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Rapport annuel d'activité, année 2014
Laboratoire National de Référence
Peste porcine classique
Nom du responsable du LNR
Marie-Frédérique Le Potier, suppléant : Olivier Bourry
Nom de l'unité où l'activité du LNR est mise en œuvre
Unité Virologie Immunologie Porcines (UVIP),
Nom du laboratoire où l'activité du LNR est mise en œuvre
Laboratoire de Ploufragan/Plouzané
Nombre de laboratoires agréés et/ou reconnus dans le réseau
16
Précisez la catégorisation du danger (en SA) sinon la justification de l'existence du
mandat de LNR
La PPC est une maladie virale des suidés domestiques et sauvages due à un pestivirus.
C’est une maladie contagieuse qui peut se manifester sous forme suraiguë (mort en 24H) à
frustre (dépérissement, troubles de la reproduction) selon la virulence de la souche et selon
le statut de l’animal (âge, statut sanitaire). Les lésions de PPC sont de type hémorragique
(maladie « rouge »). Le virus de la PPC peut être identifié par isolement viral. Son génome
peut être mis en évidence par RT-PCR à partir du sang ou d’organes (amygdales, rate) de
porcs infectés. Les anticorps dirigés contre le virus de la PPC sont mis en évidence par
ELISA ou neutralisation virale à partir du sérum.
Selon l’arrêté du 29 juillet 2013 relatif à la catégorisation des dangers sanitaires, la peste
porcine classique est classée en première catégorie
2
Introduction
Les faits marquants de l'année
- Pour la PPC, l’année 2014 a été marquée par l’absence de nouveau cas positif dans le
foyer de faune sauvage des Vosges du Nord. Bien que l’arrêt de la vaccination des
sangliers soit effective depuis 2010, la surveillance maintenue jusqu’en juin 2013 démontrait
qu’il reste environ 1% des jeunes qui présentent des anticorps dans la ZOR (zone
d’observation renforcée) correspondant à la zone où la vaccination a été pratiquée de 2004
à 2010. De plus, dans certaines communes, ce pourcentage peut être supérieur à 10%.
Pour essayer de comprendre d’où proviennent ces anticorps, une pré étude, pour la période
mars/mai 2013, en neutralisation virale a été faite sur les sérums de jeunes sangliers. Une
étude, pilotée par Sophie Rossi (ONCFS), basée sur la capture/recapture d’animaux jeunes
a été mise en place pendant l’été 2013 pour suivre la cinétique des anticorps dirigés contre
le virus de la PPC et s’est poursuivie jusqu’en juillet 2014. Cette étude a permis de mettre
en évidence une disparition progressive et précoce des anticorps anti PPC chez les jeunes
sangliers qui ont été marqués suggérant la présence d’anticorps maternels. 89 animaux
marqués à l’été 2013 n’ont pas été tirés lors de la saison 2013-2014, pourront
potentiellement compléter cette étude lors de la saison 2014-2015. Les jeunes animaux
semblent être de bons indicateurs pour mettre en évidence la présence de virus. Dans ce
contexte la DGAl a saisi l’Anses sur le risque de réémergence de la PPC chez les sangliers
des Vosges du Nord. Le groupe d’experts a préconisé dans le cadre de la saisine 2014-SA-
0048 de poursuivre la surveillance sérologique de tous les sangliers de 6 à 24 mois chassés
dans le massif des Vosges du Nord sur la saison de chasse 2014-2015, le temps de définir
une surveillance mieux ciblée sur des lots de chasse représentatifs du plus fort risque de
réémergence en cœur de massif pour la saison suivante. Le protocole de surveillance du
foyer du Nord Est proposé est de tester (sérologie et PCR) uniquement les animaux jeunes
(-30kg) tués à la chasse au cœur du massif des Vosges du Nord et de renforcer la
surveillance événementielle pour détecter toute résurgence du virus.
- Le producteur de kit ELISA anticorps PPC demande une augmentation de la durée de vie
de 6 mois, un dossier a été fourni mais le LNR le considère incomplet. Des essais sont
menés par le LNR pour vérifier sur des sérums sentinelle la conformité des résultats avant
péremption jusqu’à 6 mois après péremption.
- Un vaccin marqueur développé dans le cadre du projet européen CSFgoDIVA a obtenu
une AMM européenne et pourrait être utilisé en cas de réémergence. L’UVIP avait pu
démontrer que ce vaccin, le CP7-E2Alf, pouvait induire une protection dès 24h suite à une
administration par voie orale, contre la souche qui circulait dans les Vosges du Nord
(Renson et al, 2013 comme une protection à plus long terme vis à vis d’une souche très
virulente [Renson et al, 2014].
3
1. Méthodes développées ou révisées
Nombre de méthodes développées ou révisées proposées à l’autorité compétente
0
Nombre de méthodes développées ou révisées qui sont susceptibles d’être prêtes
pour être proposées à l’autorité compétente au cours de l’année N+1
0
2. Matériels biologiques ou chimiques, matériaux de référence et échantillons et
souches d'intérêt
Décrire ici les collections d'échantillons biologiques ou d'autre nature
(environnement, aliment...) conservés par le LNR; indiquer les méthodes de
conservation, la température, le nombre de "repositories", le nombre d'échantillons
par souche, l'enregistrement associé...).
Le LNR dispose d’une collection d’échantillons biologiques de différentes natures :
• Des sérums de porcs conservés dans des congélateurs à -18°C ;
• Des souches virales conservées dans des surgélateurs à -80°C ;
• Des organes de porcs conservés dans des surgélateurs à -80°C.
- Les sérums, comme les organes de porc, sont récoltés sur des animaux provenant des
animaleries protégées du laboratoire de Ploufragan-Plouzané. Les souches virales sont
produites par le LNR dans ses locaux à partir d’échantillons du terrain ou reçues de
laboratoires collaborateurs comme le laboratoire de référence de l’Union Européenne
(LRUE). Les souches destinées à la vente en dehors du réseau de laboratoires agréés par
le ministère sont inactivées avant expédition.
- L’ensemble de cette échantillothèque est répertorié. Chaque sérum et chaque souche
virale est associé à une fiche détaillant son origine, sa production et les analyses dont il a
fait l’objet. Les organes sont également répertoriés et tracés.
- Le LNR PPC dispose de sérums hyper immuns vis-à-vis du virus de la PPC, mais
également d’autres pestivirus comme le virus de la maladie des muqueuses (BVD) et la
maladie des frontières (BD). Il partage avec les autres LNR de l’unité des sérums de porcs
exempts d’organisme pathogènes spécifiés (EOPS) des animaleries protégées ou de porcs
venant du terrain (élevages conventionnels ou abattoirs). L’inventaire de la sérothèque est
présenté dans le tableau 2.
- Deux souches virales de travail, PPC Alfort et BD Aveyron, sont utilisées pour réaliser les
essais de diagnostic courants. 31 souches caractérisées de PPC, 2 de BD et 3 de BVD et
18 anciennes souches PPC prélevées sur le terrain et non encore complètement
caractérisées sont conservées dans les surgélateurs de l’unité et 85 souches issues du
foyer du Nord EST de la France de 2003 à 2007.
- Les organes sont essentiellement des amygdales, des rates ou des ganglions de porc.
L’organothèque comprend une vingtaine d’organes provenant de porcs infectés
4
expérimentalement par la PPC, 12 organes provenant de porcs infectés par la BD, 3
organes provenant de porcs infectés par la BVD et 18 organes provenant de porcs EOPS,
tous sous une quantité minimale de 10 g. Enfin, 188 échantillons d’organes positifs en PPC
provenant du diagnostic terrain ont été conservés, sous un volume minimal de 1 g.
- Tableau 2 : sérothèque du LNR PPC
Nature Nombre Volume total (ml)
Sérums hyper immuns PPC 101 32658
Pool de sérums hyper immuns PPC 2 3854
Sérums hyper immuns PPC conditionnés (usage interne, vente) 5 627
Sérums hyper immuns BVD 13 4182
Sérums hyper immuns BD 18 9688
Sérums EOPS 22 4033
Nombre de souches/échantillons reçu(e)s et mis(es) en collection dans l'année
3
Nombre de souches/échantillons maintenu(e)s au total
142
3. Activités d'analyse
3.1 Analyses officielles de première intention
Nombre d'analyses de première intention réalisées dans l'année (de biotypie,
sérotypie, caractérisation moléculaire...)
6
Détaillez ici par type d'analyse de première intention
RT-PCR PPC : 6 analyses réalisées
5 suspicions :
- 2 exercices organisés par la DDPP du Morbihan (45 prélèvements) et La DDPP du
Finistère (30 prélèvements). Dans le cadre d’un exercice, les échantillons sont réceptionnés
mais non analysés.
5
- 1 élevage de porc (24 prélèvements) du Finistère (été 2014), 1 porc (2 prélèvements) de
haute Corse (été 2014) et un sanglier (1) en Lozère (automne 2014) Dans le cadre du
diagnostic de première intention, le LNR reçoit principalement des organes, du sang ou
sérums lors de suspicion clinique de Peste Porcine pour analyses virologiques et/ou
sérologiques. Certains organes reçus (foie, rein) ne sont pas des organes pouvant être
utilisés pour les analyses. Dans le cas de la suspicion de l’été 2014, ce type d’organes a été
réceptionné mais non analysé.
nb de dossiers
nb de prélèvements
reçus nb d’analyses
Analyses
virologiques
Porc domestique 4 45+30+24+2=101 5 RT-PCR
sanglier 1 1 1 RT-PCR
catégorie Technique 2009 2010 2011 2012 2013 2014
Porc
domestique
Nombre dossier 0 5 2 1 1 4
Nombre
échantillons
reçus
0 88 95 44 12 101
Nombre
échantillons
analysés
0 34 RT-PCR
13 Elisa
19 RT-PCR
63 Elisa
2 RT-PCR
40 Elisa
7 RT-PCR
5 RT-PCR
Sanglier Nombre dossier 1 0 2 1 1 1
Nombre
échantillons
reçus
2 0 8 1 15 1
Nombre
échantillons
analysés
1 RT-PCR
0
7 RT-PCR
1 RT-PCR
5 RT-PCR
1 RT-PCR
Le nombre d’échantillon reçu est variable d’une année à l’autre car dépendant du contexte
épidémiologique.
6
3.2. Analyses officielles de confirmation
Nombre d'analyses de seconde intention réalisées dans l'année (de biotypie,
sérotypie, caractérisation moléculaire...)
132
Détaillez ici par type d'analyse de confirmation
analyses demandées 141, analyses réalisées 132. La mauvaise qualité de certains
prélèvements n’a pas permis leur analyse, ce qui explique la différence entre le nombre
d’échantillons reçus et ceux analysés pour les sangliers.
Porc domestique sanglier méthode Nombre
échantillon reçus
Nombre échantillon analysés
Confirmé/analysé
Nombre échantillon reçus
Nombre échantillon analysés
Confirmé/analysé
Neutralisation virale PPC Alfort
22 22 2/22 47 42 12/42
Neutralisation virale PPC Bas Rhin
0 0 40 36 10/36
Neutralisation virale BD
22 22 4/22 7 7 0/7
Elisa PPC 1 1 0/1 0 0 RT-PCR 0 0 2 2 0/2
La diminution du nombre d’analyses pour les sangliers est due à l’extinction du foyer avec la
modification du plan de surveillance (une classe d’âge sur une zone géographique réduite).
Taux de confirmations par type d'analyse (= nombre de résultats confirmés / nombre
d'analyses officielles de seconde intention réalisées)
28/132
La mauvaise qualité de certains prélèvements n’a pas permis leur analyse, ce qui explique
la différence entre le nombre d’échantillons reçus et ceux analysés pour les sangliers.
3.3. Autres analyses
Nombre estimé d'autres analyses (non officielles) réalisées dans l'année en lien avec
le mandat de LNR
488
7
Détaillez ici par type d'autres analyses
Catégorie Technique 2009 2010 2011 2012 2013 2014
EILA
(européen+national+organisation)
ELISA 27 72 44 50 53 64
Neutralisation
virale
différentielle
(PPC+BD)
79 82 60 114 72 91
RT-PCR 110 79 78 100 82 88
isolement viral 14 22 22 22 24 22
Séquençage
(nombre de
séquence)
0 0 0 12 21 21
Suivi sanitaire porcherie protégée
Anses
ELISA 0 0 0 0 0 0
Neutralisation
virale
différentielle
(PPC+BD)
122 151 62 150 114 202
RT-PCR 0 0 0 0 0 0
isolement viral 0 0 0 0 0 0
4. Activités de production et de contrôle de matériaux de référence et de réactifs
biologiques
Le LNR produit-il et fournit-il des réactifs ?
Oui
Cette activité est-elle une obligation découlant de textes réglementaires, normatifs ou
infra-réglementaires (notes de service). Si oui, lesquels?
DÉCISION DE LA COMMISSION du 1er février 2002 portant approbation d'un manuel
diagnostique établissant des procédures de diagnostic, des méthodes d'échantillonnage et
des critères pour l'évaluation des tests de laboratoire de confirmation de la peste porcine
classique [notifiée sous le numéro C(2002) 381](Texte présentant de l'intérêt pour l'EEE)
(2002/106/CE)
8
Quels sont les types de réactifs produits et fournis (vaccins, kits, autres) ?
sans objet
Quels est le nombre de lots produits et fournis par an ?
(moyenne sur les 5 dernières années)
0
Quelles sont les quantités produites/fournies par lot ?
(moyenne sur les 5 dernières années)
0
Analyse de l'évolution (augmentation, diminution) des tendances en termes d'activité
sur les 5 dernières années
/
Le LNR fournit-il des matériaux de référence ?
Oui
Cette activité est-elle une obligation découlant de textes réglementaires, normatifs ou
infra-réglementaires (notes de service). Si oui, lesquels?
DÉCISION DE LA COMMISSION du 1er février 2002 portant approbation d'un manuel
diagnostique établissant des procédures de diagnostic, des méthodes d'échantillonnage et
des critères pour l'évaluation des tests de laboratoire de confirmation de la peste porcine
classique [notifiée sous le numéro C(2002) 381](Texte présentant de l'intérêt pour l'EEE)
(2002/106/CE)
Quels sont les types de matériaux de référence (MRE, MRI, contrôles positifs ou
négatifs, autre) produits et fournis ?
Contrôles positifs et négatifs
Quel est le format (sérum, souche, produit chimique, autre) de ces matériaux de
référence ?
sérum, souche inactivée, souche
9
Quel est le nombre de lots produits et fournis par an ?
(moyenne sur les 5 dernières années)
4
Quelles sont les quantités produites/fournies par lot ?
(moyenne sur les 5 dernières années)
300
Analyse de l'évolution (augmentation, diminution) des tendances en termes d'activité
sur les 5 dernières années
stable
Le LNR réalise-t-il des contrôles de réactifs commerciaux ?
Oui
Cette activité est-elle une obligation découlant de textes réglementaires, normatifs ou
infra-réglementaires (notes de service). Si oui, lesquels?
Décision européenne (2002/106/CE
Quelles sont les modalités de contrôle (initiaux, répétitifs, lot par lot) ?
initiaux et lot par lot
Quel est le nombre de contrôles - ou de lots contrôlés - par an ? (moyenne sur les 5
dernières années)
6
Analyse de l'évolution (augmentation, diminution) des tendances en termes d'activité
sur les 5 dernières années
Nombre de
contrôle de lot
2010 2011 2012 2013 2014
Elisa 2 2 2 2 4
RT-PCR 7 3 3 3 5
stable
10
5. Activités d'expertise scientifique et technique
5.1. Demandes d’expertise scientifique et technique du ministère (chargé de
l’agriculture, santé, etc…) ou d’instances communautaires et internationales qui
concernent votre domaine de compétence
Nombre de rapports d'EST rendus dans l'année
1
Détaillez ici les demandes d'EST et les noms des mandataires
DGAl
5.2. Autres expertises
Les membres de l'équipe du LNR peuvent avoir des activités d'expertise (internes:
CES, GT ou externe: EFSA...) ou des activités auprès de commissions de
normalisation (Afnor...). Détaillez ici ces activités et estimez le temps qui y est
consacré.
MF Le Potier : membre de la commission AFNOR U47, membre du groupe d’expert national
pour la peste porcine classique, membre des groupes de travail de la plateforme ESA pour
la surveillance des pestes porcines chez le porc domestique ou le sanglier
5.3. Dossiers de demande d'agrément
Nombre de dossiers de demande d'agrément étudiés dans l'année
0
5.4. Activités de conseil aux professionnels
Détaillez ici ces activités et estimez le temps qui y est consacré
Le LNR n’est pas en relation directe avec un réseau de professionnels de la filière porc,
mais peut être sollicité par téléphone, mails etc. . Il est aussi souvent sollicité par les
DDPPs.
Une adresse email existe pour le LNR qui est noté dans toutes les notes de service :
11
6. Animation du réseau de laboratoires officiels
6.1. Organisation d'EILA
Précisez ici le nombre d'EILA organisés par le LNR au cours de l’année N
3
Nom de l'EILA
EILA PCR PPC2014
L'EILA est-il réalisé sous accréditation "17043"?
Oui
Nombre de laboratoires participants
13
Nombre de laboratoires agréés participants (Na)
8
Le LNR a-t-il participé à l'EILA?
Oui
Nombre de laboratoires participants en cours de demande d'agrément
0
Nombre d'autres laboratoires participants
4
Détail des autres laboratoires participants: français/étrangers
3 étrangers +1 producteur
Nombre de laboratoires ayant obtenu des résultats défavorables
1
Nombre de laboratoires agréés non conformes (Nc)
0
12
Taux de non conformités Nc/Na
0
Nature des non conformités (limiter aux laboratoires agréés)
sans objet
Gestion des non conformités (limiter aux laboratoires agréés) : actions mises en
œuvre pour l'identification des causes et des mesures correctives
sans objet
Suivi de décisions sur l'agrément
sans objet
Evolution du réseau dans le temps
aucune
Nom du 2ème EILA
EILA ELISA PPC 2014
cet EILA est-il réalisé sous accréditation "17043"?
Oui
Nombre de laboratoires participants à cet EILA
21
Nombre de laboratoires agréés participants (Na) à cet EILA
16
13
Le LNR a-t-il participé à cet EILA?
Oui
Nombre de laboratoires participants à cet EILA, en cours de demande d'agrément
0
Nombre d'autres laboratoires participants à cet EILA
4
Détail des autres laboratoires participants à cet EILA: français/étrangers
2 étrangers+2 producteurs
Nombre de laboratoires ayant obtenu des résultats défavorables lors de cet EILA
2
Nombre de laboratoires agréés non conformes (Nc) lors de cet EILA
0
Taux de non conformités Nc/Na lors de cet EILA
0
Nature des non conformités (limiter aux laboratoires agréés) de cet EILA
sans objet
Gestion des non conformités (limiter aux laboratoires agréés) de cet EILA: actions
mises en œuvre pour l'identification des causes et des mesures correctives
sans objet
Suivi de décisions sur l'agrément pour cet EILA
sans objet
14
Evolution du réseau de cet EILA dans le temps
aucune
Nom du 3ème EILA
EILA seroneutralisation PPC
cet EILA est-il réalisé sous accréditation "17043"?
Oui
Nombre de laboratoires participants à cet EILA
17
Nombre de laboratoires agréés participants (Na) à cet EILA
14
Le LNR a-t-il participé à cet EILA?
Oui
Nombre de laboratoires participants à cet EILA, en cours de demande d'agrément
0
Nombre d'autres laboratoires participants à cet EILA
2
Détail des autres laboratoires participants à cet EILA: français/étrangers
2 étrangers
Nombre de laboratoires ayant obtenu des résultats défavorables lors de cet EILA
0
15
Nombre de laboratoires agréés non conformes (Nc) lors de cet EILA
0
Taux de non conformités Nc/Na lors de cet EILA
0
Nature des non conformités (limiter aux laboratoires agréés) de cet EILA
sans objet
Gestion des non conformités (limiter aux laboratoires agréés) de cet EILA: actions
mises en œuvre pour l'identification des causes et des mesures correctives
sans objet
Suivi de décisions sur l'agrément pour cet EILA
aucune
Evolution du réseau de cet EILA dans le temps
aucune
Nom (s) et nombre(s) d'EILA que vous prévoyez d'organiser au cours de l’année N+1
EILA PCR PPC
Précisez le nombre d'EIL (hors EILA - dont EILV en lien avec méthodes en cours de
validation telles que précisées dans le paragraphe 1) organisés par le LNR au cours
de l’année N
0
Précisez le nombre d'EIL (hors EILA) que vous prévoyez d'organiser au cours de
l’année N+1
0
16
6.2. Formation, organisation d'ateliers, accueil de stagiaires
Nombre de journées d'échange et de restitution rassemblant les laboratoires agréés
du réseau, organisées dans l'année
0
Nombre de sessions de formation des personnels des laboratoires agréés aux
méthodes utilisées pour les contrôles officiels, organisées dans l'année
0
6.3. EILA auxquels le LNR a participé dans l'année
Détaillez les EILA auxquels le LNR a participé dans l'année, dans le cadre : National;
UE (EILA organisé par le LRUE); International
- National : 1Elisa, 1 NV, 1PCR
- UE (EILA organisé par le LRUE) : oui
- International :non
7. Participation aux activités de surveillance
7.1 PS/PC
Existe-t-il un ou plusieurs PS/PC élaboré(s) par l'autorité sanitaire dans le champ du
LNR?
oui
7.2 Activités de surveillance hors PS/PC
7.2.1 Dispositif(s) hors PS/PC
Indiquer si le LNR est intégré à un (ou des) dispositif(s) de surveillance (hors PS/PC) ?
Oui
En dehors du dispositif PS/PC de la DGAl préciser si le LNR est intégré à un autre
dispositif (Résapath, Salmonella, Resabeille, ...)
Surveillance de la PPC chez les sangliers sauvages et surveillance de la PPC chez les
porcs domestiques
17
7.2.2 Gestionnaire du dispositif
Indiquer qui est le gestionnaire de ce dispositif
DGAl
7.2.3 unités intégrées dans le dispositif
Préciser si d'autres unités/entités de l'agence sont intégrées dans ce dispositif à vos
cotés
Oui
Lesquelles ?
L’unité EBEP du laboratoire de Ploufragan peut être mobilisée en cas de suspicion/foyer de
PPC pour le volet épidémiologie opérationnelle
7.2.4 Les partenaires et acteurs de ce dispositif de surveillance
Sont acteurs ou partenaires de ce dispositif:
Le réseau de laboratoire du LNR
Un réseau de vétérinaires
Un réseau d'acteurs professionnels
Les chasseurs et l’ONCFS pour la gestion du foyer PPC chez les sangliers du Nord-Est :
récolte des échantillons sur sangliers
7.2.5 Modalités de surveillance
Préciser si ce dispositif repose:
Sur des modalités de surveillance événementielles (notification de cas par des acteurs de
terrain)
Sur des modalités de surveillance programmées (active)
8. Activités de recherche en lien avec l’activité de référence
8.1. Recherches méthodologiques pour la référence
Détaillez ici les recherches méthodologiques que vous avez réalisées dans l'année :
objectifs, partenariats, apports du LNR, projets retenus dans le cadre d'appels à
projets...
sans objet
18
8.2. Recherches associées pour la référence
Détaillez ici les recherches associées auxquelles vous avez participé dans l'année
(participations à des études cliniques, études d'incidences, modèles d'infections
expérimentales, études toxicologiques, essais vaccinaux...): objectifs, partenariats,
apports du LNR, projets retenus dans le cadre d'appels à projets...
Etude sur l’adaptation du sanglier à son environnement en collaboration avec l’ONCFS
(Sophie Rossi)
9. Relations avec le CNR
Existence d'un CNR
Non
10. Autres mandats
Le LNR détient-il d'autres mandats de référence dans le même domaine de
compétences
Non
Annexes
Listes des publications et communications:
Publications scientifiques nationales : Marcé C, Bourry O, Le Dimna M, Hutet E, Deblanc C, Simon G, Rose N, Martin C, Saubusse T, Rossi S, Le Potier M-F (2014) Bilan de la vigilance à l'égard des pestes porcines classiques et africaines en France métropolitaine et Outre-mer en 2013 Bulletin épidémiologique, santé animale et alimentation 64:49-53
Publications scientifiques internationales : Renson P, Le Dimna M, Gabriel C, Levai R, Blome S, Kulcsar G, Koenen F, Le Potier M-F: Cytokine and immunoglobulin isotype profiles during CP7_E2alf vaccination against a challenge with the highly virulent Koslov strain of classical swine fever virus. Research in veterinary science 2014, 96(2):389-395.
Conférences sur invitation : Le Potier MF, Le Dimna M, Bourry O, Marcé C, Rossi S: Classical swine fever in wild boars:
Demonstration of CSF freedom in Northern Vosges – France. In: Workshop on Laboratory Diagnosis of African and Classical Swine Fever: 2-3 June 2014; Valdeomos, Spain; 2014: 37.
