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Analyse microbiologique à la mise : pour quoi faire ? Pic Lucile-Resp labo expert microbiologie Matinée œnologique vallée du Rhône-16 Juin 2016

Analyse microbiologique à la mise : pour quoi faire...• La Charge microbiologique des produits conditionnés –Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la préparation

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Page 1: Analyse microbiologique à la mise : pour quoi faire...• La Charge microbiologique des produits conditionnés –Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la préparation

Analyse microbiologique à la mise : pour quoi faire ?

Pic Lucile-Resp labo expert microbiologie

Matinée œnologique vallée du Rhône-16 Juin 2016

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Les risques Microbiologiques dans les Vins conditionnés

• Vin : produit alimentaire non soumis à DLUO

• Aucune contrainte réglementaire

• MAIS : Evolution organoleptique post mise perte de qualité des produits

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Les risques Microbiologiques dans les Vins conditionnés

• Levures Fermentaires

• Levures Brettanomyces

• Bactéries acétiques

• Bactéries lactiques

– La Tourne

– Goût de Souris

– L'Amer

– La Graisse

– Odeur de géranium

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Les Moyens de contrôle des risques µbio

• La couverture en SO2 au conditionnement

• Mais pas que

1,E-01

1,E+00

1,E+01

1,E+02

1,E+03

1,E+04

1,E+05

1,E+06

0 20 40 60 80 100

Ge

rme

s e

n U

FC/1

00

ml

Jours après mise

Evolution de la charge microbiologique en fonction de la couverture en SO2 et de la charge initiale- R&D ICV

32mg/l-<1 UFC/100ml 16mg/l-<1 UFC/100ml

32mg/l-35UFC/100ml 16mg/l-35 UFC/100ml16/06/2016 Matinée Oenologique - ICV Vallée du Rhône 4

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Les Moyens de contrôle des risques µbio

• La couverture en SO2 au conditionnement– Mais aussi

• La Charge microbiologique des produits conditionnés– Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la

préparation des vins à la mise

Diamètre des pores Action microbiologique

0,45 µm Arrêt des levures et des bactéries

0,65 µmArrêt des levures et d’une grande

partie des bactéries

1 µm Arrêt des levures

3-5 µm Réduction partielle de la microflore

> 5 µm Réduction faible de la microflore16/06/2016 Matinée Oenologique - ICV Vallée du Rhône 5

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Les Moyens de contrôle des risques µbio

• La couverture en SO2 au conditionnement– Mais aussi

• La Charge microbiologique des produits conditionnés– Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la

préparation des vins à la mise

– Analyse microbiologique post-mise validation du niveau de qualité• Vin Rouge SEC : ex

IGACQualité

d’embouteillageRisque d'altération Type de produits

>100 UFC/100ml 4Risque Fort

Circuit très courtEntrée de gamme, BIB, vins à rotation rapide

10-100 UFC/100 ml 3Risque Moyen

Conservation qq joursCœur de gamme

1-10 UFC/ml 2Risque faible

Conservation plusieurs mois

Haut de gammeExport uniquement si

pas de Brettanomyces

<1 UFC/100 ml 1Très faible risque

Conservation plusieurs années

Haut de gammeVins de garde

Export possible

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Les Moyens de contrôle des risques µbio

• La couverture en SO2 au conditionnement– Mais aussi

• La Charge microbiologique des produits conditionnés– Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la

préparation des vins à la mise

– Analyse microbiologique post-mise validation du niveau de qualité• Vin Rouge SEC : ex

• Vin Blanc moelleux : ex

IGCQualité

d’embouteillageRisque d'altération Type de produits

>10 UFC/100 ml 3Risque TRES élevé

/

1-10 UFC/ml 2 Risque Elevé Circuit court

<1 UFC/100 ml 1Risque faible Circuit longs

Pas d' Export

<1 UFC/bouteille 0

Très faible risqueConservation plusieurs

annéesExport possible

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Les Moyens de contrôle des risques µbio

• La couverture en SO2 au conditionnement

– Mais aussi

• La Charge microbiologique des produits conditionnés

– Analyse microbiologique en pré-mise (IGA) outil de choix de la préparation des vins à la mise

– Analyse microbiologique post-mise validation du niveau de qualité

• Vin Rouge SEC : ex

• Vin Blanc moelleux : ex

– Niveau de qualité recherché • Les contrôles ont un coût : adapter les plans de contrôle au risque

produit et aux attentes clients

• Faire vivre son plan de contrôle et son cahier des charges

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Evaluation de la stabilité protéique : quels tests

Pic Lucile-Resp labo expert microbiologie

Matinée œnologique vallée du Rhône-16 Juin 2016

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Préambule

• PAS de dosage mais plusieurs Test disponibles

• Aucun Test de REFERENCE validé

– Evaluer le risque d'apparition d'un trouble dû à la floculation de protéines présentes dans le vin, floculation consécutive à une modification de l'état colloïdal du vin

• Les résultats sont dépendants de la prise d’échantillon et de l’histoire de l’échantillon (filtration, transport, traitement œnologiques …)

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Principaux tests

Test Principe Commentaires

Test (s) à la chaleur

• Précipiter les protéines solubilisées et sensibles à la chaleur sans autre modification de l'état colloïdal

• Mesure du trouble par NTU• Multiples variantes (Tps/Tre)

• Thèse de Dulau (1990) : ICVchoix couple 30min à 80°C

Bentotest

• acide phosphomolybdique• Tre Ambiante• Observation du trouble (à l'œil nu

ou NTU)

• Toutes les protéines précipitent

• Estimation du risque >Test à la chaleur

• Rapide

Acide trichloroacétique(TCA)

• Acide trichloracétique • Chauffage au bain marie (30 min

à 80°C)• Mesure du trouble par NTU

• Modification de l'équilibre colloidale par acidification

• Estimation du risque >Test à la chaleur

Test (s) aux tanins

• Tanins (X variantes)• Chauffage au bain marie (X

variantes)• Mesure du trouble par NTU

• Modification de l'équilibre colloidale par tanisage

• Estimation du risque >Test à la chaleur

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Tests : Attention aux détails

Résultats ICV Toulouge

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L'expérience ICV : le test à la chaleur

• La fiabilité des mesures

– Evaluation de répétabilité pour mode opératoire Commun ICV : +/-0.6 NTU

– Evaluation de la reproductibilité pour mode opératoire Commun ICV : +/- 10%

• La prévention du risque de casse

– 25 000 tests à la chaleur réalisés en moyenne chaque année

– Très faible taux de réclamations clients ou de retour d'insatisfaction

• Choisir des tests plus sévères

– Augmenter le traitement des vins

– Sécuriser plus fortement l'évolution des vins16/06/2016 Matinée Oenologique - ICV Vallée du Rhône 13

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En conclusion

De 2004 à 2009, l'ICV, avec un groupe national, s'est, entre autre, attaché à comparer différents tests entre eux

"Les tests de stabilité protéique se distinguent surtout parl'intensité du trouble formé. Celui-ci augmente avec latempérature de chauffage. Il est plus élevé pour les testschimiques (tanins, TCA, bentotest). Le seuil de stabilitédépend du type de test utilisé; il est important de lepréciser."

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