Interface faune sauvage – animaux de rente :

exemple de la Brucellose à Brucella suis biovar 2

chez les suidés

GREGOIRE Fabien Service de bactériologie Réseau de Suivi sanitaire de la faune sauvage

INTRODUCTIONINTRODUCTIONPourquoi s’intéresser aux maladies de la faune sauvage ?Pourquoi s’intéresser aux maladies de la faune sauvage ?

SANTE HUMAINE (Zoonoses)

« SANTE » DE L’ENVIRONNEMENT

SANTE DES SANTE DES ANIMAUX ANIMAUX DOMESTIQUESDOMESTIQUES

FAUNE = PATRIMOINE ET VALEUR ECONOMIQUE

• DIRECTIVE EUROPEENNEDIRECTIVE EUROPEENNE

• COMMISSION FAUNE SAUVAGE - COMMISSION FAUNE SAUVAGE - OIEOIE

• FRANCE : RESEAU SAGIRFRANCE : RESEAU SAGIR

• Wildlife diseases association Wildlife diseases association • Belgian Wildlife Diseases SocietyBelgian Wildlife Diseases Society

CONTEXTE EUROPEENCONTEXTE EUROPEEN

Mycobacterium Mycobacterium bovisbovis

Espagne (Sud-Ouest)

LYNX IBERIQUE

ONGULES SAUVAGES

Brucella spp. . Quelques brefs rappels

.• coccobacciles Gram –

• plusieurs « espèces » – biovars – hôtes préférentiels

Brucella spp.. Nouvelle nomenclature .

• Avant : Brucella

Plusieurs espèces(Plusieurs biovars)

Ex: Brucella abortus biovar 1, B. suis biovar 2, B. melitensis biovar 1, B. canis…

• Dorénavant :Brucella

1 espèce : melitensisPlusieurs biovars

Ex : B. melitensis biovar abortus 1, B. melitensis biovar melitensis 1, …

Biovars Hôte préférentiel Distribution

Géographique

Pathogénicité pour

l’homme

melitensis 1, 2, 3 Ovins, caprins, ongulés sauvages

Méditerranée, Moyen-Orient

Forte

abortus 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9

Bovins, ongulés sauvages

Europe, Asie, Amériques, Afrique

modérée

suis 1

2

3

4

5

Suidés

Suidés, Lièvres

Suidés

Rennes

Rongeurs

Amérique Latine, Asie, Océanie

Europe

Etats-Unis, Chine

Canada, Russie

Russie

Forte

Faible?

Forte

Modérée

Forte

ovis Ovins (mâles) Méditerranée nulle

canis Chiens Amériques, Europe centrale

faible

neotomae Néotomes Etats-Unis (Utah) ???

Brucella suis biovar 2 . Pathogénie .

• 1. Transmission:via produits d’avortements

excrétions génitales75% des verrats infectés excrètent via éjaculat !

laiturine

Voies de pénétration = orale – vénérienne – transplacentaire

• 2. Traversée des muqueuses et multiplication dans les nœuds lymphatiques

• 3. Bactériémie importante et persistante (2 à 3 mois) manipulation des carcasses des

animaux infectés !

• 4. localisations génitales ET extragénitales

• 5. « Self limiting disease »

Brucella suis biovar 2 . Pathogénie .

Brucella suis biovar 2 . Symptômes .

• Chez le porc domestique:– Lésions génitales

• ♂ – Souvent infection inapparente

(orchite et/ou épididymites)

• ♀– Avortements– Infertilité– Nombre de porcelets / portée – Métrites (granulo-kystiques dans 30% des cas)– Mammites: exceptionnelles– Rétentions placentaires: exceptionnelles

• Chez le porc domestique:– Lésions extragénitales Fréquentes

• Abcès sous-cutanés, musculaires, rénaux,…• Lymphadénites• Arthrites suppuratives et déformantes,

synovites• Spondylite paraplégie postérieure

Brucella suis biovar 2 . Symptômes .

Foyers de brucellose porcine :

• En Belgique : pas de cas recensés depuis les années 70

• En France : 36 foyers détectés entre 1993 et 2002 sur 21 départements (32 confirmés par isolement de B. suis 2)

Brucella suis biovar 2. Epidémiologie .

• Elevages en plein airElevages en plein air• Pas de lien commercial (échange Pas de lien commercial (échange animaux ou semence) entre les animaux ou semence) entre les foyers foyers foyers PRIMAIRES foyers PRIMAIRES

LE COUPABLE …LE COUPABLE …

Sanglier (Sus scrofa)

Brucella suis biovar 2. Epidémiologie .

Brucella suis biovar 2

• Intrusions des sangliers mâles dans les élevages (truies en chaleur!)

• Voie de transmission principale = vénérienne

EFFECTIFS DES SANGLIERS EN REGION WALLONNE 1980 -2002 EFFECTIFS DES SANGLIERS EN REGION WALLONNE 1980 -2002 Augmentation de plus de 300% !Augmentation de plus de 300% !

Brucella suis biovar 2

• Symptômes chez le sanglier :– Expression clinique rare (1 cas d’orchite aiguë en

1993 – Haut-Rhin)– Impact sur la fertilité? Peu probable…

• Lièvre sensible à B. suis 2 cachexie, lésions génitales, hépatomégalie, foyers nécrotiques

au niveau des viscères

• 35 souches B. suis 2 isolées chez le lièvre (France)• Prévalence ??? Rôle épidémiologique exact ???• Mis en cause dans de nombreux pays (Suisse, Ukraine,

Croatie, Danemark)– Cadavre de lièvre retrouvé dans la nourriture destinée aux PC– Elevages de PC infectés dans régions où sangliers absents

• Mais les souches lièvres et suidés semblent être génétiquement différentes ….

Brucella suis biovar 2 . Epidémiologie : rôle du lièvre ? .

• Suivi sanitaire de la faune sauvage – Projet RW

• Suivi des sangliers (brucellose) :Collecte de 1. Sang sérologie

2. Rate culture et isolement

Brucella suis biovar 2 . Etude de la prévalence en Wallonie .

• a. Mise en culture des échantillons de rate– Broyat de rate ensemencé sur milieu sélectif (Farell)

– 4 jours à 37°C (atm enrichie en CO2)

– Isolement des colonies caractéristiques

ou suspectes– Contrôle (coloration de Köster)– Biotypages des souches OXY,

CAT, et URE + identifier le biovar

Brucella suis biovar 2 . I. Diagnostic direct .

b. Analyse génétique (PCR IS6501)

Culture et PCR = méthodes de référence (« golden standard ») : spécificité et sensibilté proches de 100%

Brucella suis biovar 2 . I. Diagnostic direct .

• Brucella abortus• B. melitensis • B. suis

• Yersinia enterocolitica O:9

. II. Diagnostic sérologique .

Caractéristiques Caractéristiques antigéniques communes antigéniques communes

(LPS)(LPS)

Réactions croiséesRéactions croisées

Diagnostic sérologique .

2 TYPES D’ANTICORPS SERIQUES:

• En réaction immédiate : IgM (7 – 10 j P.I., présents env. 3 mois)

• Plus tardivement : IgG (28-30 j P.I., présents 3-10 mois)

• a. ELISA– Détection IgG anti-Brucella

(infection « chronique »)– Bonnes spécificité (99,7%)

et sensibilité (92,5 %)– Test de référence pour

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• b. AGGLUTINATION LENTE

– Résultats peu satisfaisants (sensibilité très mauvaise bcp de faux – : prévalence sous-estimée)

– IgM principalement ciblés « infection aiguë »

– Peu utilisé

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• c. AGGLUTINATION RAPIDE SUR LAME (ou test Rose Bengale)

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

Ag colorés au Rose Bengale + Ac = Ag colorés au Rose Bengale + Ac = précipitation des complexes immunsprécipitation des complexes immuns

Sensibilité et spécificité : environ 80% Détecte principalement IgG1

• d. FIXATION DU COMPLEMENT – Très spécifique– Détecte IgG1

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

Sérum à tester Sérum à tester + antigène + antigène Brucella suis 2Brucella suis 2 + complément + complément + GR de mouton + GR de mouton sensibilisés (indicateur)sensibilisés (indicateur)

Attention à l’interprétation des résultats sérologiques …

– « Self limiting disease » : un résultat séro+ ne signifie pas nécessairement que l’infection soit toujours présente.

– Les animaux porteurs peuvent perdre leur titre en Ac anti-Brucella infections latentes sans séroconversion !

Séroprévalence ≠ prévalence de l’infection !

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

Attention aux éventuelles réactions croisées !!!

Diagnostic de Yersinia enterocolitica• Sérologie : ELISA YOP (Yersinia Outer Proteins)• Culture à.p. des matières fécales

• COMBINAISON DES 5 TESTS = efficacité maximale

• Aucun test sérologique ne peut différencier réactions envers Brucella et Y. enterocolitica

• Sangliers - 2002 et 2003 (CERVA) : n = 345– ELISA : séroprévalence de 58,3 % – Seul 25% environ des animaux séro+ étaient porteurs

de la bactérie (culture+)

• Prélèvements sur lièvres également (rate, sérum). – Cultures sur rate négatives jusqu’à présent

Brucella suis biovar 2 . Etude de la prévalence en Wallonie .

• Maladie à déclaration obligatoire (liste OIE)

• Seuls les verrats pour l’IA ou monte publique font l’objet d’un contrôle sérologique obligatoire (à l’entrée dans le centre, puis chaque année)

Brucella suis biovar 2 . Réglementation sanitaire .

• En cas de confirmation de brucellose dans un élevage porcin:Séquestration des animaux du foyer

• Accès interdit à tout PC étranger (sauf castrat);• Unique sortie pour tous les PC => abattoir• Contact interdit avec autres animaux de l’exploitation• Désinfection des installations

– Persistance de la bactérie dans la terre humide et MF = 5 mois

• Mesures applicables pendant minimum 6 semaines après constatation officielle du dernier cas

Brucella suis biovar 2 . Réglementation sanitaire .

1. L’éleveur décide de n’éliminer qu’une partie des animaux :

Les porcs (âge > 4 mois) du foyer sont testés sérologiquement (2 prises de sang à 30 jours d’intervalle minimum)

Si tous les animaux sont séro- et ne présentent pas de signes cliniques de brucellose = levée des mesures

Brucella suis biovar 2 . Réglementation sanitaire .

2. VIDE SANITAIRE (la meilleure solution !!! Mais pas toujours réalisable …)

Les mesures sont levées 10 jours après la destruction du cheptel et la désinfection totale du foyer

Brucella suis biovar 2 . Réglementation sanitaire .

• Brucellose humaine principalement due à B. melitensis (Fièvre de Malte) et B. abortus– Contact avec produits de sécrétion

contaminés– Ingestion de produits laitiers crus ou

non pasteurisés– Via particules/aérosol

Brucella suis biovar 2 . Risques pour l’homme ? .

Brucella suis biovar 2 . Risques pour l’homme ? .

• B. suis 2 : pathogénicité pour l’homme supposée faible néanmoins quelques cas (sérologiques et/ou cliniques) recensés en France

Port des gants lors de la manipulation de cadavres d’animaux sauvages !!!

Risque de contamination via ingestion de viande considérée nulle

• Protection des élevages porcins:– Mesures sanitaires classiques– Contrôle des reproducteurs– Surveillance sérologique des troupeaux à

risque (plein air !!!)– Séparation nette avec les élevages bovins,

ovins, et caprins (risque de contamination avec B. abortus ou B. melitensis)

Brucella suis biovar 2 . Prophylaxie sanitaire .

• Protection contre les animaux sauvages (sangliers et lièvres)– Eradication de la maladie chez les espèces

réservoirs ? IMPOSSIBLE– Vaccination porcs ? : IMPOSSIBLE (pour le

moment ?)– Clôtures contre sangliers

• 1 clôture de 1,6 m avec un système anti-fouissement (rabat extérieur horizontal)

• Double clôture : 1 clôture de 1,30 m + 1 clôture extérieure électrique (2 fils superposés)

Brucella suis biovar 2 . Prophylaxie sanitaire .

EN CONCLUSION …

• La brucellose porcine court toujours…

• Sous-diagnostiquée en Belgique chez les porcs d’élevage ???

• Ne pas l’écarter de son diagnostic différentiel lors de troubles de la reproduction (et autres !) dans les élevages porcins (surtout en France !)

• Importance des réservoirs sauvages dans la prophylaxie des maladies infectieuses le VT d’exploitation se doit d’être au courant …

Plus d’infos?

• Site de l’OIE : www.OIE.int– Pour s’informer du statut des M.D.O.

• Site de l’AFSCA : www.afsca.be– Pour connaître les mesures sanitaires en rigueur en Belgique

• Site sur la brucellose animale (Maison-Alfort):www.vet-alfort.fr/ENSV/brucellose-2004.pdf

• Brucellose enzootique à B. suis 2 chez le sanglier en Belgique, Godfroid F., Annales Médecine Vétérinaire, 1994, 138, 263-268

• Suivi Sanitaire de la Faune Sauvage (Dr Linden A. – Service de bactériologie)