ANRS 1271 – Déterminants de la

transmission du VIH par l’allaitement maternel:Nouvelles perspectives

Projet ANRS 1271 initial

• Déterminants nutritionnels

• Déterminants socio-anthropologiques

• Déterminants immunovirologiques

Intégrés dans l’essai Kesho Bora

ANRS 1271/ Déterminants immunovirologiques : étude cas-témoin

nichée dans l’essai Kesho Bora

• 70 cas (transmission postnatale avérée)• 210 témoins (pas de transmission)

• Problèmes rencontrés: - Lenteur du recrutement;- Rareté attendue (et observée) de la

transmission postnatale

ANRS 1271 en 2008 (1)

• The Durban Vertical Transmission Study (N Rollins, ML Newell, A Coutsoudis, H Coovadia)

• 1400 femmes infectées par VIH-1, support à l’Al. Exclusif+ 1400 femmes non infectées par VIH-1

- Echantillons de lait (seins droit et gauche) collectés à S6, tous les mois jusqu’à M9 et tous les 3 mois jusqu’à M24;

- 3 Echantillons de sang disponibles chez les mères;- Diagnostic de l’infection acquise en période postnatale

(par PCR chez l’enfant)

ANRS 1271 en 2008 (2)

• The Durban Certical Transmission Study/VTS (N Rollins, ML Newell, A Coutsoudis, H Coovadia)

• 60 enfants ayant acquis le VIH-1 en période postnatale (PCR- à S4, + ensuite): 42 avant 6 mois, 18 entre 6 et 24 mois

• Etude cas-témoin nichée dans la cohorte

• Proposition de collaboration avec ANRS 1271 (inclusion des 60 enfants + témoins dans le programme 1271, en complément du recrutement de l’essai Kesho Bora)

Plan de travail (1)

• Etape “zéro”: Quantification de l’ARN et de l’ADN du VIH-1 dans le lait

• Etape 1: Amplification et clonage de l’ARN et de l’AND viral afin de déterminer l’origine du virus transmis

• Etape 2: Profil protéomique du lait de mères ayant ou non transmis le virus

Cell-free and cell-associated HIV-1 are both responsible for breast milk transmissionKoulinska I. et al., JAIDS 2006

Cell-free virus Cell-associated virus indetermined

< 9 m post p 2 8 6

> 9 m post p 11 8 5

Total 13 16 11

p=0.03

HIV-1 Transmission

Protéome du lait maternel: des surprises à attendre ?

• 2903 peptides détectés: La plupart correspond à des fragments de protéines majoritaires: αS1casein, αS2 -casein,β-casein, κ-casein, β-lactoglobulin, and α-lactalbumin.

• 143 peptides correspondant à 53 gènes distinctsLeur classification: « Host defense/immune related, enzyme, structural, transport, DNA binding and signal transduction proteins were approximately equally represented (19, 13, 17, 15, 11, and 11% respectively), whereas no chaperonins were detected. An additional 13% of the proteins were of unknown or unclassifiedfunction. »

LC/MSMS

Plan de travail (2)

• Etape 3: Quantification de facteurs solubles (cytokines, facteurs antiinfectieux, …)

• Etape 4: Etude de la réponse humorale locale

• Etape 5: Etude des co-infections maternelles (CMV, EBV, GBV-C, HSV, HCV, …)

• Etape 6: Etude des facteurs génétiques maternels par superarray (HLA, Apobec-3G, TRIM 5 alpha, NF-kappa B, cdk9, …)

2007 2008 2009

07-12 01-03 04-06 07-09 10-12 01-03 04-06 07-09 10-12

Etape 0

Etape 1

Etape 2

Etape 3

Etape 4

Etape 5 et 6

Coordination

Chronogramme