Synthèse...Hemolytic anemia. Diagnosis. Les anémies hémolytiques sont carac-térisées par une destruction périphé-rique des globules rouges. Elles peuvent être acquises ou congénitales,

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Synthèse

Anémie hémolytique congénitale par déficit en Glucose-6-Phosphate Déshydrogénase

Mura M1, Saidi R2, Wolf A3, Moalic JL2, Oliver M2

1. Service de pathologie infectieuse et tropicale, 2. Fédération des laboratoires, 3. Service de pharmacie hospitalière,Hôpital d’instruction des armées Alphonse Laveran, Marseille.

Med Trop 2009 ; 69 : 551-555

RÉSUMÉ • Le déficit en G6PD est un déficit enzymatique fréquent avec des conséquences cliniques variables mais potentiellement sévères. Il existede nombreux facteurs déclenchant les crises hémolytiques, dont une liste importante de médicaments. Le dépistage de ce déficit enzymatique est un préa-lable nécessaire à l’utilisation de certaines molécules, particulièrement la primaquine ou la dapsone.

MOTS-CLÉS • Glucose-6-phosphate déshydrogénase. Anémie hémolytique. Dépistage.

CONGENITAL HEMOLYTIC ANEMIA DUE TO GLUCOSE-6-PHOSPHATE DEHYDROGENASE DEFICIENCY

ABSTRACT • Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency is a common enzyme defect with a wide range of clinical manifestations that canbe severe. A variety of factors including many medications can induce hemolytic episodes. Screening for G6PD deficiency is required before use of somedrugs especially primaquine or dapsone.

KEY WORDS • Glucose-6-phosphate dehydrogenase. Hemolytic anemia. Diagnosis.

Les anémies hémolytiques sont carac-térisées par une destruction périphé-

rique des globules rouges. Elles peuventêtre acquises ou congénitales, corpuscu-laires ou extra-corpusculaires. Les anémieshémolytiques acquises sont surtout extra-corpusculaires, d’étiologie immunologique,toxique ou infectieuse dans la plupart descas. Les anémies hémolytiques congénitalessont le plus souvent dues à une hémoglo-binopathie mais il ne faut pas négliger lesanomalies de membrane (sphérocytose,elliptocytose,...) et les enzymopathies.Parmi les déficits enzymatiques touchant lalignée érythrocytaire, le déficit en Glucose-6-Phosphate-Déshydrogénase (G6PD) restele plus significatif par sa fréquence et sesimplications cliniques. En effet, la prise decertains médicaments (dapsone, cotri-moxazole, primaquine,...), la consommationde certains aliments (fèves), et une variétéd’infections (rickettsioses, infections àEscherichia coli,...) entraînent chez les per-sonnes déficitaires une anémie hémolytiqued’intensité et de gravité variables. Le défi-cit en G6PD est particulièrement fréquentdans les pays méditerranéens, en Afrique eten Asie tropicale mais peut être rencontrédans toutes les zones géographiques en rai-

son des mouvements de populations. Iltouche environ 420 millions de personnesdans le monde (1). Son dépistage est acces-sible à tous les laboratoires de biologiemédicale avec des techniques simples àmettre en œuvre ne nécessitant qu’unspectrophotomètre. Cependant, l’interpré-tation des résultats peut parfois être délicate,particulièrement en période d’hémolyse.Cette revue a pour objectif de faire le pointsur les anémies hémolytiques par déficit enG6PD.

Généralités

Physiopathologie du déficit enzymatiqueen G6PD

La G6PD est une enzyme de la voiedes pentoses mono-phosphates. Elle cata-lyse l’oxydation du glucose-6-phosphate en6-phospho-gluconate avec réduction conco-mitante du nicotinamide adénine dinucléo-tide phosphate (NADP+ ; NADPH, H+).Dans l’hématie, la G6PD est la seule sourcede production du NADPH, H+, coenzymede la glutathion réductase. Le NADPHréduit permet la régénération du glutathion,dont le rôle est la neutralisation desperoxydes, très toxiques pour le globulerouge. Le maintien du pool de glutathionréduit à un niveau normal est nécessaire àla lutte contre le stress oxydatif. Les

hématies des sujets présentant un déficit del’activité G6PD produisent moins deNADPH, H+ nécessaire à la détoxificationdes radicaux libres produits par le métabo-lisme. Elles sont donc plus sensibles à l’hé-molyse lors d’agressions oxydatives variées(infections, ingestion de certains médica-ments ou aliments).

Le déficit en G6PD est le deuxièmedéficit enzymatique héréditaire par ordre defréquence. Le gène de cette enzyme estlocalisé sur le chromosome Xq28. La trans-mission est donc liée au sexe : les hommeshémizygotes sont toujours symptomatiqueset les femmes, qui transmettent l’anomalie,sont en général cliniquement indemnes.Toutefois, le déficit peut être symptoma-tique chez les femmes, soit homozygotesdans les populations où la fréquencegénique est élevée, soit hétérozygotes enfonction de l’inactivation de l’un ou l’autredes deux chromosomes X (2).

L’Organisation Mondiale de laSanté (OMS) a établi une classification phé-notypique de ces déficits en fonction del’activité enzymatique résiduelle qui condi-tionne le risque d’hémolyse et donc la sévé-rité de la maladie (Tableau 1). La classe IOMS comprend les déficits responsablesd’une anémie hémolytique chronique. Cesdéficits sont rarement retrouvés et n’ont pasde spécificité de population. La classe IIOMS rassemble les déficits sévères danslesquels l’activité enzymatique est infé-

• Correspondance : [email protected]• Article reçu le 2/09/2009, définitivement acceptéle 2/10/2009.

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rieure à 10 % de l’activité enzymatique nor-male. La classe III OMS regroupe lesvariants dont l’activité enzymatique estcomprise entre 10 et 60 % de la normale.Les classes IV et V regroupent des variantsnon pathogéniques.

Le déficit en G6PD présente ungrand polymorphisme avec plus de 400variants génotypiques. La G6PD B est laforme sauvage, normale avec une demi-viede 62 jours (3). La G6PD A est unevariante fréquente à activité normale oùl’aspartate remplace l’asparagine en posi-tion 126. Lorsqu’une seconde mutation estprésente sur ce même allèle, on parle devariant G6PD A-. La fréquence de laG6PD A- est voisine de 20 % dans lespopulations noires africaines. Son activitéest modérément diminuée (classe IIIOMS) et sa demi-vie est de 13 jours. Lavariante méditerranéenne ou G6PD B- (Ser188 Phe) est présente dans le pourtourméditerranéen, le Proche- et le Moyen-Orient où elle touche 10 à 25 % de la popu-lation. Son activité est fortement diminuée(classe II OMS) avec une demi-vie de 8jours. Dans le sud-est asiatique, lesvariants Mahidol, Canton, Viangchan etKaiping sont prédominants et 10 à 15 % decette population est déficitaire (4-6).Seules les méthodes de biologie molécu-laire permettent de caractériser les variantsavec certitude.

Conséquences clinico-biologiques

Une hémolyse d’intensité variablepeut être déclenchée par l’exposition à unoxydant. L’intensité des manifestationscliniques dépend du variant enzymatique etdes facteurs déclenchants.

• Facteurs déclenchantsDe nombreux médicaments sont

impliqués dans le déclenchement des criseshémolytiques. L’Agence Française deSécurité Sanitaire des Produits de Santé(AFSSAPS) a publié en février 2008(Tableau 2) des recommandations sur leniveau de risque des principaux médica-ments incriminés. L’implication de certainsmédicaments, notamment du paracétamol,

est parfois controversée. En effet, s’il estadmis qu’un surdosage en paracétamol està l’origine d’une crise hémolytique, les casd’hémolyse retrouvés aux doses thérapeu-tiques sont souvent imputables à une infec-tion sous jacente. On ne peut cependant pasexclure une implication directe de cettemolécule dans le déclenchement de la crise(7). La plus grande prudence s’imposedonc.

L’infection est probablement unecause sous-estimée d’hémolyse chez lesujet déficient en G6PD (8). Les agentsinfectieux les plus fréquemment associésaux crises hémolytiques sont Escherichiacoli, le streptocoque bêta hémolytique, lesrickettsies et les hépatites virales.

L’ingestion de fèves est responsablede crises aiguës sévères ou favisme, en par-ticulier chez les variants méditerranéens.

L’acido-cétose diabétique est unfacteur déclenchant discuté d’hémolyse (8).

• Hémolyse aiguë (9)Dans la forme typique, une hémo-

lyse aiguë modérée survient dans les 24 à48 heures après exposition à un oxydant.Les protéines du stroma et la globine sontdénaturées par oxydation et précipitent sousforme de corps de Heinz. Les globulesrouges, plus rigides, sont alors séquestréspar la rate et éliminés de la circulation. Lessignes biologiques d’anémie hémolytiquesont présents : chute de l’haptoglobine, réti-culocytose, hyperbilirubinémie libre etélévation des LDH. Des tableaux cliniquesplus sévères sont possibles, associant unehémoglobinurie et un état de choc avec uneinsuffisance rénale aiguë, comme dans lefavisme.

Cependant, le tableau biologiquepeut parfois être trompeur. En effet, en pré-sence d’un syndrome inflammatoire asso-cié à un épisode hémolytique modéré,notamment lorsque le facteur déclen-chant est un agent infectieux, l’haptoglo-bine peut se situer dans des valeurs nor-males basses. La réticulocytose peut êtreinférieure à 100 000/mm3 si l’analyse estréalisée rapidement après le début de l’hé-molyse. Ainsi, les marqueurs biologiquesdoivent être recontrôlés lorsque le tableau

clinico-biologique est discordant ouincomplet.

Chez le sujet de classe III OMS(type G6PD A-), le processus hémolytiqueest généralement bref, malgré la poursuitede l’exposition à l’élément oxydant. Lesréticulocytes, riches en G6PD, viennentcompenser le déficit qui touche uniquementles hématies âgées en raison de la diminu-tion de la demi-vie de l’enzyme. Il existeune phase d’équilibre entre régénération ethémolyse (8).

Chez le sujet de classe II OMS(type méditerranéen), le tableau clinique esthabituellement plus sévère et ne cède passpontanément. Malgré la présence d’uneréticulocytose, l’activité G6PD est trèsdiminuée et l’hémolyse persiste. L’arrêt dufacteur déclenchant est impératif. Lerecours aux transfusions de culots globu-laires est fréquent.

Le sujet de classe I OMS, plus rare,présente une anémie hémolytique chroniqueà début précoce, souvent néonatal. La duréede vie des hématies est très diminuée.L’évolution chronique est émaillée depoussées hémolytiques aiguës. Les com-plications habituelles des hémolyses chro-niques sont rapportées : lithiase biliaire,hémosidérose.

• Ictère hémolytique néonatalIl est particulièrement fréquent en

Afrique et Asie tropicale et sub-tropicale.La physiopathologie n’est à ce jour pas bienélucidée (immaturité hépatique, ingestionde médicament oxydant par la mère dans lepré-partum,...) (2). Le risque principal estl’ictère nucléaire et le décès du nouveau-né. L’exsanguino-transfusion peut s’avérernécessaire.

Déficit en G6PD et protection contre lepaludisme

Les déficits en G6PD de classe IIou III OMS assurent une relative protectioncontre le paludisme. En effet, les zones dedéficit en G6PD de classe II et III se super-posent avec la zone d’infestation parPlasmodium falciparum. En Afrique et Asiedu sud-est, où l’infection à Plasmodium fal-

Tableau 1. Classification OMS des variants enzymatiques de la G6PD en 5 classes, dont 3 déficitaires.

Type Intensité du déficit Activité enzymatique Expression clinique Variants G6PD fréquents

Classe I sévère < 10 % de l'activité normale Hémolyse chronique Rare

Classe II sévère < 10 % de l'activité normale Hémolyse intermittente G6PD B- ou méditerranéen ; Mahidol ; Canton

Classe III modérée 10 à 60 % de l'activité normale Hémolyse suite à un stress oxydatif G6PD A-

Classe IV pas de déficit 60 à 150 % de l'activité normale - G6PD B ; G6PD A

Classe V activité accrue > 150 % de l'activité normale - Rare



ciparum est endémique, l’incidence du défi-cit en G6PD est estimée à plus de 10 % dela population. Au contraire, au Japon, auNord de la Chine et en Europe du Nord,zones géographiques historiquementindemnes de paludisme, l’incidence du défi-cit en G6PD est inférieure à 0,1 %. Il existeégalement des incidences très variablesentre les ethnies d’une même région(Vietnam du Nord) selon qu’elles vivaienttraditionnellement en dehors ou au sein deszones d’endémie palustre (10). La défail-lance des mécanismes de défense érythro-cytaires contre les oxydants est un handicappour le développement du parasite, parti-culièrement sensible aux agents oxydants.Celui-ci s’adapte rapidement mais sa fra-gilité persiste (11).

Déficit en G6PD et traitement dupaludisme

L’AFSSAPS déconseille l’utilisa-tion de la chloroquine et de la quinine en casde déficit en G6PD du fait du risque d’hé-molyse aiguë. La chloroquine est utilisée enprophylaxie du paludisme en zone 1 OMS(absence de résistance développée par P.falciparum) et en traitement curatif du palu-disme à P. vivax et P. ovale. La quinine estutilisée en traitement curatif du paludismeà P. falciparum, essentiellement par voieintra-veineuse, dans les formes graves ou enprésence d’une intolérance alimentaire. Enl’absence d’alternative thérapeutique, letraitement pourra être entrepris mais imposeun suivi médical rapproché.

L’association atovaquone-proguanilpeut être utilisée en prophylaxie et en trai-tement curatif sans risque pour les patientsdéficitaires en G6PD, de même que laméfloquine et la doxycycline.

La primaquine est la seule moléculeactuellement disponible efficace contreles formes hépatiques quiescentes dePlasmodium vivax et ovale. Le nombre decas ne cesse d’augmenter en France en rai-son de l’augmentation du tourisme et de laprésence des troupes militaires françaises enzone d’endémie. En 2008, le Haut Conseilde la santé publique évalue le nombre de casen France métropolitaine à 500-550/an (12).La primaquine peut être utilisée en pro-phylaxie terminale permettant d’éviter lesaccès de reviviscence, en cure radicaleentreprise après un ou deux accès de revi-viscence mais également en prophylaxiecausale (13). En France, elle est actuelle-ment disponible en Autorisation Temporaired’Utilisation (ATU) pour cure éradicatriceà la suite immédiate du traitement schi-

zonticide érythrocytaire d’un premier accèsà P. vivax ou ovale à la posologie de 30mg/jour pendant 14 jours (12). Sa placedans l’arsenal thérapeutique est longtempsrestée en suspens du fait du risque d’hé-molyse, nécessitant l’utilisation d’unschéma posologique particulier chez lessujets modérément déficitaires en G6PD(classe III OMS) (13). La primaquine nedoit pas être utilisée chez les sujets de classeI et II OMS. Le dépistage de ces sujets estdonc un préalable jugé indispensable à l’ad-ministration de cette molécule (14).

Exploration au laboratoire

Le déficit en G6PD est actuelle-ment recherché dans trois situations dis-tinctes : le dépistage néonatal, l’explora-tion diagnostique d’une anémiehémolytique aiguë ou chronique et ledépistage avant traitement par prima-quine, dapsone ou autres thérapeutiques àrisque. Les tests de dépistage doivent tou-jours être confirmés, en cas de positivité,par la détermination de l’activité enzyma-tique de la G6PD. Au cours d’une hémo-lyse aiguë, l’examen du frottis sanguin parcoloration supra-vitale (crystal violet,nouveau bleu de méthylène,...) peut orien-ter le diagnostic en montrant la présence de

corps de Heinz (Fig.1), inconstants. Eneffet, leur présence sur le frottis est tran-sitoire car ils sont rapidement séquestrésdans la rate. Ils sont par ailleurs non spé-cifiques car retrouvés également dans leshémoglobinopathies à hémoglobine insta-ble (Hb Köln) et dans les déficits en glu-tathion réductase.

Prélèvement et conservation des échan-tillons

Le prélèvement doit être effectuéà distance de toute transfusion (3 mois). Encas de détermination pendant une criseréticulocytaire, il est nécessaire de prati-quer une détermination concomitante del’activité pyruvate kinase pour l’interpré-tation des résultats. Le sang veineux estrecueilli sur un tube de 5 mL avec anti-coagulant, en général l’EDTA (acide éthy-lènediamine tétracétique). La fragilité del’enzyme in vitro doit faire réaliser les ana-lyses dès réception du prélèvement.L’utilisation d’ACD (adénine citrate dex-trose) est préférable car elle permet unemeilleure stabilité des enzymes in vitro.Dans ce cas, la conservation se fera à+4°C. Cependant, il faut prendre encompte le facteur de dilution introduit parle volume présent initialement dans le tubede prélèvement.


Figure 1. Corps de Heinz au nouveau bleu de méthylène (x500).

10 µm.


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Une mauvaise conservation del’échantillon pourra être à l’origine d’unevaleur faussement basse du fait de la fragilitéin vitro de la G6PD. Dans l’idéal, l’analysedoit être faite dès réception du prélèvementaprès un acheminement rapide.

Réalisation d’un hémolysat

Avant la réalisation de l’hémolyse, leculot globulaire doit être soigneusement lavépar du chlorure de sodium 9‰ à plusieursreprises, pour éliminer stromas cellulaires etprotéines plasmatiques. En règle générale, lescoffrets commerciaux contiennent une solu-tion hémolysante, comme la digitonine. Il estégalement possible d’utiliser le technique «eau distillée froid » (15).

Tests de dépistage

Le « Fluorescent Spot Test » ou«Spot Test de Beutler », retenu parl’International Committee of Standar-dizationin Haematology (16) est un test biochimiquesimple de dépistage. Ce test est d’utilisation

aisée chez le nourrisson, à partir d’une micro-ponction de sang au talon, ou sur le cordonà la naissance. De réalisation pratique, il s’agitdu test le plus utilisé dans le dépistage néo-natal. Il consiste à faire incuber un hémoly-sat en présence de glucose-6-phosphate(G6P) et de NADP, puis à en déposer unegoutte sur un papier filtre et à l’examiner à lalumière ultra-violette (UV). La production deNADPH est attestée par l’apparition d’unetâche fluorescente. Il s’agit donc d’un testvisuel permettant une distinction fiable entreles sujets fortement déficitaires ne présentantpas de fluorescence en lumière UV, et lessujets normaux présentant une fluorescence.

Parmi les autres tests de dépistage, ilfaut citer le test de réduction de la méthé-moglobine en présence de bleu de méthylèneoù le taux de réduction est proportionnel àl’activité de la G6PD érythrocytaire ; ouencore le test de réduction du MTT, dérivé dutétrazolium, en un précurseur pourpre inso-luble, le formazan (17, 18).

La positivité du test de dépistage doittoujours être confirmée par la mesure de l’ac-tivité enzymatique, technique de référence.

Confirmation par détermination del’activité enzymatique (méthode deréférence)

L’hémolysat est mis en incubationavec du glucose-6-phosphate et un mélangeréactionnel contenant du NADP. En pré-sence de NADP, le G6P est oxydé en 6Phosphogluconolactone par la G6PD. Il ya production concomitante de NADPH, H+

qui absorbe à 340 nm, contrairement auNADP. La variation d’absorbance en fonc-tion du temps est proportionnelle à l’activitéG6PD. Cette activité s’exprime en unitésinternationales (UI)/g d’hémoglobine (Hb).Dans les globules rouges normaux, l’acti-vité G6PD mesurée à 37°C est de 7 à 10UI/g d’hémoglobine.

Interprétation des résultats

Toute recherche de déficit en G6PDdoit s’accompagner de renseignements cli-niques concernant le patient : origine géo-graphique, circonstances cliniques (dépis-tage, hémolyse aiguë). Le statut

Tableau 2. Médicaments et déficit en glucose-6-phosphate-déshydrogénase (AFSSAPS – février 2008).

Contre-indiqué*

• Acide nalidixique • Rasburicase • Sulfaméthoxazole (voies orale et injectable)• Dapsone • Sulfadiazine (voie orale) • Sulfasalazine• Nitrofurantoine • Sulfafurazol • Triméthoprime (voies orale et injectable)• Noramidopyrine / Métamizole sodique • Sulfaguanidine

Déconseillé (sauf situation particulière) en raison de cas observés d’hémolyse aiguë

• Chloroquine • Glibenclamide • Phytoménadione (vitamine K1)• Ciprofloxacine (voies orale et injectable) • Lévofloxacine (voies orale et injectable) • Spiramycine (voies orale et injectable)• Dimercaprol • Norfloxacine (voie orale) • Sulfadiazine (voie locale)

Utilisation possible après analyse des données disponibles (littérature et pharmacovigilance)

• Bleu de méthylène (voies buccale et ophtalmique) • Lévodopa • Phénytoïne• Bupivacaïne • Méfloquine • Probénécide• Chloramphénicol (voie ophtalmique) • Monoxyde d’azote • Proguanil• Ciprofloxacine (voies ophtalmique et auriculaire) • Morpholine • Propylène glycol• Colchicine • Nitroprussiate• Diéthylamine • Pyriméthamine• Dihydroquinidine • Norfloxacine (voie ophtalmique) • Quinidine• Dimenhydrinate • Ofloxacine (voies ophtalmique et auriculaire) • Streptomycine• Doxorubicine • Para-aminosalicylate de sodium (PAS) • Succimer• Fève de Saint -Ignace • Phénazone (voie auriculaire) • Thiamphénicol• Isoniazide (voies orale et injectable) • Phénylbutazone • Trihexyphénidyle

Déconseillé (sauf situation particulière) en raison de l’appartenance à une classe pharmacologique à risque, ou d’un risque potentiel d’hémolyse

• Acide pipémidique • Glipizide • Prilocaïne• Carbutamide • Hydroxychloroquine • Quinine• Enoxacine • Loméfloxacine • Sulfacétamide• Fluméquine • Moxifloxacine • Sulfadoxine• Glibornuride • Ofloxacine (voies orale et injectable) • Sulfaméthizol• Gliclazide • Péfloxacine (voies orale et injectable)• Glimépiride • Phénazone (voie locale)

Déconseillé à posologie élevée

• Acide acétylsalicylique• Acide ascorbique• Bénorilate• Carbasalate calcique• Paracétamol

* Bien qu’elle ne soit pas citée dans le tableau de l’AFSSAPS, l’utilisation de la primaquine est contre-indiquée chez le sujet déficitaire. Cependant, l’OMS propose un schémathérapeutique adapté utilisable chez les sujets présentant un déficit modéré.



transfusionnel doit être connu ainsi que lesrésultats de la numération formule sanguineavec une numération réticulocytaire en casd’anémie.

En règle générale, le dépistage dudéficit en G6PD ne doit pas être effectué enpériode régénérative car le déficit est pré-dominant dans les hématies âgées et lerésultat pourra être faussement normal dufait d’une présence excessive d’hématiesjeunes. Cependant la comparaison de l’ac-tivité enzymatique G6PD à l’activité enzy-matique pyruvate kinase peut parfois per-mettre de dépister un déficit en périoderégénérative par la discordance des activi-tés enzymatiques. Ainsi, lors d’une criseréticulocytaire, une activité G6PD dans leslimites des valeurs usuelles associée à uneactivité pyruvate kinase très élevée peutfaire suspecter un déficit. Chez le sujet sain,le pourcentage d’augmentation observéepour la G6PD est en général similaire àcelui observé pour l’activité pyruvatekinase.

Cas particulier de la femme hétérozygote

Les méthodes disponibles permet-tent d’affirmer de façon fiable un déficitchez les sujets masculins hémizygotes etchez les sujets féminins homozygotes.Elles peuvent parfois être prises en défautchez les femmes hétérozygotes (9). En effet,le sang des femmes hétérozygotes comportedes cellules normales et des cellules défi-citaires en proportion variable en fonctionde l’inactivation de l’un ou l’autre des deuxchromosomes X (2). L’activité G6PDmesurée peut donc varier d’un taux normalà un taux proche du sujet déficitaire.Différentes méthodes biochimiques ont étédéveloppées pour le dépistage des femmeshétérozygotes mais aucune n’est suffisam-ment fiable à ce jour (9).

Biologie moléculaire

L’étude des mutations génétiquespar analyse de l’ADN est un test coûteux,réservé à certains laboratoires spécialisés etagréés. La biologie moléculaire permet decaractériser le défaut responsable du défi-cit et de prédire le degré de sévérité cliniqueencouru par le patient, si la mutation estdéjà connue et étudiée. La majorité desvariants résulte de mutations ponctuelles detype faux-sens. On dénombre près de 160mutations différentes (19). Celles-ci modi-

fient le plus souvent la zone d’interface deformation du D-dimère enzymatique et/oula zone d’interaction de la G6PD avec leNADPH (20). L’absence de G6PD est pro-bablement létale in utero. En effet, l’ab-sence totale d’enzyme n’a jamais étéobservée.

L’analyse moléculaire par enzymede restriction nécessite de connaitre préci-sément la mutation recherchée. Si la muta-tion causant le déficit n’est pas connue, ilest alors nécessaire d’effectuer un séquen-çage des treize exons du gène. Les muta-tions les plus fréquentes seront cherchées enpremier lieu, en fonction de l’origine géo-graphique du sujet (A-, méditerranéen, ...).

Ces études moléculaires ne dis-pensent pas des analyses de caractérisationcomportementale de l’enzyme lorsqu’unenouvelle mutation est découverte, afind’étudier l’impact de la mutation sur la sta-

bilité de l’enzyme, son niveau d’activité etson affinité pour un substrat.

Le conseil génétique vise à dépis-ter les couples à risque afin de les informeret d’organiser les conditions d’un diagnos-tic précoce des enfants atteints.

Conclusion

Le dépistage du déficit en G6PD estfacilement réalisable. Sa confirmation pardosage enzymatique, indispensable, peutêtre réalisée par tout laboratoire possédantun spectrophotomètre. La réalisation del’analyse doit être rapide en raison de lavitesse de dégradation de l’enzyme invitro. L’interprétation des résultats enpériode d’hémolyse est délicate et imposeparfois de contrôler le résultat à distancede l’épisode aigu. �


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Synthèse...Hemolytic anemia. Diagnosis. Les anémies hémolytiques sont carac-térisées par une destruction périphé-rique des globules rouges. Elles peuvent être acquises ou congénitales,