

Aktivation durch Schwermetalle

0

10

20

30

40

50

60

% c

ellu

les

ac

tiv

ée

s

Hg Ni Au Pd Pt Ti

CD4 CD8 B NK CD4CD8 B NK NK NK NK NKB B BCD4 CD4 CD4 CD4CD8 CD8 CD8 CD8B

Lymphocytes activés par les biocides

Aktivation durch Biozide

0

5

10

15

20

25

30

35

40

% c

ellu

les

ac

tiv

ée

s

Thiomersal EULAN Permethrin

CD4 CD4 CD4B B BNK NK NKCD8 CD8 CD8

Cinétique cellulaire d’une activation par le mercure

Résumé de 3 expériences indépendantesZellen Kinetik

0,00

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00

30,00

35,00

40,00

45,00

0 1 2 3 4 5 6

Inkubationszeit (Std)

% a

ktiv

iert

e Ze

llen

CD8

CD4

CD19

NK

Etat des connaissances « Metal-Protein

Complex-Mediated Transport and Delivery of Ni2+ to TCR/MHC Contact Sites in Nickel-Specific Human T Cell Activation », H-J Thierse, et al; J. Immunol., 2004, 172: 1926-1934

« Au(III), Pd(II), Ni(II) and Hg(II) alter NFkB signaling in THP1 monocytic cells », J.B. Lewis, et al; J. Biomed. Mater. Res., 2005, 74A: 474-481

Conclusions: La réponse immunitaire (taux d’activation, production de

cytokines,…) est individuelle Le test LAT est un bon indicateur de l’existence d’une

sensibilité du système immunitaire à un polluant donné Ce test constitue un instrument central de recherche

d’effets biologiques dans le contexte “Santé & Environnement”, pour autant qu’il soit demandé de manière ciblée en fonction- 1) des résultats d’analyses faites sur les prélèvements “à domicile” et- 2) de l’anamnèse du patient

D’où l’intérêt du “modèle luxembourgeois” en la matière, modèle basé essentiellement sur l’échange des informations et la collaboration étroite des acteurs

Remerciements

Laboratoire de Cytométrie Cl. Ste Thérèse- (Luis DA SILVA AREDE)- Monette LOUIS - Thibaut CAPELLEN- Claudine DEBAIFFE- Jang REUTER

Service de Médecine de l’Environnement - Dr Joseph Wampach - Mr Ralph Baden

Laboratoire d’Hygiène du Milieu & de Surveillance Biologique - Mr Gilbert Hansen - Mr Marc Fischer