Préambule du Manuel de Prélèvement Biomed34 · 2019-05-21 · Preambule du Manuel de Prelevement - RI-MP.01_BM34 - Version 1. 1 Page 5 sur 33 Ce document est la propriété exclusive

BIOMED34

DOCUMENT RI-MP.01_BM34

Version

1. 1

Preambule du Manuel de Prelevement Applicable au :

2019-02-15

Date de vérification Validation Approbation

2019-02-01

34-BODART Michel 34-TOURNOIS Audrey

2019-02-01 2019-02-01

Ce document est la propriété exclusive du LBM BIOMED34I l ne peut être communiqué à une tierce partie sans l’accord préalable du service qualité (Editée le 21/05/19).

Préambule du

Manuel de Prélèvement

Biomed34

Preambule du Manuel de Prelevement - RI-MP.01_BM34 - Version 1. 1

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Ce document est la propriété exclusive du LBM BIOMED34. Il ne peut être communiqué à une tierce partie sans l’accord préalable du service qualité (Editée le 21/05/19).

Introduction

Ce manuel est destiné à guider les préleveurs afin d'obtenir un prélèvement de

qualité conforme aux exigences de

notre système de management de la qualité.

Le rôle du préleveur est déterminant.

La qualité du prélèvement ainsi que les informations recueillies et transmises

garantissent un résultat fiable.

Ce n'est que dans ce cadre défini qu'une prestation de conseil adaptée pourra

être délivrée conformément au contrat passé avec nos patients et prescripteurs.

Cette prestation de conseil s'exerce dans le respect des recommandations et des

normes auxquelles nous devons répondre.

Nous espérons vous fournir une aide efficace et compétente dans vos pratiques

quotidiennes.

L'ensemble des biologistes et de l'équipe qualité reste à votre disposition pour

toute question, remarque ou suggestion permettant d'améliorer la qualité de nos

prestations.


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Renseignements administratifs

Vous devez vous assurer que le patient fournisse au laboratoire :

une prescription médicale ; le cas échéant des examens sans prescription peuvent

être demandés mais le patient doit s'engager à régler intégralement les actes demandés.

Une pièce d'identité à la demande ponctuelle du laboratoire

Sa carte vitale à jour (ou l'attestation papier de Sécurité Sociale) ainsi que sa carte de

mutuelle. Faute de quoi le laboratoire ne pourra pas pratiquer le Tiers-payant et le patient

devra faire l'avance des frais médicaux.

En cas de demande d'examens en rapport avec le groupe sanguin, un document

officiel d’identité qui indique le nom de naissance, le premier prénom d’état civil, la date

de naissance et le sexe et qui comporte une photographie (Arrêté du 15/05/2018

concernant les examens d'Immuno-hématologie)

A chaque étape : prise de rendez-vous, accueil au secrétariat, prise en charge par le

préleveur, il est demandé au patient de s'identifier par des questions ouvertes, et lorsque

cela n'est pas possible par un tiers (famille, personnel d'établissement de soins...).

Les prélèvements sont identifiés selon les cas en suivant les instructions du chapitre

« Identification des échantillons » ci-après.

Le laboratoire veillera à contrôler l'adéquation des identités sur la prescription médicale,

les papiers d'identité fournis, la fiche de transmission de prélèvement et les prélèvements

eux-mêmes.


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Comment renseigner la fiche de transmission

.

Il est important de

renseigner ces items pour

une bonne gestion

administrative du dossier

Permet de joindre le

patient en cas de

problème.

Le n°de portable est

obligatoire pour la

consultation des résultats

sur le serveur de résultats.

Date de limite d'utilisation du kit par le préleveur.

Cette date nous permet d'assurer la traçabilité des lots.

Permet une

meilleure

interprétation des

résultats

A saisir obligatoirement Pour le dosage des

médicaments, l'activité anti Xa

et l'Héparinémie la cible

thérapeutique pour les

AVK (NABM) , la vérification

de l'absence de transfusion

récente ( < à 4 mois) dans le cas

de groupage et l'injection de

Rophylac.

A cocher si la demande

est urgente

Nom, Prénom, Nom de

naissance, Date de naissance

et Sexe obligatoires. Mention manuscrite

obligatoire sur les tubes

pour groupe, RAI

Date et heure doivent être

saisies obligatoirement,

pour apparaître sur le

compte rendu d'examens

Le jeûne est indispensable

pour certains examens

(consulter le manuel de

prélèvement)

Indispensable pour des

raisons de traçabilité et pour

pouvoir contacter le

préleveur en cas de

problème

Des difficultés de prélèvement

peuvent perturber les résultats

(hémolyse pour le K) ou expliquer

un faible volume de remplissage

Ces renseignements sont indispensables

pour une bonne diffusion des résultats

Permet de vérifier qu'il ne

manque pas d'échantillons

à réception


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Réalisées au laboratoire : Épreuves dynamiques

Test respiratoire à l'urée : Recherche d'Helicobacter pylori

Sans rendez-vous

Le patient doit :

Être strictement à jeun (sans boire, sans manger, ne pas avoir fumé depuis la

veille).

Prévoir de rester 45 minutes au laboratoire.

Acheter le kit à la pharmacie, la prescription servant à la fois à la pharmacie et

au laboratoire

Héli-Kit® réservé aux adultes

Hélicobacter test INFAI® adultes, enfants > 12 ans

Hélicobacter test plus REFLEX adultes, enfants > 12 ans

Hélicobacter test INFAI 45 mg® enfants de 3 à 11 ans

Avoir arrêté tout traitement antibiotique depuis au moins 4 semaines.

Avoir arrêté tout traitement anti-sécrétoire depuis au moins 2 semaines (IPP, anti-

H2) sauf pour les tests INFAI lorsque le patient a suivi le régime “INFAI

REFLEX”

Avoir arrêté tout traitement anti-acide de type pansement gastrique depuis 24h.

Au laboratoire, le test sera réalisé selon les instructions décrites par le fournisseur du kit

utilisé.

Ce test est contre-indiqué chez la femme enceinte


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Dépistage du diabète gestationnel

La patiente doit rester au laboratoire et au repos durant la totalité de l'épreuve (domicile

exclus).

Hyperglycémie provoquée

Préconisée

par HAPO study du

CNOGF(Collège National

Obstréticiens Gynéco Français)

Test O'Sullivan


(réalisée à la suite d'un test

O'Sullivan perturbé)

Jeûne obligatoire Jeûne non obligatoire Jeûne obligatoire

Ingestion de 75 gr de glucose Ingestion de 50 gr de

glucose

Ingestion de 100 gr de glucose

Durée du test : 2 heures Durée du test : 1 heure Durée du test : 3 heures

Prélever à T0, T60 mn, T120 mn. Prélever à T0 (si prescrit),

T60 mn

Prélever à T0, T60 mn,

T120 mn, T180mn.

L'ingestion du glucose est réalisée en 5 mn maximum, en présence du préleveur.

Le décompte est déclenché dès le début de l'ingestion.

En cas de vomissements, il est préconisé de remplacer le test par une glycémie à jeun et

une glycémie post-prandiale (GPP à faire 2 heures après le début du repas) et après accord

du médecin.

En cas de dépistage de diabète gestationnel chez les patientes ayant subi une chirurgie

bariatrique (Sleeve, anneau gastrique...) il est nécessaire de remplacer le test par une

glycémie à jeun et un dosage HbA1C (rapport d'experts : grossesses après chirurgie

bariatrique : recommandations française pour la pratique clinique)


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Dépistage du diabète en dehors de la grossesse

Le patient doit rester au laboratoire et au repos durant la totalité de l'épreuve (domicile

exclus).


Préconisée par l'OMS


A utiliser sur prescription détaillée non conciliable avec

les recommandations OMS

Jeûne obligatoire Jeûne obligatoire

Ingestion de :

-75 gr de glucose (adulte)

-1,75g/kg de poids sans dépasser 75g

(enfant de moins de 15 ans)

Ingestion de :

-75 gr de glucose (adulte)

-1,75g/kg de poids sans dépasser 75g (enfant de moins

de 15 ans)

Durée du test : 2 heures Durée du test : 3 heures à 5 heures

Prélever à T0 et T120 mn Prélever à T0 puis en suivant la prescription

L'ingestion est réalisée en 5 mn maximum, en présence du préleveur.

Le décompte est déclenché dès le début de l’ingestion.

En cas de vomissements, il est préconisé de remplacer le test par une glycémie à jeun et

une glycémie post-prandiale (GPP à faire 2 heures après le début du repas) et après accord du

médecin.


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Test au Synacthène® rapide ou immédiat

Le patient doit :

- Être à jeun et se présenter au laboratoire entre 6 heures et 10 heures.

- Prévoir de rester environ 2 heures au laboratoire.

- Acheter l'ampoule de Synacthène® - DCI Tetrécosactide Synacthène immediate (ampoule

à 0,25mg) à la pharmacie, la prescription servant à la fois à la pharmacie et au laboratoire.

- Rester au laboratoire pendant la totalité de l'épreuve.

Au laboratoire :

- S’assurer de la présence d’une personne habilitée à pratiquer une injection.

- Installer le patient au repos.

- Au bout de 10 minutes, prélever le Cortisol à T0.

- Injecter en IM, l'ampoule de Synacthène® à 25 mg

- Prélever le Cortisol à T 30 mn et T 60 mn en laissant le patient au repos

Test à la Dexaméthasone

Le patient doit :

- Réaliser cette épreuve sur 2 jours.

- Acheter la Dexaméthasone (Dectancyl® comprimés à 0,5 mg) à la pharmacie, la

prescription servant à la fois à la pharmacie et au laboratoire.

- 1er jour: Se présenter à jeun au laboratoire entre 6 h et 9 h pour le 1er prélèvement

(Cortisol de base)

Effectuer, le même jour, la prise médicamenteuse selon les indications du prescripteur : 2

comprimés de Dectancyl®, soit 1mg.

- 2ème jour: Se présenter à jeun au laboratoire entre 6 h et 9 h pour le 2nd prélèvement

(Cortisol après freination).


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Liste du matériel pour le prélèvement et le transport des

échantillons

1. Matériel pour prélèvement sanguin

1.1. Aiguilles

Aiguilles classiques Vacutainer

Aiguilles Visio Vacutainer

Épicrâniennes pour prélèvement délicats et hémocultures

Aiguilles classiques non Vacutainer

Dispositif pour prélèvement capillaire

1.2. Corps de pompe et adaptateurs

Corps de pompe : jetables réutilisables Hémocultures

Adaptateur pour corps Vacutainer


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1.3. Tubes

Prélèvements sanguins

Prélèvements urines

1.4. Hémocultures

Flacon aérobie (vert), flacon anaérobie (orange), flacon pédiatrique (jaune)

1.5. Matériel pour gaz du sang

Seringue héparinée pour gaz du sang Capillaire Hépariné avec aimant

pour gaz de sang artérialisé

2. Matériel pour autres prélèvements

2.1. Écouvillons

Écouvillons Eswab bouchon orange ou rose (selon le diamètre de l'écouvillon) avec milieu de

transport

Tube SST II

avec gel

séparateur

Tube héparinate

de lithium avec/sans gel

séparateur

Tube citrate Tube EDTA Tube fluoré Tube de purge

Recueil urines pour biochimie

Starstedt BD


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Pour les recherches par PCR sur PV Pour les recherches par PCR sur urines (pipette)

sur prélèvement génitaux

Pour la recherche de grippe

Pour la recherche de coqueluche

Pour le transport des selles (bactériologie)

2.2. Récipients

Flacon pour recueil urines de 24h Flacon stérile pour recueil de selles Flacon stérile pour recueil urines

Flacon stérile pour recueil de liquide de ponction Réceptacle pour recueil de sperme Flacon stérile pour urines avec borate

2.3. Matériel pour prélèvements mycologiques


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Lampe de Wood

Lames de Gouge et boites de Pétri Écouvillon sans milieu de transport Pince à épiler à usage unique

2.4. Matériel pour prélèvements cytogénétique

Kit pour prélèvement liquide amniotique Tube avec milieu pour prélèvement

de villosités choriales

2.5. Matériel pour prélèvement du DPNI

2.6. Matériel pour prélèvements d’anatomopathologie


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Kit de prélèvement pour Frottis Cervico-Utérin : milieu liquide

Kit de prélèvement pour Frottis Cervico-Utérin : technique conventionnelle

3. Matériel pour le transport des échantillons prélevés à domicile

Boite individuelle par patient


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Sachets individuels par patient

Les échantillons sont transmis dans des sacoches de transport pouvant être fournies par le laboratoire.


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Prélèvements sanguins Les prélèvements sanguins sont exécutés uniquement par des personnes compétentes et habilitées.

Préleveur

Prélèvement

Technicien Infirmier Biologiste

pharmacien

Biologiste

médecin

Prélèvements sanguins

veineux et capillaires au

laboratoire

OUI (avec certificat de

capacité) OUI OUI OUI

Prélèvements à domicile OUI

(avec A.F.G.S.U) OUI OUI OUI

Tests dynamiques

-avec injection

-sans injection

NON

OUI

OUI

OUI

NON

OUI

OUI

OUI

Prélèvements artériels NON

OUI OUI (si attestation)

OUI

1- Prélèvement sanguin simple

Prélèvement sous vide

Réaliser une désinfection des mains par friction avec un produit hydro-alcoolique.

Identification positive du patient en lui demandant de décliner son identité et contrôle des

dispositions physiques.

Analyse de la demande, des informations du patient et des renseignements cliniques.

Rassurer le patient et le positionner.

Préparation du matériel : choisir le matériel adéquat

Placer le garrot et choisir le site de prélèvement de manière appropriée

Antisepsie avec une solution désinfectante.

La désinfection à l'alcool modifié (un seul passage) sauf dans les cas suivant :

-Prélèvement d'alcoolémie ;

-Prélèvement pédiatriques (utilisation de Biseptine, Bétadine,…) ;

-Prélèvement de sujet présentant une intoxication alcoolique (utilisation de Biseptine, Bétadine,…) ;

-Prélèvement des hémocultures (utilisation des Bétadine rouge et orange, cf. RI-ENR.12 -

Renseignements et préconisations : hémocultures, sauf conditions particulières-allergie à l'iode et

protocole spécifique à un établissement de soins).

Prélever les tubes en respectant l’ordre approprié

Commencer à relâcher le garrot dès le remplissage du 1er tube.

Retirer le dernier tube avant le corps de pompe et l’aiguille.

Retirer aiguille/corps de pompe en appliquant un coton, détacher le garrot, main ouverte.

Assurer ou demander au patient d'assurer la compression pendant le temps nécessaire.

Jeter immédiatement l'aiguille dans la boite récupératrice.

Jeter les matériels de soins non piquants, non coupants dans la poubelle à déchets contaminés

mous.

Agiter les tubes par retournements lents.

Appliquer un pansement.

Il est préconisé d'utiliser un tube de purge avant le tube citraté dans le cas de prélèvement avec

une aiguille épicrânienne : le remplissage du tube citraté est ainsi respecté car le volume de l'air de la

tubulure est éliminé.


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Prélèvement à la seringue

Repérer la veine à ponctionner,

Antisepsie de la zone avec tampon imbibé de solution désinfectante.

Serrer le garrot, ponctionner franchement la veine

Recueillir le sang nécessaire et inoculer les flacons

Éliminer l'aiguille dans le collecteur et la seringue dans le sachet DASRI

2- Prélèvement pour hémocultures

Cf. Fiche de renseignements et de préconisations « Hémocultures » RI-ENR.12_BM34

3-Prélèvements des gaz du sang

Cadre légal

La réalisation des ponctions artérielles au niveau de l'artère radiale ou de l'artère fémorale en vue

d'analyses de biologie médicale est soumise à prescription médicale et doit être effectuée dans un

environnement médicalisé permettant une intervention médicale immédiate en cas de complications.

Le geste technique ne peut être réalisé que par du personnel habilité :

– infirmier(e)s

– médecins

– pharmaciens biologistes (ou vétérinaires biologistes) pouvant justifier d'une attestation de

formation

Cette attestation de formation, précisant que l'intéressé possède les connaissances et la pratique requises

pour ce type de prélèvement, est établie soit par un médecin responsable de formation, soit par un

médecin possédant la maîtrise de ce type de prélèvement. Elle fait suite à la réalisation encadrée d'au

moins vingt prélèvements réalisés en présence de ce médecin, dans le cadre d'un service d'hospitalisation

publique ou privée.

Le geste ne peut s'appliquer qu'au sujet adulte, préalablement informé du déroulement du prélèvement et

de ses complications éventuelles. Il ne peut être réalisé sur une personne mineure qu'en situation

d'urgence justifiée par le médecin prescripteur.

Introduction

La gazométrie est l'étude des gaz dissous dans le sang (O2 et CO2) ; elle permet d'observer la capacité de

l’hémoglobine à se charger en oxygène, l'équilibre du pH et l'action des systèmes tampons ;

Réalisation

Choix de l'artère radiale :

– artère superficielle

– facilement accessible

– relativement éloignée des veines adjacentes

– son territoire est desservi par une circulation collatérale provenant de l'artère cubitale

Le prélèvement au niveau de l'artère fémorale est à réserver au cas où le prélèvement radial est

strictement impossible.

Le test d'Allen est pratiqué avant toute ponction radiale, dans le but de vérifier l'existence d'un débit

suffisant au niveau de l'artère (dans la négative le prélèvement sera effectué au niveau de l'artère

fémorale) :

* choisir en première intention le coté non dominant,

* faire fermer le poing, comprimer au niveau du poignet les

artères radiales et cubitales

* faire ouvrir la main et lever la compression de l'artère cubitale

=> Si la paume se recolore en moins de 10 à 15 secondes, l'artère cubitale et l'arcade palmaire sont


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perméables, le test est dit « positif », la ponction est autorisée.

Le moment du prélèvement doit se faire :

pour une gazométrie sans oxygénothérapie :

– aux urgences à l'arrivée du patient afin d'aider à poser un diagnostic

– ou 5 à 10 minutes après l'arrêt de l'O2 en surveillant la tolérance

pour une gazométrie avec oxygénothérapie :

– prélever 10 minutes après changement de la FiO2 (si ventilation assistée)

– prélever 30 minutes après le dernier réglage (si O2 nasal)

Le prélèvement artériel est effectué en respectant les conditions d'hygiène et d'éventuelle anesthésie

communément requises pour tout acte de prélèvement.

La ponction se fait obliquement (avec un angle de 30 à 45°), la pointe de l'aiguille face au courant artériel,

biseau en haut. Lors de l'apparition de sang pulsé dans la seringue, la laisser se remplir sans toucher au

piston.

A l'issue de la ponction, le site du prélèvement est comprimé pendant au moins 5 minutes, le biologiste

surveillant l'apparition d'éventuel hématome.

La seringue héparinée doit être purgée d'éventuelles bulles d'air, puis mélangée par roulement entre les

paumes de la main, puis acheminée rapidement au laboratoire pour analyse (<30 minutes).

Complications

Elles sont rares mais doivent être préalablement exposés au patient de façon claire et systématique :

– douleur, malaise vagal

– hématome, hémorragies

– vasospasme

– embole distale

– thrombose artérielles

– fistule

– infection nosocomiale

Contre-indications

Locales :

– lésions cutanées en regard du point de ponction

– infections

– atteinte artérielles

– fistule artério-veineuse

Générales :

– anomalies de l'hémostase

– fibrinolyse

– traitement anticoagulant ou antiplaquettaire

– insuffisant rénal susceptible d'être traité ou en cours de traitement par hémodialyse

Cas du prélèvement de sang capillaire

Échantillons prélevés au lobe de l'oreille ou sur la face interne inférieure du talon (chez le

nourrisson).

Désinfecter la surface à ponctionner et laisser sécher sans essuyer.

Ponction franche par incision à l'aide d'un vaccinostyle.

Élimination de la première goutte.

Agitateur placé par avance dans le tube capillaire.

Le remplissage du capillaire pré-hépariné doit être rapide, sans exercer de pressions.

L'échantillon doit être sans caillot ni bulles d'air.

Sceller par bouchage aux 2 extrémités.

Obturation hermétique du tube et homogénéisation à l'aide d'un aimant : le déplacer d'avant en


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arrière le long du tube plusieurs fois (uniquement dans la partie remplie du tube pour ne pas créer de

bulles d'air)

L'analyse immédiate de l'échantillon est recommandée (stockage10 mn max à température

ambiante)

4-Prélèvement capillaire pour la détermination de la CRP sur les sites autorisés

Échantillons prélevés à la pulpe du doigt,

Désinfecter la surface à ponctionner et laisser sécher sans essuyer,

Ponction franche par incision à l'aide d'un vaccinostyle,

Élimination de la première goutte,

Essuyer le doigt

Recueillir 20µl de sang de la seconde goutte dans un tube capillaire mis à disposition dans les

coffrets réactif du fournisseur (respecter la marque blanche du capillaire).

Pour la prise en charge de l'échantillon prélevé se conférer au mode opératoire correspondant.


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Prélèvements microbiologiques

Le respect des préconisations qui suivent est FONDAMENTAL pour la qualité du prélèvement et par voie

de conséquence pour la cohérence des résultats rendus.

1- Qui ?

Préleveur

Prélèvement

Technicien Infirmier Biologiste

pharmacien

Biologiste

médecin

Sondage pour les

prélèvements urinaires NON OUI

OUI

(chez la femme) OUI

Prélèvements

microbiologiques NON OUI OUI

OUI

Il peut être proposé aux patientes dans le cas du dépistage de la vaginose bactérienne, du streptocoque

du groupe B et de la recherche de C. Trachomatis par PCR d'effectuer un auto-prélèvement génital. Un

fiche de préconisation est mise à leur disposition - RI-DIV.17 « Préconisation patient : Auto-prélèvement

génital ».

2- Matériel spécifique nécessaire

Écouvillon taille classique avec milieu de transport Amies liquide ou gel

Écouvillon fin avec milieu de transport Amies

Écouvillon fin avec milieu pour recherche de chlamydiæ

Écouvillon fin avec milieu pour recherche de mycoplasmes

Écouvillon fin avec milieu pour recherche de virus (Herpès)

3- Préalable au prélèvement

Se désinfecter les mains au SHA, mettre des gants non stériles.

Choisir le ou les kits écouvillon/milieu selon la ou les recherches souhaitées.

Prélever ainsi que décrit dans le tableau ci-dessous en fonction des zones de prélèvement.

Plonger l'écouvillon de prélèvement dans le milieu de transport approprié, rompre la tige, reboucher et

visser fermement.

Identifier le flacon ou les écouvillons en inscrivant l'identité du patient

Compléter la fiche de renseignements et de préconisations correspondantes.


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Circonstances Prélèvement / recueil

Prélèvement

de gorge

-Angines aigües bactériennes

-Suspicion de diphtérie

- Recherche de portage de

Staphylocoques (médecine du travail,

bilan préopératoire)

-Bilan d'IST (gonocoque)

-Suspicion d’angine herpétique

Sites de recueil préférentiels : amygdales, piliers

du voile du palais, lésions existantes. Éviter de

toucher la luette; ne pas toucher la langue.

Abaisser la langue, éclairer la zone

Frotter l'écouvillon sur la surface de chaque

amygdale et de toute la surface d'aspect

pathologique

Si suspicion de diphtérie : prélever à la périphérie

des fausses membranes

Prélèvement

buccal

-Recherche d'une candidose

oropharyngée

-Suspicion de gingivostomatite

herpétique

-Si suspicion de candidose : prélever au niveau de

la langue, du palais, de la face interne des joues

-Si suspicion d'herpès effectuer le prélèvement

uniquement au niveau des ulcérations

Prélèvement

des fosses

nasales

- Sinusite, rhinopharyngite

- Recherche d'un portage de

staphylocoques (médecine du travail,

bilan préopératoire)

NB : Dans le cas des sinusites conseiller

les aspirations de pus de sinus réalisées

chez l'ORL.

Sites de recueil :

fosses nasales postérieures : sinusite,

rhinopharyngite

fosses nasales antérieures : portage de

staphylocoques

Écouvillonner les fosses nasales

Prélèvement

d'oreille

-Otite moyenne aiguë de l’enfant et de

l’adulte

-Otite moyenne récidivante

-Infection du conduit auditif externe.

-Étude d'un pus de paracentèse

-Plus rarement otite avec rupture

spontanée du tympan

- Nettoyer la partie la plus externe du conduit

auditif à l'aide d'un 1 écouvillon humidifié afin de

limiter la contamination par les bactéries

commensales.

- Sécrétions recueillies par écouvillonnage.

- Prélever en appuyant fortement sur les parois.

Prélèvement

oculaire

- Prévention des infections

postopératoires (immédiatement avant

l'intervention chirurgicale)

- Conjonctivite

-Blépharite

Prélèvement conjonctival

- Si possible le prélèvement le matin avant toute

toilette oculaire et SANS produits de maquillage

- Frottement conjonctival

- Recueil des sécrétions purulentes dans l’angle

interne de l’œil.

- Prélever un écouvillon par œil

Dans le cas d'une blépharite, prélever en plus à la

pince des cils et des croûtes boite de pétri ou

flacon stérile. Penser à la recherche de demodex.

Prélèvement

plaie

superficielle,

ulcération,

escarre,

lésions

cutanées

-Lésions cutanées superficielles

primitives

- Surinfection d'une plaie chirurgicale ou

traumatique

- Morsure

-Surinfection de lésions cutanées

chroniques

- Éviter de contaminer le prélèvement avec des germes

commensaux de la peau

- Désinfection éventuelle de la zone proximale

- Nettoyage au sérum physiologique de la zone à

prélever

-Écouvillonner les lésions

Cas particuliers

Plaie opératoire : recueillir l'écoulement de la cicatrice

Morsure : effectuer un écouvillonnage profond, penser

aux anaérobies.

Escarre : avant le prélèvement, nettoyage très abondant

des lésions, car contamination microbienne massive,

prélever au centre.

Suspicion d'herpès effectuer le prélèvement uniquement

au niveau du plancher des ulcérations et plonger

immédiatement dans le milieu de transport adapté


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Circonstances Prélèvement / recueil

Prélèvement

vaginal

Diagnostic des Infections Sexuellement

Transmissibles (IST)

Diagnostic des infections de l’appareil

génital

Prévenir chez la femme enceinte les

infections materno-fœtales.

-Patiente en position gynécologique sur un lit

d'examen recouvert d'un drap à usage unique.

-Prélèvement effectué sous spéculum (sauf pour les

enfants, les jeunes femmes vierges et les

prélèvements de fin de grossesse >35SA) sans

lubrifiant avec éclairage adapté

-Prélever avec un écouvillon avec milieu de transport

amies

-Adapter le niveau de prélèvement aux recherches à

entreprendre (cf. ci-dessous)

Recherche myco-parasito-bactériologique classique (suspicion d'une vaginose bactérienne, d'une vaginite, d'une candidose et recherche de mycoplasmes): prélever en passant

l’écouvillon au niveau du cul de sac postérieur et des parois vaginales

Recherche de Streptocoque du groupe B de fin de grossesse : prélever au niveau du tiers

inférieur du vagin sans mise en place du spéculum

Recherche d’Herpès : En présence de vésicules, frotter le plancher de celles-ci et transférer sur

milieu de transport pour virus.

Chez la femme enceinte excrétant de façon asymptomatique, prélever au niveau du col utérin et

des faces internes et externes des petites lèvres

Prélèvement

endocervical

-Diagnostic des infections hautes de

l'appareil génital

-Recherche d'une IST, en particulier

Chlamydiae et gonocoque (Neisseria

gonorrhoeae) - Recherche de Mycoplasma

genitallium

- Prélèvement effectué sous spéculum sans lubrifiant

avec éclairage adapté

- Nettoyer l'exocol avec un écouvillon qui sera jeté.

- Prélever le canal endocervical

- Ne pas toucher les parois du vagin

Recherche de Neisseria gonorrhoeae : -prélèvement symptomatique : recherche par mise

en culture, prélever sur écouvillon avec milieu de

transport amies (eswab)

-prélèvement asymptomatique ou dépistage

recherche par PCR prélever sur milieu de transport

PCR (TAAN)

Chlamydiae trachomatis et Mycoplasma

genitallium par PCR:

Prélever sur milieu de transport PCR (TAAN)

-Pour une recherche de Tréponema

pallidum

-Prélever au niveau de l'endocol ou de la vulve

-Réaliser 2 étalements sur lame

-Pour les cultures d'anaérobies (dont

Actinomycètes) peut être réalisée dans

des contextes cliniques très précis (post

partum, post IVG, post-opératoire,

endométrite, salpingite, pathologie sur

stérilet).

- Prélèvement effectué sous spéculum sans lubrifiant

avec éclairage adapté

- Nettoyer l'exocol avec un écouvillon qui sera jeté.

- Prélever le canal endocervical

- Ne pas toucher les parois du vagin

Auto-

prélèvement

-Recherche d'une IST, en particulier

Chlamydiae et gonocoque (Neisseria

gonorrhoeae) par PCR -Dépistage de la vaginose bactérienne

-Recherche de streptocoque du groupe B

Une technique par auto-prélèvement peut être

envisagée pour la recherche par PCR (TAAN)

RI-DIV.17

Prélèvement

urétral

- Présence d'un écoulement

- Recherche d'une IST dans un but de

dépistage ou en présence de signes

cliniques

NB: chez l'homme la recherche de

Chlamydiæ trachomatis est

obligatoirement associée au PU

Le patient devra éviter toute toilette intime et tout

traitement local la veille au soir et le matin du

prélèvement. Il est recommandé de boire

abondement la veille ou au moins 3 heures avant.

Cet examen est à réaliser de préférence le matin

avant miction, ou au moins 1 h après la dernière

miction. Installer le patient en position assis ou semi

allongé sur un lit d’examen recouvert d’un drap à

usage unique.


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Prélèvements mycologiques 1- Matériel spécifique

Boite de pétri

Écouvillon sec

Lampe de Wood

Manche de Gouge + lame de Gouge à usage unique

Pinces à épiler usage unique

2- Le déroulement Réaliser une désinfection des mains par friction avec un produit hydro-alcoolique, mettre des gants.

L’écouvillonnage est effectué à l'aide d'un écouvillon sec.

Concernant le recueil de squames prélevées avec les lames de Gouge, elles sont déposées dans une boîte

de Pétri portant l'identification du patient (coller l'étiquette du patient sur le couvercle ) .

Rendre hermétique le pourtour de la boîte à l'aide de ruban adhésif transparent.

o Herpès circinés

Écouvillonnage du pourtour de la lésion + squames en périphérie de lésion (lame de gouge 2/3).

o Pityriasis versicolor

Lampe de WOOD sur les tâches hyper pigmentées (fluorescence verte à jaune)

Recueillir des squames dans une boîte de Pétri uniquement pour examen direct (lame de gouge 2/3) ;

PAS DE CULTURE

o Intertrigo candidosique

Ecouvillonnage de toute la zone suintante et des plis uniquement à l'aide d'un écouvillon sec


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o Intertrigo des grands plis

Lampe de WOOD : permet la différenciation entre Erythrasma à Corynebactéries (fluorescence rose)

et lésions mycosiques (fluorescence négative)

Ecouvillonnage de la lésion + squames sur le pourtour de la lésion (lame de gouge 2/3).

o Intertrigo des petits plis

Lampe de WOOD ( cf. Intertrigo grands plis ). Ecouvillonnage sec du pli + squames du pli en prélevant dans le

sens du pli vers l'extérieur (lames de gouge 3).

o Lésions plantaires associées : Pied d'athlète

Ecouvillonnage à l'aide d'un écouvillon sec.

Squames (lame de gouge 5) recueillies dans une Boîte de Pétri.

o Onyxis dermatophytique

Squames uniquement sous-unguéales (pas de morceaux d'ongles coupés)

Racler sous l'ongle la partie friable, blanche ou colorée avec la lame de gouge 2/3.

o Onyxis candidosique


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Ecouvillonnage du pourtour de la base de l'ongle et du repli sus unguéal

(+ /- prélèvement de squames sous-unguéales à la lame de gouge).

o Teignes tondantes sèches

Lampe de Wood : pour les Teignes à grandes plaques microscopiques (fluorescence verte)

Ecouvillonnage appuyé de la zone + prélèvement à la pince à épiler de cheveux cassés, courts < 1cm

et déposer dans boîte de Pétri.

o Teignes trichophytiques à petites plaques

Lampe de Wood : fluorescence négative .Ecouvillonnage appuyé de la zone + extirper à la pince à

épiler les points noirs englués dans les squames : petits cheveux de 2mm collés dans les squames à

déposer dans une boîte de Pétri.

o Teignes inflammatoires

Lampe de Wood (pas de Fluorescence dans la majorité des cas) + écouvillonnage appuyé de la lésion

et du pus éventuel + squames si possible (lame de gouge 2/3).

La notion d'animal de compagnie et l'espèce sont importantes.


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o Recherche de Demodex

Arracher les cils (3 minimum) à la pince à épiler à usage unique, à l'endroit où l'on constate une

inflammation du bord ciliaire de la paupière, et les mettre dans une boite de Pétri stérile.

o Recherche de poux

Prélever le parasite lui-même (ou ses lentes) et le mettre dans une boite de Pétri (le parasite est

détectable à l’œil nu entre 1 et 3 mm).

o Vulvo-vaginites, balano-posthites, pli anal, mycoses ORL

Ecouvillonnage seulement.

(Vous pouvez imbiber votre écouvillon avec du sérum physiologique stérile avant le prélèvement,

si la lésion est très sèche).

o Recherche d'Aspergillus

Au niveau des oreilles : utiliser un écouvillon sec transmis tel quel au plateau de bactériologie

mycologie.

Au niveau des sinus : effectuer la recherche sur un fragment de sinus

Le prélèvement mycologique doit se faire en dehors de toute thérapeutique antifongique :

Arrêt du traitement 15 jours minimum pour un traitement local antifongique et un mois minimum pour

traitement oral et/ou filmogène (utilisation des vernis antifongiques).


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Conduite à tenir en cas d'incidents lors du prélèvement

Principaux incidents rencontrés et conduite à tenir

Réaction locale au point de ponction :

- Au moment de la ponction : douleur aiguë, apparition d'un hématome ou gonflement de la

veine (il s'agit de cas de prélèvements difficiles ou de veines très fragiles)

Conduite à tenir :

Arrêter le prélèvement en retirant doucement l'aiguille.

Comprimer un moment si hématome avec un coton imbibé d'alcool.

Rassurer le patient et si besoin recommencer la ponction en un site plus favorable

- Après la ponction : hémorragie (essentiellement pour les patients sous anticoagulants).

Conduite à tenir :

Mettre des gants et faire un point de compression sur le site de ponction, s'assurer que

l'écoulement est tari, changer le pansement en rassurant le patient.

Après son départ, nettoyer les souillures.

Ôter les gants et se laver les mains, s'assurer que tout est conforme avant d'accueillir le

patient suivant.

Réaction générale :

C'est essentiellement le malaise vagal ou syncope vaso- vagale (en cas de perte de

connaissance).

Ce réflexe vagal est déclenché chez une personne anxieuse, par la prise de sang ou par la simple

vue d'une aiguille ou du sang. Il est aggravé par l'état de jeûne, la grossesse, la chaleur

En cas d'antécédents déclarés par le patient le prévenir en mettant le patient en position allongée,

ou en privilégiant les prélèvements à domicile.

Il peut y avoir d'autres causes d'un malaise : malaises d'origine cardiaque ou neurologiques. Il

n'est pas possible dans la phase initiale du malaise vagal d'exclure une autre cause et d'autre part

un malaise vagal bénin peut être une manifestation d'une affection plus grave.

- Malaise sans perte de connaissance : le choc vagal

Il se manifeste par des sueurs, une pâleur d'installation rapide, une respiration ample, des

nausées voire des vomissements, des maux de tête, des bouffées de chaleur....

Conduite à tenir :

Dès le début d'apparition des signes de malaise:

- allonger immédiatement le patient avec les jambes surélevées

- rassurer le patient, le questionner sur son état de santé

- rafraîchir le visage avec un papier imbibé d'eau fraiche

- desserrer éventuellement ceintures et col

- aérer la pièce, ou la ventiler si possible

- proposer un verre d'eau si le patient est en état de boire ou lorsque les signes diminuent

- proposer un morceau de sucre (si pas diabétique)

- laisser le patient récupérer au calme et au repos

- puis le faire lever d'une façon progressive, quelques minutes en position assise,

- lever doucement, rester 1 minute en position debout avant de quitter la salle de prélèvement

Ne pas laisser partir le patient sans être sûr qu'il a bien récupéré ses facultés et proposer

d'appeler ou appeler un membre de la famille ou un ami.

- Malaise avec perte de connaissance : syncope vaso-vagale

Conduite à tenir :

- Identifier l'inconscience en posant quelques questions : Appeler le patient par son nom, lui


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demander de nous serrer la main, d'ouvrir les yeux s'il ne répond pas on est en face d'une perte

de conscience, apprécier sa respiration et son pouls carotidien puis

- Allonger le fauteuil et surélever les jambes

- Lui mettre la tête en arrière, lever le menton afin de libérer les voies aériennes, en cas de

vomissements mettre la personne en PLS pour éviter les fausses route

- Desserrer cravate, col et ceinture

- Demander au secrétariat d'appeler le médecin le plus proche ou les pompiers ou le SAMU -

Dans l'attente de l'arrivée du médecin faire intervenir en priorité, les membres du personnel

ayant obtenu leur AFGSU afin qu'ils prennent la direction des opérations telles qu'elles leur sont

été enseignées

- Suivre les décisions du médecin ou des pompiers.

- Nouveau-nés, nourrissons appeler le 15 en précisant l'âge.

Autres incidents possibles

- Crise de spasmophilie : Spasmes musculaires, signes de contractures, palpitations, difficultés à

déglutir : hyper excitabilité neuromusculaire

- Crise de nerfs ou crise d'angoisse : pleurs, cris, crampes, hyper-ventilation

Conduite à tenir :

Dans ces 2 cas, questionner le malade afin de le détendre, savoir s'il prend un traitement à base de

calcium ou de magnésium, lui donner un verre d'eau et attendre dans un endroit aéré que cela passe

avant de le laisser partir.

- Vomissement : incident fréquent lors des épreuves d'hyperglycémie

Avant de démarrer une épreuve de charge en glucose, avertir le patient du risque, le questionner,

puis prévoir un lieu où il pourra vomir et le déculpabiliser.

Si des vomissements ont lieu au cours de l'épreuve cf. RI-MP.01_BM34-Préambule du manuel de

prélèvement Biomed34 (cf. épreuves dynamiques).

Le biologiste responsable sur le site doit avoir connaissance de tout incident.

Dans tous les cas, si le patient ne récupère pas ou mal, et si l'interrogatoire révèle une

pathologie grave sous-jacente, appeler le médecin ou le service des urgences, ou

conseiller une consultation rapide au patient par son médecin traitant.


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Identification des échantillons

1. Le professionnel qui effectue le prélèvement doit vérifier obligatoirement

l'identité du patient au moment du prélèvement.

2. Il doit identifier les échantillons prélevés immédiatement après le prélèvement

en présence du patient.

Selon la législation en vigueur applicable à tous les préleveurs, tous les échantillons doivent

comporter tous les items suivants :

Nom de naissance (obligatoire pour les examens d'IHE - groupe et RAI)

Nom usuel*

Prénom*

Date de naissance*

Sexe

* items à renseigner à minima sur le tube.

Des fiches individuelles portant des étiquettes sans code barre peuvent être éditées et fournies aux

patients et/ou aux IDE pour accompagner la fiche de domicile.

Si le prélèvement concerne une demande de groupe sanguin ou une recherche d'Anticorps

irréguliers (RAI), l'identification complète et manuscrite du patient est obligatoire.

Le préleveur demande au patient de décliner et d'épeler son identité afin de la retranscrire manuellement,

sans abréviations.

Vérifier l'adéquation Carte Vitale et documents d'identité (CNI, passeport...) en particulier pour les bilans

pré opératoires et les groupages sanguins. En effet, la saisie de l'identité dans les EDS s'effectue à partir

de la pièce d'identité.

Dans le cas d’utilisation d'étiquettes pré-imprimées (EDS et IDE ville), le préleveur devra faire confirmer

par le patient son identité afin de vérifier les mentions portées sur l'étiquette.

- Si le patient ne peut répondre, la vérification d'identité doit être effectuée avec le personnel

soignant ou l'accompagnant présent, le cas échéant à l'aide du bracelet d'identification.

- Dans tous les cas, vérifier la concordance de l'identité avec la prescription.

L’absence ou l’erreur d’identification d’un échantillon constitue une non-conformité enregistrée

dans le système qualité du laboratoire. Cette non-conformité peut entraîner le rejet pur et simple

de l'échantillon et la non-exécution des examens dans les cas de demandes de groupes sanguins

par exemple.


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3. Règles d'étiquetage des échantillons

A l'attention des préleveurs externes : Si vous disposez d'étiquettes pré-imprimées, il est impératif de la positionner selon les mêmes modalités,

pour ce, veillez à apposer (droite et à plat) l'étiquette pré-imprimée sur la zone papier du tube.

En interne: L'étiquette CAB est positionnée à la même hauteur que celle du tube primaire.

Dans tous les cas de figures: il est impératif que l'étiquette soit positionnée droite, à plat (sans plis) et

soit parfaitement lisible.

Son positionnement permettra la visibilité du sérum sur une zone d'au moins 4 mm

Correct

CAB mal collé

Sérum non visible

Incorrect

Etiquette superposée sur

l'étiquette du tube

Correct Incorrect

Etiquette mal collée

Niveau du sang non visible


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Cas d’hémocultures :

Tout manquement à ces règles d'étiquetage sera

enregistré en non-conformité


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Transport des échantillons

Le conditionnement, les modalités de transport et de conservation des échantillons doivent permettre

de maîtriser les points suivants :

Intégrité de l'échantillon

Intégrité des analytes

Confidentialité

Sécurité des personnes

En matière de transport, la classe 6.2 couvre les matières infectieuses (ADR 2017).Dans le cadre des

prélèvements réalisés à l'extérieur du laboratoire, le transport concerne des produits de catégorie B,

affectés au numéro UN 3373.

Les conditions de transport sont conformes à l'accord européen relatif au transport international des

marchandises dangereuses par route ( instruction P650 de l'ADR en vigueur) : respect de la règle du

triple emballage, étiquetage conforme...

Prélèvements réalisés hors du laboratoire devant être acheminés vers les sites pré-post

Les prélèvements réalisés hors du laboratoire doivent être transportés, dans les kits de prélèvement

fournis par le laboratoire et à une température ambiante.

Les délais d'acheminement des prélèvements réalisés hors du laboratoire sont limités par la stabilité des

analytes avant prétraitement décrite dans le document RI-DIV.12_BM34 -Délais de stabilité des analytes

avant prétraitement et mentionnés à l'aide d'un pictogramme dans le manuel de prélèvement.

A l'exception des paramètres listés dans ce tableau, les analytes sanguins peuvent se conserver 8 heures

au moins à température ambiante avant d'être prétraités au laboratoire. Il conviendra de s'assurer que

l'heure de prélèvement soit compatible avec ces durées de conservation limitée.

Les équipements isothermes mis à disposition par le LBM (enveloppes ou sacoches) protègent les

échantillons des écarts de température pour un transport n'excédant pas 2 heures dans des conditions

extrêmes.

Pour les prélèvements bactériologiques, le LBM met à votre disposition des écouvillons ou des kits de

prélèvement et de conservation adaptés. Leurs conditions d'utilisation et de conservation suivent les

mêmes règles que celles des prélèvements sanguins.

Échantillons prétraités destinés aux plateaux techniques

Les plans de tournées, les horaires de passage des coursiers et le colisage des échantillons sont définis et

tracés en interne.

Les prélèvements sont transportés dans des véhicules équipés de caissons à températures dirigées en

fonction des conditions de stabilité définies.

Les délais et modalités de stabilité des échantillons après prétraitement sont définis.


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Élimination des déchets


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Information, DASRI pour préleveurs externes

Documents

Préambule du Manuel de Prélèvement Biomed34 · 2019-05-21 · Preambule du Manuel de Prelevement - RI-MP.01_BM34 - Version 1. 1 Page 5 sur 33 Ce document est la propriété exclusive